Rho/Rho激酶信号通路与胰腺疾病

Rho/Rho激酶信号通路是真核细胞内广泛存在的一条信号通路,参与多种生物学行为.研究表明,Rho/Rho激酶在胰腺腺泡细胞、导管细胞及内分泌细胞均见表达,并与胰腺内、外分泌功能以及胰腺癌、胰腺炎和糖尿病的发生、发展密切相关.     

胰腺癌组织中神经激肽3受体的表达及组织学定位

目的研究神经激肽3受体(NK3R)在胰腺癌组织中mRNA和蛋白水平的表达,以及该受体在胰腺癌中的组织学定位。方法应用逆转录聚合酶链反应技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中NK3R的mRNA水平,应用Westernblot检测其蛋白的表达水平,应用免疫组织化学技术进行组织学定位。结果与正常胰腺相比,胰腺癌组织中NK3RmRNA过度表达,胰腺癌组织中NK3R蛋白也过度表达,正常胰腺组织NK3R蛋白表达为11±05,胰腺癌组织为146±36,P<001。免疫组织化学检查结果显示正常胰腺中有较弱的NK3R表达,胰腺癌的导管细胞、神经纤维、炎性细胞中均有较强的NK3R表达。结论胰腺癌组织中NK3R的表达水平明显上升。     

Her 2/neu和MMP2在胰腺癌中的表达及其意义

笔者应用免疫组织化学法检测Her 2 /neu和MMP2基因在 3 4例胰腺癌、5例胰腺囊腺瘤、5例胰腺囊肿和 2例正常胰腺组织中的表达水平。结果示胰腺癌中Her 2 /neu和MMP2表达明显高于胰腺正常组织和良性病变 (P <0 .0 5)。Her 2 /neu的表达在有淋巴结转移的胰腺癌中明显低于无淋巴结转移的胰腺癌 (P <0 .0 5) ;随TNM分期增高 ,其表达阳性率显著降低。MMP2表达在肿瘤直径大于 4.5cm及有淋巴结转移的胰腺癌中均明显高于肿瘤直径小于 4.5cm及无淋巴结转移者 (P <0 .0 5) ;随TNM分期增高 ,其表达阳性率也增高。MMP2在预后不良组中表达水平较生存组高 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5)。提示Her 2 /neu和MMP2过度表达可能与胰腺癌的发生发展有关 ;Her 2 /neu可能在胰腺癌发生转移之前发挥作用 ,而MMP2与胰腺癌的侵袭、转移密切相关。检测二者表达水平对指导临床治疗和评估预后可能有较重要价值。     

在胰腺癌中胃泌素的表达和加工

胃泌素是胃肠道的营养性激素 ,能促进正常粘膜和胃肠癌肿的生长 ,肝、胰和胃肠癌细胞对血循胃泌素、自分泌胃泌素及其前体起反应 ,合成胃泌素的能力依据细胞的胃泌素前体加工。作者研究正常胰腺和胰腺癌细胞 CCK- B/胃泌素受体、前胃泌素、甘氨酸 -扩增胃泌素和酰胺胃泌素表达 ,后两者是胃泌素加工过程中的产物。取 10例正常胰腺、2 2例胰腺癌组织切片作免疫组化染色以检测 CCK- B/胃泌素受体、前胃泌素、甘氨酸扩增胃泌素和酰胺胃泌素的表达。由 2名有经验的组织病理学家分别评分 ,其差别不超过 10 %。所用CCK- B/胃泌素受体抗体 (稀…     

胰腺微循环与胰腺的功能和临床

胰腺是机体重要的器官 ,从功能上讲 ,它是机体唯一一个既是内分泌又是外分泌的实质器官 ;从临床上讲 ,胰腺内外分泌都引起危及人体健康的常见多发病 ,发病机理不清是这些疾病高发和临床疗效不理想的根本原因。胰腺内分泌部最常见的疾病是糖尿病 ,它的发病率呈逐年上升趋势 ,据世界卫生组织新近公布的资料表明 ,其病死率仅次于恶性肿瘤和心脑血管疾病居第三位。胰腺外分泌部最常见的疾病是急性胰腺炎 (ＡＰ)和胰腺癌 ,新近的资料显示 ,胰腺癌和急性坏死性胰腺炎的发病率逐年增高 ,其病死率居高不下 ,已成为当今医学的一大难题。然而 ,人们对…     

