艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用研究

目的：观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用。方法：将人胃癌细胞BGC-823接种于裸鼠右腋皮下,建立荷瘤裸鼠模型;将荷瘤裸鼠随机分为5组：模型组、环磷酰胺组和艾迪注射液高、中、低剂量组,各组动物按相应药物和剂量给药,连续14d;末次给药后处死动物,剥取瘤块,称重计算抑瘤率并作组织学观察。结果：艾迪注射液高剂量组的抑瘤率为61.84%,光镜下可见大片状的坏死区。结论：艾迪注射液对裸鼠人胃癌细胞BGC-823具有抑制作用。     

艾迪注射液对胃癌患者术后细胞免疫功能的影响

目的 探讨艾迪注射液对胃癌患者术后细胞免疫功能的影响.方法将40例行胃癌根治术的患者随机分为A、B两组,各20例,另选择40例健康体检者为对照组.B组患者仅给予常规抗炎支持治疗,A组患者术后在常规治疗基础上给予艾迪注射液静脉滴注.比较胃癌组和对照组术前细胞免疫功能[用外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4+/CD8+)变化判断细胞免疫功能]及A、B组患者术前与术后14 d的细胞免疫功能.结果 (1)胃癌患者术前CD3+、CD4+、CD8+T细胞所占百分比及CD4+/C8+值与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)B组患者术后CD3+、CD4+、CD8+T细胞所占百分比及CD4+/CD8+值与术前比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)A、B两组患者术后CD3+、CD4+、CD8+T细胞所占百分比及CD4+/CD8+值间差异有统计学意义(P＜0.01).结论胃癌患者细胞免疫功能处于抑制状态,手术不能逆转胃癌患者的免疫抑制状态,而术后应用艾迪注射液可逆转胃癌患者的免疫抑制状态.     

人胃癌裸鼠胃原位移植转移模型的建立

目的 :建立人胃癌裸鼠原位移植转移模型 .方法 :用人胃癌细胞悬殊液接种于裸鼠皮下 ,形成稳定传代的皮下移植瘤 ,将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆膜下 ,称为间接胃原位移植模型 ,并与直接用细胞悬液接种于裸鼠胃浆膜下、皮下、腹腔、尾静脉的移植瘤模型比较 ,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化及细胞动力学改变等生物学特性 .结果 :肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特片 ,尾静脉注射与直接原位接种成瘤率均为6 0 % ,间接原位接种模型移植成瘤率为 80 % ,皮下与腹腔接种成瘤率均为 10 0 % .间接胃原位移植模型肝脏转移率为6 0 % ,直接胃原位移植模型肝脏转移率为 33.3% (P <0 .0 5 )尾静脉移植瘤模型仅见肝脏转移 ,实验过程中裸鼠衰竭处死后的肺脏经连续组织切片未见瘤细胞侵袭 .移植瘤细胞具有分泌CEA的功能 ,细胞动力学检测显示以五倍体细胞为主 .结论 :人胃癌裸鼠皮下 -胃原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似 ,为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型 .     

