中药复方糖耐康对KKAy糖尿病小鼠低度炎症信号通路的影响

目的:观察中药复方糖耐康对KKAy小鼠血糖、体重及低度炎症通路中关键因子的影响。方法:选取自发性2型糖尿病动物模型KKAy小鼠65只及 C57BL/6J 小鼠13只屏障系统饲养,给予高脂饲料喂养,连续给药8周后,评价静脉空腹血糖(禁食8 h以上)及体重变化,采用半定量酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)的水平。蛋白免疫印迹法检测肌肉组织核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。结果:中药糖耐康给药组中,尤其高剂量组,能够显著降低模型组血糖水平(P<0.05),具有一定控制体重增长趋势的作用; 可下调炎性因子TNF-α、IL-1β及MCP-1的水平(P<0.05),下调肌肉组织中NF-κB蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:糖耐康可能通过抑制炎症信号通路中关键炎性因子的表达水平,抑制机体低度炎症反应,从而起到改善胰岛素抵抗及抗糖尿病的作用。     

槲皮素对实验性肺结核病小鼠TLR4、TRAF6、IL-1β表达影响的研究

目的:探讨槲皮素对肺结核小鼠Toll样受体4 (Toll-like receptor 4,TLR4)、肿瘤坏死因子相关因子-6 (Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)表达的影响。方法:120只昆明系雌性小鼠,随机选取15只为空白组,其余105只建立肺结核病小鼠模型。选取模型制备成功的60只小鼠分为模型组、槲皮素低、中、高剂量组,每组15只,低、中、高剂量组分别灌胃0.4 mL浓度分别为1 mg/mL,2.5 mg/mL,5 mg/mL的槲皮素,空白组及模型组给予等量PBS,于给药8天后,检测各组小鼠体征变化,HE染色观察肺脏病理变化,用免疫组织化学法,蛋白免疫印迹法和实时荧光定量检测肺脏组织TLR4、TRAF6、IL-1β表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠皮毛暗淡无光,精神萎靡,懒动,且体质量增加量显著下降(P 0.05),肺脏炎症明显增加,TLR4、TRAF6、IL-1β蛋白及m RNA表达量显著上升(P 0.05);与模型组比较,槲皮素各剂量组能显著改善小鼠皮毛及精神状态,且体质量增加量显著增加(P 0.05),肺脏炎症明显改善;TLR4、TRAF6、IL-1β蛋白及mRNA表达量显著下调(P 0.05),且呈现药物剂量依赖性(P 0.05)。结论:槲皮素可明显减轻肺结核病造成的肺脏炎症反应,推测其机制为槲皮素抑制TLR4、TRAF6的高表达,阻碍相关炎症信号通路激活从而减少相关炎症因子的释放,抑制炎症反应,减轻组织病理损伤,起免疫调节抗感染作用。     

糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素信号转导的影响

目的:观察糖耐康对自发性2型糖尿病KKAy小鼠胰岛素抵抗及胰岛素信号转导途径中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3-K)、葡萄糖转运子4(GluT4)mRNA表达的影响。方法:将SPF级KKAy小鼠40只按血糖值随机分为模型组、糖耐康高剂量组、糖耐康低剂量组、吡咯列酮组,并选C57bl/6J小鼠为正常对照组,连续灌喂给药60 d。60 d后测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(Fins)并计算胰岛素敏感指数(ISI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),游离脂肪酸(FFA)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并对胰岛进行病理学检查。用实时定量RT-PCR法测定小鼠骨骼肌和脂肪组织中PI3-K及GluT4的mRNA的表达。结果:糖耐康高剂量组的FPG、TNF-α水平较模型组显著降低(P<0.05),高,低剂量组PI3-K及GluT4mRNA表达较模型组明显升高(P<0.05或P<0.01),且糖耐康在一定程度上能够保护胰岛β细胞,延缓β细胞衰竭,对血脂及FFA有降低趋势。结论:通过提高胰岛素信号转导受体后途径中PI3-K的表达,从而改善GluT4的转位是糖耐康改善胰岛素抵抗状态的可能作用机制之一。     