以白细胞介素4-受体为靶标的胰腺癌靶向治疗研究

目的 检测白细胞介素4受体(IL-4R)在胰腺癌组织及人胰腺癌细胞株中的表达,观察以抗白细胞介素-4受体单抗(MAIL4R)为载体构建的免疫毒素MAIL4R-CTX对胰腺癌细胞的靶向杀伤作用.方法 应用免疫组织化学检测IL-4R在26例胰腺癌组织、15例胰腺正常组织中的表达;免疫细胞化学染色检测IL-4R在人胰腺癌PANC-1、BxPC-3细胞和人肺腺癌H1299细胞中的表达;采用噻唑蓝(MTT)法观察MAIL4R、眼镜蛇毒细胞毒素(CTX)、免疫毒素MAIL4R-CTX对体外培养PANC-1,BxPC-3细胞和H1299细胞生长的影响.结果 IL-4R在26例胰腺癌组织中均呈不同程度的阳性表达,而15例胰腺正常组织中仅1例呈弱阳性表达,余均为阴性表达;人胰腺癌PANC-1,BxPC-3细胞均表达IL-4R,H1299细胞不表达IL-4R;CTX对PANC-1,BxPC-3和H1299细胞均有明显抑制作用,但对3株细胞的抑制率差异无统计学意义(P＞0.05);MAIL4R对PANC-1、BxPC-3和H1299细胞均无明显抑制作用;MAIL4R-CTX对过表达IL-4R的BxPC-3和PANC-1细胞的生长具有显著的抑制作用,并且为剂量依赖性,而对低表达IL-4R的H1299细胞不敏感,在浓度为18.75 mg/L,作用4h时PANC-1和BxPC-3细胞分别有86.4%和95.2%被杀伤,H1299细胞仅死亡26.8%(P＜0.01).结论 IL-4R过表达于胰腺癌组织和胰腺癌细胞株,而低表达于正常胰腺组织中,免疫毒素MAIL4R-CTX在体外对过表达IL-4R的细胞株PANC-1、BxPC-3有靶向性杀伤作用.     

凋亡抑制蛋白2在胰腺癌中的表达及其与化疗耐药的关系

目的 观察细胞凋亡抑制蛋白2(c-IAP2)在胰腺癌组织中的表达,探讨c-IAP2表达与胰腺癌细胞对化疗药物耐药性的关系.方法 收集胰腺癌标本32例,应用免疫组织化学染色法观察c-IAP2在胰腺癌及癌旁正常胰腺组织中的表达;体外培养胰腺癌细胞PANC-1,间歇浓度递增法诱导胰腺癌细胞株PANC-1对吉西他滨(Gem)的耐药,噻唑蓝(MTT)检测处理前后细胞对Gem的药物敏感性,免疫荧光和免疫印迹检测c-IAP2蛋白表达水平.结果 c-IAP2在胰腺癌组织均有表达(32/32,100.0%)、癌旁正常胰腺组织(8/18,44.4%)中有表达,胰腺癌表达水平显著强于癌旁正常胰腺组织.c-IAP2的表达强度在不同分化程度的肿瘤组织中的差异有统计学意义(P<0.05).药物培养3个月后,PANC-1对Gem的半数有效浓度(IC50)由(6.03±0.27)mg/L升高至(41.60±1.14)mg/L(P<0.05),免疫荧光和免疫印迹结果显示耐药亚株c-LAP2蛋白表达水平较亲本株升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 C-IAP2在胰腺癌分化程度和对吉西他滨耐药过程中有一定作用.     

