卵巢癌大网膜转移差异基因的筛选及验证

目的:通过筛选并验证卵巢癌原发灶和大网膜转移灶组织样本的差异表达基因,从中发现与卵巢癌大网膜转移相关的基因。方法:应用基因芯片检测3对配对的卵巢癌原发灶和大网膜转移灶组织样本差异基因表达谱,初步筛选出差异表达显著的基因,并通过qRT-PCR和免疫组化法验证基因芯片结果。结果:通过基因芯片检测共筛选得到187个差异性表达的mRNA,其中大网膜转移组相对于卵巢癌原发灶组表达上调的基因160个,表达下调的基因27个。初步筛选出差异表达显著的2个mRNA:Interleukin 8(IL-8)和Armadillo Repeat Containing 9(ARMC9);qRT-PCR和免疫组化结果显示,IL-8和ARMC9在大网膜转移灶中的表达均显著高于卵巢癌原发灶(P0.05)。结论:IL-8和ARMC9基因可能与卵巢癌大网膜转移有关。     

卵巢上皮性癌淋巴结转移相关差异表达蛋白内质网氨基肽酶1的表达及意义

目的 从基因转录及蛋白表达的水平检测内质网氨基肽酶1(ERAP1)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞、组织中的表达,探讨其与卵巢癌转移的关系.方法 应用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法检测在卵巢癌淋巴结非定向转移细胞系(SKOV3)与淋巴结定向高转移细胞系(SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4)中ERAP1 mRNA和蛋白的表达情况;并应用免疫组化方法在人卵巢癌原发灶与相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶与相应的淋巴结转移灶中对ERAP1的蛋白表达进行验证.结果 SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达呈下降趋势(分别为0.118±0.012、0.031±0.003、0.028±0.003、0.016±0.005;0.91±0.33、0.09±0.03、0.10±0.04、0.05±0.04),其中,SKOV3细胞中ERAP1 mRNA和蛋白的表达显著高于SKOV3-pm2、SKOV3-pm3、SKOV3-pm4细胞,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).ERAP1蛋白在人卵巢痛原发灶(184±14)和相应的淋巴结转移灶、裸鼠卵巢癌移植瘤原发灶(143±22)和相应的淋巴结转移灶(97±12)中的表达均呈下降趋势,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 卵巢癌中ERAP1表达的下降或缺失与淋巴结转移有关.     

微小RNA-7在上皮性卵巢癌原发灶及转移灶中表达的研究

目的:检测上皮性卵巢癌组织原发灶、转移灶中miR-7及其靶标EGFR蛋白的表达,探讨miR-7及EGFR与卵巢癌转移的关系。方法:采用显色原位杂交(CISH)检测miR-7在卵巢癌组织原发灶、转移灶石蜡切片中的表达;采用免疫组化检测EGFR蛋白表达。结果:上皮性卵巢癌转移灶中miR-7表达显著低于原发灶(P0.05),而EGFR表达显著高于原发灶(P0.05);miR-7与EGFR表达具有相关性(r=-0.441,P0.05)。结论:miR-7可能通过EGFR抑制卵巢癌的转移,miR-7可能成为治疗卵巢癌的新靶标。     

BRMS1和fascin基因在卵巢上皮癌中的表达及其意义

目的 :研究原发卵巢上皮癌 (POEC)中乳腺癌转移抑制基因 (BRMS1)和运动相关蛋白 (fascin)基因表达水平及其意义。方法 :用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5份正常卵巢、15份良性卵巢上皮瘤、2 8份卵巢上皮癌及 15份卵巢癌盆、腹腔种植转移灶中BRMS1和fascin基因mRNA表达情况。结果 :(1)BRMS1基因表达 :在POEC为 0 .4 73± 0 .179,明显低于正常卵巢和良性上皮瘤组 (P <0 .0 5 ) ;在III、IV期 (晚期 )卵巢癌原发灶中的表达显著低于I、II期 (早期 ) (P =0 .0 12 ) ,在腹腔脱落细胞阳性患者卵巢癌组织中的表达明显低于阴性者 (P =0 .0 4 3) ;(2 )fascin基因表达 :在POEC为 0 .94 1±0 .2 87,明显高于良性上皮瘤的 0 .382± 0 .0 4 6(P <0 .0 0 1) ;其表达与分期有关 ,在III、IV期卵巢癌原发灶中的表达显著高于I、II期 (P =0 .0 2 ) ;(3)fascin/BRMS1的相对光密度值(ROD)比值随肿瘤转移增加。结论 :BRMS1和fascin基因表达与卵巢上皮癌转移密切相关 ,其中fascin/BRMS1的ROD比值可成为提示卵巢癌有转移的指标     

应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因

目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因.方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3 3种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase reaction,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[Oligo Tumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证.结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio＞3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pin3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio＜0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调.结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路.     

