芦荟多糖调控Th17/Treg细胞平衡缓解肠炎的实验研究

目的探讨芦荟提取液芦荟多糖是否通过调节辅助性T细胞（Th17）与调节性T细胞（Treg）免疫失衡,缓解2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-TNBS）诱导的肠炎。 方法用完全随机数字法将30只SD大鼠分成正常组（PBS液灌肠）、芦荟多糖治疗组（TNBS-乙醇液灌肠+肛门注入芦荟多糖）及模型组（TNBS-乙醇液灌肠）,每组10只。记录大鼠体质量变化、疾病活动指数（DAI）。取结肠组织进行宏、微观损伤评分及病理学检查;检测结肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性以及细胞因子转化生长因子（TGF-β）、白细胞介素（IL）-10、IL-17A、IL-6 mRNA的表达,转录因子RORγt、Foxp3⁺及信号转导和转录激活因子（STAT）3、5蛋白表达;检测血浆中细胞因子IL-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、肿瘤坏死因子α刺激基因6（TSG-6）的表达。 结果与模型组比较,芦荟多糖治疗组的DAI、MPO、组织病理学评分及血浆细胞因子IL-1β、TNF-α的蛋白表达显著降低,血浆TSG-6浓度增加。芦荟多糖抑制了结肠组织中促炎细胞因子IL-17A、IL-6 mRNA表达,以及转录因子RORγt活化及STAT3磷酸化,促进了抑炎细胞因子IL-10、TGF-βmRNA表达,以及Foxp3⁺表达及STAT5磷酸化。 结论芦荟多糖可以通过纠正Th17/Treg细胞失衡,缓解TNBS诱导的实验性肠炎。     

重组人促红细胞生成素和甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠TNF-α表达影响的对比研究

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对急性脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织中促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响,并与甲基强的松龙(MP)进行比较.方法 用改良Allen撞击法制作成年Wistar大鼠SCI模型,随机分为rhEPO组(腹腔注射rhEPO)、MP组(腹腔注射MP)和SCI组(腹腔注射生理盐水对照组).免疫组织化学染色及图像定量分析实验鼠处死后1h、12h、24 h、72 h TNF-α阳性细胞光密度值.结果 rhEPO组、MP组与对照组相比,TNF-α表达明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05);rhEPO组与MP组相比,TNF-α表达无统计学差异(P＞0.05).结论 rhEPO可降低急性SCI大鼠促炎因子TNF-α表达,其效果与MP相当.     

白细胞介素-10通过降低脂多糖诱导大鼠急性肺损伤高迁移率组蛋白1释放产生保护作用

目的 旨在研究白细胞介素（interleukin,IL）-10对高迁移率组蛋白l（high mobility group protein 1,HMGB1）释放的影响及其肺保护作用,进而探讨IL-10在治疗急性肺损伤中的可能机制. 方法 采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致大鼠脓毒症急性肺损伤模型,健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180 g～220 g,采用随机数字表法,随机分为对照组即磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）组（P组,6只）、急性肺损伤组即LPS组（L组,30只）、PBS＋IL-10组（PI组,6只）、LPS＋IL-10组（LI组,30只）.P组和PI组腹腔注射等体积PBS的同时分别经由气道滴注5 ml的PBS和IL-10,L组和LI组腹腔注射LPS的同时分别经由气道滴注等体积的PBS和IL-10.L组和LI组注射LPS后的4、8、16、24 h和48 h分别检测各组大鼠肺湿/干重比（wet/dry weight ratio,W/D）和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总蛋白浓度,酶联免疫吸附实验法检测BALF中炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-6水平,苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察肺组织的病理变化,Western Blot分析肺组织中HMGB1表达水平. 结果 腹腔注射LPS后,L组大鼠肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.68±0.12） mg/L和（254±105） mg/L,与P组比较,分别增加了12％和297％（P＜0.05）,BALF中TNF-α和IL-6水平明显增加（P＜0.05）,HE染色显示在注射LPS后4h肺组织的细胞浸润达到峰值随后减少,肺组织中HMGB1水平升高（P＜0.05）;使用IL-10后,LI组肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.28±0.14） mg/L和（109±48） mg/L,与L组比较,分别降低了7％和57％ （P＜0.05）,BALF中炎性因子水平降低（P＜0.05）,肺组织细胞浸润改善,HMGB1表达下调（P＜0.05）. 结论 IL-10对急性肺损伤具有保护作用,其机制可能为降低BALF中炎性因子的水平,下调晚期炎症介质HMGB1的表达,从而改善肺组织的细胞?     