2-ME对BALB/C裸鼠人子宫内膜癌移植瘤的抑制作用

目的：探讨2-甲氧雌二醇（2-ME）对BALB/C裸鼠人子宫内膜癌移植瘤的作用。方法：将20只BALB/C裸鼠随机分成2组,每组10只,建立人子宫内膜癌裸鼠模型,第1组为空白对照组,第2组为治疗组。治疗组动物从接种肿瘤细胞的第3天开始,给予2-ME,按照100 mg·kg^-1·d^-1剂量,溶解在50 μL的 0.1%的DMSO中,灌服,连续4周;空白对照组灌服相同剂量的0.1%的DMSO,观察治疗组与空白对照组裸鼠用药4周后肿瘤大小的变化;采用HE染色法观察100 mg·kg^-1·d^-1的2-ME灌服裸鼠人子宫内膜癌移植瘤动物模型4周对心、肝、肾等重要脏器的损伤;采用免疫组化法观察2-ME对BALB/C 裸鼠人子宫内膜癌移植瘤MVD和VEGF表达的影响。结果：空白对照组平均肿瘤体积(943.8±4.8)mm³,治疗组为(430.5±5.6)mm³,抑瘤率为52.1%,治疗组明显小于对照组,两组比较,差异具有非常显著性（P<0.01）。100 mg·kg^-1·d^-1的2-ME对裸鼠体重、食欲和行为未造成影响,对心、肝和肾等重要器官未造成损害。MVD对照组为(12.6 ± 3.4)n/H,治疗组为(6.4 ± 2.8)n/H,两组比较差异具有非常显著性（P<0.01）;在VEGF的表达上,对照组阳性率(58.1 ±2.5)%,治疗组为(33.5 ± 3.1)%,两组比较差异具有显著性（P<0.01）。结论：100 mg·kg^-1·d^-1的2-ME对BALB/C裸鼠人子宫内膜癌移植瘤有抑制作用,此剂量对心肝肾等重要脏器未造成损害。     

人胃癌细胞株抗脱落凋亡特性的分析

目的：研究胃癌细胞HGC27，BGC823，MGC803，SGC7901抗脱落凋亡的特性，为研究肿瘤细胞抗脱落凋亡的机制奠定基础。方法：应用软琼脂集落形成实验，DNA ladder检测，流式细胞术等技术观察胃癌细胞脱落培养后细胞生长状况的改变。结果：对照组细胞MDCK（狗的正常肾脏上皮细胞系）在软琼脂中不生长，没有形成细胞集落；悬浮培养15h后，可见有细胞凋亡特征性的DNA ladder出现；流式细胞仪检测，悬浮培养24，48h可见有凋亡峰出现，而HGC27等4种胃癌细胞系在软琼脂中均形成大小不等的细胞集落，脱落培养15h后，没有细胞凋亡特征性的DNA ladder出现，流式细胞仪检测，与贴壁培养的对照组相比细胞周期没有显性差异。也没有凋亡峰的出现。结论：MDCK细胞属于锚着依赖性细胞，可出现脱落凋亡，胃癌细胞HGC27，BGC823，MGC803，SGC7901属于抗脱落凋亡细胞。     

金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MK-45细胞凋亡的影响

目的:评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞的抑制作用。方法:50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况,肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-fluoresceinisothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)双标记染色法鉴别早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞。电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化。结果:金龙蛇颗粒高、中、低剂量组的抑瘤率分别为68.13%、55.94%和50.31%,呈剂量依赖效应,与5-FU干预组抑瘤率比较,差异无统计学意义。金龙蛇颗粒各剂量组肿瘤细胞凋亡率为22.81%~38.54%,亦呈剂量依赖效应,且肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期。AnnexinV-FITC/PI双标记染色结果显示,金龙蛇颗粒各剂量组以早期凋亡细胞居多,5-FU干预组则以晚期凋亡细胞和坏死细胞居多。结论:金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制作用,促进MKN-45细胞凋亡可能是其抗肿瘤治疗的主要作用机制之一。     

茶多酚诱导人胃癌细胞凋亡

为寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂，选用茶的主要活性成分茶多酚，采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法，ＤＮＡ凝胶电泳以及透射电镜技术，观察茶多酚对人胃癌细胞（ＭＧＣ－８０３）凋亡的影响。结果表明，被１２５μｇ·ｍｌ－１茶多酚作用２４ｈ后，ＭＧＣ细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带，透射电镜下看到凋亡小体；茶多酚对ＭＧＣ细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞毒作用。     

