电针联合壮医药线点灸对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦组织氧化应激反应的影响

目的:观察电针联合壮医药线点灸对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠氧化应激相关指标的影响,探讨电针联合壮医药线点灸治疗DGP的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、电针组、点灸组、联合组,每组15只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DGP大鼠模型。西药组予0.15 mg/mL枸橼酸莫沙必利混悬液灌胃给药;选取大鼠“中脘”“内关”“三阴交”穴,电针组电针20 min(10 Hz/50 Hz, 2 mA),点灸组每穴点灸3壮,联合组为电针联合点灸治疗。均每日1次,连续3周。检测各组大鼠体质量、血糖、胃排空率、小肠推进率;采用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA法检测血清活性氧(ROS)活性;HE染色观察胃窦组织的病理学改变;Western blot、实时荧光定量PCR检测胃窦组织血红素氧合酶1(HO-1)、核因子E2相关因子2(Nrf 2)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)蛋白及mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组血糖升...     

翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,造模成功后,给予翻白草水煎液灌胃,连续给药4周;采用组织化学技术和图像分析系统检测血管内皮细胞NOS活性。结果翻白草组大鼠血管内皮细胞NOS平均吸光度值显著高于模型对照组和实验对照组(P<0.01),与正常对照组无差异(P>0.05)。结论翻白草能有效防止NOS的破坏,提高NOS的活性,提示其对血管内皮细胞有一定的保护作用。     

壮医药线点灸治疗糖尿病胃轻瘫50例

糖尿病胃轻瘫是糖尿病常见的慢性并发症之一,其临床症状主要表现为恶心、呕吐、早饱、腹胀、食欲不振等。自2006年2月～2009年1月,笔者采用壮医药线点灸辅助治疗本病50例,疗效满意,现报道如下。     

丹参酮ⅡA对猪主动脉内皮细胞受血管紧张素Ⅱ作用时产生NO及eNOS基因表达的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法 采用硝酸还原酶法、逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和免疫组织化学法,分别检测不同作用时间（1h、6h、24h）的血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以及在AngⅡ作用的不同时间点（0h点为A组、6h点为B组）加入丹参酮ⅡA对培养的猪主动脉内皮细胞产生NO及其内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的蛋白和mRNA表达。结果 （1）随着AngⅡ作用时间的延长,血管内皮细胞NO的产生及eNOS的表达呈显著下降（P〈0．01）,表现出时间依赖性的负性作用。（2）丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS基因表达的负性作用（P〈0．01）。（3）在丹参酮ⅡA作用1h、6h,A组的抑制效应明显强于B组（P〈0．05）;随着作用时间延长至24h,两组比较差异无显著性。结论 丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对血管内皮细胞分泌NO以及细胞eNOS基因表达的负性作用;     

丹参酮ⅡA对猪主动脉内皮细胞受血管紧张素Ⅱ作用时产生NO及eNOS基因表达的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法 采用硝酸还原酶法、逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和免疫组织化学法，分别检测不同作用时间（1h、6h、24h）的血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以及在AngⅡ作用的不同时间点（0h点为A组、6h点为B组）加入丹参酮ⅡA对培养的猪主动脉内皮细胞产生NO及其内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的蛋白和mRNA表达。结果 （1）随着AngⅡ作用时间的延长，血管内皮细胞NO的产生及eNOS的表达呈显著下降（P〈0．01），表现出时间依赖性的负性作用。（2）丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS基因表达的负性作用（P〈0．01）。（3）在丹参酮ⅡA作用1h、6h，A组的抑制效应明显强于B组（P〈0．05）；随着作用时间延长至24h，两组比较差异无显著性。结论 丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对血管内皮细胞分泌NO以及细胞eNOS基因表达的负性作用；     

