母—胎免疫识别低下型反复自然流产的供者及配偶白细胞免疫 …

比较供者及配偶白细胞免疫疗法治疗母－胎免疫识别低下型反复自然流产的临床疗效。方法将４０例封闭抗体缺乏的ＲＳＡ患者随机分成两组,分别采用供者白细胞与配偶白细胞行免疫治疗,封闭抗体及抗其独物型抗体分析采用单向混合淋巴反应封闭试验,单向混合淋巴细胞反应封闭抑制试验,细胞毒试验及封闭抗体的流式细胞分析。结果经供者或配偶白细胞后,封闭抗体扩抗其独特体呈明显升高（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。再次妊娠成功或配     

妊娠丢失与抗磷脂抗体的关系

目的探讨妊娠丢失与抗磷脂抗体［ＡＰＡ,包括抗心磷脂抗体（ＡＣＡ）和狼疮抗凝抗体（ＬＡ）］的关系。方法对１２２例有不明原因妊娠丢失史的患者（研究组）和１００例正常非孕妇女（对照组）,分别采用酶联免疫吸附法和活性部分凝血酶原时间法,测定静脉血清中的ＡＰＡ。其中,研究组分为胚胎停育组（２８例）、死胎组（３１例）和复发性流产组（６３例）。结果整个研究组中ＡＰＡ、ＡＣＡ、ＬＡ的阳性百分比均高于对照组,与对照组相比,差异均有显著性（Ｐ＜０．０５～０．００１）。死胎组和复发性流产组此３项指标的阳性百分比分别与对照组比较,差异有显著性（Ｐ＜０．０５～０．００１）,而胚胎停育组与对照组相比,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ＡＰＡ与妊娠丢失有关,尤其是复发性流产和死胎。因此,应对有不良孕产史的患者常规筛查ＡＰＡ,以利于尽早对因治疗。     

妊娠肝内胆汁淤积症患者雌孕激素水平及免疫功能的变化

目的探讨雌孕激素水平及免疫功能变化与妊娠肝内胆汁淤积症（ＩＣＰ）的关系。方法采用放射免疫法、单向免疫扩散法、碱性磷酸酶及抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）检测ＩＣＰ孕妇５０例（ＩＣＰ组）及正常妊娠妇女５０例（对照组）雌孕激素水平的变化、体液免疫和细胞免疫功能的水平。结果ＩＣＰ组雌激素水平（２５．８９±６．８５μｇ／Ｌ）较对照组（１６．９２±４．９８μｇ／Ｌ）明显升高,（Ｐ＜０．０１）,孕激素水平差异无显著性（Ｐ＞０．０５）;ＩＣＰ组细胞毒性抑制性Ｔ细胞（ＣＤ８＋）水平（１９．０６±１．９３％）较对照组（２６．４３±２．８９％）降低（Ｐ＜０．０５）,辅助性诱导性Ｔ细胞（ＣＤ４＋）与ＣＤ８＋比值（２．２３±０．３８）较对照组（１．７３±０．２３）升高（Ｐ＜０．０５）;雌激素水平与ＣＤ８＋呈负相关,与ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值呈正相关。结论ＩＣＰ患者雌激素水平增高,雌激素通过ＣＤ８＋上的雌激素受体而发挥作用,导致免疫功能的改变,而引起ＩＣＰ的发生     

抗心磷脂抗体对体外受精—胚胎移植的影响

目的探讨血清抗心磷脂抗体对体外受精－胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）中胚胎着床的影响。方法采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ法）对１９９４年１１月至１９９６年５月共１５０个ＩＶＦ－ＥＴ周期（１５０例）中女性血清中抗心磷脂抗体（ＡＣＡ－ＩｇＧ、ＩｇＭ类）进行测定,同时观察ＩＶＦ－ＥＴ周期的妊娠结局。结果２１个ＡＣＡ阳性周期的临床妊娠率为９．５％,明显低于１２９个ＡＣＡ阴性周期的临床妊娠率２６．３％（Ｐ＜０．０５）。１５例生化妊娠者的血清ＡＣＡ阳性率为２０．０％,９９例未妊娠者的ＡＣＡ阳性率为１６．２％,两者ＡＣＡ阳性率均高于３６例临床妊娠者的５．６％（Ｐ＜０．０５）。生化妊娠者与未妊娠者的ＡＣＡ阳性率比较,差异无显著性（Ｐ＞０．２５）。结论女性患者体内ＡＣＡ可能干扰了ＩＶＦ－ＥＴ中胚胎着床和胚胎着床后的早期发育,体内自身抗体的存在也是ＩＶＦ－ＥＴ失败的原因之一。     

