南美响尾蛇神经毒素对吉非替尼诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡的影响

目的探讨南美响尾蛇神经毒素（crotoxin）对吉非替尼（iressa）诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡及其对吉非替尼的抗肿瘤效果的影响。方法应用MTT法和流式细胞仪annexinV-PI双标法研究crotoxin及其与iressa联用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞促凋亡作用。结果 Crotoxin作用浓度大于或等于25μg/ml时对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显生长抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）,与iressa联合作用明显高于单用crotoxin和iressa,其Q值均在0.85～1.15之间,两者呈现出相加的抗肿瘤效果。结论 Crotoxin对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的生长有抑制作用,并呈浓度依赖性,与iressa联合应用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显的促凋亡作用。     

苯丁酸钠和吉非替尼对肺腺癌A549细胞的作用

目的研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂苯丁酸钠(Sodium 4-Phenylbu-tyrate,SPB)和EGFR小分子抑制剂吉非替尼单独及联合运用对肺腺癌A549细胞生长及侵袭能力的影响,探讨苯丁酸钠和吉非替尼联用的效果。方法通过MTT法和细胞克隆形成试验法察细胞生长的抑制作用;采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化;用transwell小室法检测药物处理前后细胞侵袭力的变化。结果苯丁酸钠和吉非替尼联用时,肺腺癌A549细胞的生长速度明显减慢,细胞周期被阻滞在G0/G 1期,S期细胞数减少;药物处理后肺腺癌A549细胞的侵袭能力降低与对照组、单用药组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂苯丁酸钠和EGFR小分子抑制剂吉非替尼联用时有明显的增效作用。     

索拉非尼联合吉非替尼对人肺癌细胞株A549的生长抑制作用

目的探讨索拉非尼联合吉非替尼对肺癌细胞株A549增殖的抑制作用。方法用索拉非尼联合吉非替尼处理培养的肺癌细胞株A549,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Bec-lin1蛋白表达;加用3-甲基腺嘌呤(3-MA)和两药联用,检测自噬和凋亡情况。结果索拉非尼与吉非替尼单药及联用均能抑制A549细胞生长,表现为时间-剂量依赖效应,两者具有协同作用;索拉非尼与吉非替尼联用使A549细胞的凋亡率显著升高,Beclin1蛋白表达增加;加用3-MA处理后,Beclin1蛋白表达减少,凋亡减少。结论索拉非尼联合吉非替尼对肺癌细胞株A549体外增殖的抑制作用具有协同效应,其机制与诱导自噬和凋亡两种途径相关。     

吉非替尼门诊治疗晚期肺腺癌1例

1病例报告 患者女性,42岁,不吸烟。2006年8月29日体检时胸部X片发现两肺多发性结节,CT显示左下肺病变2．5cm×1．5cm×4．0cm块状阴影,呈分叶状,边缘不规则,可见毛刺、胸膜牵拉等原发肺癌特征和两肺多发性结节转移癌特征（图1a）。查体发现两侧锁骨上淋巴结肿大,行右侧锁骨上淋巴结活检,病理为低分化腺癌,血癌性标志物检查CEA30．50ng／ml,     

厄洛替尼治疗吉非替尼耐药的晚期非小细胞肺腺癌的临床观察

目的评价观察厄洛替尼对吉非替尼耐药的晚期非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)腺癌患者的疗效和安全性。方法分析2008年6月至2009年12月共22例NSCLC腺癌患者,均口服吉非替尼并出现病情进展,改换为厄洛替尼,直到病情进展或不良反应不能耐受为止。观察疗效与不良反应以及疗效与临床特征之间的关系。结果厄洛替尼治疗22例吉非替尼耐药的进展期NSCLC患者,2例获得部分缓解(partial remission,PR),7例获得稳定(stable disease,SD),客观有效率为9%,疾病控制率为40.9%。获有效和稳定的9例患者中,7例曾在吉非替尼治疗中获益。厄洛替尼治疗的中位疾病进展期(time to progress,TTP)和中位总生存期(overall survival,OS)分别为82 d和192 d。厄洛替尼获益的9例患者较未获益的13例患者获得更长的TTP(112 vs 45.5 d,P<0.05)。厄洛替尼最常见的不良反应为皮疹。结论厄洛替尼可以作为治疗吉非替尼耐药的进展期NSCLC的药物选择,尤其是对于曾予以吉非替尼治疗可以获益的患者。     