参芪复方对GK大鼠主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响

目的 观察参芪复方对GK（Goto-Kakizaki）大鼠大血管病变主动脉血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R） mRNA表达的影响。方法 67只GK大鼠随机分为GK组（18只）、模型组（16只）、阿托伐他汀组（17只）及参芪复方组（16只）,另设正常Wistar对照组（18只）。以L-NAME 0.10 mg/（mL·d）加入大鼠饮用水中复制糖尿病大血管病变模型。除正常Wistar对照组外,其他4组均喂饲高脂饲料。阿托伐他汀组及参芪复方组分别按1.60 mg/（kg·d）、1.44 g/（kg·d）灌胃相应药物,均每天1次,连续35天。采用葡萄糖氧化酶法每周测定血糖1次;给药5周后,夹心酶联免疫吸附法测定甘油三酯（TG）及总胆固醇（TC）水平,放射免疫法检测血清血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）水平,实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测主动脉AT1R mRNA表达。结果 给药4周末阿托伐他汀组和参芪复方组血糖水平均较本组给药前明显降低（P<0.05）,且参芪复方组明显低于模型组同期（P<0.05）。模型组TC、TG、血清AngⅡ及主动脉AT1R mRNA水平均明显高于正常Wistar对照组（P<0.01）。给药5周后,阿托伐他汀组和参芪复方组TC、TG、AngⅡ及AT1R mRNA水平明显低于模型组（P<0.01,P<0.05）。阿托伐他汀组AT1R mRNA明显低于参芪复方组（P<0.05）。结论 参芪复方可降低GK大鼠早期大血管病变模型的血糖、血脂,减少血清AngⅡ含量及主动脉AT1R mRNA表达。AT1R可能是参芪复方治疗糖尿病大血管病变的有效靶点之一。     

壮医药线点灸疗法对糖尿病性胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞的影响

目的:观察壮医药线点灸对糖尿病性胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦Cajal间质细胞(ICC)的影响,探讨壮医药线点灸治疗DGP的作用机制。方法:120只SD大鼠随机抽取空白组30只,其余90只在运用链脲佐菌素一次性腹腔注射法及高脂高糖饲料伴不规则饮食法制备DGP模型成功后随机抽取模型组与治疗组各30只。治疗组壮医药线点灸治疗,取"中脘""脾俞""胃俞""内关""后三里",每日治疗1次,5次为1个疗程,疗程间休息2d,连续3个疗程。治疗结束后测定各组大鼠的体质量、粪重;用炭粉混悬液灌胃法测定各组大鼠的胃肠推进率;免疫组化法检测胃窦酪氨酸激酶(c-kit)阳性ICC细胞率变化。结果:与空白组相比,模型组粪重显著升高,体质量、胃肠推进率、c-kit阳性细胞率明显降低(均P0.01);与模型组相比,治疗组粪重显著降低(P0.01),体质量、胃肠推进率、c-kit阳性细胞率明显提高(均P0.01)。结论:壮医药线点灸治疗能改善DGP大鼠胃ICC中c-kit的表达水平,恢复ICC正常的功能活动以提高胃肠推进率。     

壮医药线点灸配合针刺治疗糖尿病胃轻瘫的疗效观察

目的:观察壮医药线点灸配合针刺治疗糖尿病胃轻瘫的临床疗效。方法:将糖尿病胃轻瘫患者40例随机分为治疗组和对照组,每组各20例,治疗组采用壮医药线点灸配合针刺治疗(穴取胃俞、脾俞、内关、公孙、中脘、足三里、上巨虚、下巨虚、天枢、气海等);对照组口服吗丁啉,每次10mg,每天3次。两组均治疗30天。结果:两组患者治疗后糖尿病胃轻瘫各症状均明显改善(P<0.05),治疗组的改善程度优于对照组(P<0.05);治疗组总有效率为95%,对照组总有效率为80%,两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:壮医药线点灸配合针刺治疗糖尿病胃轻瘫疗效满意,其症状改善优于吗丁啉治疗。     