中药胃肠安诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡的途径及基因调控的研究

目的:观察以健脾类中药为基础的复方“胃肠安”(Weichang'an,WCA)对人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用和体内诱导胃癌细胞凋亡的作用和途径。方法:用高效液相色谱法监测WCA的制备,保证研究制剂的稳定性;用人胃癌细胞SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤模型评价WCA对胃癌细胞的体内抑瘤作用;链霉素抗生物素-过氧化酶法(streptavidin peroxidase,SP)检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate fluorescence nick end labeling,TUNEL)法检测凋亡指数以及SP法检测活化caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达;SYBR green dye I实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)检测bcl-2等5条凋亡调控相关基因的表达;SP法比较有差异表达基因在细胞内的蛋白表达。结果:WCA组的平均瘤质量为(0.99±0.76)g,低于模型组的(1.93±0.58)g,差异有统计学意义(P=0.011 7),WCA组对皮下移植瘤生长的抑制率为48.70%;WCA组移植瘤PCNA阳性表达率为(35.73±6.01)%,强阳性表达率为(3.39±1.48)%,总阳性率为(39.03±7.37)%,均低于模型组的(53.48±9.34)%、(8.78±5.43)%和(62.26±13.80)%,差异有统计学意义;凋亡指数为(9.72±4.51)%,高于模型组的(2.45±1.37)%(TUNEL法);WCA组活化caspase-3表达阳性率为(5.20±2.26)%,较模型组的(2.82±1.84)%高(P=0.036 7);caspase-8表达阳性率为(4.44±2.67)%,而模型组为(3.94±2.10)%,差异无统计学意义(P=0.682 7);caspase-9表达阳性率为(8.87±6.08)%,较模型组的(2.25±0.79)%高(P=0.0144);与模型组相比,WCA组bcl-2等5条与凋亡调控相关基因的表达量差异有统计学意义的为Stat3(2-ΔΔCT=0.16)和bcl-2(2-ΔΔCT=0.10),均为下调表达作用;WCA组P-Stat3阳性表达率为(35.93±12.67)%,强阳性表达率为(3.64±1.72)%,总阳性率为(39.57±13.31)%,均分别低于模型组的(56.49±9.34)%、(13.16±7.06)%和(69.65±10.80)%,差异有统计学意义;bcl-2蛋白阳性表达率为(1.62±0.82)%,低于模型组的(7.53±3.73)%,差异有统计学意义。结论:中药复方WCA在体内可抑制胃癌细胞增殖,诱导凋亡;WCA在体内诱导胃癌细胞凋亡可通过caspase-9和caspase-3的活化实现。诱导胃癌细胞凋亡的机制与下调stat3和bcl-2的mRNA表达,抑制P-stat3和bcl-2蛋白在细胞内的表达有关。     

生脉注射液对裸鼠人胃癌SGC7901/VCR细胞移植瘤生长及P-gp表达的影响

目的 观察生脉注射液对裸鼠人胃癌SGC7901/VCR细胞移植瘤生长及P-gP表达的影响.方法 建立裸鼠人胃癌SGC7901/VCR细胞皮下移植瘤模型,将裸鼠随机分为生理盐水组、5-FU组、5-FU 异搏定组、5-FU 生脉组、生脉组,观察裸鼠生长状态,计算移植瘤平均瘤重及抑瘤率,检测P-gP表达.结果 5-FU TG生脉组瘤重、瘤体积与生理盐水组、5-FU组、生脉比较,P<0.05,均有统计学意义;抑瘤率(57.96%)明显高于5-FU组(11.66%);5-FU 生脉组瘤重与5-FU 异搏定组比较有统汁学意义(P<0.05),抑瘤率(57.96%)高于5-FU 异搏定组(27.56%).5-FU 生脉组P-gp表达与生理盐水组、5-FU组、生脉组比较,P<0.05,均有统计学意义;5-FU 生脉组与5-Fu 异搏定组比较,P>0.05,无统计学意义;单药生脉组与生理盐水组比较,P<0.05,有统计学意义.结论 以上实验结果表明生脉注射液能抑制裸鼠人胃癌SGC7901/VCR细胞移植瘤生长,降低P-gP表达.     