吉非替尼二线治疗晚期肺腺癌疗效观察

目的:评价吉非替尼二线治疗晚期肺腺癌的疗效及不良反应.方法:32例晚期肺腺癌应用含铂类方案治疗失败后,口服吉非替尼250mg,1次/日,直至进展.30天后评价疗效及不良反应.结果:32例患者中,完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)18例,有效率(RR)为59.4%,稳定(SD)7例,疾病控制率(DCR)为81.35,进展(PD)6例.中位无疾病进展时间(PFS)7个月,1年生存率为56.3%,中位生存时间(OS)为13个月.不良反应主要为皮疹、腹泻,不影响治疗.结论:吉非替尼治疗晚期肺癌疗效好,不良反应能够耐受.     

厄洛替尼治疗吉非替尼控制后失败的晚期肺腺癌患者的可行性

目的 评价厄洛替尼用于既往吉非替尼控制后失败的晚期肺腺癌患者的可行性.方法 回顾性分析我院12例厄洛替尼用于既往吉非替尼控制后失败的晚期肺腺癌患者的疗效,观察厄洛替尼无疾病进展生存期和总生存期.结果 厄洛替尼用于既往吉非替尼控制后失败的晚期肺腺癌有效率0%,疾病控制率75%(9/12),中位无疾病进展生存期180 d(6.0个月),中位总生存期831 d(27.7个月).结论 对于既往吉非替尼有效的晚期肺腺癌患者,吉非替尼失败后,厄洛替尼可作为治疗手段之一.     

肺金生方联合吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效

目的 观察肺金生方加减与EGFR-TKIs联合治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效.方法 选取2016年10月至2018年12月在浙江中医药大学附属第二医院就诊的90例EGFR突变晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组(46例)和对照组(44例).对照组给予吉非替尼靶向药物治疗,治疗组给予吉非替尼靶向药物联合肺金生方治疗,服药后...     

吉非替尼治疗晚期肺腺癌临床观察

目的观察吉非替尼与多西他赛二线治疗晚期肺腺癌的疗效与毒副反应．方法71例一线化疗失败的晚期肺腺癌患者,随机分为吉非替尼组和多西他赛组,吉非替尼组：250mg,每天一次口服,维持治疗直至病情进展或出现不能耐受的不良反应．多西他赛组：75mg/m^2,第1天静脉滴注1h,每21d重复,至少接受2个疗程,评价其疗效及不良反应．结果71例NSCLC均可评价疗效,2组总有效率（ORR）吉非替尼组40．0％（14/35）,多西他赛组16．7％（6/36）,P〈0．05;疾病控制率（DCR）吉非替尼组74．3％（26/35）,多西他赛组44．4％（16/36）,P〈0．05．吉非替尼组的毒性反应主要为皮疹和腹泻,多西他赛组主要存在骨髓抑制和胃肠道反应毒性（P〈O．05）．结论吉非替尼与多西他赛相比,治疗晚期肺腺癌有较好的有效性和安全性．     

消疹散联合吉非替尼治疗肺腺癌临床研究

目的:验证消疹散在治疗肺腺癌中降低吉非替尼副作用的临床效果。方法:将60例放化疗失败的肺腺癌病人分为消疹散加吉非替尼组与单纯吉非替尼组比较治疗效果。结果:各级比较两组皮疹发生率差异有显著意义,两组疗效比较差异无显著意义。结论:中药消疹散可以有效降低吉非替尼引起的皮疹反应,但没有降低其治疗作用。     

褪黑素联合顺铂对肺腺癌A549细胞生长的影响

目的:探讨褪黑素联合顺铂对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法:分别将不同浓度褪黑素(100、300、500、7001、000μmol/L)及顺铂(2.55、、10μg/mL)联合与肺腺癌A549细胞共培养48 h,MTT法检测细胞抑制率。结果:不同浓度顺铂(2.5、5、10μg/mL)与500μmol/L的褪黑素联合使用对肺腺癌细胞生长抑制率([71.25±5.01)%(、86.37±7.10)%(、97.63±8.65)%)]明显高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:褪黑素和顺铂均可抑制肺腺癌A549细胞增殖,二者联合可协同抑制肿瘤细胞增殖。     

