雄激素受体AR表达在前列腺癌诊断中的意义

目的:以实时荧光定量RTPCR技术研究BPH与Pca组织标本中AR(Androgenreceptor)的表达,探讨AR在前列腺癌特异性诊断的意义。方法:用免疫组化和RTPCR技术对23例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织AR的表达检测,比较其在3种组织定量的差异。结果:BPH与PCa组织AR的定量表达值分别为(3.85±0.72)与(1.58±0.22),差异有显著性(P<0.05)。结论:实时荧光RTPCR定量检测AR为前列腺癌的诊断、治疗、预后监测等提供了更为可靠的辅助指标。     

结直肠癌组织中GITRL mRNA表达水平的检测及其临床意义

目的:建立检测人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(human glucocorticoid induced tumor necrosis factor receptor ligand,hGITRL)mRNA的实时荧光PCR方法,探讨hGITRL表达与结直肠癌发生发展的关系.方法:构建含hGITRL基因片段的标准质粒...     

Toll样受体4、9mRNA在带状疱疹患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的研究带状疱疹患者外周血单个核细胞中Toll样受体TLR4、TLR9mRNA的表达情况,并探讨其与带状疱疹的发病关系。方法采用实时荧光定量PCR方法检测30例带状疱疹患者和20例正常人的外周血单一核细胞中Toll受体TLR4、TLR9mRNA的表达水平。结果带状疱疹患者与正常人对照,其外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,具有显著的统计学差异（P〈0.05）。结论带状疱疹患者外周血单一核细胞中TLR4、TLR9mRNA的表达水平均明显升高,说明在带状疱疹患者的发病过程中,TLR样受体4、9可能参与了水痘-带状疱疹病毒的识别及抗病毒免疫。     

胰腺癌组织生长抑素受体mRNA的表达及意义

目的研究人体胰腺癌组织生长抑素受体mRNA的表达。方法应用逆转录PCR(RT-PCR)检测30例胰腺癌组织和12例正常胰腺组织生长抑素受体亚型mRNA的表达。结果(1)胰腺癌生长抑素受体5种亚型SSTR1~5mRNA表达依次为2.29±0.87,3.72±1.42,1.91±0.92,1.80±0.98,2.25±0.92,其中SSTR2mRNA表达明显高于其他亚型(P<0.01)。(2)正常胰腺组织SSTR1~5mRNA表达依次为1.37±0.74,1.38±0.98,1.26±0.79,1.21±0.42,1.33±0.92,各亚型mRNA表达比较无显著性差异(P>0.05)。(3)胰腺癌SSTR1.2.5mRNA表达明显高于正常胰腺组织的相应亚型(P<0.01),SSTR3mRNA表达也明显高于正常胰腺组织(P<0.05)。结论胰腺癌组织SSTR1.2.3.5mRNA表达水平明显高于正常胰腺组织,并且胰腺癌以SSTR2mRNA表达最为显著。     

人肝癌组织中APRIL及其受体mRNA水平的定量测定

[摘要]目的：采用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ—PCR）技术分析肝癌组织中增殖诱导配体（APRIL）及其受体mRNA的表达水平。方法：在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针，实时检测PCR产物的荧光强度。根据标准品建立的标准曲线。由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量，并以靶基因和内参B2MmRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。     

实时荧光定量PCR检测胎膜早破胎膜组织中MMP-9 mRNA表达

目的：通过实时突光定量PCR检测胎膜早破胎膜组织中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase, MMP-9） mRNA 的表达,探讨MMP-9在胎膜早破中的作用。方法：利用实时荧光定量PCR方法测定胎膜早破组35例（足月胎膜早破25例, 足月前胎膜早破10例）和未胎膜早破组25例胎膜组织中MMP-9 mRNA的表达水平。结果：（1）两组胎膜组织中均表达MM-mRNA。（2）胎膜早破组胎膜组织中MMP-9 mRNA明显高于未胎膜早破组（P〈0. 01）,足月胎膜早破和足月前胎膜早破 两组间比较差异无统计学意义（P 〉0.05）。结论：胎膜早破患者胎膜组织中MMP-9 mRNA表达水平高于未胎膜早破组,提 示MMP-9可能参与了胎膜早破的发生。     

实时定量PCR检测口腔组织中CD44 mRNA的表达

目的：研究细胞黏附分子CD44mRNA在口腔组织中的表达情况,探讨CD44与口腔鳞癌之间的关系.方法：应用实时定量PCR（real-time PCR,RT-PCR）检测17例正常口腔组织及14例口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达情况.结果：CD44 mRNA在口腔鳞癌组织中的表达显著低于正常口腔组织中的表达（P=0.038）;与正常口腔组织中CD44mRNA的表达水平相比较,其中有12例（86％）口腔鳞癌组织表达下调,2例（14％）口腔鳞癌组织表达上调.结论：口腔鳞癌组织中CD44mRNA的表达显著低于正常口腔组织中的表达,因此CD44的表达量可能与口腔鳞癌的发病及转移有关.     

