应用胃蛋白酶消化的牛腱胶原作为骨形态发生蛋白的缓释载体（动物实验）

胃蛋白酶消化牛腱胶原的提取纯化以及作为ＢＭＰ的载体复合后注射入小鼠肌肉。术后７天组织学检查可见异位成骨，并有新生血管，胶原部分吸收。２８天时软骨被吸收并被有红骨髓的正常骨组织替代，大部分胶原被吸收。未见排斥反应。钙含量测定显示成骨量大于单纯植入ＢＭＰ组。单纯注射胶原组未见成骨。实验结果表明牛腱胶原经胃蛋白酶消化等提取纯化处理后，抗原性很弱，对部分纯化的ＢＭＰ有助溶助悬作用，吸收快，利于成骨，是ＢＭＰ的一种良好缓释载体。该种胶原与ＢＭＰ的复合物具有较大临床价值。     

诱导性人工骨膜的研制及实验研究

目的　本研究研制了一种诱导性人工骨膜。方法　用猪真皮提取纯化胶原,盐析法制备胶原膜,并用此吸附ＢＭＰ,制备成胶原－ＢＭＰ人工骨膜。用大鼠桡骨３ｍｍ长骨缺损作为骨折模型。设空白、单纯胶原膜、胶原－ＢＭＰ膜包绕骨折段以及新鲜同种异体植骨共４组。术后０．５、１、２和３个月分批处死各组大鼠数只,处死前２天每只大鼠腹腔内注射钙黄绿素８０ｍｇ／ｋｇ。处死后分别行Ｘ线和软Ｘ线摄片,血清ＢＧＰ测定以及荧光显微镜观察。结果　胶原－ＢＭＰ人工骨膜组的上述多项检测指标均表明其成骨效能明显优于其他各组。结论　作者认为该组成骨效果优良的原因是由于胶原膜吸附了ＢＭＰ,同时具有骨诱导和骨引导的两种成骨作用,而仅胶原膜包绕骨折段的单纯骨引导效果并不理想。     

骨胶原的制备及作为骨形成蛋白载体修复骨缺损的研究

在提取ＢＭＰ的过程中，从废去的中间产物骨基质胶中同时提取胶原作为ＢＭＰ的载体用于修复兔颅骨缺损。４０只大白兔随机分为Ａ、Ｂ两组，在兔颅顶骨两侧对称各制造直径为１ｃｍ的圆形骨缺损，Ａ组兔颅顶骨缺损左侧植入骨胶原／ＢＭＰ，右侧植入单纯骨胶原。Ｂ超兔左侧植入ＢＭＰ，右侧空白对照，组织学检查显示：植入后７天，骨胶原／ＢＭＰ组即有软骨细胞岛出现，且在各期的成骨面积均大于单纯ＢＭＰ组和胶原组。另外，移植材料内     

四种可溶性载体对骨形态发生蛋白在小鼠体内诱导成骨活性的影响

以四种可溶性物质作为牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）的载体，通过实验观察哪种物质是ｂＢＭＰ的有效缓释载体。将聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）、葡聚糖、羟乙基淀粉（ＨＥＳ）、甘露醇分别与等量ｂＢＭＰ复合后，注射入小鼠股部肌肉，观察组织学成骨及测定标本内钙含量。结果，ｂＢＭＰ／ＰＶＰ有良好成骨，吸收较快，未见炎症及排斥反应，其混悬液较稳定，具有良好的适针性及可注射性，ｂＢＭＰ／甘露醇只有很低成骨率。其余各组未见成骨。ＰＶＰ对ｂＢＭＰ具有满意助溶、助悬及缓释载体作用，对ｂＢＭＰ活性无损害，生物相容性好。     

成纤维细胞生长因子增强骨形态发生蛋白在小鼠体内骨诱导作用

在啮类动物体内植入骨形态发生蛋白后，引起细胞内一系列生化和形态学变化，在植入物内和其周转形成新骨。这过程受多因素影响。本实验将重组人成纤维细胞生长因子与部分纯化的ＢＭＰ悬液混合后注入小鼠肌肉，观察成骨反应。单独注射牛骨ＢＭＰ组和ｂＦＧＦ组为对照。     

