成年大鼠基底前脑存在一个Nestin免疫阳性神经元簇

目的　观察Nestin免疫活性在成年大鼠基底前脑中的表达和分布 ,并探讨其与胆碱能神经元之间的关系。方法　采用免疫组化方法对成年大鼠基底前脑的切片进行nestin免疫组化染色及其与ChAT ,NADPH d双标染色。结果　在成年大鼠基底前脑的隔斜角带复合体有一个连续的nestin免疫阳性细胞带 ,胞体较大 ,梭形或多极形 ,有 2～ 4个突起。双标染色显示 ,Nestin阳性神经元与ChAT ,NADPH d阳性神经元间杂分布 ,大多数不呈交叉反应 ,只有少数 ,约 10 %呈双标染色。结论　成年大鼠基底前脑存在一个有别于胆碱能神经元的nestin免疫阳性神经元簇 ,其化学属性和生物学意义有待进一步研究。     

成年大鼠基底前脑隔-斜角带复合体的巢蛋白免疫阳性神经元至海马的纤维投射

目的 观察大鼠基底前脑巢蛋白(nestin)免疫阳性神经元的纤维投射。方法 先用荧光素逆行追踪法显示基底前脑内投射至海马的荧光素标记神经元，观察摄片后再进行nestin免疫组织化学染色。对比荧光照片和免疫组织化学染色照片，辨认荧光素和nestin双标神经元。结果 在基底前脑注射侧的内侧隔核(MS)和斜角带核的垂直支(vDB)和水平支(hDB)均存在荧光素标记细胞，其中一部分为nestin免疫阳性。在MS、vDB和hDB，双标细胞占逆行标记细胞的比例分别为21．3％、25％和20．6％；占nestin阳性细胞的比例分别为26．6％、15．7％和16．3％。结论 大鼠基底前脑的nestin免疫阳性神经元发出神经纤维向海马投射。提示在基底前脑有一个平行于隔-海马胆碱能投射和GABA能投射的第3条通路。     

银杏叶提取物改善AD模型鼠学习记忆功能的作用

目的 :研究银杏叶提取物 (EGb)对早老性痴呆 (AD)模型鼠学习记忆等认知功能的影响和对基底前脑隔区胆碱能神经元的保护作用。方法 :大鼠随机分成预防组、治疗组和对照组。各组切割右侧海马伞后分别用EGb(预防组及治疗组 )和蒸馏水 (对照组 )灌胃连续 6周。其中预防组在手术前先用EGb灌胃 2周。各组在术后次日及灌胃 6周后进行行为学检测。脑切片经Nissl、NOS组织化学和ChAT免疫组织化学染色 ,观察损伤侧内侧隔核和斜角带垂直支中NOS和ChAT阳性神经元的变化 ,并对ChAT阳性神经元作图像分析。数据分别用方差分析、SNK检验及 χ2 检验作统计学处理。结果 :行为学检测证实 ,EGb用药组AD模式鼠的学习记忆等认知功能较对照组明显改善 ,其中预防组效果又较治疗组为好 ;形态学检测证实 ,EGb用药组AD模式鼠损伤侧内侧隔核和斜角带垂直支中NOS、ChAT阳性神经元数目及ChAT阳性神经元的面积和周径等均优于对照组 ,预防组结果又优于治疗组。结论 :EGb对AD模型鼠学习记忆等认知功能障碍有一定的改善作用 ,这一作用是通过保护基底前脑隔区胆碱能神经元而实现的 ,其中预防效果比治疗效果更优     

基底前脑神经元移植互海马后ChAT,NGFR和NOS的表达变化

为了比较基底前脑神经元移植至海马后胆碱乙酰转移酶，神经生长因子受体和一氧化氮合酶神经元的变化规律，选用雄性SD大鼠35只，在单侧穹隆海马伞损伤后一周，将胚胎基底前脑神经元植入损伤侧海马。在移植术后存活5d,7d,14d,30d,60d,90d,和180d共分为7个时间组灌注取材，进行ChAT和NGFR的免疫组织化学反应及NOS反应，观察其神经元的变化。结果证明，ChAT神经元在移植后30d方出现阳性反应；NGFR神经元在移植后7d可见淡染的胞体，随后逐渐增强；NOS神经元在移植后7d时呈明显的阳性反应，而且数量多，三种神经元直到180d时均尚呈阳性反应，提示移植物内NOS神经元出现早且数量多，NGFR神经元出现的也较早，ChAT神经元出现最晚。这三种物质在细胞内出现的时间和数量差异与它们在细胞内发挥的功能有关。     

神经干细胞移植对注射192-IgG-saporin致AD动物模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的影响