LPS耐受巨噬细胞致炎和抗炎细胞因子表达和分泌的特点

目的：分析巨噬细胞LPS耐受形成过程中致炎和抗炎细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-10）释放的特点和规律,探讨其在巨噬细胞建立LPS耐受机制中的作用.方法：培养小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7 细胞.实验分为两部分：①LPS刺激细胞不同时间（4 h,8 h,20 h）或用PBS培养细胞4 h;②LPS耐受实验（LPS预刺激巨噬细胞20 h后,换液并洗去LPS,再次加入LPS刺激4 h）.ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-6和IL-10的浓度,RT-PCR法相对定量分析巨噬细胞TNF-α和IL-10 mRNA 表达水平.结果：细胞培养上清中TNF-α、IL-6和IL-10的浓度随着LPS刺激时间的延长而增加;LPS刺激20 h后建立耐受的巨噬细胞再次受到LPS打击时,其TNF-α释放量低于非耐受细胞,而IL-6和IL-10释放量则大幅增加,与TNF-α释放减少截然相反.TNF-α和IL-10mRNA 表达水平与其蛋白分泌量呈现相似的变化规律.结论：巨噬细胞对LPS的耐受建立在致炎因子和抗炎因子共同作用的基础上;LPS预刺激细胞再次受到LPS打击时,抑炎因子表达和分泌大幅增加是介导巨噬细胞对LPS耐受的重要机制.     

硫喷妥钠对内毒素诱导小鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的研究硫喷妥钠对内毒素（LPS）诱导小鼠肺组织NF-κB的表达的影响。方法雄性昆明小鼠24只，随机分为4组（n=6）：对照组（C组）、LPS组（L组）、硫喷妥钠处理组（L＋T组）、单纯硫喷妥钠处理组（T组）。C组腹腔注射生理盐水1ml／ks；L组腹腔注射LPS5mg／kg；L＋T组腹腔注射LPS5mg／kg 20min时再注射1％硫喷妥钠注射液60mg/kg；T组单纯腹腔注射1％硫喷妥钠注射液60mg／kg。在注射LPS后3h放血处死小鼠，立即开胸取肺。免疫蛋白印迹法测定肺组织NF-κB p65的表达；酶联免疫吸附法测定肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量。结果与C组相比，L、L＋T组肺组织NF-κB p65表达增加，L、L＋T、T组肺组织，TNF-α、IL-1β含量上升（P〈0．05）；与L组相比，L＋T、T组肺组织NF-κB p65表达降低，肺组织TNF-α，IL-1β含量降低（P〈0．05）。结论硫喷妥钠通过下调小鼠LPS诱导的肺组织NF．KB065表达，降低了TNF-α及IL-1β的释放。     

MyD88在重症急性胰腺炎胰腺组织中表达及意义的实验研究

目的探讨髓样细胞分化蛋白88（MyD88）在重症急性胰腺炎（SAP）发病机理的作用。方法将48只小鼠按随机数字表法随机分为SAP组（32只）与正常对照组（16只）;再将2组小鼠随机（随机数字表法）分为6、12、24及48h组,SAP组各亚组每组8只,正常对照组每亚组4只。SAP组小鼠腹腔注射20％L．精氨酸以诱导SAP模型,正常对照组小鼠仅腹腔注射生理盐水。分别于建模术后6、12、24及48h处死小鼠,取其动脉血,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素-1β（IL-1p）、白细胞介素-10（IL-10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-d）浓度;同时取其胰腺组织（正常对照组仅术后6h取材）,用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测胰腺组织中MyD88mRNA和核因子-κB（NF—KB）mRNA的表达水平,并进行HE染色。结果镜下见SAP组小鼠的胰腺组织随时间进展其炎症逐渐加重。各时点SAP组小鼠的IL-1D、IL-10及TNF-α浓度均高于正常对照组（P〈0．05）;各时点SAP组与正常对照组（6h组）相比较,其胰腺组织中MyD88mRNA及NF-rBmRNA的表达水平均较高（P〈0．05）。各时点SAP组小鼠MyD88mRNA的表达水平与血清IL-1B、IL-10及TNF-α的浓度和NF-KBmRNA的表达水平均呈正相关（P〈0．01）。结论MyD88的表达对SAP的发生和发展可能均具有重要的作用。     