参元丹胶囊对动脉内皮损伤大鼠血浆内皮素、血管紧张素Ⅱ、血清一氧化氮合酶影响的研究

目的:观察益气破血法组方中药参元丹胶囊(SYD)对动脉内皮损伤大鼠血浆内皮素(ET)、血管紧张素II(AngII)、血清一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法:应用导管拉伤加高渗液损伤的方法建立大鼠主动脉内皮损伤模型,研究中药SYD对大鼠动脉内皮损伤后血浆ET、AngII、血清NOS水平的影响。结果:与正常对照组相比较,病理模型组ET明显升高,P<0.01;SYD组可抑制ET的升高,P<0.01。与正常对照组相比较,各组的NOS均有升高,P<0.05,P<0.01;SYD组与病理模型组比较未见显著性差异。与正常对照组相比较,病理模型组ET/NOS明显升高,P<0.01;与病理模型组比较,SYD组可抑制ET/NOS的升高,P<0.01。与正常对照组相比较,病理模型组的AngII有升高趋势,但两组之间无统计学差异,P>0.05;与病理模型组比较,SYD可降低AngII,P<0.05,P<0.01。结论:参元丹胶囊能调整ET/NOS比值及AngII水平,提示其对血管内皮损伤有一定的保护作用。     

电针结合西药治疗糖尿病胃轻瘫的临床研究

目的：比较电针、西药、电针结合西药3组方法对糖尿病胃轻瘫（DGP）的疗效。方法：将90例DGP患者按照随机对照方法分成电针组（1组）、西药组（2组）、电针结合西药组（3组）3组,以X线透视胃内小钡条残留数、痞满证分级、痞满症疗效、临床症状评分来比较疗效。结果：治疗后对3组患者X线透视胃内小钡条残留数及组内两两比较（3组与1组、3组与2组）、痞满症分级评分及组内的两两比较、痞满症分级评分比较均P〈0.05,差异有统计学意义。3组痞满证临床疗效差异有统计学意义（P〈0.05）,3组有效率组间及两两比较（3组与2组）差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后对3组患者临床症状评分组间、两两比较进行比较（3组与2组,1组与2组）P〈0.05,差异有统计学意义。结论：3组均能促进胃固体排空,改善痞满症,改善糖尿病胃轻瘫的临床症状;电针结合西药组在促进胃固体排空、改善痞满症方面更优;电针结合西药组与电针组改善糖尿病胃轻瘫的临床症状方面更优。     

针刺对吗啡戒断大鼠脑组织一氧化氮合酶基因表达的影响

目的 :观察针刺对吗啡戒断大鼠脑组织神经元一氧化氮合酶基因 (nNOSmRNA)表达的影响 ,探讨针刺改善戒断症状的分子生物学机理。方法 :建立大鼠吗啡自然戒断模型 ,运用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定戒断大鼠脑组织nNOSmRNA的表达。观察戒断后 ,针刺“足三里”和一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂L N 硝基精氨酸 (L NAME)对吗啡戒断大鼠戒断症状和脑组织nNOSmRNA表达的影响。结果 :戒断组nNOSmRNA表达增加 ,针刺组和L NAME组nNOSmRNA表达比戒断组减少。针刺组戒断积分比戒断组少 ,组间差异显著 (P <0 .0 1 )。结论 :针刺“足三里”穴具有抑制吗啡戒断大鼠脑组织nNOSmRNA表达的作用 ,提示这可能是针刺改善吗啡戒断症状的一个重要机制。     

电针对VD大鼠脑微血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察一氧化氮合酶(iNOS)在血管性痴呆(VD)大鼠脑微血管内皮细胞中的表达情况及电针对其的影响。方法:采用夹闭再通大鼠双侧颈总动脉的方法建立缺血再灌注损伤性VD模型,电针组用G-6805电针治疗仪,以疏密波刺激“百会”“大椎”“足三里”“膈俞”,治疗20 min,每日1次,连续治疗7 d。利用SP免疫组织化学染色方法,观察脑微血管内皮细胞iNOS的活性,并与假手术组、模型组做比较。结果:电针组大鼠脑微血管内皮细胞iNOS的活性较模型组减弱,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:电针可抑制VD大鼠脑微血管内皮细胞iNOS的活性,对脑缺血再灌注损伤具有脑保护作用。     