妊高征患者胎盘中一氧化氮合酶-mRNA转录强度的变化及意义

目的探讨妊高征患者胎盘中内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）含量减少的原因。方法采用定量的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术,检测９例正常足月妊娠妇女胎盘和１２例妊高征患者胎盘中ｅＮＯＳｍＲＮＡ转录强度的变化。结果（１）正常足月妊娠妇女胎盘和妊高征患者胎盘中均存在ｅＮＯＳｍＲＮＡ。（２）妊高征患者胎盘中ｅＮＯＳｍＲＮＡ的转录强度显著低于正常足月妊娠妇女（Ｐ＜０．０５）。结论妊高征患者胎盘中ｅＮＯＳ含量的减少是由于ｅＮＯＳｍＲＮＡ转录强度下降所致。     

自身免疫性卵巢功能衰退小鼠体液免疫和细胞免疫的测定

目的探讨自身免疫性卵巢功能衰退者体液免疫和细胞免疫的变化。方法在建立自身免疫性卵巢功能衰退小鼠动物模型基础上,测定血自身抗卵巢抗体（ＡＯＡ）和Ｔ细胞亚群变化。结果自身免疫性卵巢功能衰退小鼠辅助性诱导性Ｔ细胞（ＣＤ＋４）无明显变化,而细胞毒性抑制性Ｔ细胞（ＣＤ＋８）百分比明显下降（Ｐ＜０．０１）,ＣＤ４／ＣＤ８比率明显增加（Ｐ＜０．０５）;血清ＡＯＡ阳性,并导致卵巢组织病理性损伤,性激素产生减少,生育率降低。结论Ｔ细胞亚群比例失调、Ｂ细胞功能增强,是导致自身免疫性卵巢功能衰退的免疫病理基础     

稳定期系统性红斑狼疮孕妇外周血淋巴细胞亚群及白细胞介素-2受体的变化

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）孕妇在ＳＬＥ稳定期外周血中的Ｔ淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞（ＮＫ细胞）及可溶性血清白细胞介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）的改变。方法：采用流式细胞仪对１４例ＳＬＥ稳定期（仅服用小剂量激素）的患者妊娠时（ＳＬＥ＋ＮＰ组）的Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞进行检测，同时用固相酶联反应法（ＥＬＩＳＡ）检测其ＳＩＬ－２Ｒ。并以１８例稳定期ＳＬＥ未孕妇女（ＳＬＥ组）、２０例正常未孕妇女（ＮＮＰ组）和２０例正常孕妇（ＮＰ组）作对照。结果：ＳＬＥ＋ＮＰ组的辅助性－诱导性Ｔ细胞（ＣＤ４＋）细胞数量较其他３组有明显下降（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ４＋／细胞毒性－抑制性Ｔ细胞（ＣＤ８＋）值，ＳＬＥ＋ＮＰ组较ＳＬＥ组和ＮＮＰ组有显著下降（Ｐ＜０．０１），ＮＰ组也有下降，ＳＬＥ＋ＮＰ组和ＮＰ组之间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ＮＫ细胞数在４组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；ＳＬＥ＋ＮＰ组ＳＩＬ－２Ｒ有明显增高（Ｐ＜０．０１），其他３组变化不显著（Ｐ＞０．０５）。结论：ＳＩＬ－２Ｒ和ＣＤ４＋细胞数量变化可能对判断稳定期ＳＬＥ孕妇病情进展有重要作用     

孕妇血清中抗心磷脂抗体水平对围产儿的影响

目的：探讨孕妇血清抗心磷脂抗体（ａｎｔｉｃａｒｄｉｏｌｉｐｉｎａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡＣＡ）水平增高对围产儿的影响。方法：用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定２０８份健康孕妇的血清ＡＣＡ－ΙｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＡ结合指数，观察ＡＣＡ水平与小于胎龄儿、胎儿窘迫及新生儿窒息的关系。结果：小于胎龄儿组和围产儿缺氧组的ＡＣＡ－ＩｇＭ、ＩｇＡ结合指数显著高于对照组（Ｐ＜０．００１～Ｐ＜０．０５），而ＡＣＡ－ＩｇＧ结合指数差异无显著性（Ｐ＞０．２）；小于胎龄儿组的ＡＣＡ－ＩｇＡ结合指数显著高于围产儿缺氧组（Ｐ＜０．０２），但ＡＣＡ－ＩｇＭ和ＩｇＧ结合指数差异无显著性（Ｐ＞０．１，Ｐ＞０．５）；胎儿窘迫、新生儿窒息及胎儿窘迫合并新生儿窒息时，孕妇血清ＡＣＡ－ＩｇＭ、ＩｇＡ和ＩｇＧ结合指数差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：孕妇血清中的ＡＣＡ水平增高对围产儿预后具有显著的不良影响     

