PRK术后转化生长因子β1 mRNA表达的实验研究

目的探讨准分子激光角膜切削术(PRK)后转化生长因子β1 (TGF-β1)在角膜伤口愈合和角膜雾状混浊发病机制中的作用.方法将24只新西兰大白兔(24只眼)随机分为正常组(n=4)和手术组(n=20).手术组每只左眼行PRK术,术中采用准分子激光器,角膜中央激光去上皮,然后按-10.00 D近视进行切削,分别于术后第7d,14d,28d和3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物,将角膜组织制成石蜡切片,应用原位杂交技术检测角膜组织中TGF-β1mRNA的表达.结果①从术后第7 d开始,术眼均不同程度地发生了角膜haze,严重者可达3级,haze高峰约在术后第28 d.②正常角膜上皮中TGF-β1 mRNA有低水平表达,PRK术后第7d,14d和28d,角膜上皮TGF-β1mRNA表达明显增高,术后3月已开始降低;正常组角膜基质中未检测出TGF-β1mRNA,术后第7d,14d和28d,角膜基质中TGF-β1mRNA表达明显增高,术后3月己开始降低. 结论TGF-β1可能参与了PRK术后的伤口愈合,它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生.     

PRK术后转化生长因子β1 mRNA表达的实验研究

目的 :探讨准分子激光角膜切削术 (PRK)后转化生长因子β1(TGF β1)在角膜伤口愈合和角膜雾状混浊发病机制中的作用。方法 :将 2 4只新西兰大白兔 (2 4只眼 )随机分为正常组 (n =4 )和手术组 (n =2 0 )。手术组每只左眼行PRK术 ,术中采用准分子激光器 ,角膜中央激光去上皮 ,然后按 10 .0 0D近视进行切削 ,分别于术后第 7d ,14d ,2 8d和 3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物 ,将角膜组织制成石蜡切片 ,应用原位杂交技术检测角膜组织中TGF β1mRNA的表达。结果 :①从术后第 7d开始 ,术眼均不同程度地发生了角膜haze ,严重者可达 3级 ,haze高峰约在术后第 2 8d。②正常角膜上皮中TGF β1mRNA有低水平表达 ,PRK术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜上皮TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月已开始降低 ;正常组角膜基质中未检测出TGF β1mRNA ,术后第 7d ,14d和 2 8d ,角膜基质中TGF β1mRNA表达明显增高 ,术后 3月己开始降低。结论 :TGF β1可能参与了PRK术后的伤口愈合 ,它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生。     

PRK术后转化生长因子β1mRNA表达的实验研究

目的：探讨准分子激光角膜切削术（PRK）后转化生长因子β1（TGF－β1）在角膜伤口愈合和解膜雾状混浊发病机制中的作用。方法：将24只新西兰大白兔（24只眼）随机分为正常组（n＝4）和手术组(n=20)。手术组每只左眼行PRK术，术中采用准分子激光器，角膜中央激光去上皮，然后按－10.00D近视进行切削，分别于术后第7d,14d,28d和3月于裂隙灯下观察记录角膜haze的变化并处死动物，将角膜组织制成石蜡切片，应用原位杂交技术检测角膜缲TGF－β1mRNA的表达。结果：①从术后第7d开始，术眼均不同程度地发生了角膜haze，严重者可达3级，haze高峰约在术后第28d。②正常角膜上皮中TGF－β1mRNA有低水平表达，PRK术后第7d,14d和28d，角膜上皮TGF－β1mRNA表达明显增高。术后3月已开始降低；正常组角膜基质中未检测出TGF－β1mRNA，术后第7d,14,和28d，角膜基质中TGF－β1mRNA表达明显增高，术后3月已开始降低。结论：TGF－β1可能参与了PRK术后的伤口愈合，它可能通过促进角膜基质细胞的增殖和细胞外基质的合成而促进角膜haze的发生。     

PRK与LASIK术后角膜愈合机制比较分析及基因重组表皮生长因子在屈光手术中的应用效果初探

方法：将32只家兔分为PRK、LASIK、PRK+EGF和对照组，分别制作动物模型，按术后24小时、1周、1月、2月，3月进行观察．采用裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮修复和Haze情况，进行纪录比较．并取角膜进行切片光镜检查和原位杂交试验，检测角膜屈光手术后修复过程中形态学改变和EGF、EGFRmRNA的表达。结果：发现Haze从PRK术后1-2周开始出现，2月达到最高峰，之后逐渐减退；正常兔角膜上皮和基质有EGF、EGFRmRNA表迭，PRK术后EGF、EGFRmRNA表达增加，且以术后1～2月表达最明显并与角膜Haze的出现和程度相关：LASIK术后无Haze出现，EGF、EGFRmRNA表迭无明显增加；基因重组人表皮生长因子滴眼液可加速PRK术后角膜的修复过程．结论：EGF参与PRK术后伤口愈合过程，且与Haze的形成和发展相关：PRK和LASIK术后角膜修复过程中的形态改变及调节机制存在很大差异；基因重组人表皮生长因子能够安全的应用于角膜屈光手术后角膜的修复过程。     

