一种简便快速的液相色谱串联质谱法用于人体内血尿样品中奈诺沙星浓度的测定

目的建立一种简便快速高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)的方法用于测定人血浆和尿液中奈诺沙星药物浓度。方法色谱柱为Waters Symmetry RP1 8柱(50mm×2.1 mmm,5μm),以加替沙星为内标,血浆和尿液样品测定采用0.1%甲酸乙腈混合溶液为流动相,比例分别为82:1 8和85:1 5,流速均为0.2 mL/min。采用蛋白沉淀法处理血浆样品,以液液萃取法清除尿液样品中杂质。ESI源正离子选择性反应临测(SRM),奈诺沙星检测通道:m/z 372.4→m/z354.1,内标检测通道:m/z376.1→m/z 332.2。结果本方法测定血浆和尿液中的奈诺沙星的线性范围均为5～100ng/mL,最低检测浓度均为5ng/mL血浆和尿液的奈诺沙星提取回收率分别为(98.49±4.69)%和(84.92±6.81)%,且血浆和尿液的RSD)分别小于或等于4.31%和9.76%。奈诺沙星血浆样品的方法日内、日间准确度分别为(99.27～103.75)%和(100.40～106.36)%;而尿液样品的方法日内、日间准确度依次为(103.52～11 5.94)%和(9 9.50～1 10.96)%,且基质效应、精密度、稳定性等均通过方法学验证。并已用于该药的人体药动学研究中药物浓度的测定。结论本方法操作简便、迅速,特异性强,灵敏度高,准确性好,符合奈诺沙星人体药物动力学研究中血尿样测定的方法学要求。     

同时测定血浆血管紧张素Ⅰ、Ⅱ和醛固酮的液相色谱 串联质谱法的建立与评价

目的 建立同时测定血浆中血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(Aldo)的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法。方法 将200μL血浆和温育液在37℃温育3 h后，加入同位素内标，用固相萃取法提取各激素。通过LC-MS/MS分析AngⅠ、AngⅡ和Aldo,最终用标准曲线定量。结果 AngⅠ、AngⅡ和Aldo的线性范围分别为0.2～50.0、0.002～0.500、0.02～5.00 ng/mL,定量限(LOQ)为0.2、0.002、0.02 ng/mL。3种分析物的回收率在91%～103%之间。方法灵敏度高、重现性好，变异系数(CV)分别为1.4%～4.6%(AngⅠ)、2.1%～5.1%(AngⅡ)、2.4%～5.2%(Aldo)。健康人血浆中AngⅠ、AngⅡ、Aldo的浓度范围分别为1.4～11.8、0.003～0.016、0.02～0.20 ng/mL。方法无明显基质效应和携带污染。结论 建立了一种可同时准确、快速测定血浆AngⅠ、AngⅡ和Aldo的LC-MS/MS方法。     

可溯源干血片样本类固醇激素标准曲线的建立

目的 建立可溯源的干血片样本19种类固醇激素液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)标准曲线。方法收集乙二胺四乙酸抗凝新鲜全血,用0.9%NaCl溶液清洗血细胞,将清洗后的血细胞和无类固醇激素的血浆按0.55∶0.45比例混合,制备模拟全血。根据拟制备标准曲线浓度添加不同量类固醇激素至模拟全血样本中,制备不同浓度的类固醇激素标准曲线干血片。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测各标准曲线干血片类固醇激素含量,分析其线性范围,并对类固醇激素标准曲线干血片进行性能验证。结果 类固醇激素标准曲线干血片中孕烯醇酮、孕酮、可的松、脱氢表雄酮的线性范围为0.25～100 ng/mL,11-脱氧皮质酮、21-脱氧皮质醇、18-羟皮质醇、11-酮睾酮的线性范围为0.05～20ng/mL,皮质酮、11-羟睾酮的线性范围为0.025～10 ng/mL,17-羟孕酮、18-羟皮质酮、11-脱氧皮质醇、雄烯二酮、11-羟雄烯二酮、睾酮的线性范围为0.1～40 ng/mL,皮质醇的线性范围为1.5～600 ng/mL,17-羟孕烯醇酮的线性范围为0.2～80 ng/mL,硫酸脱氢表雄酮的线性范围为25～1...     