血液动力学指标预测胎儿缺氧及酸中毒的价值

目的：评价血液动力学指标预测胎儿缺氧及酸中毒的价值。方法：用彩色多普勒超声检测了４６例正常晚期妊娠（正常组）和３２例高危妊娠（高危组）妇女子宫动脉（ＵｔＡ）和胎儿脐动脉（ＵｍＡ）、大脑中动脉（ＭＣＡ）、肾动脉（ＲＡ）的血流速度波型，并且测定高危组脐动脉血气。结果：高危组ＵｔＡ、ＵｍＡ、ＲＡ的阻力指数（ＲＩ）、搏动指数（ＰＩ）及收缩期最大血流速度（Ｓ）与舒张末期血流速度（Ｄ）的比值（Ｓ／Ｄ值）均高于正常组，而ＭＣＡ的ＰＩ及Ｓ／Ｄ值均明显低于正常组（Ｐ＜０．０５）。与ＵｍＡＰＯ２＞２．５ｋＰａ的高危妊娠病例比较，ＵｍＡＰＯ２≤２．５ｋＰａ者ＵｔＡ的Ｓ／Ｄ值、ＵｍＡ的ＰＩ、Ｓ／Ｄ值以及ＲＡ的ＲＩ、ＰＩ、Ｓ／Ｄ值均明显增高，ＭＣＡ的ＰＩ明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＵｍＡ及ＲＡ的ＰＩ与ＵｍＡＰＯ２和ｐＨ值呈负相关，与ＰＣＯ２呈正相关；ＭＣＡ的ＰＩ与ＵｍＡ的ｐＨ、ＰＯ２呈正相关，与ＰＣＯ２呈负相关。结论：高危妊娠胎儿缺氧时ＭＣＡ血流阻力降低，而周围血管，特别是肾血管血流阻力明显升高；胎儿血液动力学变化与缺氧及酸碱平衡失调呈良好相关性，可预测胎儿缺氧及酸中毒的程度。     

正常晚期妊娠胎儿脐动脉、大脑中动脉及腹主动脉血流速度波形与胎儿血气相关性探讨

目的探讨正常妊娠胎儿血流速度波形与胎儿血气的相关性。方法应用彩色多普勒超声对４５例正常晚期妊娠初孕妇女于剖宫产术前２４小时内进行胎儿脐动脉（ＵＡ）、大脑中动脉（ＭＣＡ）及腹主动脉（ＡｂＡｏ）的血流速度波形（ＦＶＷｓ）检查，计算搏动指数（ＰＩ）、阻力指数（ＲＩ）及收缩期最大血流速度（Ｓ）与舒张末期血流速度（Ｄ）的比值（Ｓ／Ｄ），同时对剖宫产分娩的新生儿立即进行脐动脉血气ｐＨ、二氧化碳分压（ＰＣＯ２）、氧分压（ＰＯ２）测定。结果ＵＡＲＩ与血ｐＨ、ＰＯ２呈明显负相关（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），与ＰＣＯ２呈正相关（Ｐ＜０．０５），ＭＣＡＲＩ与血ｐＨ、ＰＯ２呈明显正相关（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），与ＰＣＯ２呈负相关（Ｐ＜０．０５）。结论产前监测ＵＡ及ＭＣＡ的血流速度波形，可间接了解胎儿血气情况，及时判断胎儿宫内安危的状况。     