美沙拉秦灌肠液联合双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床研究

目的：探讨美沙拉秦灌肠液联合双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊治疗溃疡性结肠炎（UC）的临床疗效,以及对炎性因子的影响。方法：将2019年5月至2021年1月我院收治的70例UC患者随机分为2组,各35例,一组予以美沙拉秦灌肠液灌肠治疗（对照组）,另一组予以美沙拉秦灌肠液灌肠和双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊口服治疗（观察组）,连续治疗2个月。比较2组临床总体疗效及白细胞介素（IL）-6、IL-10和TNF-α水平。结果：观察组治疗总有效率（94.29%）明显高于对照组（71.43%）,P <0.05。与治疗前相比,2组治疗后IL-6和TNF?α水平均降低,IL-10水平均升高,P <0.05;治疗后2组间比较,观察组IL-6和TNF-α水平更低,IL-10水平更高,P <0.05。结论：与单纯美沙拉秦灌肠液灌肠治疗相比,联合双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊口服治疗UC可提高临床疗效,更好地调节促炎因子和抑炎因子水平。     

细胞因子对猴脑选择性超深低温断血流复苏缺血性脑保护的影响机制

目的观察猴脑选择性超深低温断血流复苏实验前后血清中细胞因子的动态变化，了解脑缺血后选择性超深低温复苏对缺血性脑保护的炎性机制。方法健康恒河猴4只，先阻断双侧颈总动脉血流10分钟，然后建立闭胸式脑局部体外循环，行一侧颈内动脉冷灌注，同侧颈内静脉回流。60分钟后恢复脑血流，自然复苏。应用ELISA法统一测定实验前后猴血清中IL-2、IL-10、TNF-α、IFN-γ的浓度。结果4只恒河猴术后安全复苏并长期存活，术后头颅MRI检查正常，术后神经功能评分无异常。4种细胞因子在灌注结束后较术前均明显增高（P〈0．05），24小时后恢复至术前水平，72小时测得值与术前无显著差异（P〉0．05）。Spearman相关系数统计显示不同时间点促炎因子IL-2、TNF-α、IFN-γ与抑炎因子IL-10之间呈明显的正相关。结论猴脑选择性超深低温断血流复苏可引起抗炎细胞因子与促炎细胞因子一过性增高，其中抑炎因子IL-10的明显表达和促炎因子之间互相抑制，互相作用，促使细胞因子网络维持动态平衡，从而减轻机体炎性反应同时抑制了脑缺血后机体炎性反应所引起的脑组织损伤，发挥脑保护作用。     

射频对肝癌小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 观察肝癌小鼠模型射频治疗后外周血肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-2（IL-2）的变化及癌组织CD54的表达情况，探讨肝癌射频治疗对机体免疫功能的影响。方法 Balb＇s小鼠60只，随机分为2组，对照组（C组）和射频治疗组（R组），每组30只。成功制作小鼠肝细胞癌模型后，R组给予射频治疗，并于其后0h、2h、2周、3周、4周处死并眼球取血法取血，采用双抗体夹心ELISA法测定TNF-α和IL-2光密度值（OD），同时切除肿瘤进行免疫组化CD54表达分析。结果 R组肿瘤明显缩小，其TNF-α和IL-2浓度呈递增趋势，与对照组比较差异有显著性（P〈0．05）；经射频处理后的R组肝癌细胞CD54呈过度表达现象，并与各时间段TNF-α、IL-2浓度呈明显正相关（r=0．520，P〈0．01；r=0．501，P〈0．01）。结论 肝癌射频治疗诱使TNF-α、IL-2浓度增高，并上调细胞间粘附分子CD54的表达，从而诱导肿瘤免疫应答而发挥抗肿瘤作用。     