微小RNA在卵巢癌中侵袭转移机制的研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类长约20～22个核苷的非编码RNA分子。miRNA通过调控靶基因影响肿瘤细胞的分化、增殖、转移及细胞坏死。大量研究提示miRNA与人类恶性肿瘤有关,其在卵巢癌组织中表达往往存在异常。卵巢癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,90%以上的卵巢癌是上皮性癌,5年生存率仅30%,因卵巢癌早期多无明显症状,故在诊断时,肿瘤发生转移率高。卵巢癌的侵袭转移机制涉及多种物质及通路,有大量研究表明肿瘤干细胞相关miRNA、上皮－间充质转换相关miRNA、细胞外基质相关miRNA以及血管形成相关miRNA与卵巢癌侵袭、转移过程有关,其在卵巢癌组织中的异常表达能通过调控下游物质的表达,从而参与卵巢癌的发生发展及侵袭转移。综述miRNA在卵巢癌中侵袭转移相关机制方面的研究。     

钙联蛋白A9和波形蛋白在子宫颈癌及其淋巴结中的表达及意义

目的:探讨钙联蛋白A9(S100A9)和上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(Vimentin)在子宫颈癌及其淋巴结中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测99例子宫颈癌患者原发灶、淋巴结转移(LNM)灶及灶旁淋巴结和盆腔阴性淋巴结组织中S100A9和Vimentin的表达情况,根据术后病理检查结果分为LNM组(33例)和无淋巴结转移(NLNM)组(66例),分析S100A9和Vimentin表达与子宫颈癌LNM、转移前生态位的关系。结果:(1)S100A9和Vimentin在子宫颈癌原发灶和淋巴结转移灶主要表达于细胞质,在淋巴结组织主要表达于细胞膜;(2)S100A9和Vimentin在子宫颈癌原发灶中的阳性表达率分别为77.8%(77/99)、29.3%(29/99)。S100A9和Vimentin在子宫颈癌原发灶表达的阳性率均与LNM有关(P<0.05);(3)S100A9在LNM组子宫颈癌原发灶和转移灶表达的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但表达强度差异有统计学意义(P<0.05),而Vimentin阳性表达率和强度差异均无统计学意义(P>0.05...     

SRGAP1在卵巢癌中的表达及对预后判断的意义

目的: 探讨Slit-Robo GTP 酶激活蛋白1（Slit-Robo GTPase-activating protein 1,SRGAP1）在卵巢癌中表达的临床意义。方法: 采用免疫组织化学法分析SRGAP1蛋白在卵巢良性囊肿组织、卵巢癌组织及腹膜转移组织中的表达差异,并通过蛋白质印迹（Western blotting）和实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）技术验证。评估SRGAP1与卵巢癌患者的临床病理参数[年龄、国际妇产科联盟（The International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO）分期、组织学分型、病理学分级及淋巴结转移]的关系;采用Kaplan Meier plotter分析SRGAP1 mRNA表达水平与患者预后的相关性。结果: 卵巢癌组织中SRGAP1表达高于卵巢良性囊肿组织和腹膜转移组织（P<0.05）。SRGAP1高表达和低表达患者的组织学分型和病理学分级差异有统计学意义（P<0.05）;与SRGAP1低表达患者相比,SRGAP1高表达患者的总生存期（OS）和无进展生存期（PFS）明显缩短,差异有统计学意义（P<0.001）,进展后生存期（PPS）缩短,但差异无统计学意义（P=0.054）。结论: SRGAP1在卵巢癌中表达上调,其高表达与卵巢癌的不良预后有关,可考虑作为卵巢癌预后不良的特异性标志物。     

血管内皮生长因子C及其受体3mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）及其受体3（VEGFR-3）mRNA在上皮性卵巢癌组织的表达及与癌周淋巴管生成及淋巴转移的关系。方法 2003-04—2004-06第三军医大学附属西南医院采用RT-PCR方法，检测VEGF-C及VEGFR-3mRNA在良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织的表达及组织化学淋巴管染色并计数，分析其与VEGF-C mRNA表达及淋巴转移的关系。结果 VEGF-C mRNA和VEGFR-3 mRNA在卵巢良、恶性肿瘤的表达差异有显著性。VEGF-C mRNA表达阳性及有淋巴结转移组的癌组织淋巴管密度分别大于VEGF-CmRNA表达阴性及无淋巴结转移组的癌组织，二者差异均有显著性。结论 VEGF-CmRNA在上皮性卵巢癌组织的表达上调导致了癌周淋巴管生成，促进了肿瘤的淋巴道转移。     