桑叶治疗2型糖尿病药效及其机制研究

目的:探讨桑叶对KKAy2型糖尿病小鼠血糖、胰岛素(Ins)敏感性及胰岛细胞Toll样受体TLR2,TLR4 mRNA表达的影响,初步探讨其降糖机制。方法:KKAy小鼠随机分为模型组、桑叶高、中、低剂量组(分别相当于含生药3.0,1.5,0.75 g.kg-1)和二甲双胍组(0.4 g.kg-1)。另设10只C57BL6小鼠为正常对照组。各给药组分别喂饲不同浓度的药物,模型组与对照组均ig等容量自来水。连续4周,末次给药后1 h取血,测定小鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)含量,分析胰岛素敏感性的变化情况。提取小鼠胰岛细胞总RNA,Real time-PCR法测定胰岛细胞TLR2,TLR4 mRNA表达。结果:桑叶各剂量能明显降低KKAy小鼠的FPG(P<0.05或P<0.01)、降低血清Ins含量(P<0.05或P<0.01),明显降低KKAy小鼠胰岛素抵抗指数与胰岛细胞TLR2,TLR4 mRNA表达(P<0.05或P<0.01)结论:桑叶有较好的降血糖、增强胰岛素敏感性等作用,其作用可能与减弱胰岛细胞TLR2,TLR4表达、抑制炎症过程有关。     

固本防哮饮对哮喘小鼠NLRP3和TLR4的影响

目的观察中药复方固本防哮饮对哮喘小鼠肺组织中炎症小体3(NLRP3)及Toll样受体4(TLR4的影响并探讨其防治哮喘机制。方法采用卵蛋白(OVA)联合人呼吸道合胞病毒(RSV)致敏激发雌性Balb/c小鼠,建立哮喘持续期小鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药组(固本防哮饮组)。苏木精-伊红染色法观察小鼠肺组织病理变化,Western blotting法及real-time q PCR法测定小鼠肺组织中NLRP3、TLR4、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白及mRNA表达,ELISA法测定小鼠肺组织、血清中IL-1(IL-1)及IL-18(IL-18)表达水平。结果模型小鼠肺组织内TLR4、IL-1β蛋白及mRNA表达均高于正常组(P 0.05),固本防哮饮组小鼠肺组织中TLR4、IL-1β蛋白、mRNA表达均低于模型组(P 0.05);肺组织中NLRP3蛋白及m RNA表达、肺组织及血清中IL-18蛋白表达3组间差异无统计学意义(P 0.05)。结论 TLR4的激活可能与哮喘持续期气道炎症持续存在有关。固本防哮饮可能通过下调TLR4,减少IL-1的释放,减轻气道炎症,从而缓解哮喘症状。     

葛根芩连汤对KKAy糖尿病小鼠TLR4/IKKβ/NF-κB信号通路的影响

目的 观察经方葛根芩连汤对KKAy小鼠部分炎性因子及脂多糖介导的炎症通路中关键靶点的影响,探讨其改善2型糖尿病的作用机制。方法 选取SPF级自发性2型糖尿病动物模型KKAy小鼠65只及对照C57BL/6J小鼠13只予屏障系统、高脂饲料喂养,随机血糖≥13.9 mmoL·L^-1,为成模小鼠44只。随机分为5组,每组11只。正常组（生理盐水20 mL?kg^-1）、阿卡波糖组（3.9 mg?kg^-1）、葛根芩连汤高、低剂量组（1.82、0.45 g?kg^-1）及模型组（生理盐水20 mL?kg^-1）,连续灌胃给药8周,1次/d,系统评价血糖及体质量。末次给药12 h后,摘眼球取血,提取血清及肌肉、肝脏组织。采用半定量酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及葡萄糖转运子4（GluT4）含量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肌肉组织IκB磷酸化激酶β（IKKβ）蛋白、核转录因子-κB（NF-κB）及肝组织Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组体质量及血糖显著升高（P<0.01）;与模型组比较,阿卡波糖组及葛根芩连汤组能够明显降低体质量及血糖水平（P<0.05,P<0.01）。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α、IL-6含量显著升高（P<0.01）,GluT4含量明显下降（P<0.05）;与模型组比较,各给药组炎性因子TNF-α、IL-6含量均有不同程度下降（P<0.05,P<0.01）,阿卡波糖组与葛根芩连汤高剂量组GluT4含量明显升高（P<0.05,P<0.01）。Western blot分析显示,与正常组比较,模型组IKKβ、NF-κB及TLR4蛋白表达均有升高（P<0.01）;与模型组比较,阿卡波糖组与葛根芩连汤组IKKβ、NF-κB及TLR4蛋白表达均明显下降（P<0.05,P<0.01）。结论 葛根芩连汤可能在调节肠道菌群的基础上,通过下调TLR4通路中关键炎性因子的水平,抑制其激活,提高GluT4的转位及活性水平,从而在一定程度上抑制炎性级联效应,改善2型糖尿病。     