LC-MS/MS法同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度

目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI~+)(m/z:271.5204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1～20 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 2),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N10)。异欧前胡素浓度在0.05～10 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 9),定量下限0.05 ng/mL(S/N10),基质效应为94.89%～110.70%,方法学回收率为94.3%～104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别4.91%、5.26%,期间CV分别16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。     

检测人血清中5-羟色胺的高效液相色谱-串联质谱技术方法

目的建立一种快速、灵敏地测定血清中5-羟色胺的高效液相色谱-串联质谱技术方法(LC-MS/MS)。方法采用同位素内标稀释法,直接沉淀蛋白,采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×50 mm,3.5μm),大气压化学电离源(APCI),正离子模式,选择5-HT的特征离子对177.1/160.0,内标d4-5-HT的特征离子对181.1/164.0。结果 5-HT在10~2000 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.9996),定量下限为10 ng/ml,提取回收率85%,日内和日间精密度15%。结论本LC-MS/MS技术方法准确可靠、重现性好,灵敏度高,适用于人血清样品中5-HT的浓度测定。     

液相色谱串联质谱法和电化学发光免疫分析法检测25-羟维生素D的一致性评价

目的 比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清中25-羟基维生素D(25(OH)D)结果的相关性和一致性,以期指导临床选择合适的检验方法。方法 收集该实验室临床血清标本94例,分别用LC-MS/MS和ECLIA这两种方法检测25(OH)D。采用Passing-Boblok回归分析两种方法的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性。以血清25(OH)D<20.0 ng/mL为维生素D缺乏,20.0～<30.0 ng/mL为维生素D不足,使用Kappa分析判断两种方法的诊断维生素D营养状况的符合率。结果 LC-MS/MS与ECLIA检测25(OH)D结果分别为(26.67±4.79)ng/mL和(39.33±4.09)ng/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测25(OH)D浓度的回归方程为Y_ECLIA=-4.558 1+1.719 8X_LC-MS/MS,斜率为1.719 8(95%CI 1.586 3～1.828 4),不包...     

比格犬致命鹅膏急性肝毒性实验研究

目的 建立比格犬致命鹅膏(Amanita exitialis)急性肝毒性模型,探讨含鹅膏肽类毒素蘑菇急性中毒性肝功能衰竭的特点,以期为含鹅膏肽类毒素的蘑菇中毒实验研究提供帮助.方法 UPLC-MS/MS(超高效液相色谱串联质谱)法测定致命鹅膏干粉中鹅膏肽类毒素含量,胶囊喂饲比格犬60 mg/kg体质量致命鹅膏干粉,观察其变化,通过检测凝血及肝肾功能、肝脏病理以及血浆和尿液中鹅膏肽类毒素含量,用于比格犬致命鹅膏急性肝毒性模型观测指标.结果 本研究所用致命鹅膏干粉中鹅膏肽类毒素总含量为(3 482.6±124.94) mg/kg.模型犬在12～48 h出现呕吐、腹泻等症状,染毒后24h,模型犬ALT、AST、TBIL、ALP、PT和APTT水平出现明显升高,染毒后36 h,ALT、AST、PT和APTT水平达到峰值[(ALT (283.2±112.9),AST(223.9±93.8),PT (132.9±152.6)s,APTT (131.4 ±153.9)s,染毒后48 h,TBIL和ALP值达到峰值[(TBIL(23.3±14.6)μmol/L,ALP (274.5 ±115.5) U/L],模型犬TBIL、TP和APTT在染毒后1周恢复至正常水平,ALT、AST和ALP在染毒后3周恢复至正常水平.染毒后24～72 h死亡3只,肝脏病理检查显示弥漫性肝细胞出血性坏死.染毒后24 h内,血浆中可检测到鹅膏肽类毒素;染毒后96h内,尿液中可检测到鹅膏肽类毒素.结论 鹅膏肽类毒素可引起肝细胞出血性坏死,导致急性肝功能衰竭,该模型符合含鹅膏肽类毒素蘑菇致中毒性肝功能衰竭临床病理生理特点,可应用于含鹅膏肽类毒素蘑菇中毒的诊断和治疗研究.     