P物质及其受体在胰腺癌细胞中的表达

目的 了解P物质(SP)、神经激肽-1受体(NK-1R)及中性肽链内切酶(NEP)在胰腺癌细胞中表达。方法应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)技术,检测正常胰腺、胰腺癌组织和7株胰腺癌细胞中前速激肽原A(PPT-A)、NK-1R和NEP的mRNA表达,应用Westernblot检测NK-1R和NEP的蛋白水平。结果正常胰腺组织PPT-A的mRNA表达水平为0.430 0±0.464 7,胰腺癌组织中为1.790 0±1.833 1(P<0.05);正常胰腺NK-1R的mRNA表达水平为0.088 2±0.086 8,胰腺癌组织中为2.154 5±2.103 1(P<0.01);正常胰腺组织NEP的mRNA表达水平为3.234 7±6.301 0,胰腺癌为8.606 9±8.703 2(P>0.05)。Western Blot结果发现,胰腺癌组织中NK-1R蛋白也过度表达,而NEP的蛋白水平未相应上调。结论 胰腺癌组织中SP和NK-1R都明显上调,而SP的降解酶——NEP未相应上调,这表明胰腺癌组织中SP的产生与灭活的平衡被打破,产生过多的SP,发挥过度的生物学效应。     

核内不均一性核糖核蛋白A2/B1在胰腺癌中的表达及其对B细胞淋巴瘤/白血病-X选择性剪切的调控机制

目的 探讨核内不均一性核糖核蛋白(hnRNP) A2/B1作为下游靶蛋白参与Fyn诱导的胰腺癌细胞B细胞淋巴瘤/白血病-X(bcl-X)选择性剪切调控的作用及其机制.方法 通过免疫组织化学方法观察28例胰腺癌标本hnRNP A2/B1的表达,并探讨其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.通过RNA-免疫共沉淀技术,探讨受Fyn活性调控的hnRNP A2/B1的下游靶基因.通过改变hnRNP A2/B1的表达,观察对bcl-X选择性剪切的影响.结果 28例胰腺癌组织标本中有23例出现hnRNP A2/B1的表达,表达水平与胰腺癌TNM分期(R =0.854,P＜0.05)、是否发生远处转移(R =0.698,P＜0.05)相关等因素有关.RNA-免疫共沉淀证实,hnRNP A2/B1能够与BxPC3细胞中bcl-X基因的Pre-mRNA结合.hnRNP A2/B1表达水平的改变参与BxPC3胰腺癌细胞中bcl-X两种剪切体比例的调控.结论 hnRNP A2/B1的表达水平与胰腺癌组织侵袭转移能力密切相关;hnRNPA2/B1可以与胰腺癌细胞中bcl-X基因结合,从而影响bcl-X选择性剪切.     

Bak和Bcl-xL蛋白在胰腺癌中表达的临床病理学意义

目的:观察促进细胞凋亡的Bak蛋白与抑制细胞凋亡的Bcl-xL蛋白对胰腺癌发生、进展、转移及预后的影响.方法:免疫组织化学方法(SABC法)检测10例正常胰腺组织、59例胰腺癌及65例胰周淋巴结组织内的Bak和Bcl-xL蛋白表达;TUNEL法检测胰腺癌组织内的凋亡细胞.结果:Bak、Bcl-xL蛋白在正常胰腺组织表达率分别为2/10,4/10,凋亡率为2/10;在胰腺癌组织的表达率分别为79.7%(47/59),32.2%(19/59);凋亡率为74.6%(44/59).Bak蛋白在正常胰腺、高分化胰腺癌、中分化胰腺癌中的表达逐渐增高;在转移淋巴结与非转移淋巴结中表达率分别为86.4%(19/22),23.3%(10/43),二者差异有统计学意义(P＜0.05).中、高分化胰腺癌Bak蛋白高表达,术后平均生存时间长.结论:Bak蛋白的表达与细胞凋亡呈正相关趋势,Bcl-xL则呈负相关趋势.细胞凋亡主要影响胰腺癌的发展、转移及预后.Bak蛋白可作为胰腺癌预后评估的一项指标和一种抗癌基因有望用于胰腺癌治疗.     