养阴清热方对糖尿病肾病大鼠血清炎性因子表达的影响

目的：观察养阴清热方对糖尿病肾病（DN）大鼠血清炎性因子等的影响,进一步探讨中药对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用机制.方法：60只SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常对照组,余下的50只采用高脂饮食饲料喂养加链脲佐菌素腹腔注射方法制作糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型对照组、养阴清热方组、罗格列酮组;分别灌胃给药12周,观察各组大鼠治疗前后一般情况,测定治疗后各组大鼠血清TNF-α、IL-17、VEGF含量.结果：与糖尿病肾病模型组比较,养阴清热方组的血清TNF-α、IL-17、VEGF含量下降,差异有统计学意义.结论：养阴清热方能够改善实验性糖尿病肾病大鼠一般状况,降低 DN 大鼠血清TNF-α、IL-17、VEGF表达,对糖尿病肾病大鼠肾脏损害有一定的保护作用.     

结直肠癌微环境中细胞因子的表达及其与CD16a mRNA表达的相关性研究

目的探讨结直肠癌肿瘤微环境中细胞因子的表达及其与CD16a mRNA表达的关系。方法分别采用实时荧光定量PCR法和流式细胞术微球阵列法(CBA法)检测42例结直肠癌组织及其癌旁组织中CD16a mRNA和8种细胞因子[包括白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)和血管内皮生长因子(VEGF)]的表达水平,分析两者之间的相关性。结果结直肠癌组织中IL-6、TNF-α和VEGF的表达水平高于癌旁组织(P<0.05),而IL-2、IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ在2种组织中的表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术前CEA正常组的IL-6和VEGF的表达水平高于术前CEA升高组(P<0.05)。相关性分析结果显示:结直肠癌组中IL-6的相对表达水平与CD16a mRNA的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论结直肠癌组织中IL-6、TNF-α和VEGF的表达水平较癌旁组织明显升高,提示促血管生成作用及免疫抑制增强。此外,结直肠癌肿瘤微环境中CD16a mRNA的表达与IL-6的表达呈负相关。     

上调Smad7表达对腹膜纤维化大鼠腹膜炎症细胞浸润及促炎症因子表达的影响

目的 研究基因转染上调Smad7表达对大鼠腹膜纤维化模型腹膜炎症细胞浸润及促炎症因子表达的影响。方法 48只SD大鼠随机分为（1）正常对照组（n=12）；（2）模型组（n=12）：每日给予腹腔注射4．25％葡萄糖腹膜透析液（100ml／kg），同时于第8、10、12、22、24、26天腹腔注射脂多糖（LPS，0．6mg／kg）；（3）空白载体对照组（n=12）：仅转入不含Smad7的Tet-on／vector空白载体；（4）Smad7基因转染组（n=12）：在造模后第0、14天分别转染Smad7。第28天时杀检，分别应用免疫荧光染色及RT-PCR检测脏层腹膜泛白细胞标志性抗原（OX-1）、单核巨噬细胞抗原（ED-1）、白介素1（IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白和mRNA的表达水平。Smad7基因转染采用超声介导的微泡基因转染技术。结果 与模型组及空白载体转染组比较．Smad7转基因组脏层腹膜OX-1、ED-1阳性细胞以及IL-1、TNF-α表达水平有明显的减少，但均高于正常对照组。结论 高糖腹膜透析液联合LPS可刺激腹膜炎症细胞的浸润及腹膜间皮细胞IL-1、TNF-α表达上调。基因转染上调Smad7表达可明显抑制大鼠腹膜纤维化模型腹膜炎症细胞浸润及促炎症因子的表达上调。     

