乳腺癌患者ER、PR、C-erbB-2基因蛋白表达的研究

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一。乳腺癌预后与多种因素相关，其中与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、C-erbB-2基因蛋白表达较密切。我们采用免疫组织化学染色方法检测ER、PR、C-erbB-2。探讨它们在乳腺癌中的表达情况及与预后的关系。     

乳腺癌中EGFR和CD_(44)的表达及其临床病理意义

目的明确乳腺癌中表皮生长因子受体(EGFR)和CD44的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法对115例手术切除的乳腺癌标本进行EGFR、CD44免疫组织化学染色,分析其表达情况与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、ER、PR、C-erbB-2表达等临床病理特征的相关关系。结果乳腺癌EGFR、CD44表达与乳腺癌淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05),而与发病年龄、肿块大小、C-erbB-2表达无明显相关性。EGFR的表达与ER、PR相关(P<0.05),而CD44的表达与ER、PR无明显相关性。EGFR的表达与CD44无明显相关性。结论 EGFR、CD44与乳腺癌的发生发展有密切关系,其表达有助于判断预后及指导治疗。     

散发性乳腺癌组织BRCA1基因启动子甲基化与蛋白表达的相关性

目的：探讨BRCA1基因启动子甲基化对BRCA1蛋白表达的影响，与散发性乳腺癌发病之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测51例散发的乳腺浸润性导管癌和10例乳腺良性组织的BRCA1基因启动子甲基化状态，免疫组织化学SP法检测相应组织的石蜡标本BRCA1蛋白表达水平。结果：10例乳腺良性组织中均未检测到BRCA1启动子的异常甲基化，结合免疫组织化学检测，BRCA1蛋白均在细胞核阳性表达，其中70％为强阳性表达；在51例散发性乳腺浸润性导管癌组织中检测到7例BRCA1启动子发生异常甲基化，甲基化比例为13．73％（7／51）；其余44例（44／51，86．27％）未检测到BRCA1启动子甲基化。     

恶性血液病中乳腺癌耐药蛋白基因的表达

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在恶性血液病中的表达。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),β2微球蛋白基因作内参照,以BCRP/β2-MG的比值作为BCRP基因的相对表达水平,检测62例恶性血液病BCRP基因的表达。结果BCRP基因在恶性血液病中,阳性表达率高,表达水平差别较大,由低到高依次为AML、CML、ALL,此外MDS-RAEB和CLL各1例阳性。其中,18例AML(M3除外)中,初次缓解率在BCRP基因表达水平高者明显低于低的患者。结论BCRP基因在恶性血液病中阳性表达率高;BCRP可能与肿瘤的耐药有关,是预后不良的因素之一。     

多种耐药基因蛋白在乳腺癌和三阴乳腺癌中表达差别的研究

目的 比较分析多种耐药相关基因蛋白在乳腺癌和三阴乳腺癌表达差别,进一步了解三阴乳腺癌的耐药特性,为临床治疗三阴乳腺癌选择化疗方案提供依据.方法 选取术前未行化疗及内分泌治疗的的62例乳腺癌标本,其中三阴乳腺癌病例20例.采用免疫组化方法 检测LRP、p170、谷胱甘肽S转移酶（GSTπ）、TopoⅡa在乳腺癌、三阴乳腺癌、非三阴乳腺癌中表达差别.结果 p170、LRP、GSTπ、TopoⅡa四种耐药基因相关蛋白在所有乳腺癌病例中阳性表达率分别为41.94%,59.68%,56.45%,62.90%,p170、LRP、GSTπ、TopoⅡa在非三阴组与三阴组阳性表达率分别为和40.48%,59.52%,47.62%,57.14%和45.00%,60.00%,75.00%,75.00%,其中GSTπ在2组中的表达差异有统计意义（P〈0.05）.2组乳腺癌中多基因共表达率分别为40.00%、11.90%,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 初治乳腺癌中存在多个耐药基因蛋白表达及共表达,三阴乳腺癌比非三阴乳腺癌化疗耐药性强,化疗效果不如非三阴组敏感.GSTπ表达强于非三阴组,提示三阴乳腺癌预后较差,化疗不敏感.     