去整合素和金属蛋白酶17调控胰腺癌细胞增殖凋亡的机制

目的 探讨去整合素和金属蛋白酶17(ADAM17/TACE)调控胰腺癌细胞增殖凋亡的作用机制.方法 分别采用免疫组织化学及流式细胞仪检测58例胰导管腺癌组织及6株胰腺癌细胞株中ADAM 17/TACE的表达,用小RNA干扰(siRNA)技术去除胰腺癌细胞L3.6pl ADAM17/TACE mRNA及蛋白表达后,CCK-8试剂盒检测胰腺癌细胞L3.6pl的生长速度,Western blot检测ADAM17/TACE、凋亡相关基因PARP、增殖相关基因p27( p27kipl)表达.阻断表皮生长因子受体(EGFR)及丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路后,Western blot检测ADAM17/TACE及EGFR/p-EGFR、AKT/p-AKT的表达变化.结果 58例胰导管腺癌组织及6株胰腺癌细胞中ADAM17/TACE的表达阳性率均为100％.同亲代L3.6pl细胞比较,siRNA干扰ADAM17/TACE mRNA的表达后,L3.6pl细胞生长速度减缓(P＜0.05);p27kipl的表达明显增强;多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)表达亦明显增强提示出现凋亡;分别阻断EGFR和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT信号通路后,ADAM17/TACE蛋白表达均增加.结论 ADAM 17/TACE调控胰腺癌细胞增殖,抑制其表达可致胰腺癌细胞凋亡,可能与PI3K/AKT信号通路相关.     

Cholecystokinin plays a novel protective role in diabetic kidney through anti-inflammatory actions on macrophage: anti-inflammatory effect of cholecystokinin

Inflammatory process is involved in the pathogenesis of diabetic nephropathy. In this article, we show that cholecystokinin (CCK) is expressed in the kidney and exerts renoprotective effects through its anti-inflammatory actions. DNA microarray showed that CCK was upregulated in the kidney of diabetic wild-type (WT) mice but not in diabetic intracellular adhesion molecule-1 knockout mice. We induced diabetes in CCK-1 receptor (CCK-1R) and CCK-2R double-knockout (CCK-1R(-/-),-2R(-/-)) mice, and furthermore, we performed a bone marrow transplantation study using CCK-1R(-/-) mice to determine the role of CCK-1R on macrophages in the diabetic kidney. Diabetic CCK-1R(-/-),-2R(-/-) mice revealed enhanced albuminuria and inflammation in the kidney compared with diabetic WT mice. In addition, diabetic WT mice with CCK-1R(-/-) bone marrow-derived cells developed more albuminuria than diabetic CCK-1R(-/-) mice with WT bone marrow-derived cells. Administration of sulfated cholecystokinin octapeptide (CCK-8S) ameliorated albuminuria, podocyte loss, expression of proinflammatory genes, and infiltration of macrophages in the kidneys of diabetic rats. Furthermore, CCK-8S inhibited both expression of tumor necrosis factor-α and chemotaxis in cultured THP-1 cells. These results suggest that CCK suppresses the activation of macrophage and expression of proinflammatory genes in diabetic kidney. Our findings may provide a novel strategy of therapy for the early stage of diabetic nephropathy.     