纯化天然骨唾液蛋白的体内成骨活性

目的 评价骨唾液蛋白（ｂｏｎｅ ｓｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＳＰ）在大 本内的成骨活性。方法 应用从牛骨中提取纯化的ＢＳＰ与经盐酸胍处理诱导活性的不溶性骨基质（ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｂｏｎｅ ｍｔｒｉｘ,ＩＢＭ）或提纯的１型胶原形成共价交联的复合物,将ＢＳＰ－ＩＢＭ复合物和ＢＳＰ－１型胶原复合物分别植入直径８ｍｍ的大鼠颅骨骨缺损和胸部皮下组织内。不含ＢＳＰ的ＩＢＭ或１型胶原也分别植入上述部位作为对照。     

珊瑚复合人工骨骨诱导活性的实验研究

目的弥补单纯珊瑚无骨诱导活性、骨修复能力弱等缺陷,为临床提供理想的骨移植替代材料。方法将珊瑚与胶原和重组人骨形成蛋白２（ｒｈＢＭＰ２）复合,制备珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨,将其植入大鼠背部肌肉陷窝,以珊瑚／胶原和珊瑚／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨植入作对照;取材后通过组织学方法和图像分析评价其骨诱导活性。结果珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２植入后１周,在局部诱导出软骨细胞分化和软骨基质形成;植入后４周,形成含骨髓的板层骨;诱导成骨的量有明显的ｒｈＢＭＰ２剂量依赖性（Ｐ＜０．０１）;而珊瑚／胶原和珊瑚／ｒｈＢＭＰ２植入区均无骨或软骨形成。结论珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨具有良好的异位诱导成骨活性,是一种较理想的骨移植替代材料。     

骨诱导性载体复合骨形态发生蛋白的双重成骨作用

本文用猪骨基质明胶（ｐＢＭＧ）复合猪骨形态发生蛋白（ｐＢＭＰ）植入小鼠肌肉内，以期达到ｐＢＭＧ和ｐＢＭＰ双重诱导成骨的叠加作用，并与单独植入的明胶海绵、ｐＢＭＧ、ｐＢＭＰ和无机骨－ｐＢＭＰ（ＡＯＢ－ｐＢＭＰ）的成骨效应相比较。结果显示，含有ｐＢＭＰ的各组术后４天有明显的间充质细胞化，新骨在１０天左右开始形成。ＡＬＰ的活性高峰出现在术后２１～２８天，组间钙、磷含量差异具有高度显著性（Ｐ＜０．０１），明胶海绵组最低，而ｐＢＭＧ－ｐＢＭＰ组含量最高。各组的钙、磷相关系数为高度正相关。作者讨论了ｐＢＭＧ复合ｐＢＭＰ后的双重成骨作用及其优越性，认为ＡＬＰ主要由诱导性新骨成熟期的成骨细胞和骨细胞所产生，新骨中的钙、磷含量因呈高度正相关，两者均可作为新骨定量的指标，但以钙含量为主。     

骨形态发生蛋白对体外培养胎儿关节软骨细胞胶原基因表达的影响及意义

为了解骨形态发生蛋白对关节软骨细胞的作用特点及意义，本研究用部分纯化的牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）对胎儿关节软骨细胞进行诱导，并用人Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的前胶原ｃＤＮＡ探针对被诱导关节软骨细胞进行原位杂交。结果发现，ｂＢＭＰ可明显增加被诱导软骨细胞中Ⅰ型胶原的表达，中断Ⅱ型胶原的表达，并轻度增加软骨细胞中Ⅲ型胶原的表达，但对Ⅳ型胶原的表达影响不大。本研究认为，ｂＢＭＰ诱导的软骨细胞胶原基因表达的这种改变是软骨细胞在向成骨细胞样细胞方向分化的标志。     