HPLC-MS/MS检测急性百草枯中毒患者血浆的方法及意义

目的探讨高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测急诊百草枯中毒患者血浆中百草枯水平的可靠性和优越性。方法采用Phenomenex Kinetex mHILIC色谱柱(100.0mm×2.1mm,2.6μm),以1%甲酸铵水溶液(含甲酸铵250mmol/L)和乙腈分别为流动相A、B,建立HPLC-MS/MS(流速0.35mL/min、检测波长258nm、柱温40℃),通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆百草枯水平。结果 54.28～13 190.00ng/mL百草枯的线性关系良好(R~2=0.999 9),批内、批间RSD均10%。63例急性百草枯中毒患者血浆百草枯水平平均为2 820ng/mL,死亡组水平显著高于存活组(P0.05)。结论 HPLC-MS/MS能快速、准确、可靠检测急诊百草枯中毒患者血浆的百草枯水平,对患者的治疗具有指导意义。     

液相色谱串联质谱技术在载脂蛋白E室间质量评价中的应用

目的探讨液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)在载脂蛋白E(apo E)室间质量评价中的应用。方法分别将5份混合人血清样品冷链运送到76家实验室,用免疫比浊法(ITA)进行单次检测。以同位素标记精氨酸的肽段为内标,对标本进行变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理,液相色谱部分采用SB-C18色谱柱分离,质谱部分采用正离子模式和多反应监测定量。JMP13.0软件分析不同方法分组所对应的相对偏倚。结果对于所有样品,ITA检测apo E的方法组内不精密度在1.7%至20.4%之间。总不精密度在8%左右(s B~s E样品)。5个样品相对偏倚的均值分别是(按照样品浓度由低到高排列):-34.2%、-9.4%、-9.8%、-2.7%和-2.1%。高浓度样品比低浓度样品更接近LC-MS/MS检测结果。结论 LC-MS/MS检测apo E可评价免疫法的准确性,为临床应用提供帮助。     

人血浆百草枯高效液相色谱-串联质谱法的建立与评价

目的建立测定人血浆百草枯浓度的高效液相色谱-串联质谱法并评价。方法用甲醇蛋白质沉淀法对血浆样品预处理后,以乙腈-水(含200 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸)为流动相梯度进样,流速为0.4 mL/min。通过色谱柱(Waters XBridge BEH HILIC,2.5μm,2.1 mm×100 mm)分离样品。以ESI正离子模式、多反应离子监测(MRM)模式监测百草枯(m/z 186.1→171.1作为定量离子对)。用该方法检测临床患者血浆百草枯浓度,用ROC曲线评价血浆百草枯浓度和百草枯中毒严重指数(SIPP)对临床结局的判断价值。结果血浆百草枯浓度在50～10 000 ng/mL时,线性关系良好(R~2=0.997),最低定量下限为50 ng/mL。低(100 ng/mL)、中(2 000 ng/mL)、高(8 000 ng/mL)3个浓度水平质控品的不精密度均符合要求,且无基质效应。处理后样品室温放置6 h内稳定,样本反复冻融3次对结果无影响。31例中毒患者SIPP为17.76(0.30～90.91)h·mg/L,死亡组SIPP高于存活组(P0.05)。SIPP的ROC曲线下面积为0.889,最佳临床临界值为11.679 h·mg/L。结论本法灵敏、准确、快速、特异性好,适用于临床检测百草枯中毒患者。     

中国含鹅膏毒肽蘑菇中毒临床诊断治疗专家共识

蘑菇中毒是影响公众健康最突出的公共卫生问题之一[1]。在中国,含鹅膏毒肽蘑菇中毒死亡人数超过蘑菇中毒总死亡人数的90%[2-3]。含鹅膏毒肽蘑菇中毒是指因食用含有鹅膏毒肽的蘑菇所引起的以急性肝损伤为主要特征的一种疾病[4]。该疾病进展快、病情复杂、病死率高。为此,来自临床医学、公共卫生学、生物分类学、毒理学等领域的专家,通过文献复习和对诊治实践总结,经反复交流磋商,形成此专家共识,供临床医生和相关专业人员参考。在研究过程中认识到,此领域存在高质量研究报告较少,临床实践积累不规范,系统规范研究时间短等问题,故本共识为中国专家对含鹅膏毒肽蘑菇中毒诊治阶段性的认识。     

液相色谱串联质谱法和循环酶法测定血清中同型半胱氨酸的相关性

目的分析液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法与循环酶法测定人血清中同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)浓度的相关性。方法收集63例患者的血清样本,用LC-MS/MS法和循环酶法分别测定相同样本的HCY浓度,并评价2种方法的相关性。结果 LC-MS/MS法与循环酶法对HCY浓度测定的结果分别为(19.11±15.69)μmol/L和(16.95±14.41)μmol/L,差异有统计学意义(t=6.25,P0.05)。2种方法的线性回归方程为YLC-MS/MS法=1.074X循环酶法+0.892,相关系数(R)=0.987,相关性较好。结论 LC-MS/MS法与循环酶法测定血清中HCY浓度的相关性较好,LC-MS/MS法适用于临床对HCY的检测。     