Gastrin、CCK对胆管癌细胞bcl-2、baX基因表达的调控

目的探讨Gastrin、CCK对胆管癌细胞bcl-2和bax基因表达的调控作用.方法用免疫组织化学、原位杂交、流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等技术,研究了Gastrin17肽(G-17)和CCK-8S肽(CCK-8 Sulfated)及CCK-A受体拮抗剂L364,718(L18)和Gastrin/CCK-B受体拮抗剂L365,260(L60)对QBC939胆管癌细胞bcl-2和bax mRNA、蛋白含量的影响.结果在正常情况下胆管癌细胞bcl-2和bax mRNA表达均为阳性,bax mRNA强于bcl-2 mRNA;G-17(1×10-10 mol/L、48 h)、CCK-8S(1×10-10mol/L)明显增强bcl-2 mRNA表达,而对bax mRNA表达无影响;同时加入L18和/或L60(1×10-10 mol/L)可明显抑制G-17和CCK-8S对bcl-2mRNA的促表达作用.经G-17或CCK-8S(1×10-8 mol/L)作用48 h,胆管癌细胞bcl-2蛋白表达明显增加,而bax蛋白表达无显著变化;L60或L18(1×10-8 mol/L)能明显抑制G-17和CCK-8S对bcl-2蛋白表达的促进作用.结论 Gastrin和CCK对bcl-2基因表达有上调作用,提示Gastrin和CCK对胆管癌细胞凋亡过程有抑制作用.     

结直肠癌组织中胃泌素的表达与Fas／FasL和天冬半胱氨酸蛋白酶的关系

目的了解胃泌素（GAS）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达情况，并探讨其与结直肠癌细胞凋亡指数（AT）和凋亡调控基因Fas／FasL、天冬半胱氨酸蛋白酶（easpases）的关系。方法采用巢式RT-PCR方法检测79例结直肠癌组织中GAS的mRNA表达．用TUNEL法检测细胞凋亡情况，结直肠癌组织中GAS、Fas／FasL、caspase-3、caspase-8的蛋白表达采用免疫组织化学SP法。结果结直肠癌组织中GASmRNA与其蛋白表达呈正相关（rGAS=0．99，P〈0．01）．高、中分化结直肠癌组织中GASmRNA及其蛋白的表达明显低于低分化者（χ^2，（高与低）=10．47、10．23，均P〈0．01；χ^2（中与低）=6．68、4．95，均P〈0．05）；GASmRNA及其蛋白在乳头状腺癌、管状腺癌的阳性表达率明显低于黏液印戒细胞癌及未分化癌（χ^2（乳与黏印）=4．80、6．22，χ^2（乳与未）=5．44、8．43，χ^2（管与黏印）=4．40、4．38．χ^2（管与未）=4．92、6．43，均P〈0．05）；DukesA、B期的GASmRNA及其蛋白阳性表达率明显低于C、D期（χ^2=4．84、4．45，均P〈0．05）。GAS高、中表达组的细胞AI明显低于低表达组，差异有统计学意义（q（高与低）=6．71，q（中与低）=4．60，均P〈0．01）；FasL阳性表达率在GAS低、中、高表达3组间相比。差异具统计学意义（χ^2=9．35，P〈0．011，其中FasL在GAS高、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组（χ^2（高与低）=6．24．χ^2（中与低）=4．74，均P〈0．05）：结论GAS对结直肠癌细胞凋亡的调控可能与Fas／FasL的表达失衡及其功能和信号系统的紊乱有关。GAS的检测可作为临床结直肠癌生物学行为的评估指标之一．     

微小RNA-618通过靶向羧基末端结合蛋白2抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨微小RNA(miR)-618及羧基末端结合蛋白2(CtBP2)对胰腺癌增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胰腺癌细胞中miR-618的表达;分别转染miR-618 inhibitor和mimics后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆集落形成及Tr...     

CDC25B在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨CDC25B在胰腺癌中的表达与胰腺癌发生、发展的关系。方法采用卵白素-生物素-辣根过氧化酶复合物（ABC）法检测88例胰腺癌组织，15例胰腺良性病变组织中CDC25B的表达情况，并分析CDC25B的表达与胰腺癌临床病理参数之间的关系。结果CDC25B在胰腺癌组织和胰腺良性病变组织中的阳性表达率分别为56．9％（50／88）和13．3％（2／15），两者差异有统计学意义（P〈0．01）。CDC25B的阳性表达与肿块的大小、远处转移及临床分期显著相关（P〈0．05或〈0．01），与患者性别、年龄、淋巴结转移及癌细胞分化程度无关（P〉0．05）。结论胰腺癌组织中CDC25B存在异常高表达，CDC25B的高表达可能与胰腺癌的发生、发展及转移有关。     