电针对神经病理性痛大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶蛋白及其mRNA表达的影响

目的:通过观察坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白及其mRNA表达的变化和电针对其的影响,探讨电针干预神经病理性痛的脊髓一氧化氮机制。方法:雄性SD大鼠,随机分为3组(n=12):假手术组仅分离坐骨神经,但不进行结扎;模型组采用坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)法制备神经病理性痛模型;电针组于CCI术后11～17d时应用韩氏穴位神经刺激仪进行损伤侧"委中"穴与"环跳"穴电针干预,刺激频率2Hz,波宽0.6ms,起始电流强度1mA,每10min递增1mA,刺激时间30min,1次/d。于CCI前(基础状态),CCI后10、16d时测定机械痛阈和热痛阈。CCI后17d时各组随机取6只大鼠采用Western blot法测定脊髓nNOS蛋白的表达;另取6只大鼠采用逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)法测定脊髓nNOS mRNA的表达。结果:CCI后10d,与基础值比较,模型组和电针组机械痛阈和热痛阈降低(P0.01);与CCI后10d比较,电针组CCI后16d时机械痛阈和热痛阈均升高(P0.01)。与假手术组比较,模型组机械痛阈和热痛阈降低(P0.01),脊髓nNOS蛋白及其mRNA表达均上调(P0.05,P0.01);与模型组比较,电针组CCI后16d时机械痛阈和热痛阈升高(P0.01),脊髓nNOS蛋白及其mRNA表达均下调(P0.05)。结论:电针减轻大鼠神经病理性痛的机制可能与有效地抑制脊髓nNOS的活性有关。     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦组织胰岛素生长因子1及其受体的影响

目的:观察电针"足三里""梁门""三阴交"对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠动力、胃窦胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达的影响,探讨电针治疗DGP的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、电针腧穴组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只。采用腹腔注射2%链脲佐菌素(55mg/kg)结合高脂高糖不规律饮食制备DGP模型。电针腧穴组取单侧"足三里""梁门""三阴交"电针治疗,电针非穴组取同侧三穴对照点电针治疗,胃复安对照组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每天1次,连续干预15d。观察各组大鼠症状积分、血糖、胃排空率、小肠推进率,ELISA法检测胃窦组织IGF-1及IGF-1R的含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组胃排空率及小肠推进率明显降低,血糖、症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量明显升高(P0.01)。与模型对照组比较,电针腧穴组、胃复安对照组胃排空率及小肠推进率明显升高(P0.05,P0.01),电针腧穴组血糖、症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量明显降低(P0.05,P0.01)。与电针腧穴组比较,电针非穴组及胃复安对照组症状积分、胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量均明显升高(P0.05,P0.01)。结论:电针腧穴能降低DGP大鼠血糖水平,促进胃肠动力,其作用机制可能与降低胃窦组织IGF-1及IGF-1R含量有关。     

疏肝和胃汤对功能性消化不良大鼠胃窦iNOSmRNA SSR1mRNA表达的影响

目的：在前期研究的基础上,观察具有促胃排空作用的疏肝和胃汤对功能性消化不良（functional dyspepsia,FD）大鼠胃窦组织一氧化氮合酶mRNA（iNOSmRNA）、生长抑素受体1mRNA（SSR1mRNA）表达的影响,以深入探讨该方促胃动力作用机理。方法：实验分成生理盐水组、疏肝和胃汤大、中、小剂量组及莫沙比利组。采用夹尾激怒法造成肝胃不和型功能性消化不良大鼠模型,给药治疗后,取胃窦组织,应用原位杂交技术观察该方对上述指标在胃窦表达的影响。结果：疏肝和胃汤均可不同程度地降低模型大鼠胃窦iNOSmRNA及SSR1mRNA的表达（P〈0.05-0.01）,其作用与莫沙比利相当。结论：疏肝和胃汤可通过降低胃窦iNOSmRNA的表达,随之而降低了iNOS及NO的分泌及合成;并通过降低SSR1mRNA的表达,减少SS受体的表达,从而减少SS的释放。上述作用可能是该方促胃动力的作用机理之所在。     