LC-MS/MS法和HPLC法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度的对比研究

目的 验证液质联用质谱(LC-MS/MS)法和高效液相色谱(HPLC)法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度结果的可靠性,并分析两种方法检测结果的差异性.方法 对实验室目前在用的LC-MS/MS法和HPLC法检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度的方法学进行验证,合格后再分别对该院住院患者的60份血清标本进行相关检测.采用配对t检验、Pearson相关分析、散点图和Bland-Altman偏差图对其检测结果的相关性及差异进行评价.结果 LC-MS/MS法和HPLC法的方法学验证均符合要求,检测结果呈正相关;LC-MS/MS法和HPLC法检测利培酮和九羟利培酮结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);LC-MS/MS法检测利培酮与九羟利培酮的结果分别比HPLC法检测结果高1.97和1.38 ng/mL,95％ 置信区间分别为-5.81～9.74、-10.28～11.66.结论 LC-MS/MS法和HPLC法可同时运用于日常检测人血清中利培酮和九羟利培酮血药浓度,检测结果可靠但存在差异,如果是需要长期监测的患者建议一直选用同一种方法检测.     

HILIC-UPLC-MS/MS在两起河豚中毒事件病因确证和病情预测中的应用研究

目的 建立河豚毒素(TTX)亲水液相色谱串联质谱检测方法,查明两起食物中毒事件原因,根据TTX摄入量和体内残留量对患者病情进行预测,并实施抢救,为此类中毒事件处置提供参考。方法 运用亲水液相色谱串联质谱技术对食物和人体样本中的TTX进行检测,评估患者毒素摄入量和体内残留量,预测患者病情和预后情况。结果 方法准确性、重现性和灵敏度良好。TTX在10～200 ng/mL水平,线性相关系数r>0.999。血液中TTX回收率为80%～103%,鱼肉中TTX回收率为75%～87%,相对标准偏差为5.3%～9.2%。血液和鱼肉中TTX检出限分别为0.2 ng/mL和3.7μg/kg。案例1中患者A的TTX摄入量约为0.28 mg,患者B摄入量约为0.04 mg。洗胃后,二者血液中TTX降为摄入量的10%,远远低于致死剂量(0.5 mg),患者预后良好。相反,案例2中,洗胃后患者C血液中TTX残留量为1.9 mg,远远高于致死剂量(0.5 mg),患者死亡。结论 该研究建立的亲水液相色谱串联质谱技术不仅可以为河豚中毒的诊断提供定性确证依据,还可以测定食品及人体中TTX水平,为TTX摄入量、体内...     

液相色谱串联质谱法检测人血清雌酮、雌二醇

目的建立同时测定人血清中雌酮(E1)及雌二醇(E2)水平的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法,并初步应用于临床血清样品的雌激素检测。方法血清样品经乙酸乙酯提取,丹磺酰氯衍生化后进行LC-MS/MS分析。用Agilent ZORBAX SBC18色谱柱进行线性梯度洗脱,流动相为乙腈(0.05%甲酸)-水(0.05%甲酸),流速为0.3 m L/min。用多重反应离子监测(MRM)正离子模式对血清中的E1、E2进行质谱检测,并根据"生物样品定量分析方法验证指导原则(中国药典,2015)"对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、精密度、提取回收率和稳定性等进行评价。用本法对172例健康成年女性血清标本进行E1、E2检测,用百分位数法计算不同月经周期E1、E2的浓度区间。结果 LC-MS/MS法可同时检测人血清中E1、E2的含量,在0.05~10 nmol/L范围内线性关系良好。该法的定量限为0.05 nmol/L,日内与日间不精密度均小于15%,稳定性良好。初步临床应用显示,用LC-MS/MS法计算所得的E1、E2浓度区间符合女性月经周期生理性变化规律。结论 LC-MS/MS法能有效分离并定量检测人血清中E1、E2的浓度水平,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,有望作为临床血清雌激素检测的参考方法。     