人原发性肝细胞癌细胞和组织中SOX2mRNA的表达

原发性肝细胞癌( hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见的恶性肿瘤之一，发病率位居恶性肿瘤第5位，缺乏有效的治疗措施且易复发[1]。我国年死于HCC的人数占全世界HCC年死亡总数的55％[2]。HCC的发生和发展是一个多因素、多阶段累积的复杂过程，例如病毒的感染、基因的异常表达等，但具体的分子作用机制尚未明确。研究[1]发现，经典Wnt信号通路在HCC中被异常激活。     

实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立

目的:建立一种用SYBR GreenⅠ实时定量逆转录(SYBR GreenⅠQ-RT-PCR)检测大鼠脑组织中神经生长因子(NGF)mRNA基因表达的方法。方法:以Trizol一步法提取大鼠脑组织总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录产生cDNA,利用SYBRGreenⅠ荧光染料法实时检测NGF mRNA的表达水平。通过熔解曲线分析NGF mRNA检测的特异性,以管家基因β-actin为内参照对NGF进行定量分析。结果:建立的大鼠NGF mRNA SYBR GreenⅠ实时检测方法具有良好的特异性和敏感性。结论:成功建立实时RT-PCR检测NGF mRNA基因表达的方法。     

肺癌组织中Atrogin-1 mRNA的表达及患者生存分析

目的:检测人肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,了解对肺癌患者术后生存情况及其影响因素.方法:运用实时定量PCR技术测定60例肺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,采用Kaplan-Meier单因素与Cox多元回归进行生存分析.结果:肺癌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平(-8.15±3.94)显著高于其配对的癌旁组织(-10.39±4.35)(t=3.873,P =0.000),其中71.67%(43/60)患者Atrogin-1 mRNA高表达,28.33%(17/60)患者低表达.Kaplan-Meier法生存分析结果显示:Atrogin-1的表达水平、淋巴结转移、家族史、病理分级与患者的生存率显著相关.Cox回归分析结果显示:Atrogin-1 mRNA表达水平、淋巴结转移、病理分级和吸烟是影响肺癌患者生存率的独立危险因素.结论:肺癌组织中Atrogin-1 的高表达可能影响肺癌患者术后的生存,其可作为肺癌患者预后的一个评价指标,并可能成为基因治疗的一个作用靶点.＃     

急性心肌梗死后延迟冠状动脉内支架植入治疗对左室结构和功能的影响

目的:评价急性心肌梗死(AM I)后延迟冠状动脉内支架植入治疗对左室结构和功能的影响。方法:选择60例急性前壁、前间壁及广泛前壁ST段抬高的AM I后病情稳定,发病后7~14d,(平均10.2±2.5d),冠状动脉造影证实左前降支完全闭塞者,依据是否成功行冠状动脉内支架植入治疗,分为成功支架植入组和对照组,分别于术前(心肌梗死后平均9.0±2.5d)和术后2个月,术后6个月应用超声心动图测量左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末容量指数(LVEDV I)、左心室收缩末期容量指数(LVESV I)和异常室壁运动积分指数(VWMA积分)。结果:AM I后2个月两组LVEF、LVEDV I、LVESV I、VWMA积分与术前比较无显著差异(P>0.05)。6个月时两组LVEF和VWMA积分与术前和术后2个月相比无显著差异(P>0.05)。但对照组LVEDV I,LVESV I与术前比较差异有显著性(P<0.01,P<0.05),且与成功植入支架组相比差异显著(P<0.01,P<0.05)。结论:急性前壁AM I后延迟冠状动脉内支架植入治疗能明显减少AM I后晚期的左心室重构,而对AM I后早期左心室重构的影响不大。     

心肌缺血预适应对急性心肌梗塞的影响

分析急性前壁或前壁合并下壁，高侧壁心肌梗塞１０５例病人缺血预适应对心肌梗塞的影响。心肌梗塞前有预缺血者６１例，无预缺血者４４例。结果显示：Ｂ组患者心肌酶峰值，梗塞面积及左室功能，病死率明显高于Ａ组，差别均有显著性，提示心肌梗塞前缺血对心肌具有一定的保护作用。     

心肌梗塞后心肌重塑与PDGF-B蛋白表达的相关性

目的：探讨心肌重塑与血小板源性生长因子（PDGF－B）蛋白表达的相关性。方法：建立Wistar大鼠心肌梗死后心肌重塑模型,用免疫组化和图像分析方法研究I型,Ⅲ型胶原含量和PDGF－B表达的变化。结果：心肌I型、Ⅲ型胶原含量和PDGF－B表达均增加,分别与假手术组比较均具有非常显著性差异（P＜0．01）。I型、Ⅲ型胶原含量与PDGF－β表达量正相关（P＜0．01）。结论：心肌梗死后心肌重塑的机制可能是各种致病因素最终通过调节成纤维细胞PDFG－B表达实现的。     