平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用先卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝凝胶[AI(OH)3]腹腔注射致敏,采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后,采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位(p65)、NF-κB的抑制蛋白(IκBα)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润,上皮基底膜增厚,胶原纤维增多,平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维面积减小;与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度,肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平,气管中TLR4mRNA及蛋白表达水平均升高(均P<0.01),IκBα蛋白表达及mRNA水平降低(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低,MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调(P<0.01,P<0.05),地塞米松组IκBα蛋白表达及mRNA水平升高(均P<0.01),平喘方组IκBαmRNA水平升高(P<0.01),IκBα蛋白表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。与地塞米松组比较,平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),p65及TLR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低TLR4及MyD88活性,调控NF-κB信号通路有关。     

黄连-干姜提取物对溃疡性结肠炎小鼠结肠上皮TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察中药黄连、干姜的主要成分黄连素和6-姜烯酚对溃疡性结肠炎小鼠结肠上皮细胞炎症信号通路Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)的影响。方法:50只昆明种小鼠随机分为正常组,模型组,黄连素组(100 mg·kg^-1),6-姜烯酚组(100 mg·kg^-1),6-姜烯酚合黄连素组(200 mg·kg^-1),每组10只。采用2%葡聚糖硫酸钠口服2周建立溃疡性结肠炎小鼠模型,各组给予相应剂量的药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,给药20 d后取血清及结肠组织样本,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.01),血清IL-1β,TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,6-姜烯酚组,黄连素组,6-姜烯酚合黄连素组小鼠结肠上皮组织TLR4,NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.01),血清IL-1β,TNF-α含量显著降低(P<0.01);三组间比较,6-姜烯酚合黄连素组作用力最强(P<0.01)。结论:6-姜烯酚、黄连素均能够抑制结肠组织炎症,减轻炎症损伤,治疗溃疡性结肠炎,黄连素和6-姜烯酚联合应用有显著的协同增效作用,其机制与抑制TLR4/NF-κB通路的过度活化进而调节肠道非可控性炎症有关。     

黄柏碱对细菌性阴道病小鼠模型的保护作用

目的探讨黄柏碱改善实验性细菌性阴道病小鼠的作用及机制。方法采用大肠杆菌-金黄色葡萄球菌混合液制备细菌性阴道病模型。ig不同剂量黄柏碱(10、20、40 mg/kg)进行干预治疗,对照组、模型组每日ig等量生理盐水。7 d后观察阴道黏膜病理学变化,ELISA法检测阴道分泌物中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及子宫组织中前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)水平,Western boltting法检测组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Toll样受体4(TLR4)及核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果黄柏碱可有效减轻模型小鼠阴道黏膜病变,显著降低模型小鼠阴道中IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α等炎症因子含量,下调子宫组织中PGE2、PGF2α水平及MMP-9、TLR4、NF-κB蛋白表达水平。结论黄柏碱可有效改善细菌性阴道炎模型小鼠阴道炎症,同时抑制TLR4/NF-κB信号通路,从而改善细菌性阴道病及相应早产风险。     

补肾活血方对帕金森病模型小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨补肾活血方对帕金森病(PD)模型小鼠神经炎症的抑制效应及其机制。方法将36只雄性C57/BL小鼠随机分为3组(正常组、模型组、中药组),每组12只。模型组和中药组小鼠采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)法建立PD模型,造模成功后中药组予补肾活血方灌胃治疗14天(0.3 mL/d),同时正常组和模型组予等量生理盐水灌胃。选择爬杆试验和Morris水迷宫试验评估小鼠行为学变化。采用Western Blot法检测各组小鼠黑质致密部Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Caspase-3蛋白表达,并用免疫组化法测定各组小鼠脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)的阳性表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠在爬杆实验中转向时间和爬下时间均增加(均P<0.01),在水迷宫实验中逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01);与模型组比较,中药组小鼠爬下时间减少(P<0.01),逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠TH阳性神经元数目减少(P<0.01),信号通路蛋白TLR4、NF-κB p65、炎症因子IL-6、TNF-α及凋亡蛋白Caspase-3的表达水平均升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药组小鼠TH阳性神经元数目增加(P<0.05),TLR4、NF-κB p65、IL-6、TNF-α及Caspase-3的表达均下调(P<0.05)。结论补肾活血方能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,进而降低炎性因子和Caspase-3蛋白表达,减轻炎症反应,抑制细胞凋亡,减少DA能神经元损伤。补肾活血方对PD模型小鼠具有神经保护作用,并能够改善PD小鼠运动协调及学习记忆能力。     

探索游戏疗法在儿童自闭症康复中的应用

对自闭症儿童的治疗一直是自闭症研究的重要课题之一,也是该领域研究的热点和难点.文章通过对自闭症儿童的异常行为表现及游戏疗法对儿童发展的影响进行分析,探讨游戏疗法对自闭症儿童康复训练的重要性.通过游戏能够满足儿童的愿望、使受压抑的情绪、冲动得到发泄,以促进自闭症儿童认知、语言、情感等方面的健康发展,并还能增加患儿对康复治疗的兴趣,发挥主动性,积极配合治疗和训练.     