目的探讨神经干细胞(NSCs)移植对注射192-IgG-saporin致老年性痴呆动物模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元的影响。方法将24只成年SD大鼠随机分为正常组、模型组和移植组,每组8只。模型组:左侧侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin2.5μg/5μL,建立192-IgG-saporin致老年性痴呆动物模型;移植组:动物模型建立后,于基底前脑行神经干细胞移植,4周后行免疫组织化学染色,结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑ChAT阳性神经元数量和形态学参数的变化。结果模型组注射192-IgG-saporin后1个月,观察到注射侧基底前脑内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)ChAT阳性神经元明显减少,分别为正常组的9.70%和14.10%(与正常组相比,P<0.01);移植组ChAT阳性神经元恢复到正常组的71.51%和73.52%(与模型组相比,P<0.01)。细胞形态学参数提示,移植组ChAT阳性神经元中含有大小不等的未成熟细胞。结论神经干细胞移植对192-IgG-saporin致痴呆模型鼠基底前脑ChAT阳性神经元有明显补充和保护作用。     

Neurturin和NGF联合应用对AD模型鼠基底前脑NGFR阳性神经元的保护作用

本研究目的是探讨neurturin和神经生长因子(NGF)联合应用对穹窿-海马伞(FF)切断后基底前脑胆碱能神经元的保护作用。将这两种因子联合注射到FF切断的大鼠侧脑室,注射一个月后,取脑进行免疫组化结合图像分析方法对内侧隔核(MS)和斜角带核垂直支(VDB)的神经生长因子受体(NGFR)阳性神经元存活情况进行比较分析。结果表明:FF切断一个月后,损伤组损伤侧MS和VDB的NGFR阳性神经元大量减少(分别减少64.8％和51.4％),MS和VDB的NGFR阳性细胞的面积和周长显著降低(P<0.01),OD值显著增高(P<0.01);NGF组损伤侧NGFR阳性神经元受到保护,NGFR阳性经元数显著高于损伤组损伤侧(P<0.01);联合组损伤侧NGFR阳性神经元也受到保护(MS和VDB细胞数分别只下降7.3％和15.4％),与损伤组损伤侧比较NGFR阳性细胞数增加了57.4％和36.0％(P<0.01),也明显高于NGF组(P<0.05);细胞形态学参数明显改善(P<0.05),细胞膜受体含量显著提高(P<0.05)。结果提示,neurturin和NGF联合应用和NGF单独应用均能不同程度地保护基底前脑胆碱能神经元,联合应用效果更佳。     

基底前脑巢蛋白免疫反应阳性神经元的来源探索

目的探索基底前脑巢蛋白免疫阳性神经元的来源,为进一步研究巢蛋白免疫阳性神经元的功能及利用巢蛋白表达改善学习记忆能力提供基础。方法用免疫荧光法研究巢蛋白免疫阳性神经元与5．乙炔基．2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）阳性细胞的关系、用免疫组化法研究巢蛋白免疫阳性神经元与双皮质素阳性神经元的关系。结果EdU阳性细胞主要分布于海马齿状回及侧脑室的室管膜及室管膜下区的细胞,在内侧隔核、斜角带核等区域无明显的EdU阳性细胞,巢蛋白免疫反应阳性神经元与EdU阳性细胞无共定位表现。双皮质素阳性细胞主要分布于海马齿状回及侧脑室的室管膜及室管膜下区的细胞,巢蛋白免疫反应阳性神经元与双皮质素阳性神经元之间无双标。结论基底前脑巢蛋白免疫反应阳性神经元不是一种新生的神经元,可能是成熟胆碱能神经元的一种功能状态。可能是巢蛋白表达赋予了胆碱能神经元特殊的功能。     

基底前脑巢蛋白免疫阳性神经元研究现状及展望

目的阐述基底前脑nestin免疫阳性神经元的研究现状,为后续研究提供依据。方法对近年发表的有关基底前脑nestin免疫阳性神经元的文献进行分析和综述。结果在人和大鼠的基底前脑存在着一群能表达nestin的成熟神经元,这群神经元是区别于胆碱能神经元和γ-氨基丁酸能神经元的独立的神经元。其形态和分布与胆碱能神经元相似,向海马、大脑皮质及丘脑投射,与学习记忆及神经元的可塑性有关。结论基底前脑nestin免疫阳性神经元的化学属性、纤维联系及电生理特征等有待于进一步研究。这些研究将有助于我们了解成熟神经元表达nestin的功能意义,并为相关疾病的诊治提供新的视角。     