髓系触发受体-1在脆弱类杆菌诱导小鼠脓毒血症中的作用

目的 探讨小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体(Lentivector,LV)TREM-1 vshRNA对脆弱杆菌脓毒血症小鼠脾脏中促炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达及NF-κB通路的影响.方法 将清洁级BALB/c雄性小鼠分成4组,即正常对照组(C组),脆弱类杆菌脓毒症模型生理盐水组(S组),TREM-1 vshRNA干扰实验组(T组)和GFPvshRNA干扰实验组(G组).观察各组中小鼠脾内TREM-1,TNF-α,IL-1β,IL-6的蛋白表达以及IkBa,pDAP12,NF-κB p65的表达情况的变化.结果 与C组比,T组TREM-1 mRNA及蛋白表达均有显著增加(P＜0.01);T,G,S组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较C组显著增加(P＜0.01);T组脾细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量均较S,G组明显降低(P＜0.01).S组脾细胞中的pDAPl2和核内NF-κB p65蛋白表达水平明显增强,IκBa蛋白表达水平降低;而T组与S组比较,pDAP12和NF-κB p65蛋白的表达水平显著下调.结论 小鼠TREM-1基因重组慢病毒干扰载体可选择性抑制TREM-1表达,下调脆弱类杆菌诱导的促炎症因子的分泌,而转染可能是通过下调DAPl2的表达,稳定IkBa/NF-κB复合物,抑制TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8基因的转录,而对脆弱类杆菌脂多糖炎症反应产生抑制作用.     

氩氦刀冷冻联合CpG寡脱氧核苷酸治疗小鼠皮下移植性结肠癌

目的 探讨氩氦刀冷冻消融联合CpG寡脱氧核苷酸（ODN）对小鼠移植性结肠癌的治疗作用.方法 BALB/c小鼠皮下接种结肠癌CT26细胞建立荷瘤鼠模型,小鼠被分成PBS组（6只,瘤周注射PBS组）、氩氦刀组（6只,氩氦刀冷冻组）、CpG ODN组（6只,瘤周注射CpG ODN）和联合治疗组（6只,氩氦刀冷冻加瘤周注射CpG ODN）.观察各组小鼠存活及肿瘤生长情况;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠外周血中IL-12和IFN-γ的含量;利用流式细胞仪检测小鼠外周血中CD3＋CD4＋T细胞与CD3＋CD8＋T细胞比例;对氩氦刀组和氩氦刀联合CpG ODN组治愈小鼠进行再攻击实验,观察小鼠再次成瘤率.结果 氩氦刀组和联合治疗组小鼠的平均生存时间为（80.3±5.4）d和（83.8±5.5）d,明显长于PBS组[（53.7±3.7）d]和CpG ODN组[（51.5±6.8）d],差异均有统计学意义（P＜0.05）.氩氦刀组和联合治疗组抑瘤率分别为83.8%和86.2%.治疗后20 d,氩氦刀组和联合治疗组的CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值、IL-12和IFN-γ水平均高于PBS组和CpGODN组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与氩氦刀组比较,联合治疗组CD3＋CD4＋T细胞/CD3＋CD8＋T细胞比值差异无统计学意义,但IL-12和IFN-γ水平则显著升高（P＜0.05）.肿瘤再攻击后,氩氦刀组和联合治疗组分别有5只（5/6）和1只（1/6）再次成瘤,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氩氦刀冷冻联合CpG ODN可以增强荷瘤鼠的抗肿瘤免疫应答,增强了氩氦刀治疗小鼠的免疫功能,减少了肿瘤再次攻击的成瘤率.     

交感神经递质NE对内毒素诱导大鼠kupffer细胞TNF-α/IL-1β表达的影响

目的探讨交感神经递质去甲肾上腺素对体外培养大鼠kupffer细胞TNF-α、IL-1β炎症相关细胞因子表达的影响。方法分离大鼠kupffer细胞体外分三组培养,经体外培养48h后,给予外源性内毒素（LPS10μg／m1）刺激,同时给予不同浓度的去甲。肾上腺素（0．1μmol／L～10μmol／L）分别作用12h,运用定量逆转录多聚酶链反应检测各处理组TNF-α和IL-1β mRNA的表达,ELISA检测细胞培养上清TNF-α IL-1β蛋白的表达。结果同时给予LPS（10μg/ml）刺激和去甲肾上腺素（1μmol／L及10μmol／L）作用后,kupffer细胞培养上清TNF-α和IL-1β蛋白较LPS组显著增高（P〈0．05）;TNF-α mRNA表达分别较LPS组增加50．9％（P〈0．05）和59．1％（P〈0．05）;IL-1β mRNA较LPS组表达增加53．7％（P〈0．05）和57．8％（P〈0．05）。结论应激浓度的去甲肾上腺素能增加内毒素诱导大鼠kupffer细胞TNF-α、IL-1β表达,具有促炎效应。     