N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲在大鼠体内的药动学研究

 目的 研究N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲(BBU)给药后药物在大鼠体内的血浆药动学特征,为新药开发提供参考依据。方法 单剂量600 mg·kg^-1N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲口服给药,应用高效液相色谱法测定大鼠体内N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲的浓度。结果 大鼠灌胃给予600 mg·kg^-1 N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲后,大鼠血浆中N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲的AUC_0-t和AUC_0-∞分别为110.55和122.79 mg·h·L^-1;t_1/2z和t_max平均值分别为3.71和3.67 h,ρ_max为17.49 mg·L^-1;N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲的CLz/F为4.97 L·h^-1·kg^-1,Vz/F为26.10 L·kg^-1,MRT_0-∞为6.71 h。结论 N-(4-溴苄基)-N-(4-溴苄氧基)脲一室模型和二室模型拟合效果参数非常接近,两种模型都可选择,但以二室模型为好。     

微管蛋白聚合抑制剂Combretastatin A4衍生物的研究进展

 目的 重点综述近5年来Combretastatin A4(CA-4)衍生物的研究进展。方法 通过对国内外文献的分析、整理和归纳,较为全面地介绍了具有抗癌活性的微管蛋白聚合抑制剂CA-4衍生物的研究现状。结果与结论 具有抗癌活性的天然产物CA-4结构简单,作用机制新颖,以它为先导化合物研究出了许多的类似物,并筛选出一些新药候选物,而且对其衍生物的研究也为此类化合物作用机制研究提供了帮助。     

4-色酮类和4-色满酮类化合物生物活性研究概况

 目的　综述4-色酮类和 4-色满酮类化合物生物活性的研究概况。方法　以国内外有代表性的论文为依据 ,进行分析、整理和归纳。结果与结论 4-色酮类和4-色满酮类化合物具有抗炎和抗变态反应、抗血小板聚集、抗癌和抗精神病等生物活性 ,随着人们对这两类化合物研究的深入 ,将会有更多的有关新药被开发。     

4-氧和4-羟四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物抗脂质过氧化作用研究

 目的:对6种四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物(4-TEMPO)抗脂质过氧化作用进行了实验研究,为其进一步研究及应用于临床作为抗自由基损伤药物提供依据。方法:用Fe²⁺-VitC引发大鼠肝细胞膜、心肌细胞膜、肝线粒体的脂质过氧化,通过TAB比色法测定丙二醛(MDA)含量观测了4-TEMPO抗脂质过氧化作用。结果:OTMPO(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPO(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPOH(4-羟-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)、OTMPOH(4-氧-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)有较强的剂量依赖性抑制MDA产生的作用,且OTMPOH,HTMPOH较OTMPO,HTMPO作用强,而OTMP(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶)、HTMP(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶)无效。结论:4-TEMPO有较明显的对抗脂质过氧化作用,作为一种临床抗自由基引起的脂质过氧化损伤的药物研究及开发利用,可能有广泛的前景。     

治疗急性粒-单细胞性白血病4例报道

吴翰香教授治疗急性粒-单细胞性白血病4例，报道基本治疗过程。其中有2例因化疗过量，导致仅存活3年余，另2例化疗适可而止，坚持长期中药治疗，已分别存活8年、4年以上。说明化疗过量之危害与弊端，中药结合适度化疗疗效较好。     

程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在胃癌中作用的研究进展

程序性细胞死亡因子4(PDCD4)是新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因,主要通过蛋白转录及翻译过程来抑制肿瘤细胞生长,也是第1个被发现作用于蛋白翻译阶段的肿瘤抑制物,研究表明其与胃癌的发生发展及预后密切相关,从PDCD4抗肿瘤机制、胃癌中表达、多基因关系、中药干预治疗胃癌后影响等多方面对其进行综述,为未来胃癌的中西医治疗提供一个潜在分子靶点。     

公孙穴在妇科病中的临床应用

本研究概述了公孙穴的穴性及在古代与现代妇科病中的临床应用,公孙穴既是足太阴脾经的络穴,又与八脉交会穴之冲脉相通,故临床上与脾经、冲脉相关的妇科病证取公孙穴多见奇效。