免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的:建立侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物模型,观察其学习记忆能力和基底前脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化。方法:侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin,行Y迷宫检测,采用NADPH-d组织化学法染色,结合图像分析技术观察大鼠基底前脑NOS阳性神经元数目和形态学参数的变化。结果:模型组大鼠的学习、记忆能力较正常组明显下降。模型组基底前脑内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)NOS阳性神经元数分别减少到正常组的21.62%和17.70%;细胞周长和面积降低,灰度值升高,均有显著性差异。结论:应用192-IgG-saporin免疫毒素可使基底前脑NOS阳性神经元明显减少。     

成年大鼠基底前脑nestin阳性神经元的性别差异

为了探讨成年雌雄大鼠基底前脑nestin阳性神经元的性别差异及其意义,本实验应用免疫组织化学方法对正常成年雌雄SD大鼠及去势2周和4周的雌雄SD大鼠基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及斜角带水平支(hDB)的nestin阳性神经元的变化进行了比较研究。结果显示正常雌雄大鼠MS、vDB及hDB的nestin阳性神经元数十分接近(P>0.05);而去睾丸2周大鼠组MS、vDB、hDB的nestin阳性神经元数则明显高于去卵巢2周大鼠组(P<0.05,P<0.01);去睾丸4周大鼠组vDB、hDB的nestin阳性神经元数依然明显高于去卵巢4周大鼠组(P<0.05),但两组MS间的nestin阳性神经元数差别不大(P>0.05);各组大鼠的nestin阳性神经元的胞体和树突均相似。以上结果表明,正常成年雌雄大鼠基底前脑的nestin阳性神经元数不存在性别差异,无论去势与否,nestin阳性神经元的形态始终不存在性别差异;而去势后nestin阳性神经元数却存在着明显的性别差异。提示基底前脑nestin阳性神经元的性别差异不仅与雌激素和雄激素在雌雄个体中所发挥的不同作用密切相关,而且还可能是促使学习记忆出现性别差异的形态学基础。     

成人侧脑室下区Nestin阳性细胞的免疫组化观察

目的　探讨成人侧脑室下区 (SVZ)Nestin阳性细胞的分布及其化学特点。方法　采用 3 3 1B、10C2、Rat4 0 1、GFAP、NSE和viminten等神经细胞标志物对成人SVZ区进行免疫组织化学研究。结果　SVZ区存在较多Nestin反应阳性细胞 ,GFAP免疫阳性细胞及较少的NSE免疫阳性细胞。Nestin免疫反应阳性细胞可分为两类 ,一类为卵圆形 ,胞体较大 ,少有纤维突起 ;一类为星形 ,胞体较小 ,发出多支放射状的纤维突起。Nestin免疫阳性细胞均不与GFAP及NSE发生交叉反应。成人SVZ区细胞未见有viminten的表达。结论　成人SVZ区可能存在神经前体细胞和星形胶质样Nestin免疫阳性细胞。     

基底前脑神经元移植到海马后ChAT、NGFR和NOS的表达变化

为了比较基底前脑神经元移植至海马后胆碱乙酰转移酶、神经生长因子受体和一氧化氮合酶神经元的变化规律。选用雄性 SD大鼠 35只 ,在单侧穹隆海马伞损伤后一周 ,将胚胎基底前脑神经元植入损伤侧海马。在移植术后存活 5 d,7d,14 d,30d,6 0 d,90 d,和 180 d共分为 7个时间组灌注取材 ,进行 Ch AT和 NGFR的免疫组织化学反应及 NOS反应 ,观察其神经元的变化。结果证明 ,Ch AT神经元在移植后 30 d方出现阳性反应 ;NGFR神经元在移植后 7d可见淡染的胞体 ,随后逐渐增强 ;NOS神经元在移植后 7d时呈明显的阳性反应 ,而且数量多。三种神经元直到 180 d时均尚呈阳性反应。提示移植物内 NOS神经元出现早且数量多 ,NGFR神经元出现的也较早 ,Ch AT神经元出现最晚。这三种物质在细胞内出现的时间和数量差异与它们在细胞内发挥的功能有关     

成人海马内Nestin免疫阳性细胞的分布

为探讨成人海马内 Nestin免疫阳性细胞的分布 ,本实验采用 331B、10 C2、Rat40 1、NSE、GFAP、Vimentin抗体对成人海马了进行免疫组织化学研究。结果显示 ,海马内 Nestin免疫阳性细胞可分为三类 :一类细胞位于门区及齿状回颗粒下层 ,胞体为卵圆形 ,无突起 ,胞浆深染 ,此类细胞不与 NSE呈交叉反应 ;第二类细胞也位于门区及齿状回颗粒下层 ,胞体较小发出少量放射状突起 ,与 GFAP及 Vimentin抗体无交叉反应 ,在海马裂及海马伞中也存在少量的此类神经细胞 ;第三类为 Nestin免疫阳性细胞 ,体积较大 ,形态与星形胶质细胞相似 ,并分别位于齿状回分子层及颗粒层 ,其突起常常跨越齿状回颗粒细胞层。Nestin免疫阳性神经细胞不被 GF AP抗体标记。成人海马内未见 Vimentin免疫阳性细胞。结论 :人海马内存在神经前体细胞及放射状胶质样Nestin免疫阳性细胞     