白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤中PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将BGC-823细胞复苏后,通过右前肢腋部皮下移植构建裸鼠胃癌移植瘤模型。建模成功后的荷瘤裸鼠随机分为空白对照组、Res组、顺铂组和联合用药组(白藜芦醇+顺铂),各组分别在成瘤部位皮下注射0.2ml相应的药物,每日1次,治疗1周。停药后将裸鼠处死,剥离肿瘤组织。采用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中PDCD5蛋白表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况。结果 Res组中PDCD5蛋白表达水平明显高于空白对照组,但低于顺铂组和联合用药组,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测到胃癌移植瘤中凋亡细胞核呈棕褐色,染色深浅不一,染色质分布不均,空白对照组中仅见到少数凋亡细胞,Res组、顺铂组和联合用药组凋亡细胞数依次增加,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可上调裸鼠胃癌移植瘤细胞中PDCD5的蛋白表达,表明其可能通过上调PDCD5的表达进而诱导细胞凋亡。     

黄芩素诱导胃癌细胞凋亡

目的 探讨黄芩素对胃癌细胞凋亡的影响。方法 MTT法测定黄芩素对胃癌SGC-7901细胞生长抑制率。TUNEL染色、AO／EB荧光染色测定细胞凋亡率。结果 胃癌细胞呈典型的凋亡形态学改变，凋亡比例呈剂量时间依赖性。TUNEL染色法显示，细胞凋亡指数2．696～16、196。结论 黄芩素具有诱导胃癌细胞凋亡的作用。     

12-脂氧化酶影响胃癌细胞株AGS蛋白激酶C活性

目的 研究胃癌细胞中蛋白激酶C(PKC)活化与12-脂氧化酶(12-LOX)的关系.方法 胃癌细胞株AGS于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中常规培养,AGS细胞培养24 h至对数生长期改用无血清RPMI 1640培养基培养24 h加入干预药物.PKC活性采用非同位素标记法测定.分别采用12-LOX催化合成产物12-羟基廿碳四烯酸(12-HETE)及12-LOX特异性抑制剂--黄芩素干预AGS细胞,测定其PKC活性变化.结果 AGS细胞经12-HETE干预后PKC活性明显增高,而经黄芩素干预后PKC活性明显下降,且呈时间、剂量依赖性.结论 12-LOX对PKC活性具有调节作用;PKC参与了12-LOX影响胃癌细胞增殖凋亡的信号传导.     

异丙肾上腺素对人胃癌细胞株凋亡的影响

目的研究异丙肾上腺素(ISO)对人胃癌细胞株(NKM45细胞)凋亡的影响。方法把NKM45细胞置含不同浓度(15,30,60μmol/L)ISO的培养液中培养24h。用TUNEL试验检测凋亡率。用免疫组化技术检测Bcl2和P53基因的表达。结果ISO显著地增加NKM45细胞的凋亡率(P<0.01),并随ISO浓度的增高而增高。Bcl2和P53的表达随ISO浓度的降低而降低(P<0.01)。NKM45细胞凋亡率与Bcl2和P53的表达密切相关(r=-0.93,P<0.01和r=-0.99,P<0.01)。结论ISO可促进NKM45细胞凋亡。NKM45细胞凋亡与Bcl2和P53表达减少相关。     

人胃癌细胞株在裸鼠体内不同种植部位的增殖,侵袭和转移

两株人胃癌细胞,MKN-28和MKN-45,分皮下、腹腔、胃壁和尾静脉途径种植在无胸腺裸鼠体内。腹腔和胃壁种植后荷瘤鼠存活时间较短,肿瘤相关死亡率高。而经皮下种植后荷瘤鼠存活最长。尾静脉接种后易在肺和脑形成转移瘤。种植在腹腔和胃壁的癌细胞能自发性转移到肝、食管旁组织、纵膈和肺。而种植在皮下的癌细胞不形成转移灶。肠系膜、肝、胰、结肠、胃和膈肌易受癌细胞侵袭,小肠和脾均不受累及。证明不同种植部位的组织和器官特性同癌细胞在体内的生物学行为有密切关系。     