超声心动图追踪观察心肌梗死后左心室血栓演变1例报告

1.1一般资料患者,女,74岁,因“反复胸闷、胸痛2年,加重1周”于2007年9月7日入院。查体：神志清楚,血压110/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),心率78次/min,律齐,无异常杂音。心电图示窦性心律,急性广泛前壁及下壁心肌梗死。急诊冠状动脉造影显示左前降支开口处狭窄75%,左回旋支近段狭窄90%,右冠状动脉开口处狭窄90%。完善相关准备后,于左回旋支近段病变处放置药物洗脱支架1枚,术后给予低分子肝素5 000单位(每天2次,10 d),以及阿司匹林、氯吡格雷等药物治疗。     

MSCSHH心肌移植对大鼠心肌梗死后血管新生的作用机制研究

目的 探讨Sonic hedgehog（SHH）基因转染骨髓间充质干细胞并移植大鼠心梗区后,血管新生的变化及作用机制.方法 以结扎法制作大鼠急性心肌梗死模型,并按随机数字表法分为5组（每组40只）.分别在梗死周边部位移植BMMSCSHH（转染组）、等量的BMMSC（细胞组）、BMMSC和pcDNA3.1-Shh DNA的混合物（混合组）、单纯pcDNA3.1-Shh DNA质粒（基因组）、等容积的低糖DMEM培养基（对照组）.移植后第1、2、4、8周每组分别取10只为标本,qPCR检测移植后各组间移植部位Ptc1、Gli-2、COUP-TFⅡ等SHH信号传导通路下游基因以及血管内皮生长因子（VEGF）、Ang-1促血管再生因子的表达差异.结果 移植后第7天,转染组移植部位SHH下游基因Ptc1、Gli-2、COUP-TFⅡ表达分别较对照组、细胞组、基因组、混合组上调（Ptc1：P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05; COUP-TF Ⅱ：P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05;Gli-2：P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05）;转染组VEGF、Ang-1等促血管再生因子分别较对照组、细胞组、基因组表达上调（VEGF：P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05;Ang-1：P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05）,而与混合组比较差异无统计学意义,但有表达上升的趋势（VEGF：P＝0.147,Ang-1：P＝0.15）.而在后续第2、4、8周检测上述因子表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 转染SHH基因后的骨髓间充质干细胞移植大鼠心梗区后通过上调其下游基因表达促进血管新生,其作用随时间的推移逐渐减弱.     

卡维地洛防治兔心肌梗死后心肌氧化应激损伤的实验研究

目的:观察卡维地洛的抗氧化应激作用及对心肌梗死后心脏的保护机制?方法:兔22只随机分为4组:对照组(5只)?未干预心梗组(5只)?维生素E组(6只)?卡维地洛组(6只)?除对照组外,余均行冠脉结扎术,建立心肌梗死动物模型?后两组分别给以卡维地洛或维生素E行干预性治疗,60～70 d后,测其血流动力学和氧化应激状态指标:左室舒张末期压力(LVEDP)?左室收缩期峰压(LVPSP)?动脉收缩压(ASP)和动脉舒张压(ADP)?血浆中的脂质过氧化物丙二醛(MDA)?超氧化物歧化酶(SOD)?谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及心钠素(ANP)的水平?结果:①未干预心梗组与对照组及药物干预的两组相比,氧自由基堆积,表现为前者血浆中MDA升高,而SOD?GSH-PX明显下降(P<0.05)?对照组与卡维地洛组?维生素E组相比,氧化应激状态各指标差异无统计学意义(P>0.05)?②各组心功能表现为对照组?卡维地洛组心功能明显好于未干预心梗组,未干预心梗组血浆ANP水平明显高于其他三组,ASP明显低于其他3组(P<0.05);未干预心梗组LVEDP高于对照组(P<0.05),LVPSP低于对照组和卡维地洛组(P<0.05)?结论:卡维地洛具有氧自由基清除活性,可阻断心肌梗死后的氧化应激状态,对心肌梗死后的心脏发挥保护作用?     