抗独特型抗体免疫治疗卵巢癌的动物实验研究

目的：研究抗独特型抗体对卵巢癌的免疫治疗作用，为临床试验提供动物实验依据。方法：用人卵巢癌抗独特型抗体（Ａｂ２）免疫杂交一代小鼠ＢＣＦ１，为实验组；用正常小鼠ＩｇＧ免疫小鼠ＢＣＦ１，为对照组。两组均免疫３次，于末次免疫后１周，将经裸鼠传代的人卵巢癌细胞系移植于ＢＣＦ１小鼠肾脏包膜下，分别于移植后第２、４、６、８和１０天处死小鼠，取血清进行抗独特型抗体（Ａｂ３）分析。移植瘤行组织学检查，观察宿主淋巴细胞浸润情况及瘤细胞可见率。结果：实验组小鼠肾脏包膜下人卵巢癌细胞系很快受到排斥，在移植后第６天，淋巴细胞浸润即达高峰，而对照组在第１０天才达高峰；瘤细胞可见率，在移植第６天后即明显降低，而对照组呈逐渐下降。结论：Ａｂ２作为抗原免疫小鼠后，能够排斥瘤细胞的生长。     

正常妊娠妇女外周血可溶性白细胞介素－2受体及淋巴细胞亚群的变化

测定了８７例妊娠晚期及２９例正常非孕妇女外周血可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，同时对其中３６例孕妇及１０９例正常非孕妇女（正常对照）进行外周血淋巴细胞亚群检测。结果：妊娠晚期妇女ｓＩＬ－２Ｒ水平及Ｔｓ细胞（ＣＤ＿８）明显高于正常对照，分别为：２１４６００±７０４００Ｕ／Ｌ比１６２１００±８４１Ｄ０Ｕ／Ｌ，　Ｐ＜０．０１及３７．６％±５．３％比３１．３％±７．０％，Ｐ＜０．０１。妊娠妇女Ｔｈ细胞／Ｔｓ细胞（ＣＤ＿４／ＣＤ＿８）比例明显低于正常对照（１．２±０．２比１．５±０．５，Ｐ＜０．０１）。但总Ｔ淋巴细胞（ＣＤ＿３），ＣＤ＿４，细胞与正常对照相比，差异无显著性，分别为：６４．１％±７．３％比６６．０％±９．９％，Ｐ＞０．０５及４４．１％±５．８％比４３．８％±９．Ｏ％，Ｐ＞０．０５。相关分析表明孕妇ｓＩＬ－２Ｒ水平与ＣＤ＿３、ＣＤ＿４、ＣＤ＿８细胞及ＣＤ＿４／ＣＤ＿８均无显著相关性（ｒ分别为０．２０３２，０．２０７７，０．１０３７及０．１２１４，Ｐ均＞０．０５）。提示：孕妇外周血Ｔ淋巴细胞亚群及血清ｓＩＬ－２Ｒ的变化对维持正常妊娠有重要作用，ｓＩＬ－２Ｒ可能是促进胎儿正常生长的重要介质之一。     

抗兔附睾特异性蛋白ESP－2单克隆抗体及其抗生育研究

兔附睾液中分离纯化了两个特异性蛋白ＥＳＰ－１和２，分子量分别为４２ＫＤ和２０ＫＤ。应用基因克隆技术，又从人睾丸λ－ｇｔｌｌ表达性。ＤＮＡ基因库中筛选分离出一个１．９Ｋｂ的编码ＥＳＰ－２ｃＤＮＡ片段，为了进一步深入研究ＥＳＰ－２做为抗生育疫苗的可能性，本研究用半固体融合细胞培养基法成功地制备了抗ＥＳＰ－２的单克隆抗体，经三轮筛选后获得阳性克隆３８个，经定量分析ＯＤ值均为０．５以上，其中三株命名为ＥＳＰ－２ｍＡｌ、ＥＳＰ－２ｍＡ３和ＥＳＰ－２ｍＡ９，接种于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔之后，腹水滴度均达１∶１００，０００。本研究采用体内外结合的被动免疫抗生育实验，即用抗体处理精子后进行体内抗生育实验，用小鼠双侧子宫互为对照和实验，证明ＥＳＰ－２ｍＡ３，ＥＳＰ－２ｍＡ９单抗对小鼠受精有明显的抑制作用，Ｐ＜０．０５和＜０．０１。对上述两株ＥＳＰ－２抗体的抗受精机理需进一步探讨。     