复合骨形态发生蛋白胎儿骨修复长骨缺损的实验研究

寻找满意的骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的载体一直是应用ＢＭＰ修复骨缺损研究中的一个重要课题，为探讨胎儿骨（ＦＢ）能否成为ＢＭＰ载体，制备了复合ＢＭＰ胎儿骨（ＢＭＰ／ＦＢ），将其植入兔桡骨中段１５ｍｍ人工缺损处，以单纯ＦＢ植入、异体骨（ＡＬＢ）植入、空白作为对照，通过Ｘ线摄片，光镜观察，电子探针钙磷元素测定等方法了解各组骨缺损修复速度和愈合程度。结果发现ＢＭＰ／ＦＢ植入侧４周时骨缺损处有大量间充质细胞聚集，８周形成骨小梁，ＦＢ基本被吸收，１２周出现部分板层骨，钙磷值达到正常桡骨皮质骨水平，１６周骨细胞成熟，髓腔再通，外观塑形较好，在不同时间点骨缺损修复程度，ＢＭＰ／ＦＢ组明显优于ＦＢ组，ＦＢ组优于ＡＬＢ组，空白组骨缺损则被纤维组织，脂肪组织等填充。实验证明ＦＢ是一种良好的ＢＭＰ载体。     

骨形态发生蛋白对体外培养胎儿关节软骨细胞胶原基因表达…

为了解骨形态发生蛋白对关节软骨细胞的作用特点及意义，本研究用部分纯化的牛骨形态发生蛋白对胎儿关节软骨细胞进行诱导，并用人Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的前胶原ｃＤＮＡ探针对被诱导关节软骨细胞进行原位杂交。结果发现，ｂＢＭＰ可明显增加被诱导软骨细胞中Ⅰ型胶原的表达，中断Ⅱ型胶原的表达，并轻度增加软骨细胞中Ⅲ型胶原的表达，但对Ⅳ型胶原的表达影响不大。本研究认为，ｂＢＭＰ诱导的软骨细胞胶原基因表达的这种改变是软骨     

骨缺损中内源性BMP的分布及其作用

了解内源性ＢＭＰ的浓度及分布，对提高ＢＭＰ在骨再生中的作用有帮助。本实验在兔桡骨１０ｍｍ骨缺损模型上，利用ＢＭＰ免疫组化技术及真彩色计算机定量分析系统观察了内源性ＢＭＰ在骨缺损中的分布及对骨再生的作用。术后３日，骨端可见“空穴”，骨缺损间血肿ＢＭＰ染色阳性。来自骨内外膜的间质细胞，成软骨细胞。成骨细胞ＢＭＰ阳性。ＢＭＰ分布定量研究表明，骨缺损区存在ＢＭＰ浓度梯度，即距骨端愈远ＢＭＰ量渐渐下降。术后１周，ＢＭＰ值最大。提示内源性ＢＭＰ有骨端坏死，吸收及间质细胞分泌两种来源。据此，作者提出了内源性ＢＭＰ有效量的概念。提高内源性ＢＭＰ浓度，改善其分布，将是骨缺损治疗的有效途径。     

重组人骨形态发生蛋白－2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作者采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ—２（ｒｈＢＭＰ—２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ—２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬质骨的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形态学观察表明，诱导成骨过程符合典型的软骨内成骨的时相。另在大鼠颅骨大面积缺损模型中观察到，在颅骨缺损区植人ｒｈＢＭＰ—２三个月后，缺损区内有从周边向中央生长的新骨生成，实验组缺损区的面积明显小于对照组，并且颅骨的厚度也显著增加。家兔股骨骨膜下植入试验发现，ｒｈＢＭＰ—２植入后２１天，植入区股骨的骨皮质增厚，并有沿骨干延伸的骨痂组织的产生。以上结果证明，大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ—２有较强的跨种诱导成骨活性和骨损伤修复作用，具有较好的临床应用前景。     

骨形态蛋白与骨基质明胶复合修复骨缺损的实验研究

通过骨形态蛋白（ＢＭＰ）与其前身物质骨基质明胶（ＢＭＧ）复合，修复家兔桡骨缺损，同时以ＢＭＰ与羟基磷灰石（ＨＡ）复合作实验对照。结果发现：ＢＭＰ／ＢＭＧ组第４周即在骨缺损区出现纤维性骨痂，第８周可见大量的骨小梁形成，第１２周ＢＭＰ完全被吸收，为新生的骨组织所代替，第１６周出现髓腔再通现象。而ＢＭＰ／ＨＡ复合组，虽然在第４、８周也有纤维性骨痂形成，但ＨＡ不被吸收；第１２、１６周与第８周相似，无髓腔再     

