用原位杂交技术探讨EB病毒受体（EBVR／CR_2）在鼻咽癌发病中的作用

本文经原位杂交技术检测发现部分人胚鼻咽上皮细胞、鼻咽癌细胞株及高分化鼻咽癌中均有限强的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒受体（ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２）的病毒结合区ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达，而低分化鼻咽癌中未检测到其表达，提示ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达与ＥＢＶ的复制有关，ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２可以介导ＥＢＶ感染鼻咽上皮细胞导致鼻咽癌的发生。     

EB病毒LMP与EGF自分泌在鼻咽癌细胞生长中的作用及其相互关系

以ＬＭＰ基因转染ＣＮＥ１细胞为对象，用放射免疫分析（ＲＩＡ）和细胞增殖实验（ＭＴＴ）等方法，研究ＥＢ病毒ＬＭＰ和ＥＧＦ自分泌在高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１生长增殖中的作用和关系。结果示：从细胞培养液中检获ＥＧＦ；细胞可在无血清培养液中生长。说明ＣＮＥ１细胞具有ＥＧＦ自分泌促生长功能。转染ＰＣＭＶα－ＬＭＰＤＮＡ的ＣＮＥ１细胞ＬＭＰ的ＰＣＲ和ＬＭＰ单抗免疫组化检测均为阳性，证明ＬＭＰ基因转染成功。ＥＧＦ自分泌量和无血清培养下ＥＧＦ的促生长反应，ＬＭＰ转染细胞均高于未转染细胞，表明ＥＢ病毒ＬＭＰ可通过促进ＥＧＦ自分泌而促进鼻咽癌细胞生长增殖。     

淋巴细胞β受体与放射配基结合所需孵育时间的确定

介绍理论运算和实验测量相结合，确定淋巴细胞膜碎片β受体与标记配基结合所需平衡时间的方法。结果表明：二种方法所得平衡时间基本一致。多点法时平衡时间需25-30min；单点法时需5-7min。     

应用PCR方法检测头颈部肿瘤病人EB病毒的研究

多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法对一组头颈部肿瘤病人口咽部含氵敕液中Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ进行测定。结果表明：恶性肿瘤如鼻咽癌，恶性淋巴瘤，喉癌，鼻腔鼻窦癌，甲状腺癌等检出阳性率为７４．４７％；良性肿瘤如喉乳头状瘤，甲状腺瘤等检出阳性率为１３．５１％；对照组为鼻、咽、喉慢性炎症病人，仅１例结果阳性（７．１４％）。结果提示：ＥＢＶ可能参与了这些癌肿的发病。     

376例EB病毒壳抗原抗体检测结果

３７６例ＥＢ病毒壳抗原抗体检测结果王化胶，夏英亭，李林，孙化鲲（临沂地区人民医院检验科，耳鼻喉科）关键词爱泼斯坦－巴尔病毒；抗体．病毒；鼻咽肿瘤ＥＢ病毒（ＥＢＶ）与鼻咽癌有关ｔ’·’］。侵入机体后在体内产生多种抗体。其中ＥＢＶ—ＶＣＡ抗体的测定对鼻咽...     

鼻咽癌中PK,p53,和EBER—1表达的初步研究

采用地高辛标记的ＥＢＥＲ－１寡脱氧核苷酸探针原位杂交，ｐ５３，Ｒｂ单克隆抗体和细胞角质多克隆抗体免疫组织化学技术对４０例鼻咽癌进行了研究。结果发现９５．２％的鼻咽癌表达ＥＢＥＲ－１，８５％的病例细胞角质染色阳性，７７．５％ｐ５３的阳性，９２．５％Ｒｂ阳性，非癌组织基本上不表达ｐ５３。     

人脐带和胎盘血管β受体的放射配基检测

建立放射配基结合实验方法,并用此法检测人脐带和胎盘血管是否存在β受体,为开拓β受体拟似剂改善子宫胎盘血循的用途提供依据。     

扁桃体淋巴上皮瘤样癌的病理特征及其与EB病毒的相关性

报道１９８８年１月至１９９４年１２月所见１０６例扁桃体癌中有１５例淋巴上皮瘤样癌（ＬＥＬＣ），占１４％。对１５例ＬＥＬＣ作了免疫组化和组织病理学观察，采用原位杂交技术进行了ＥＢ病毒编码的小ＲＮＡ（ＥＢＥＲｓ）检测。结果表明：（１）癌细胞的形态与鼻咽非角化癌尤其是未分化癌类同，增殖活跃，有７例（４６％）ＬＥＬＣ的癌细胞呈Ｐ５３异常表达。（２）在癌细胞周围及癌巢间，有大量的淋巴类细胞浸润，巨噬细胞和树状突细胞丰富。（３）１０例（６７％）ＬＥＬＣ的癌细胞核内检测到ＥＢＥＲｓ。由于扁桃体ＬＥＬＣ具有一定的形态特征，与ＥＢ病毒感染相关，在临床病理诊断中宜将其作为扁桃体癌的一种特殊类型加以重视。     