电针对大鼠脊神经节和脊髓内一氧化氮合酶表达的影响

目的：观察电针对脊神经节和脊髓一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法：电针单侧大鼠“足三里”穴,采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶（HADPH-d）法显示L5－6脊神经节和脊髓节段的NOS表达变化。结果：针刺组针刺侧脊神经节和脊髓的NOS表达,均比非针刺侧及对照组增加。结论：电针可上调脊神经节和脊髓NOS表达,这可能是一氧化氮（NO）参与针刺效应的重要基础之一。     

电针对脑缺血再灌注损伤大鼠一氧化氮合酶的影响

目的 探讨电针对脑缺血再灌注损伤大鼠一氧化氮合酶（NOS）的调节作用。     

琥珀散对子宫内膜异位症大鼠NO及NOS作用研究

目的：探讨琥珀散治疗子宫内膜异位症（EMs）的作用机理。方法：采用夹尾刺激加自体子宫内膜移植法建立病证结合的气滞血瘀型EMs大鼠模型。随机分为模型组、治疗组（琥珀散高剂量组、琥珀散中剂量组、琥珀散低剂量组）和孕三烯酮组,分别灌胃给药,4周后处死。比色法检测血清一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性,酶联免疫法检测血浆前列腺素2α（PGF2α）水平,光镜下观察子宫内膜形态学变化。结果：①琥珀散高、中剂量组可降低模型鼠血清NO含量、NOS活性和血浆PGF2α水平,与模型组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）;与孕三烯酮组相比,差异均无统计学意义（P〉0.05）;琥珀散低剂量组可降低模型鼠NO含量,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。②模型组大鼠在位内膜腺体数量多,腺腔完整,异位内膜出现类似于在位子宫内膜的结构。治疗组大鼠在位内膜变化不明显,异位内膜体积偏小,腺体减少,腺上皮呈不同程度的萎缩。孕三烯酮组大鼠在位、异位内膜均见腺体数目少,腺腔缩小,腺上皮细胞萎缩。结论：琥珀散可以降低EMs大鼠血清NO、NOS及血浆PGF2α水平,这可能是琥珀散有效抑制异位病灶种植、生长,缓解盆腔疼痛的作用机理之一。     

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal间质细胞超微结构及干细胞因子-kit信号途径的影响

目的:观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃肠运动及其胃窦起搏细胞Cajal间质细胞(ICC)超微结构、c-kit受体蛋白表达及干细胞因子(SCF)基因表达的影响,探讨电针治疗DGP的机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针穴位组、电针非穴组、胃复安对照组,每组10只。腹腔注射2%链脲佐菌素结合高糖高脂饲料不规则喂养制备DGP模型。电针穴位组电针"足三里""梁门""三阴交",电针非穴组电针"足三里""梁门""三阴交"穴位对照点,胃复安对照组予1.7%胃复安药液(1mL/100g)灌胃,均每日1次,连续15d。监测血糖,酚红灌胃法测量大鼠胃排空率及小肠推进率,透射电镜法检测胃窦ICC超微结构,Western blot法、RT-PCR法分别检测大鼠胃窦c-kit蛋白及SCF mRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血糖显著升高(P0.01),胃排空率和小肠推进率显著降低(P0.01),ICC呈细胞凋亡样改变,SCF mRNA表达量显著下降(P0.01);与模型组比较,电针穴位组大鼠血糖明显降低(P0.05),胃排空率及小肠推进率显著升高(P0.05,P0.01),ICC数目增加,受损超微结构得到修复,SCF mRNA表达量显著升高(P0.01);与电针非穴组比较,电针穴位组ICC受损超微结构有所恢复,SCF mRNA表达量明显升高(P0.05)。各造模组间比较,c-kit蛋白表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针"足三里"等穴可调控DGP大鼠血糖,促进胃肠排空,其作用机制可能与上调SCF mRNA,修复受损ICC超微结构,恢复其起搏功能,进而改善胃肠运动障碍有关。