IFITM1在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的:干扰素诱导的跨膜蛋白1(IFITM1)是一种在淋巴细胞中转导同型黏附信号的膜复合物,在胰腺癌组织中表达量异常,但是其在胰腺癌中的作用机制则仍不清楚,因此,本研究初步探讨IFITM1的表达对胰腺癌细胞生物学行为的影响.方法:用Western blot法检测78例胰腺癌患者(32例转移,46例未转移)的癌组织和...     

分选蛋白17对胰腺癌细胞生物学性状的影响

目的:探讨分选蛋白(SNX)17通过激活表皮生长因子受体(EGFR)影响胰腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。方法:采集3例人胰腺癌组织及癌旁组织样本,自2021年1月至2021年3月收集于贵州医科大学附属医院肝胆外科,用免疫组织化学(IHC)染色检测癌组织与癌旁组织中SNX17的表达量。用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-...     

利用生物信息学综合分析lncRNA GAS5在三阴性乳腺癌中的功能作用

目的利用生物信息学管理对乳腺癌和癌旁组织进行长链非编码RNA-生长停滞特异基因5(lncRNA GAS5)差异表达分析,以探讨GAS5对三阴性乳腺癌发生发展的影响。方法用基因图谱计划(The Cancer Genome Atlas,TCGA)的乳腺癌数据分析各个乳腺癌亚型及病理分期中GAS5的表达情况。利用基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中三阴性乳腺癌数据GSE76124和GSE83937对GAS5进行相关性分析,选取相关性基因并取交集。利用所得到的正相关基因做GO功能和KEGG通路富集分析。用TCGA数据库和GEO76124数据进行GAS5的GSEA分析。选取GEO数据集GSE40525和GSE76250进行三阴性乳腺癌的差异miRNA和mRNA的筛选,通过预测,构建GAS5-miRNA-mRNA的ceRNA网络。结果GAS5在乳腺癌各亚型组织中表达均较癌旁组织低。GAS5主要参与多种代谢进程包括有机物代谢、大分子代谢、氮化合物代谢等,在通路方面主要影响真核生物中的核糖体生物发生,WNT信号通路等。通过构建GAS5在三阴性乳腺癌中ceRNA调控网络,发现GAS5最有可能通过吸附hsa-miR-650和has-miR-532-5p调控包括SLC7A2和LONRF2在内的25个基因的表达,发挥抑癌基因的作用。结论lncRNA GAS5可能在乳腺癌中起到抑癌基因的作用,可为乳腺癌的基因治疗提供新的治疗靶点。     

胰腺癌组织中Heparanase1的表达及其临床意义

目的：探讨胰腺癌组织中Heparanase1（Hpa1）表达与胰腺癌侵袭性及其临床病理之间的关系。方法：采用RT-PCR、免疫组织化学（SP法）检测37例胰腺癌组织中Hpa1表达,分析Hpa1的表达与胰腺癌侵袭性、临床病理等因素之间的相关性。结果：Hpa1在胰腺癌、癌旁组织中表达阳性率分别为64.9%（24/37）、56.8%（21/37）;原发性胰腺癌组织中Hpa1表达与胰腺癌TNM分期、累及神经和血管与否、包膜完整与否以及是否有淋巴转移有关（P〈0.05）,但与患者年龄、性别、组织学分化程度、肿瘤大小无关（P〉0.05）。结论：Hpa1与胰腺癌发生、发展密切相关,Hpa1表达与胰腺癌的侵袭性和局部浸润、临床分期、以及区域淋巴结转移呈正相关,胰腺癌组织中Hpa1过度表达可能促进胰腺癌浸润生长与转移,Hpa1有望成为抑制胰腺癌侵袭与转移能力的靶蛋白。