人成骨细胞瘦素受体放射配基结合分析研究

骨质疏松是以骨量减少、骨组织微结构被破坏为特征的系统性骨病。研究表明 ,无论是否是负重骨 ,血清雌激素水平经校正后 ,体脂和骨量直接相关 ,因此肥胖被认为是骨量的保护因子[1～ 3 ] 。瘦素(leptin)是肥胖基因 (ob)的蛋白质表达产物 ,主要由脂肪细胞分泌 [4 ] 。已有的研究表明 ,瘦素不仅是降低食欲、调节能耗和体重的重要体脂激素 ,而且还与机体多种代谢功能密切相关。有研究提出 ,瘦素可能是骨形成的合成因子 ,介导肥胖对骨量的影响 [5,6]。本研究拟通过培养成人成骨细胞 (osteoblast,OB) ,采用受体放射分析方法探讨 OB瘦素受体蛋白 …     

正常人肝细胞表面人多聚白蛋白受体的放射分析

作者用受体放射分析法在７例正常成人肝细胞上检测到人多聚血清白蛋白（ＰＨＳＡ）受体的存在，受体的亲和常数（Ｋｄｓ）及结合容量（Ｃ）存在个体差异，其均值分别为：Ｋｄ＿１＝９．６７６９±５．２７６７ｆｍ￣（－２），Ｃ＿１＝８６．１４６８±４６．４１２９ｆｍ／μｇ；Ｋｄ＿２＝１０３．１８１０±５６．４７７０ｆｍ￣（－２），Ｃ＿２＝２６１．５３０２±１７５．９０９４ｆｍ／μｇ。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图为一曲线，提示肝细胞上的ＰＨＳＡ受体由两种不同亲和力及结合容量的结合位点组成。本文还对该受体在ＨＢＶ嗜肝机理中可能的作用及其意义进行了讨论。     

鼻咽癌中EB病毒启动子Qp的突变及其功能学研究

【目的】 探讨鼻咽癌细胞中启动EB病毒核抗原1(EBNA1蛋白)表达的EB病毒Q启动子(Qp)的变异特征,比较有第62 225位点(g→a)和第62 422位点(g→c)两个点突变的Qp与原型Qp(B95.8型)的功能学差异及其生物学意义&#65377;【方法】 采用PCR的方法扩增29例鼻咽癌组织石蜡标本和14例健康成人外周血标本(总共43例)中的Qp序列,PCR产物测序后分析其突变情况,统计学分析Qp中的点突变与鼻咽癌的相关性&#65377;把突变型和原型Qp分别克隆到荧光素酶报告基因载体上,检测相对光强度(RLU),比较突变型与原型Qp启动转录的活性&#65377;使用染色质免疫共沉淀(ChIP)实验来比较突变型和原型Qp与Sp1蛋白的亲和力&#65377; 【结果】 通过PCR扩增和测序实验,证实Qp的突变与鼻咽癌有密切的相关性(P = 0.0395,< 0.05)&#65377;突变型Qp启动转录的活性明显高于原型(RLU之比约为2.5:1,P < 0.05),并且突变型Qp与Sp1的亲和力较原型Qp增强约1.52倍&#65377;【结论】 在鼻咽癌组织中,突变型Qp可能通过增强与Sp1亲和力的机制,使其启动转录的活性明显增强&#65377;Qp特定位点的突变在EB病毒对鼻咽上皮细胞的感染和转化过程中可能起了重要的作用&#65377;     

对氯苯丙氨酸对大鼠海马胞液皮质酮受体数量的影响

本实验以(~3H)皮质酮为配体,建立了去肾上腺大鼠海马胞液皮质酮受体的放射配体结合测定法,并对海马胞液皮质酮受体的结合特性以及对氯苯丙氨酸(pCPA)对皮质酮受体数量的影响进行了研究。测得的皮质酮受体具有可饱和性、有限的结合能力、高亲和力和高特异性的特征。Scatchard分析为一直线,表明测得的皮质酮受体是一个或一组kd值十分接近的受体。侧脑室注射pCPA 1mg4天后,海马5-HT含量明显降低,同时海马胞液皮质酮受体的最大结合客量(Bmax)显著升高,提示海马5-HT能神经元的功能性活动在控制海马胞液皮质酮受体数量的相对恒定中具有重要作用。     

Epstein-Barr Virus Encephalitis in Infancy

Epstein-Barr virus (EBV) infection causes a wide spectrum of illness in humans including subclinical infection, infectious mononucleosis, and is associated with some malignancies. This report presents the clinical findings of an unusual case of EBV encephalitis in a 10-month old infant who presented with a febrile infection and seizures. The clinical manifestations, serologic study and a dynamic change of EBV DNA in cerebrospinal fluid with spontaneous recovery confirmed the diagnosis of EBV infection of the nervous system.     