放疗联合125 I粒子植入对荷肺癌裸鼠肿瘤生长抑制作用的实验研究

目的 研究放疗联合125 I粒子植入对荷肺癌裸鼠肿瘤生长的抑制作用.方法 应用裸鼠建立肺腺癌A549移植瘤模型,待平均瘤体积达到(300±50) mm3时,将40只裸鼠随机分成4组(每组10只),对照组:不做任何处理;单纯放疗组:第1天给予单次外照射,6 MV-X线, 10 Gy;125 I粒子植入组:于肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125 I粒子;放疗加125 I粒子植入组(联合治疗组):第1天在肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125 I粒子的同时予单次外照射,6 MV-X线,10 Gy.治疗后共观察15 d,绘制肿瘤生长曲线,测量各组肿瘤体积并计算抑瘤率,切除肿瘤组织进行瘤体组织常规病理学检查,分别用免疫组织化学及蛋白免疫印迹方法测定乏氧诱导因子(HIF-1α)的表达, TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 治疗第8天起,联合治疗组的瘤体积与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).15 d后,单纯放疗组、125 I粒子植入组及联合治疗组的抑瘤率依次为45.9%、44.4%和69.4%,联合治疗组与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05),而单纯放疗组与125 I粒子植入组比较差异无统计学意义(P>0.05).联合治疗组与其他各组相比HIF-1α改变均无统计学意义(P>0.05).联合治疗组细胞凋亡明显.结论 放疗联合125 I粒子植入近距离治疗能显著抑制肿瘤的生长,较早诱导肿瘤细胞凋亡和退缩,但未抑制肿瘤细胞HIF-1α的表达,各治疗组均未出现急性毒性反应,治疗能耐受.     

维甲酸联合低浓度化疗药物对肺腺癌A549细胞的作用

 目的：观察全反式维甲酸和低于临床用药浓度不同剂量的化疗药物吉西他滨、顺铂等及两者联合处理A549人肺腺癌细胞株,以了解不同药物、不同剂量及不同作用时间对A549细胞增殖、细胞周期的影响。方法：用MTT法测定不同药物组相对于对照组的A549细胞增殖抑制率,并用流式细胞学方法检测各药物组及对照组的细胞周期分布。结果：维甲酸联合应用低浓度的顺铂和吉西他滨可显著抑制A549细胞的增殖,随着化疗药物的浓度的增加,抑制率也一并增加,并在达到同样增殖抑制率的效果下降低顺铂和吉西他滨的药物浓度。结论：维甲酸与低浓度化疗药物联合应用有希望显著减少药物的剂量,降低化疗药物的毒性,增强疗效。     

高氧对人肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2表达的影响

目的 研究高浓度氧暴露对人肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2 (thioredoxin-2,Trx-2)表达的影响,探讨Trx-2 对高氧肺损伤线粒体的保护作用.方法 体外传代培养 A549细胞系,待其在37 ℃、5% CO2培养箱中生长至接近融合状态时,随机分为高氧组和空气组.高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧浓度 > 90%,CO2浓度为 5%;空气组仍置于含5% CO2培养箱中.两组分别于高氧或空气暴露12、24、48 h 提取A549 细胞总RNA,采取半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Trx-2 mRNA的表达;采用 Western blot 检测A549 细胞Trx-2 蛋白的表达变化.结果 ①与空气组相比,A549 细胞高氧暴露24 h Trx-2 mRNA 表达显著增强(P<0.05);48 h 后Trx-2 mRNA呈下降趋势,其表达较空气组减弱,但两者差异无显著性意义(P>0.05).②与空气组相比,A549 细胞高氧暴露后 12 h Trx-2 蛋白表达水平显著增强(P<0.05),随后逐渐减弱,至48 h 显著减弱(P<0.05).结论 高浓度氧暴露诱导A549 细胞中Trx-2 动态表达的变化,这种变化表明Trx-2 对高氧肺损伤线粒体可能起重要的保护作用.     

新藤黄酸体外抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用

目的研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用及其相关机制。方法不同浓度GNA分别作用A549细胞24、48和72 h,甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测药物对A549细胞增殖的抑制率,吖啶橙/溴化乙啶（acridine orange/ethidium bromide,AO/EB）染色荧光显微镜检测细胞的凋亡;乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）法检测GNA对A549细胞损伤作用。结果 MTT法检测结果显示,GNA在0-8μmol/L浓度范围内、24-72 h时间范围内对A549的生长有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系;相差显微镜观察表明GNA作用A549细胞48 h后,细胞变圆,呈半贴壁状态;AO/EB染色荧光显微镜观察显示GNA作用48 h后,细胞出现典型的凋亡特征;LDH实验进一步证实GNA在0-4μmol/L浓度范围内对正常细胞未见明显毒性作用。与空白对照组比较,8μmol/L GNA显著降低LDH释放。结论 GNA具有体外抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用,在0-4μmol/L浓度范围内GNA可能是通过诱导细胞凋亡而发挥抑制A549细胞增殖的作用。     