神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的分布与共存

用神经生长因子受体免疫组化，NADPH－d组化及两者的双重反应技术观察了神经生长因子受体和一氧化氮合酶在大鼠基底前脑神经元的表达和共存。神经生长因子受体和一氧化氮合酶阳性神经元在基底前脑内都以一条连续的细胞带的形式存在．神经生长因子受体阳性神经元多为多极形．排列较密，由吻侧向尾侧数量逐渐增多；一氧化氮合酶神经元的形状与神经生长因子受体阳性神经元相似，但数量较少，且由吻侧向尾侧数量相对稳定。通过双重反应证明，基底前脑神经元包括着神经生长因子受体阳性和一氧化氮合酶阳性以及两者共存的神经元等三种类型。双重反应阳性神经元在形态上和神经生长因子受体阳性神经元相似，其数量从吻侧向尾侧逐渐减少，在前由＋1．0水平，它占一氧化氮合酶阳性神经元的70％，神经生长因子受体阳性神经元的50％；但到前连合水平则仅占一氧化氮合酶阳性神经元的20％和神经生长因子受体阳性神经元的40％。本文对神经生长因子受体与一氧化氮合酶双重反应阳性神经元的分布意义以及此二种阳性神经元之间的关系进行了讨论。     

培养中E8鸡胚前脑5-羟色胺免疫反应神经细胞的鉴定

本研究采用免疫细胞化学PAP方法,对培养4天的E_8鸡胚前脑5-羟色胺(5-HT)免疫反应神经细胞的表达进行研究。发现生长在基板蛋白(LN)支持物上的前脑细胞,98％为神经特异性烯醇酶(NSE)免疫反应阳性细胞,证明为神经细胞;其中部分神经细胞显示5-HT免疫反应强阳性,约占培养神经细胞的10.4％,大多数细胞为多突或双极的形态学特征。为了要了解其余2％的NSE免疫反应阴性细胞是否为胶质细胞,我们以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体做胶质细胞特异性染色,阳性细胞为2％,与上述结果一致。     

Immunohistochemistry of choline acetyltransferase in the guinea pig brain

Choline acetyltransferase (ChAT) was localized immunohistochemically within the brain of the guinea pig using a monoclonal antibody. ChAT was found in the cytoplasm of cell bodies and primary dendrites of neurons located in striatum, basal forebrain, cranial nerve motor nuclei and scattered cells in the pons. The greatest numbers of immunoreactive neurons were located in the diagonal band of Broca, medial septum and striatum. Distinct immunoreactive fibers were not visible using this antibody, although a diffuse immunostaining was present in the same nuclear regions as well as in the nerve roots of cranial nerve nuclei and the interpeduncular nuclei. Results of the present study agree closely with other previous reports of acetylcholine distributions.     

The immunohistochemical localization of neuronal nitric oxide synthase in the basal forebrain of the dog

The present work describes for the first time the anatomical distribution of neuronal nitric oxide synthase (nNOS) immunoreactivity and NADPH-d activity in the basal forebrain of the dog. As in other species, small, intensely nNOS-immunoreactive cells were seen within the olfactory tubercle, caudate nucleus, putamen, nucleus accumbens and amygdala. In addition, a population of mixed large and small nNOS positive cells was found in the medial septum, diagonal band and nucleus basalis overlapping the distribution of the magnocellular cholinergic system of the basal forebrain. Our results show that the distribution of NOS containing neurons in these nuclei in the dog is more extensive and uniform than that reported in rodents and primates. When double labeling of nNOS and NADPH-d was performed in the same tissue section most neurons were double labeled. However, a considerable number of large perikarya in the diagonal band and nucleus basalis appeared to be single labeled for nNOS. Thought a certain degree of interference between the two procedures could not be completely excluded, these findings suggest that NADPH-d histochemistry, which is frequently used to show the presence of NOS, underestimates the potential of basal forebrains neurons to produce nitric oxide. In addition, a few neurons mainly localized among the fibers of the internal capsule, appeared to be labeled only for NADPH-d. These neurons could be expressing a different isoform of NOS, not recognized by our anti-nNOS antibody, as has been reported in healthy humans and AD patients.