溃愈散对溃疡性结肠炎患者TNF—α和IL-8的影响及疗效分析

摘要为探讨溃愈散对溃疡性结肠炎（UC）患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-8（IL-8）的影响及临床疗效,本研究以采用中药溃愈散保留灌肠治疗的UC患者（治疗组）、采用西药柳氮磺吡啶口服治疗的UC患者（对照组）及正常健康体检者（空白组）为研究对象,采用双抗体夹心ABC—ELISA法检测UC患者治疗前后及正常健康体检者血清TNF-α、IL-8的含量,采用二步免疫组化法检测UC患者治疗前后结肠组织中TNF-α、IL-8的表达水平,并将各组治疗前后血清和结肠组织中TNF-α、IL-8的变化进行对比分析。结果显示,（1）综合疗效：治疗组总有效率（92．6％,25／27）明显高于对照组（71．4％,20／28）,P〈0．05;（2）TNF-α、IL-8水平：治疗组和对照组UC患者治疗后血清及结肠组织中TNF-α、IL-8水平均显著降低,尤以治疗组降低更明显。结果表明,中药溃愈散保留灌肠对UC有良好的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制促炎细胞因子的分泌,调节免疫反应,减少炎症递质的释放,来有效阻断免疫反应对机体造成的损伤,从而达到治疗UC的目的。     

安定-氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期炎症反应的影响

目的研究安定-氯胺酮麻醉对烧伤小鼠腹腔巨噬细胞糖皮质激素受体(GR)及血清炎性细胞因子的影响,探讨其对创伤早期炎症反应的作用.方法 120只BALB/C健康雄性小鼠随机分为正常对照组、烧伤对照组、麻醉对照组、先处理组(麻醉后15 min烧伤)、后处理组(烧伤后15 min麻醉).采用安定-氯胺酮麻醉,小鼠烧伤模型为背部15%～20%Ⅲ度烧伤.于烧伤或麻醉后4 h颈椎脱臼法处死小鼠,收集全血及腹腔巨噬细胞.采用ELISA法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β、IL-10浓度,采用Western blot技术测定腹腔巨噬细胞GR表达.取部分正常对照组和烧伤对照组腹腔巨噬细胞在体外与安定、氯胺酮共同培养,并测定腹腔巨噬细胞GR水平.结果与正常对照组比较,烧伤对照组血清TNF-α、IL-1β、IL-10浓度增高,先处理组血清IL-10浓度增高,后处理组血清IL-10浓度增高(P＜0.01);与烧伤对照组比较,先处理组和后处理组血清TNF-α、IL-1β、IL-10浓度降低(P＜0.01或0.05).与正常对照组比较,烧伤对照组、麻醉对照组和后处理组腹腔巨噬细胞GR表达水平降低(P＜0.05或0.01);与烧伤对照组比较,先处理组和后处理组腹腔巨噬细胞GR表达水平明显增高(P＜0.05或0.01);与先处理组比较,后处理组GR表达水平明显降低(P＜0.05).正常组或烧伤组腹腔巨细胞经安定-氯胺酮培养后GR表达差异无统计学意义(P＞0.05),正常组GR表达高于烧伤组(P＜0.01).结论安定-氯胺酮麻醉对小鼠烧伤后腹腔巨噬细胞GR表达水平下调以及炎性细胞因子的释放有一定抑制作用.     