MMP-2和CD_(44)V_6基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨MMP-2和CD_(44)V_6的表达与卵巢浆液性肿瘤侵袭和转移的关系。方法应用流式细胞免疫法定量检测MMP-2和CD_(44)V_6在45例卵巢浆液性肿瘤中的表达。结果MMP-2在卵巢浆液性癌中的表达明显高于卵巢浆液性瘤(P<0.05),且与卵巢浆液性癌组织分级和临床分期密切相关(P<0.05)。CD_(44)V_6在卵巢浆液性癌中的表达明显高于卵巢浆液性瘤(P<0.05),且与卵巢浆液性癌组织分级和临床分期密切相关(P<0.05)。MMP-2和CD_(44)V_6在卵巢浆液性癌中的表达密切相关(P<0.05)。结论卵巢浆液性癌中MMP-2和CD_(44)V_6的高表达促进了癌的侵袭和转移,MMP-2和CD_(44)V_6在卵巢浆液性癌中的表达有相关性。提示MMP-2和CD_(44)V_6的共同检测可作为诊断和判断预后的参考指标。     

乳腺癌中EGFR基因的表达和致病机制

在我国城市妇女中,乳腺癌已经成为恶性肿瘤发病率首位,约每30人中就有1人罹患乳腺癌。乳腺癌的转移是影响生存期的主要因素之一,本文主要目的是研究表皮生长因子受体(EGFR)的表达及致病机制,揭示EGFR与乳腺癌淋巴结转移之间的关系,为判断乳腺癌预后提供可靠依据。     

CD_(44)和YNZ22基因多态性与食管癌的相关性研究

目的研究CD44和YNZ22、基因多态性与食管癌的关系。方法应用PCR技术,对45例食管癌患者癌组织及癌旁组织进行CD44和YNZ22基因多态性分析。结果癌组织中CD44蛋白呈高表达,明显高于癌旁组织,差异具有显著性(P<0.01)。对检出的YNZ22对应等位基因频率分布统计分析表明,食管癌患者癌组织与癌旁组织间无显著差异。结论食管癌组织中CD44和YNZ22多态性改变与食管癌的易感性关系较密切。     

PTEN、CD44v6蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的　探讨PTEN、CD4 4v6蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床病理意义。方法　采用免疫组化S P法检测 90例乳腺癌组织中PTEN、CD4 4v6蛋白的表达水平。结果　 (1)正常乳腺组织中PTEN呈高表达 ;有腋窝淋巴转移的乳腺癌组织中PTEN高表达率为 39 3% ,明显低于无腋窝淋巴结转移者 5 9 6 % (P <0 0 5 ) ;复发组PTEN高表达率低于无转移组 ,两组有统计学差异 (P <0 0 0 5 )。 (2 )CD4 4v6在浸润性导管癌中阳性表达率较高 (6 9 5 % ) ,小叶癌中的阳性表达率较低(35 5 % ) ,两者有统计学差异 ;PTEN、CD4 4v6蛋白表达水平与患者年龄、肿瘤最大直径、组织学分级无关。结论　乳腺癌组织中PTEN/CD4 4v6蛋白表达减弱 ,可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关 ;CD4 4v6可以作为浸润性导管癌和小叶癌的鉴别诊断的辅助指标。     

合成基因IL-6在大肠杆菌中表达及融合蛋白鉴定分析

目的合成IL-6的编码基因,并在大肠杆菌中表达,获得纯化的融合蛋白IL-6。方法采用基于PAS(PCR-based accurate synthesis)的方法,设计全长拼接引物,合成基因IL-6,并将其插入载体pCzn1,获得的重组质粒pCzn1-IL-6,化学法将其转化入大肠杆菌TOP10进行克隆。将克隆得到的阳性克隆子转化入大肠杆菌Arctic Express后用IPTG诱导剂诱导融合蛋白的表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定蛋白表达效果。结果经测序和双酶切验证,正确构建了重组质粒pCzn1-IL-6,重组质粒成功转入表达菌株,IL-6原核蛋白在表达菌株中以包涵体和可溶性形式稳定表达,通过Ni柱亲和纯化获得纯化的目标蛋白。结论 IL-6原核蛋白在大肠杆菌中成功表达,为进一步的应用研究打下基础。     