硝酸甘油介入心肌核素显像检测存活心肌的意义

目的探讨急性心肌梗死(AMI)与陈旧性心肌梗死(OMI)心肌存活状态的差异。方法应用SPECT对63例Q波MI患者行常规99mTc-MIBI心肌显像(静息显像),隔日舌下含服NTG(1.0mg)后5分钟静注99mTc-MIBI,再行心肌显像(介入显像),其中4例患者行冠脉搭桥术(CABG),3例于CABG术后3月再行心肌显像。结果静息显像中239个节段灌注异常,NTG介入后有97个节段得到不同程度的改善,改善率为40.59%,静息显像平均得分为9.65±4.31,介入显像平均得分为7.75±4.66,两者比较差别有统计学意义(P<0.001)。3例CABG术前检测有改善的6个节段,术后均得到不同程度的改善。AMI组与OMI组1月-6月组,6月-3年组相比较,存活心肌的检出率分别为43.10%,42.80%,35.15%,虽呈逐渐下降,但无统计学意义(P>0.05)。结论NTG介入99mTc-MIBI心肌显像可明显提高存活心肌的检出率,且该方法简便易行,安全可靠。OMI患者亦有存活心肌,也可从血运重建中获益。     

氟伐他汀抗氧化改善心肌梗死大鼠心室重塑

目的:探讨氟伐他汀长期应用对SD大鼠心肌梗死(AMI)心室重塑过程的影响及其机制.方法:结扎雄性大鼠左冠状动脉前降支,复制心肌梗死模型,将大鼠分为2组,AMI组(n=7)以蒸馏水灌胃,氟伐他汀组(n=8)以氟伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃;另设假手术2组,分别以蒸馏水和氟伐他汀灌胃.8周后心脏超声、血液动力学、心脏形态学分析;检测血浆总胆固醇(Tch)、一氧化氮(NO)、脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和心肌LPO水平;激光共聚焦显微镜检测超氧阴离子和NO的分布;RT-PCR、免疫组化检测诱导型一氧化氮合酶(NOS2)、p22phox的mRNA和蛋白水平表达.结果:与AMI组比较,氟伐他汀组左室舒张末压降低[(18.24±6.58 vs 10.74±4.71)mmHg,P<0.05]、右室相对重量减轻[(0.92±0.19 vs 0.71±0.13)g/kg,P<0.05]、左室后壁厚度减少[(3.04±0.28 vs 2.60±0.36)mm,P<0.05];AMI后射血分数无影响,但肺相对重量减轻[(5.79±2.92 vs 3.69±0.68)g/kg,P<0.05];血浆和心肌LPO水平降低[(8.64±0.59 vs 7.71±0.66)μmol/L,P<0.05;(3.12±0.38 vs 1.93±0.40)ng/μg.pro,P<0.01],NO的过度表达抑制和GPx水平增加[(436.87±47.22 vs 313.78±34.35)mg/dl,P<0.01;(66.13±8.31 vs 79.78±2.38)mg/dl,P<0.05].氟伐他汀干预后增加NOS2、p22phox mRNA和蛋白水平的表达均下降(P<0.01).血浆总胆固醇水平减低,但无显著性差异[(59.40±14.15 vs 48.30±8.83) mg/dl,P>0.05].结论:氟伐他汀参与了改善大鼠心肌梗死后心室重塑过程,其中可能包括抗氧化机制.     

急性心肌梗死患者心率变异性的变化

目的：研究急性心肌梗死（AMI）患者心率变异性（HRV）的变化及溶栓治疗对其影响。方法：测定AMI组58例和健康对照组30例HRV时域6项指标，并作对比分析。结果：AMI组平均R－R间期的标准差（SDNN）、平均R－R间期标准差均值（SD）、平均R－R间期标准差的标准差（SDSD）、相邻R－R间期差值均方根（rMSSD）低于对照组，AMI溶栓治疗后再通组其SD，SDSD，SDNN高于溶栓未通组。结论：AMI患者HRV降低，溶栓治疗可提高HRV，从而减少致命性心率失学的发生，改善患者预后。     

骨桥蛋白通过促血管新生调节心肌梗死后左室重构

目的 观察骨桥蛋白(OPN)转基因小鼠(OPN^-/-)心肌梗死后心肌血管新生能力及其与左室重构的关系。方法 采用OPN^-/-小鼠体外心肌内皮细胞管结构形成、体内心肌Matrigel植入及心肌梗死3种模型,以野生型小鼠(WT)作为对照。结果 体外培养的OPN^-/-小鼠心肌血管内皮细胞在Matrigel的管结构生成显著减弱,可溶性OPN能明显改善OPN^-/-内皮细胞的管结构生成能力。在OPN^-/-小鼠心肌Matrigel植入模型,毛细血管样结构生成的体积明显降低。OPN^-/-小鼠心肌梗死后7和14d,梗死区毛细血管密度和小动脉密度均明显降低。且在梗死后7～14d,OPN^-/-小鼠小动脉的去血管化速率显著加快。OPN^-/-小鼠心肌梗死后,左室扩大及梗死区室壁变薄均较对照组显著。结论 OPN的促血管新生机制在心肌梗死后左室重构的调节中起重要作用。