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2诱导成骨的调节机理

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组,分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材,观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,成骨量优于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,而单纯牛松质骨载体组在２１ｄ仅出现了少量增殖的间充质细胞。结论：ｒｈＢＭＰ－２和ｂＦＧＦ在诱导成骨调节中存在着协同作用。     

人体内羟基磷灰石配合自体红骨髓移植的光镜和扫描电镜观察

为了解羟基磷灰石（ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ，ＨＡＰ）植入人体内的生物学行为、组织学变化以及成骨情况，对一例患胫骨纤维异样增殖症接受自体红骨髓（ｂｏｎｅ－ｍａｒｒｏｗ，ＢＭ）与ＨＡＰ复合移植的患儿，在术后１年取组织，进行了光镜及扫描电镜观察，发现：ＨＡＰ－ＢＭ周围组织未见明显炎性反应、坏死和腐蚀，ＨＡＰ基本被新生的骨组织替化，并与周围的骨组织紧密结合。结果表明，在人体内ＨＡＰ同样具有良好的生物相容性，ＨＡＰ－ＢＭ移植既能为成骨提供成骨细胞和诱骨物质，又能为骨生长提供支架，是一种良好的骨替代材料     

骨形态发生蛋白复合纤维蛋白载体修复骨缺损的实验研究

目的：探讨以纤维蛋白作为骨形态发生蛋白的载本修复节段性骨缺损。材料和方法：于３６只新西兰白兔两侧桡骨干处造成１．５ｃｍ缺损，采用四种方法进行处理：Ａ组，植入２５ｍｇ ＢＭＰ与人纤维蛋白制成的复合物；Ｂ组，植入单纯２５ｍｇＢＭＰ：Ｃ组，植入单纯纤维蛋白；Ｄ组，留作空白对照，术后不同时间进行放射学，组织学和放射性核素显像检查。结果：Ａ组骨缺损区在成骨活跃程度，骨再生量和再生髓腔结构等方面均显著优于Ｂ组     

重组人骨形态发生蛋白—2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作用采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ－２（ｒｈＢＭＰ－２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ－２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬有的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形     

BMP／DBM修复关节软骨缺损的实验研究

作者旨在对骨形态生成蛋白／脱钙骨基质（ＢＭＰ／ＤＢＭ）复合体在关节软骨缺损修复中的作用进行探讨。在１６只雄性兔双侧股骨髁间凹各做一直径４ｍｍ，深２．５ｍｍ的全层关节软骨缺损。１６个右膝缺损区植入ＢＭＰ／ＤＢＭ，８个左膝缺损内单独植入ＤＢＭ，另外８个左膝为空白。术后１２周处死动物，取材，石蜡包埋，连续切片，做苏木素一伊红，甲苯胺蓝及ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色。结果显示，在ＢＭＰ／ＤＢＭ组，植入物完全被吸收并被新生软骨替代，１４例（１４／１６）愈合，且１２例ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ阳染，新生软骨厚度和特征与邻近正常软骨相似。ＤＢＭ组只有２例（２／８）愈合，ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色全部阴性。空白组未见新生软骨。结果说明，ＢＭＰ／ＤＢＭ能在关节腔内诱导软骨再生，并能以透明软骨修复全层关节软骨缺损。     

可降解多孔β—TCP／rhBMP—2人工骨的骨诱导活性研究

目的：检测可降解多孔β－ＴＣＰ／ｒｈＢＭＰ－２人工骨的诱导成骨能力。方法：自制要降解多孔β－ＴＣＰ与ｒｈＢＭＰ－２复合后植入４５只小鼠股后肌袋作为实验组，单纯β－ＴＣＰ植入对侧作对照，术后２４，７２小时，１，２，４，８周分别取材做组织学检查，２，４周取材的部分标本做扫描电镜观察：１，２，４周取材的部分标本做碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性测定。结果：实验组有大量新生软骨和骨形成，随着时间的推移，生成量逐渐