新藤黄酸与细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响

目的研究新藤黄酸(Gambogenic acid,GNA)与细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulatedkinase,ERK)特异性抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响。方法新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059处理肺腺癌A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;甲基噻唑基四唑(methyl th-iazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内活性氧的变化;蛋白印迹法(Westernblot)检测ERK、p-ERK蛋白的表达。结果 MTT法结果表明GNA在2.5μmol/L对肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用;与PD98059合用24h,GNA的抑制作用更加明显。倒置显微镜观察显示GNA作用肺腺癌A549细胞24h后,细胞固缩变圆,体积变小,部分细胞呈半贴壁状态;GNA和抑制剂PD98059合用后,多数细胞固缩变圆,脱落,并悬浮于培养液中;少数细胞体积增大、肿胀、破裂呈坏死状。流式细胞仪检测结果表明,20μmol/L PD98059+2.5μmol/L GNA共同作用于A549细胞24h后,与GNA 2.5μmol/L组比较细胞内活性氧生成增加。Western blot法检测表明,PD98059和GNA联合作用A549细胞24h后,p-ERK蛋白表达与GNA组比较显著降低。结论 GNA能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,联合应用ERK抑制剂PD98059后可减少ERK蛋白的活化,增加肺腺癌A549细胞的凋亡;结果初步表明GNA诱导肺腺癌A549细胞的凋亡可能与调节ERK信号通路有关。     

MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨MicroRNA-98（miR-98）对肺腺癌耐顺铂细胞系A549／DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA（miRNA）芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549／DDP细胞：M．rr检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549／DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR．98的A549／DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549／DDP对顺铂的药物敏感性。     

熊果酸对肺癌细胞株A549及SPCA1细胞周期的抑制作用

目的 研究熊果酸(ursolic acid,UA)对肺癌细胞株A549及SPCA1细胞周期的抑制作用,探讨其分子机制。方法 采用MTS法检测不同浓度UA作用不同时间对A549及SPCA1细胞的增殖抑制作用;光镜下观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测不同浓度UA对A549及SPCA1细胞周期分布的影响;实时荧光定量PCR分析UA作用下A549及SPCA1的相关分子表达情况。结果 MTS结果显示UA对A549及SPCA1细胞具有增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。经UA作用后,光镜下可见A549及SPCA1细胞增殖受到抑制,细胞出现变圆、回缩和脱落。流式细胞仪结果显示在UA作用后,A549及SPCA1细胞周期抑制在G₀/G₁期,S期和G₂/M期的比例降低。实时荧光定量PCR结果表明,UA作用后A549及SPCA1细胞cyclinD1 mRNA、cyclinE mRNA、Ankrd17 mRNA表达水平降低,p27 mRNA、p16 mRNA表达增加,Ankrd17 mRNA表达变化差异无统计学意义。结论 UA能明显抑制A549及SPCA1细胞增殖,呈时间和剂量依赖性,该作用是通过将细胞周期抑制在G₀/G₁期实现的。其分子机制可能与上调p27和p16的表达,下调cyclinD1和cyclinE的表达有关。     

青蒿素衍生物对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响

目的:观察青蒿素衍生物对非小细胞肺癌A549增殖的影响.方法:通过MTT法初步对青蒿素、双氢青蒿素和青蒿琥酯进行TC50的测定,选择低毒剂量TC10作为实验浓度,再以动态MTT法观察各青蒿素衍生物在低毒剂量下对非小细胞肺癌A549增殖的影响.结果:青蒿素、双氢青蒿素、青蒿琥酯的TC50分别为1.77 mmol/L、58.24 μmol/L、64.33 μmol/L.;在对A549细胞增殖影响中,双氢青蒿素和青蒿琥酯能延长细胞倍增时间,减缓细胞增殖周期,但青蒿素对细胞倍增时间没有影响,仅能延长细胞到达高峰期的时间.结论:青蒿素衍生物中,青蒿素抗肿瘤作用稍弱,青蒿琥酯和双氢青蒿素抗肿瘤作用较好,能同时延长细胞倍增时间和增殖周期,显示对肺癌A549细胞的增殖有直接抑制作用.