人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及两种方法比较

目的：建立人胃癌裸小鼠原位移植和转移模型，并比较两种不同方法的结果。方法：将肿瘤组织块和肿瘤细胞悬液种植于裸小鼠胃壁形成原位移植瘤，观察和比较了两种方法所建立模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。结果：胃癌组织块种植的原位成瘤率达100％，淋巴结广泛转移率90％，肝转移发生率75％。细胞悬液种植的原位成瘤时间较组织块法延迟2周，成瘤率为67％，淋巴结广泛转移率为50％，肝转移发生率仅为30％。结论：两种原位移植和转移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，以肿瘤组织块原位模型为优，该模型的建立可为人胃癌转移机制和抗转移实验治疗的研究提供一种有价值的工具。     

罗格列酮诱导裸小鼠胃癌移植瘤细胞分化

目的研究罗格列酮（ROS）对人胃低分化黏液癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤的诱导分化作用,初步探讨其可能机制。方法培养人胃癌MGC-803细胞,建立移植瘤模型,随机分为模型组、雏甲酸组、ROS25mg／kg组、ROS50mg／kg组和ROS100mg／kg组,用药后,观察移植瘤体积变化并计算抑瘤率;检测肿瘤细胞周期及胃粘蛋白（Mucin5AC）。结果ROS能缩小移植瘤体积,肿瘤细胞被阻滞于G0／G1期,S期细胞减少;Mucin5AC表达增强。结论ROS诱导胃癌裸小鼠移植瘤细胞分化,可能是通过抑制胃癌细胞从G1期向S期过渡,降低细胞的增殖能力实现的。     

右旋甲硫氨酸联合化疗诱导胃癌细胞凋亡的机制

目的 探索右旋甲硫氨酸(D-Met)和联合应用周期特异性化疗药物诱导胃癌细胞凋亡的机制和途径。方法 将人胃癌细胞株SGC-7901分别置于六种不同培养基中：含L-Met、含D-Mel、不含Met而替以同型半胱氨酸(Met^-Hcy^ )，或在上述培养基中分别加入5-FU。培养48h后，在蛋白和mRNA水平检测凋亡相关基因bcl-2、bax和p53的表达，以及caspase-3、caspase-8和caspase-9的活性。结果 各组间bcl-2、bax和p53蛋白表达无明显差异；各组均见bax mRNA和p53 mRNA表达，但未见bcl-2 mRNA表达。三种培养基组间caspase-3活性无统计学差异，而D-Met组的caspase-8活性明显低于L-Met和Met-Hcy^ 组，L-Met组的caspase-9活性显著高于Met^-Hcy^ 和D-Met组；与未加入化疗药物时相比，联合应用5-Fu后，各组caspase-3、caspase-8和caspase-9活性均明显提高。结论 D-Met诱导胃癌细胞凋亡至少部分系通过p53非依赖途径所介导，且可能以caspase非依赖方式进行；无证据支持bcl-2和bax参与凋亡的调节；5-FU可能既通过死亡受体信号传递途径，又通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡。     

艾迪注射液对晚期癌症患者生活质量的影响

目的：观察艾迪注射液对晚期癌症患者的疗效和生活质量。方法：采用随机方法将40例晚期癌症患者分为两组,治疗组在化疗基础上加用艾迪注射液,对照组只采用化疗。对完成2个以上疗程的患者进行疗效、生活质量状况、毒副反应的比较。结果：有效率,治疗组与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）;KPS评分治疗组与对照组比较有显著性差异（P〈0．05）;胃肠道反应、白细胞下降、血小板下降的发生率,治疗组均低于对照组,治疗组与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05）。结论：艾迪注射液配合化疗治疗晚期癌症能减轻药物毒性,提高疗效,改善患者的生活质量。