ELISA法检测中国中山市正常人及鼻咽癌患者血清EB病毒抗体水平

目的观察EB病毒抗体 EBNA1/IgA、ZEBRA/IgG、EBNA1/IgG在不同年龄、不同性别的正常人群中的分布,并与鼻咽癌患者进行比较。方法用ELISA法在全自动酶联免疫分析系统上检测468例正常人和16例鼻咽癌患者的血清标本。结果正常人血清各抗体的水平[rD（λ）值]分别为:EBNA1/IgA男性0.726±0.541,女性0.563±0.340,男性高于女性（P<0.001）;ZEBRA/IgG男性0.709±0.480,女性0.829±0.480,女性高于男性（P<0.01）;EBNA1/IgG男性0.781±0.285,女性0.784±0.302,男女之间无显著性差异（P>0.05）。ZEBR/IgG的阳性率随年龄增高而升高,相关系数为0.766（P<0.05）。鼻咽癌患者上述3种抗体的血清水平分别为3.265±1.76、1.408±0.672、1.249±0.317,均明显高于正常人（P<0.01）。结论正常人群中EBNA1/IgA、ZEBRA/IgG、EBNA1/IgG3种抗体的血清水平存在年龄和性别上的差异,但波动在一定范围内;在鼻咽癌的临床诊断和高危人群筛查中有必要根据具体的人群界定不同的阳性临界值;鼻咽癌患者此3种抗体的血清水平均明显升高,对鼻咽癌的诊断有一定意义。     

Epstein-Barr病毒RPMS1基因的克隆及其编码区序列分析

目的：克隆Epstein—Barr(EB)病毒的RPMS1基因，并分析其编码区序列的变异情况。方法：从7例高发区鼻咽癌组织中分别提取总RNA，以RT—PCR扩增出RPMS1基因编码序列，克隆入pGEM—T载体，构建重组质粒pGEM—T／RPMS1，重组质粒经PCR、BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定，并进行序列测序。结果：成功克隆了高发区鼻咽癌的RPMS1基因，该基因编码序列第151nt发生G→A替换，导致相应第51位氨基酸由天冬氨酸变为天冬酰氨。该变异位于DNA第Ⅴ外显子的155849nt，变异频率为6／7。结论：高发区鼻咽癌EB病毒RPMS1基因的编码序列存在变异；RPMS1基因可能参与高发区鼻咽癌的发生。     

用导入嗜亲性病毒受体基因的S~＋L~－貂细胞建立的鼠嗜亲性MuLV的病灶形成实验

命名为ＩＤ的Ｓ＋Ｌ－貂细胞是通过用磷酸钙沉淀法导入嗜亲性鼠白血病病毒受体基因而建立的。用嗜亲性鼠白血病病毒感染ＩＤ细胞引起的转化病灶与由嗜异性和双嗜性白血病病毒引起的转化病灶相似。这种ＩＤ细胞可用于滴定不能形成ＸＣ蚀斑的嗜亲性病毒，并可同时检测不同宿主范围的病毒。     

EB病毒体外感染NPC病人及IgA/VCA~+者的PBMC上清的作用

本文用EB病毒体外感染鼻咽癌病人,IgA/VCA~+,IgA/VCA~-者和新生儿的外周血单个核细胞,观察其上清对CNE-2Z和Raji细胞生长的影响。结果表明,鼻咽癌病人对CNE-2Z有明显抑制作用,生长指数为0.67～0.74,IgA/VCA阳性者和阴性者对CNE-2Z无明显作用。上述感染组对Raji细胞则均有抑制作用,生长指数为0.49～0.69。未经EBV诱导的5天上清对Raji细胞生长呈促进作用。生长指数为1.31～1.44,但对CNE-2Z细胞无明显作用。经EBV和未经EBV感染的新生儿对两种细胞均呈促进生长的作用。     

定量检测EB病毒VCA-IgA和EA-IgA抗体对EB病毒相关鼻咽癌的诊断意义

目的:评价EB病毒特异性VCA-IgA和EA-IgA抗体定量检测对EB病毒相关的鼻咽癌的诊断意义?方法:试验组为228例鼻咽癌血清标本,对照组为102例正常健康体检者血清标本?用ELISA法定量检测血清标本中EBV特异性VCA-IgA和EA-IgA抗体水平,以临床病理诊断为金标准,分析各血清检测指标的准确性?灵敏性?特异性及其cut-off值的设定?结果:正常健康人血清中EB病毒特异性VCA-IgA和EA-IgA抗体的平均水平分别为15 U/ml 和 11.5 U/ml,鼻咽癌患者血清中VCA-IgA和EA-IgA抗体的平均水平分别为56.5 U/ml 和 63.5 U/ml,鼻咽癌组抗体水平显著高于健康体检组?根据VCA-IgA?EA-IgA定量检测结果绘制ROC曲线图,曲线下面积分别为0.903 和 0.948,VCA-IgA?EA-IgA定量检测可用于鼻咽癌的准确诊断?根据ROC曲线图分析,cut-off值分别设定为30 U/ml 和23 U/ml?按此值设定时,VCA-IgA检测鼻咽癌的敏感性和特异性分别为84.9%和66.8%,EA-IgA检测鼻咽癌的敏感性和特异性分别为87.9%和91.1%?联合检测VCA-IgA和EA-IgA的敏感性为92%,特异性为91%?结论:以ELISA法定量检测VCA-IgA?EA-IgA的血清抗体水平对鼻咽癌具有诊断意义,尤其将两指标联合应用?