肿瘤坏死因子-α与神经根炎症研究进展

Marshall等于1977年首次提出腰椎化学性神经根炎（chemical radiculitis）这一概念。它是指由于纤维环破裂、髓核液漏至椎间盘外并沿着神经根扩散引起神经根炎症的一种状态。近年研究发现,神经根炎症反应是一种由多种细胞、多种因子共同参与的非常复杂的过程。参与炎症反应的因子主要包括促炎或抗炎因子、炎症介质。目前发现的促炎细胞因子包括肿瘤坏死因子一仅（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）和白细胞介素-6（IL-6）,其中最重要的促炎因子是TNF-α和IL-1。1975年,Carswell等给接种过卡介菌（BCG）的小鼠注射脂多糖（LPS）后,在其血清中发现一种能直接杀伤某些肿瘤细胞或诱导体内肿瘤组织发生出血坏死的因子,即肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）。1985年Shalaby把单核巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α,把T淋巴细胞产生的淋巴毒素（lymphotoxin,LT）命名为TNF—β。TNF—α主要由活化了的单核巨噬细胞产生,中性粒细胞、内皮细胞、T淋巴细胞、平滑肌细胞受刺激后也能产生。TNF-α单体是一条相对分子质量为17000的肽链。近年来,关于TNF-α与神经根炎症的研究较多,现作一综述。     

重组人促红细胞生成素预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎性反应的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎性反应的影响及其机制。方法健康雄性SD大鼠138只,体重350～450g,随机分为3组：假手术组（Sham组,n=42）、缺血再灌注组（I/R组,n=48）和rhEPO预先给药组（n=48）。缺血前24h,Sham组和I/R组腹腔注射0．9%NaCl溶液4ml/kg,rhEPO预先给药组腹腔注射rhEPO 5 000IU/kg（溶于0．9% NaCl溶液4ml/kg）。采用阻断左前降支冠状动脉30min、再灌注180min制备心肌缺血再灌注损伤模型,分别于结扎冠状动脉前即刻、缺血即刻、再灌注30、60、120、180min 3组各随机处死6只大鼠,取左心室心肌组织,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、自细胞介素（IL）-6和IL-10的含量,检测心肌细胞核NF-kB和活化蛋白-1（AP-1）的表达；3组随机另取6只大鼠,再灌注结束时观察心肌中性粒细胞浸润情况。I/R组和rhEPO预先给药组再随机取6只大鼠,再灌注结束时测定心肌梗死面积。结果与Sham组比较,I/R组和rhEPO预先给药组NF-kB、AP-1表达及TNF-α、IL-6、IL-10含量升高（P＜0．01）；与I/R组比较,rhEPO预先给药组NF-kB和AP-1表达及TNF-α、IL-6含量降低,IL-10含量升高（P＜0．05或0．01）；rhEPO预先给药组较I/R组心肌梗死面积减小,中性粒细胞浸润程度减轻。结论预先腹腔注射rhEPO 5 000 IU/kg可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与下调NF-kB和AP-1表达,抑制心肌炎性反应有关。     

脐带间充质干细胞调节炎性微环境干预急性肾损伤的效应研究

目的：观察移植外源性脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对小鼠急性肾损伤（AKI）炎性微环境的影响及对肾组织的修复作用。方法：分离培养孕后期C57BL/6雌性小鼠的UC-MSCs。另取雌性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组、AKI组、AKI＋MSC移植组,每组20只。AKI组和AKI＋MSC组用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45 min复制AKI模型,并于模型制备成功时腹腔内注射生理盐水0.2 ml（AKI组）或1＆#215;106 UC-MSCs（AKI＋MSC组）。于第2天和第7天每组活杀10只小鼠,取眼球血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（SCr）水平;肾组织行HE染色,观察组织病理学变化;ELISA法检测肾组织匀浆中促炎因子IL-1β、TNF-α、干扰素-1（IFN-1）及抗炎因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、IL-10、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的水平。结果：2 d时AKI组小鼠肾小管上皮细胞肿胀,胞质空泡性变,BUN和Cr均显著高于正常对照组,提示造模成功后肾小管受损严重,7 d稍有减轻;AKI＋MSC移植组小鼠肾功能在2 d时较AKI组有所恢复,肾组织病理学变化明显减轻（P＜0.01）,7 d基本恢复正常。ELISA结果显示,与正常对照组比较, AKI组各时间点肾组织匀浆中促炎因子的水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）,抗炎因子的水平均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,2 d较7 d更加明显。各时间点AKI＋MSC组抗炎因子的水平较AKI组明显升高,促炎因子的水平明显下降,但与正常对照组比较差异均有显著性（P＜0.01或P＜0.05）,7d较2 d改善更明显。结论：MSC可通过减轻AKI肾组织炎症反应,调节损伤肾脏组织微环境中的细胞因子水平发挥保护肾损害的修复作用。