冷冻切片干燥处理对HE染色效果的影响

<正>冷冻切片是术中快速提供病理诊断和观察组织细胞有效成分的一种重要的手段,在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,再进行切片染色的快速制片。在制片的过程中,临床快速诊断的组织除了需要防冰晶形成外,笔者在实际工作中注意到不同的固定液及不同的处理方案对冷冻制片HE染色质量同样会带来影响,现分析总结如下。     

快速网状纤维染色在术中快速冷冻切片病理诊断中的应用

正术中冷冻切片快速病理诊断对外科手术具有重要的诊断意义,该技术是借助低温冷冻条件将活体组织快速冻结达到一定硬度后进行制片,具有快捷、准确的特点~([1]),但术中快速冷冻组织制片易形成冰晶以致组织肿胀、结构模糊,导致诊断困难甚至误诊~([2])。网状纤维染色已有几十年的历史,目前在病理常规诊断中仍具有实用价值,特别是针对上皮组织和间叶组织来源肿瘤的鉴别诊断,但其在术中快速冷冻切片的应用未见相关文献报道,可能源于网状纤维染色过程较为     

建立优化的术中快速免疫组化检测体系

术中快速病理诊断是辅助临床医师在术中明确肿瘤良恶性、决定手术方式的重要手段,病理切片经HE染色在镜下观察细胞形态、组织学特征,并进行快速诊断。由于HE染色切片因其自身局限性、制片过程中造成假象等可能导致误诊,难以确诊疑难病例,有较大的医疗风险。术中对冷冻切片进行快速免疫组化染色,可提高术中快速病理诊断的准确性。     

一种新型样本托在冷冻制片全流程管理中的应用

冷冻切片是在低温条件下使新鲜的手术标本快速冷却到一定硬度后,再行切片、染色的一种常规制片技术,是术中快速病理诊断技术的主要工作之一,有助于明确病变性质、观察恶性肿瘤的浸润情况以及决定患者的治疗方案[1-2].在切片过程中,先将组织置于样本托上,再使用包埋剂OCT或胶水将组织包裹住,一起放于液氮中或冷冻台上速冻,之后将带...     

Lillie-Mayer苏木精在冷冻切片快速进行性染色中应用

恒温冷冻切片是用于术中快速病理诊断的主要制片技术,除了要求技术人员有熟练的操作技能外,更重要的是要求在制作程序及苏木精染液的配制和使用方法上做出有效的选择,才能达到最佳的染色效果.Lillie-Mayer苏木精染液是一种从英国引进的改良配方,应用于冷冻切片的快速进行性染色,全程染色约90 s完成,该方法简化了盐酸乙醇分化的程序,节省了分化和返蓝中所消耗的时间,避免了盐酸乙醇酸化后引起的部分组织脱落掉片的现象.现将我科多年来在冷冻切片的快速染色方法及Lillie-Mayer苏木精染液的配制方法介绍如下.     

病理冷冻切片制作质量的探讨

目的 探讨病理冷冻切片制作的质量.方法 严格规范操作取材、切片、固定、染色、封片等制片过程中的各个环节,对制片质量进行观察.结果 经光镜观察切片,切片组织切面完整,厚薄均匀,效果良好,所制切片色彩鲜艳,对比清晰.结论 只有严格规范地做好制片中各个环节的技术操作,才能避免冷冻切片制作中出现各种常见问题,提高冷冻切片质量,为临床医师决定手术方式、范围,缩短手术时间,确定进一步治疗方案,提供可靠的诊断依据,对临床治疗具有重要意义.     

显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用

细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1 3 ] ,然而传统的Feulgen染色操作时间较长 ,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程。我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色 ,大大缩短了染色时间 ,并取得了良好效果 ,满足了快速病理诊断的要求。一、材料和方法1.材料 :复旦大学华山医院近期外科手术切除的各 5例乳腺纤维腺瘤及乳腺癌标本 ,例 1～ 5为纤维腺瘤 ,例 6～ 10为腺癌 ,均分别制成印片、冷冻切片、快速石蜡切片各 2份。2 .试剂及仪器设备 :常规配制的Schiff试剂、0 .5 %偏重亚硫酸钠溶…     

术中冷冻切片快速免疫组化染色及其应用

随着免疫组化技术的不断改进和标准化试剂盒的出现使免疫组化染色的质量不断提高 ,染色时间大大地缩短 ,同时也使术中冷冻切片的快速免疫组化染色成为可能。笔者尝试用标记的葡聚糖聚合物法 (labeleddextranpolymer,LDP)对 4 4例术中冷冻组织样本进行快速免疫组化染色 ,旨在探讨术中冷冻样本快速免疫组化染色在冷冻组织的快速病理诊断中的作用及其可操作性和实用性。1　材料与方法1.1　材料　收集四川大学华西医院病理科 2 0 0 2年 2～ 3月部分术中冷冻切片快速诊断的组织标本 ,包括 16个解剖部位共 4 4例病变组织。其中乳腺 13例 ,腹腔或…     

冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…     

不同组织冷冻切片的体会

随着医疗技术的发展,各临床科室对术中冷冻的要求也随之提高,除常规的明确病变性质外,保乳手术切缘、宫颈癌前病变锥切手术、甲状腺清扫淋巴结、手术断端等,都需要通过冷冻切片的快速诊断确定手术范围及治疗方案.这就要求我们技术人员在较短的时间内根据不同组织制出高质量的切片.由于组织不同对冷冻的时间、温度、切片厚度、染色等要求也不同,我们通过多年的经验,总结出一些提高冷冻切片质量、缩短冷冻制片时间的可行方法,现报告如下.     