BRCA1蛋白在散发性乳腺癌组织中的表达

目的：探讨BRCA1蛋白表达在散发性乳腺癌组织的表达水平、以及与临床病理指标的相关性。方法：免疫组织化学SP法检测相应组织的石蜡标本BRCA1蛋白表达水平，动态收集乳腺癌临床病理学相关指标。结果：应用免疫组织化学方法，检测12例非癌性乳腺组织，BRCA1蛋白在细胞核均为阳性表达（12／12，100％），其中强阳性表达率为75％，未见细胞浆表达。检测的98例散发性乳腺癌组织中，52例为BRCA1蛋白细胞核阳性表达（52／98），46例为BRCA1蛋白细胞核阴性表达；在BRCA1蛋白核表达阳性病例中，发现14例（14／52，26．9％）同时伴有无功能BRCA1细胞浆表达；     

ERα／β蛋白表达与基因启动子甲基化在中国女性散发性乳腺癌中的相关性研究

目的：探讨雌激素受体α（Estrogen Receptorα,ERα）、雌激素受体β（EstrogenReceptorβ,ERβ）基因启动子区甲基化与ERα、ERβ蛋白失表达关系。方法：甲基化特异性PCR（Methylation specific PCR,MSP）法检测138例散发性乳腺癌和14例乳腺纤维腺瘤组织中ERα基因启动子区四个CpG岛密集区域甲基化及ERβ启动子区甲基化状态,免疫组织化学方法检测ERα、ERβ蛋白的表达。结果：纤维腺瘤组织中,ERα、ERβ甲基化发生率分别为28．6％（3／14）、14．3％（2／14）：乳腺癌组织ERα、ERβ总甲基化发生率分别为60．1％（83／138）、53．6％（74／138）,ERQ启动子区ER1、ER2、ER3、ER4四个检测区域的甲基化发生率分别为34．896、35．5％、39．1％、36．996,ER1 ER4各检测区域间甲基化率未见显著性差别;乳腺癌组织ERα、ERβ甲基化发生率均显著高于纤维腺瘤组织（60．1％vs．28.6％,）（2=5．117,P=0．023;53．6％vs．14．3％,X2=11．418,P=-0．004）;分析乳腺癌中ERQ基因启动子甲基化与ERa表达相关性发现ERα阳性的乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率为37．7％（26／69）,而在ERα阴性组织总甲基化发生率82．6％（57／69）。进一步针对四个CpG岛密集区域异常甲基化检测发生率,发现在职α阳性的乳腺癌组织中职α基因启动子甲基化发生率分别为14．5％、18．896、7．296、17．4％,在ERα阴性的乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率明显升高,分别为55．1％、52．2％、58％、56．5％,以ERα表达水平与甲基化检出率做Spearman相关性分析,二者呈显著负相关（r=-0．469,P〈0．0001）;分析乳腺癌中ERβ基因启动子甲基化与ERβ蛋白表达的相关性发现ERβ阳性的乳腺癌组织中ERβ基因启动子甲基化发生率为35．4％（29／82）,而在ERβ阴性组织总甲基化发生率80．4％（45／56）。以ERβ表达水平与甲基化检出率做Spearman相关性分析,二者呈显著负相关（r=-0．743,P〈0．0001）。结论：中国女性散发性乳腺癌存在较高频率的ERα、ERβ基因启动子异常甲基化;乳腺癌组织中ERα、ERβ失表达与其基因启动子异常甲基化有关。     

S100A4蛋白在乳腺癌中的表达和意义

目的探讨乳腺癌中S100A4的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测62例乳腺癌中S100A4表达情况,分析其表达与临床病理特征之间的关系。结果①S100A4表达率在组织学分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌中分别为45.0%(9/20)、64.0%(16/25)和88.2%(15/17),差异有统计学意义;在淋巴结转移阳性组和阴性组中分别为78.1%(25/32)和50.0%(15/30),差异亦有统计学意义。②S100A4的表达与组织学分级、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),然而与年龄、肿瘤大小、TNM分期无显著相关。结论乳腺癌中S100A4的表达与肿瘤的进展密切相关,是判断乳腺癌侵袭、预测转移趋势的有价值的指标。     