血管内皮生长因子与血小板源性生长因子在卵巢上皮性癌淋巴管形成中的作用

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血小板源性生长因子(PDGF)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)淋巴管形成中的作用.方法 RT-PCR技术检测淋巴管内皮细胞核标志物Proxl和淋巴管形成相关因子VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D及PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D在卵巢癌细胞株SKOV3、70例卵巢上皮性肿瘤(卵巢良性肿瘤15例、卵巢交界性肿瘤10例、卵巢癌45例)和20例正常卵巢组织中的表达情况.实时定量PCR技术检测卜述90例卵巢组织中Proxl、VEGF-A、-C、-D及PDGF-A、-B、-C、-D的表达水平,并进行相关性分析.结果 (1)Proxl在各种卵巢组织中均有表达,而在SKOV3细胞中无表达;VEGF-A、-C、-D及PDGF-A、-B、-C、-D在SKOV3细胞和各种卵巢组织中均有表达.(2)卵巢癌组织中Proxl(2.2±1.3)、VEGF.A(3.5±1.5)、VEGF-C(19 ±14)、VEGF-D(3.0±1.8)及PDGF-A(3.3±3.3)、PDGF-C(6.9±4.6)的表达水平高于卵巢良性肿瘤和交界性肿瘤(P均＜0.05).(3)Proxl、VEGF-A和PDGF-A在卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期(Proxl:2.6±1.3,VEGF-A:4.0± 1.4.PDGF-A:4.1±3.7)、淋巴结转移阳性(Proxl:3.0±1.4,VEGF-A:4.1±1.7,PDGF-A:4.9±4.1)及腹膜转移阳性(Proxl:2.8±0.9,VEGF-A:4.0±1.8,PDGF-A:4.5±4.0)的组织中的表达水平,分别高于Ⅰ～Ⅱ期、淋巴结转移阴性和腹膜转移阴性者(P均＜0.05);VEGF-C、VEGF-D在淋巴结转移阳性卵巢癌组织中的表达水平(VEGF-c:24± 13,VEGF-D:3.9±2.0)高于淋巴结转移阴性者(P均＜0.05).(4)卵巢癌组织中Proxl的表达水平与VEGF-D(r=0.62,P＜0.01)、PDGF-C(r=0.91,P＜0.01)、PDGF-D(r=0.61,P＜0.01)的表达水平呈正相关关系.结论 VEGF-A、VEGF-C和PDGF-A可能通过参与淋巴管形成之外的机制促进卵巢癌的淋巴结转移;VEGF-D可以促进卵巢癌的淋巴管形成及淋巴结转移;PDGF-B与卵巢癌的淋巴管形成及淋巴结转移无关;PDGF-C、PDGF-D参与卵巢癌淋巴管形成,但无促进淋巴结转移的作用.     

Effect of lubrication of frictional properties of sutures

The results of this study have provided an insight into the behavior of sutures in the environment of fluids. It has been shown that friction could both increase or decrease with lubrication, depending upon the nature of the application. In tests on straight sutures, lubricants have generally led to an increase in friction. This was found in the present investigation as well as in another study which measured friction in sutures soaked in serum. These results are explained on the basis that higher friction is expected to arise if the lubricant formed a multilayer film between the sliding surfaces. In this instance, the resistance to shear flow by the lubricant becomes the governing factor. On the other hand, if only a small amount of lubricant, such as a monolayer film, is present between surfaces, as expected within the structure of a snugged surgical knot, the lubricant may play the role of decreasing adhesion and, thus, friction.     

454例足月妊娠胎膜早破妊娠结局的临床分析

目的:探讨胎膜早破与分娩方式及围产儿不良结局的关系,为临床围产期保健和并发症防治提供参考。方法:对2005年1月至2008年12月在我院住院分娩的454例足月妊娠无骨盆异常胎膜早破的病例进行回顾性分析。结果:胎膜早破占同期分娩总数的11.76%,无骨盆异常,其难产率为46.47%,剖宫产率为33.7%,新生儿窒息率10.79%,新生儿肺炎发生率1.54%,明显高于对照组。结论:胎膜早破与难产互为因果关系,及时终止妊娠,以改善新生儿预后,减少母婴并发症。