5种固定液对淋巴结冷冻切片HE及免疫组化染色效果的影响

正淋巴结组织纤维成分少,淋巴细胞丰富,往往还附有较多的脂肪组织,在制片过程中容易出现裂纹、细胞核皱缩、染色模糊甚至是脱片等,如需改善应严格控制冷冻的温度和时间,挑选渗透力强、固定作用强的固定液。本文通过对固定液配方的探索,着重与病理医师交流制片的方法与经验,以提高淋巴结组织冷冻切片优良率。1 材料与方法1.1 材料选取2019年1～3月我院手术室送检淋巴结组织标本30例,其中乳腺前哨淋巴结12例,中央组淋巴结14例,其它淋巴结     

一种提高冷冻切片染色效率的苏木精加热组件

临床病理工作中,冷冻切片质量的优劣直接影响到术中病理诊断的快速性和准确性。冷冻切片制片速度与质量受多种因素的影响,其中苏木精染色是非常关键的环节。细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA带负电荷,呈酸性,很容易与苏木精碱性染料结合而被染色,苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色［1］,易与被伊红染成红色的细胞质区分。我们设计了一种病理冷冻切片的染色加热组件（专利证书号：ZL 201320589148.4）,对150例冷冻切片进行染色,比较该组件处理下与其他4种苏木精染色条件下,HE染色的速度与质量。     

显示石蜡组织切片脂质的染色方法

在实验动物脂质代谢模型中，为了观察组织中脂质的分布情况，笔者采用石蜡包埋连续切片，进行脂质染色，克服了冷冻切片不能有效原位固定脂质的局限性。经过改进油红乙醇液和Tracy染色法的石蜡制片，获得较好的染色效果。     

线性染色机在快速冷冻切片染色中的应用体会

<正>快速冷冻切片为外科在术中快速活检病理诊断提供有力帮助[1]。其可判别病变的性质(良性、交界性、恶性),为外科医师采取适当的手术方案提供依据。由于术中快速冷冻制片和诊断受到很多因素的制约,延迟性诊断时有发     

浅谈冷冻制片中常见问题与处理

冷冻切片是在低温条件下将未经固定的手术切除标本的组织块快速冷冻到一定的硬度,然后进行切片的一种制片方法.冷冻切片的质量在快速病理诊中的作用至关重要,它直接影响病理诊断的正确性.     

输卵管妊娠组织制片的技巧

目的通过此制片法解决了输卵管妊娠血块组织制片本身的问题,可制作出输卵管妊娠组织的优良切片,便于临床工作和科研及基础医学教学和科研。方法最好选择快速固定液;脱水时也不用常规乙醇脱水,改用丙酮脱水;浸蜡温度应控制在56℃为宜,浸蜡时间控制在1h左右;血块组织切片厚度最好为3μm;苏木精-伊红(HE)染色时,苏木素浸染时间长些,伊红浸染时间短些。结果用此法制作输卵管妊娠组织切片,不是那么脆和硬,也不易碎,能够顺利切出连续蜡带;染色时也不易脱片,染色对比度也好。结论在输卵管妊娠组织制片过程中,只要解决输卵管妊娠血块组织制片本身的问题,就能制作出优良的切片。     

基础医学专业本科16学时显微制片技术课程的教学经验

正显微制片技术是现代生物医学领域的重要技术,在较长时期内难以取代。该技术最常用的操作流程是甲醛固定—石蜡或冷冻切片—H-E染色~([1]),此外还包括特殊染色、组织化学检测等。由于认识和技术经验不足,显微制片技术越来越不受年轻学者的青睐;能独立胜任显微制片的专职人员数量近年也呈锐减趋势。技术后备人才的培养不容忽视。本院2004年起在基础医学实习课程中开设了"显微制片技术"培训。学时从最初的80学时逐年缩减到2011年的16学时,分8次课。这迫使笔者     

自动染色机应用于病理术中快速冷冻切片的效果和价值

正术中快速冷冻病理切片能帮助外科医师决定手术方式和范围,使患者免受二次手术的痛苦~([1]),而切片的染色质量直接影响病理诊断的准确性~([2])。传统手工染色步骤操作繁琐、费时费力且人为因素的影响较大,切片的同时需兼顾染色,易导致染色质量不稳定~([3])。因此,本科室引进一台NQ100S自动快速冷冻切片染色机,旨在保障冷冻切片的染色质量。虽然常规染色使用全自动染色机早已被广泛应用~([4]),但是使用自动染色机对术中快速冷冻切片进行染色的相关报道相对较少,     

超声快速石蜡与常规石蜡在胃肠道间质瘤Sanger测序中结果的对比分析

正随着病理技术的发展,各种利用超声震动、恒温水浴和专用试剂对病理组织完成固定、脱水、透明全过程于一体的病理组织处理仪得到广泛应用,是目前国内病理科常用的快速制片方法之一[1]。因其方法简便快捷、省时省力,很多病理科会用超声快速石蜡方法对胃肠镜活检组织进行制片,据文献报道,在某些活检组织中,超声快速石蜡制片可以获得跟常规制片一致的HE染色的形态学结果[2]。在后续没有手术大标本的情况下,还需要用活检组织对胃肠道间质瘤