CD_(44)Ⅴ_6和P27~(kip1)基因蛋白表达对非小细胞肺癌生物学行为和预后的影响

目的探讨CD44Ⅴ6和P27kip1基因蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测63例NSCLC组织、20例正常支气管黏膜中CD44Ⅴ6和P27kip1蛋白的表达情况。结果CD44Ⅴ6在NSCLC中的阳性表达率为65·1%,而在正常支气管黏膜中无阳性表达。CD44Ⅴ6的表达与NSCLC的淋巴结转移及TNM分期有关(P<0·01)。P27kip1在正常支气管黏膜和NSCLC组织中的阳性表达率分别为80%和54%,两组比较差异有显著意义(P<0·05)。P27kip1的表达缺失与NSCLC的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移有关(P<0·05)。结论CD44Ⅴ6和P27kip1基因蛋白在NSCLC的发生、发展、转移过程中均发挥作用,可作为判断NSCLC预后的重要指标。     

乳腺癌nm23基因产物表达的研究

目的 :为了解转抑副基因nm2 3在乳腺癌发生 ,进展过程中的作用 ,应用S P免疫组织化学技术 ,兔抗NDPK多克隆抗体对 35例乳腺癌及 5例正常乳腺组织中nm2 3产物 NDPK的表达进行了检测。结果 :35例肿瘤和 5例正常乳腺上皮组织中的nm2 3 NDPK均呈阳性表达。肿瘤组织中的表达强度明显高于正常乳腺上皮组织 ,强表达缺失与肿瘤的转移行为有关。结论 :nm2 3 NDPK在乳腺癌发生和转移抑制过程中可能起重要作用     

CDC6蛋白在乳腺癌中表达及与病理指标的关系

目的：探讨乳腺癌组织中细胞分裂周期蛋白6(CDC6)表达情况,分析CDC6蛋白表达与乳腺癌临床病理特征的关系和意义。方法采用免疫组化方法检测73例乳腺癌石蜡标本中CDC6蛋白的表达,分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果 CDC6主要表达于细胞浆及细胞核中,阳性表达率：乳腺癌中65.8%;CDC6蛋白表达与淋巴结转移及组织学分级呈正相关。结论 CDC6蛋白表达与乳腺癌关系密切,检测其表达对进一步了解乳腺癌的生物学行为及判断预后有一定价值。     

乳腺癌耐药蛋白的检测及临床应用研究

目的 探讨多药耐药蛋白(P-170)在乳腺癌中的作用和地位。方法 采用免疫细胞化学染色法,检洲了33例(初治21例和复发12例)乳腺癌患者血液中的多药耐药蛋白(P-170)的表达,并进行了比较。结果 初治的乳腺癌P-170蛋白阳性表达率为14.29％,复发的乳腺癌P-170蛋白阳性表达为58.33％(P<0.01),有显著性差异,P-170蛋白检测方法具有更强 的敏感性。结论 复发组比初治组具有更普遍的抗药性,且主要是获得性抗药,P-170蛋白表达可作为临床合理地制定化疗方案,预洲化疗效果的重要参考指标。     

采用组织芯片技术研究乳腺癌中p27和cyclinE的表达

To study the expressions of p27 ,cyclinE and analysis its meaning in breast carcinoma. Methods By using tissue chip technique creating 80 cases breast carcinoma tissue chip. at the same time using the S-P immunohis-tochemical methods, the expressions of p27 and cyclinE in breast carcinoma tissue chip was studied.Results The positive rates of p27 and cyclinE were 38.8% and 52.5% in 80 eases breast carcinoma respectively. A significant correlation was found between the lowexpression of p27, overexpression of cyclinE and metastasis of lymph node in breast carcinoma. A simaificant correlation was found be-tween the lowexpression of p27 and overexpression of cyclinE in breast carcinoma. Conclusion The expression of p27 and cyclinE might be considered to be a reference indicator for prognosis of breast carcinoma. The lowexpression of p27 has an ability to effect the overexpression of cyclinE in breast carcinoma. It is feasible to utilize tissue chip for a rapid, economic and accurate screening of clinical tissue specimens on a large scale.     

乳腺癌中Her-2/neu过表达与基因扩增及意义

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,发生机理尚不十分清楚,研究表明,Her-2/neu基因扩增的乳腺癌患者手术后易复发,生存期短,并对常见的化疗药物如环磷酰胺,5- 氟尿嘧啶等不敏感。本研究用免疫组化疗法,对52例乳腺癌手术患者的癌组织,28例癌旁正常粘膜组织石蜡标本进行了Her-2/neu检测,探讨乳腺癌细胞中Her-2/neu基因数量及蛋白表达临床意义。1 材料和方法