同位素稀释液相色谱-串联质谱法检测血清睾酮候选参考方法的建立及应用

目的建立基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术的血清睾酮候选参考方法,并采用该方法对临床常规检测方法(微粒子化学发光法)的正确性进行评价。方法采用睾酮-2,3,4-~(13)C_3作为内标,以等体积比的正己烷-乙酸乙酯溶液对样本进行液液萃取,上清液采用氮气吹干后用流动相复溶,进行LC-MS/MS分析。采用五点包括法计算血清睾酮浓度。参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和EP15-A3文件对建立的同位素稀释液相色谱-串联质谱(ID-LC-MS/MS)方法进行性能评价(方法残留、特异性、线性范围、精密度、准确度),参考CLSI EP9-A3文件对微粒子化学发光法的正确性进行评价。结果建立的ID-LC-MS/MS方法检测血清睾酮的分析时间为5min,特异性好,无残留,线性范围为0.034～22.00ng/mL,批内不精密度≤2.3%,批间不精密度≤2.2%,测定有证参考物质SRM971(Level male)的相对偏移为0.2%,测定2017 RELA-A、2017 RELA-B样本的相对偏移分别为-2.9%、-3.3%,测定2017 RELA-A样本的不确定度为0.11 ng/mL。微粒子化学发光法与ID-LC-MS/MS的相关性较好(r=0.963),但偏差较大[总平均偏差为-24.4%,低浓度样本(≤1 ng/mL)平均偏差为-62.4%,高浓度样本(1 ng/mL)平均偏差为6.3%]。结论成功建立了检测血清睾酮的ID-LC-MS/MS候选参考方法。该方法的精密度、准确度均较好,且操作简单,分析时间短。     

液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证

液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)是近年来发展极为迅速的新技术。该技术结合了液相色谱的高分离性能和质谱的高敏感性、高特异性等优势,被广泛应用于化工、生物、医药、食品、临床医学、环境等领域。在临床检验和诊断领域,LC-MS/MS作为传统诊断技术的补充,可提供更为准确、可靠的依据,使许多疾病得到准确、快速的诊断。文章结合目前已公布的LC-MS/MS方法相关验证指南、文献及实际操作经验,系统介绍了LC-MS/MS方法开发的关键流程,并以25-羟基维生素D3 [25(OH)D3]为实例介绍方法验证的关键要素,为LC-MS/MS技术临床应用方法的建立、验证和实施提供参考。     

液相色谱串联质谱法分析血清中脂溶性维生素的性能评价及临床应用

目的 建立液相色谱串联质谱法定量分析血清中脂溶性维生素的方法,并进行性能分析评价以及初步临床应用。方法 采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素含量,并检测2022年11月至2023年11月在苏州大学附属第一医院产科门诊产检的1 113例孕妇血清中的脂溶性维生素。参照《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》进行血清中脂溶性维生素高效液相色谱串联质谱检测方法的方法学验证。结果 液相色谱串联质谱法定量检测血清中脂溶性维生素,包括维生素A、维生素E、维生素D2、维生素D3、维生素K1,线性范围分别为40～4 000 ng/mL、0.5～50μg/mL、2～200 ng/mL、5～250 ng/mL、0.1～10 ng/mL,检出限分别为2.50 ng/mL、0.10 ng/mL、0.40 ng/mL、1.00 ng/mL、0.02 ng/mL,定量下限分别为10.00 ng/mL、0.50 ng/mL、1.00 ng/mL、5.00 ng/mL、0.10 ng/mL,批内变异系数(CV)和批间CV均小于15%,回收率分别为91.25%～107.18%、90.00%～105.51%...     

引起我国首例婴儿肉毒中毒丁酸梭菌全基因组序列分析

  目的  对我国首次分离自婴儿肉毒中毒病例粪便样品的1株产E型肉毒毒素的丁酸梭菌进行全基因组测序，解析菌株产毒的遗传学特性。  方法  对从婴儿肉毒中毒病例粪便样品中分离的产E型肉毒毒素丁酸梭菌分离株TJ-S提取基因组DNA，利用Pacific Biosciences RSⅡ 平台对菌株进行全基因组测序，并进行序列分析。  结果  TJ-S基因组由一个染色体和一个质粒组成，大小分别为3 949 987 bp和747 151 bp。 GC含量分别为28.8%和28.2%。 染色体上携带产肉毒毒素的bont/e基因，该基因位于典型orfX基因簇内，且在基因簇上游存在3个转座酶编码基因。 遗传进化分析发现，菌株TJ-S在亲缘关系上与引起英国婴儿肉毒中毒的2株产E型肉毒毒素的丁酸梭菌分离株最为接近。  结论  丁酸梭菌携带的产E型肉毒毒素基因位于稳定的orfX基因簇内，可引起人类肉毒中毒。 本报道是我国第一次对产E型肉毒毒素丁酸梭菌进行全基因组学分析。