PRK与LASIK术后角膜愈合机制比较分析及基因重组表皮生长因子在屈光手术中的应用效果初探

方法将32只家兔分为PRK、LASIK、PRK+EGF和对照组,分别制作动物模型,按术后24小时、1周、1月、2月、3月进行观察.采用裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮修复和Haze情况,进行纪录比较.并取角膜进行切片光镜检查和原位杂交试验,检测角膜屈光手术后修复过程中形态学改变和EGF、EGFRmRNA的表达.结果发现Haze从PRK术后1-2周开始出现,2月达到最高峰,之后逐渐减退;正常兔角膜上皮和基质有EGF、EGFRmRNA表达,PRK术后EGF、EGFRmRNA表达增加,且以术后1～2月表达最明显并与角膜Haze的出现和程度相关;LASIK术后无Haze出现,EGF、EGFRmRNA表达无明显增加;基因重组人表皮生长因子滴眼液可加速PRK术后角膜的修复过程.结论EGF参与PRK术后伤口愈合过程,且与Haze的形成和发展相关;PRK和LASIK术后角膜修复过程中的形态改变及调节机制存在很大差异;基因重组人表皮生长因子能够安全的应用于角膜屈光手术后角膜的修复过程.     

表皮生长因子受体在鼠角膜损伤前后的表达

采用免疫组织化学PAP法检测正常及刮除部分角膜上皮3、6、12、24h后大鼠角膜内表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)的分布。结果:正常状态下,只有角膜缘干细胞和近前弹力层角膜上皮细胞表达EGFR。角膜上皮缺损后6h,损伤区角膜上皮均表达EGFR。当损伤后24h,角膜上皮缺损恢复时,在基质层内可见EGFR阳性基质细胞。结果表明:表达EGFR的角膜上皮细胞具有很强的增殖能力,在角膜损伤修复中起重要作用。     

五种生长因子mRNA在兔角膜中的表达

目的　了解EGF、TGF-α、bFGF、TGF-β1和PDGF在兔角膜上皮和基质中的表达情况,探讨其在角膜伤口愈合中的作用。方法 应用原位核酸分子杂交方法检测兔角膜上皮和基质中EGF、TGF-α、bFGF、TGF-β1和PDGF mRNA的表达。 结果 EGF、TGF-α和PDGF mRNA仅在正常角膜上皮细胞层表达,基质中未见表达;bFGF和TGF-β1mRNA在正常角膜上皮和基质中均有表达。 结论 角膜能合成和分泌EGF、TGF-α、bFGF、TGF-β1和PDGF,且共同调节着角膜伤口的愈合。     

家兔PRK术后角膜创面的免疫组织化学研究

目的 评价实验室家兔不同屈光度PRK术后角膜创面愈合的过程。方法 应用SVSAPEX PLUS型（Summit Technology Inc.USA)准分子激光治疗系统对6只家兔双眼进行PRK术,随机分为FLM点眼组和CM点眼组,每组3只家兔,分别于术后3d、30d、100d两组随机选取1只家兔,猝死摘除双眼球,取其角膜。OCT包埋后冰冻切片,用于免疫组化研究,检测Ⅲ-C和FN。结果 所有家兔角膜上皮均在PRK术后第3天愈合,术后15d 开始出现不同程度的角膜haze,30-60d的最明显,术后100d,除1只家兔角膜haze为1级外,余家兔角膜haze为0级。CM组Ⅲ－C和FN的表达较FLM组明显;左眼（－8．00D）Ⅲ-C和FN的表达较右眼（－4．00D）明显。结论 PRK术后100d角膜组织结构基本正常,但仍有组织薄弱处和特殊性改变。角膜基质层切削深度可能是影响PRK术后haze发生的一个因素。     

PRK术后房水中TGF-β1含量与haze的相关性

目的探讨兔眼准分子激光角膜切削术(photorefractkeratectomy,PRK)术后3个月房水中TGF-β1含量的动态变化及其与角膜上皮下混浊(haze)形成的关系.方法52只新西兰白兔,取4只兔(8眼)作术前对照;另48只兔(96眼)平均分两组,行PRK术,即切削深度为100μm组和150μm组,消融直径5.6mm.于术后3、7、21d及1、2、3个月抽取房水并同时记录haze分级,ELISA法测定房水中TGF-β1含量.结果PRK术后两种切削深度的兔眼角膜上皮均于5～7d愈合;haze均自术后2周开始形成,术后2个月时达到高峰,3个月时明显下降.但150μm切削组术后3个月时,haze仍较100μm组明显,伴有房水中TGF-β1含量的相应改变;150μm切削组在术后7d和3个月时,haze和TGF-β1含量均明显高于100μm切削组.结论PRK术后TGF-β1影响haze的形成并具有一种剂量依赖的关系,而且与切削深度相关.     

准分子激光屈光性角膜切削术后兔眼角膜组织蛋白多糖的变化

目的：动态观察准分子激光屈光性角膜切削术(photorefractive kemtecmy,PRK)后角膜组织蛋白多糖(protoglycan,PG)的变化,并探讨其与角膜雾状混浊(haze)的关系。方法：16只兔(32眼)进行PRK手术建立动物模型,矫正度数-9．00D。术后裂隙灯显微镜对各组角膜的haze分级,并取不同时间点角膜组织,应用超微结构组织化学方法观察PG的变化。结果：异常PG主要沉积在角膜的前部基质;haze在术后3周明显,随着时间的推移逐渐减轻。haze愈明显,PG改变亦明显。结论：PRK术后切削区角膜基质浅层PG的异常改变与角膜haze的形成密切相关。