卵巢上皮性癌单克隆抗体183B2相关抗原的纯化和鉴定

目的纯化卵巢上皮性癌单克隆抗体（单抗）183B2相关抗原,并对该抗原及其理化特性进行鉴定和分析。方法用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法筛选出与单抗183B2阳性反应较强的卵巢上皮性癌腹水标本,继而用免疫亲和层析技术纯化得到相应抗原。纯化后的抗原分别经高碘酸钠、神经氨酸酶、去糖脂混合液及胰蛋白酶、链酶蛋白酶破坏糖链和肽链后,用间接ELISA方法检测其活性,并用十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）及蛋白印迹（western blot）法进行鉴定。再进一步用双向电泳结合western blot对卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞的相应抗原进行验证。结果纯化后的抗原经破坏糖链处理后活性不变,而经破坏肽链及加热处理后活性消失。SDS—PAGE显示,该抗原两个不同亚单位的相对分子质量分别为56000和25000,而前者能与单抗183B2反应。纯化后的抗原N端氨基酸测序后进行同源序列分析发现,此序列与人Ig重链N端的15个氨基酸相同。确定了双向电泳凝胶上3个目标点的位置,并初步确定该蛋白点的相对分子质量约为56000,等电点为5．3～5．8。结论卵巢上皮性癌单抗183B2相关抗原决定簇位于糖蛋白的肽链上,为Ig超家族成员,它可能是一种新的肿瘤相关抗原。     

胎儿生长迟缓与抗心磷脂抗体的相关性

目的：探讨胎儿生长迟缓（ＩＵＧＲ）与抗心磷脂抗体（ＡＣＡ）的相关性。方法：用酶联免疫吸附法检测５３３０例正常孕妇血清的ＡＣＡ。同时对ＩＵＧＲ合并ＡＣＡ阳性产妇产后胎盘进行免疫荧光检查，了解其结构改变。结果：正常孕妇ＡＣＡ阳性发生率为２．７０％，其中ＩＵＧＲ发生率１５．２８％，ＡＣＡ阴性的孕妇ＩＵＧＲ发生率为１．７７％，两者比较，差异有极显著性（Ｐ＜０．００１）。新生儿ＡＣＡＩｇＧ阳性５例，胎盘免疫荧光检查发现胎盘组织均出现免疫球蛋白荧光抗体和补体阳性着色。结论：ＡＣＡ阳性是ＩＵＧＲ发生的病因之一，ＡＣＡ检测给ＩＵＧＲ的病因诊治提供了新的研究途径。     

抗兔附睾特异性蛋白ESP－2单克隆抗体及其抗生育研究

兔附睾液中分离纯化了两个特异性蛋白ＥＳＰ－１和２，分子量分别为４２ＫＤ和２０ＫＤ。应用基因克隆技术，又从人睾丸λ－ｇｔｌｌ表达性。ＤＮＡ基因库中筛选分离出一个１．９Ｋｂ的编码ＥＳＰ－２ｃＤＮＡ片段，为了进一步深入研究ＥＳＰ－２做为抗生育疫苗的可能性，本研究用半固体融合细胞培养基法成功地制备了抗ＥＳＰ－２的单克隆抗体，经三轮筛选后获得阳性克隆３８个，经定量分析ＯＤ值均为０．５以上，其中三株命名为ＥＳＰ－２ｍＡｌ、ＥＳＰ－２ｍＡ３和ＥＳＰ－２ｍＡ９，接种于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔之后，腹水滴度均达１∶１００，０００。本研究采用体内外结合的被动免疫抗生育实验，即用抗体处理精子后进行体内抗生育实验，用小鼠双侧子宫互为对照和实验，证明ＥＳＰ－２ｍＡ３，ＥＳＰ－２ｍＡ９单抗对小鼠受精有明显的抑制作用，Ｐ＜０．０５和＜０．０１。对上述两株ＥＳＰ－２抗体的抗受精机理需进一步探讨。     

自身抗体与子宫内膜异位症关系的研究进展

子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）是育龄期妇女常见的良性疾病,但具有侵袭、种植及复发等恶性倾向,主要表现为痛经、月经紊乱、性交痛等,与不孕关系密切,其发病机制尚不明确。近年来多数研究认为,子宫内膜异位症是一种自身免疫性疾病,自身免疫反应在其发病机制中可能起一定作用。检测自身抗体可能为子宫内膜异位症的早期诊断提供新的辅助指标。     

子宫内膜异位症与抗碳酸酐酶抗体的关系

目的 :探讨抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体与子宫内膜异位症的关系。方法 :应用酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测内异症 32例、其他妇科疾病 (妇科组 ) 2 0例及正常妇女 12例血清抗碳酸酐酶抗体水平。结果 :(1)内异症患者血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率(87.5 %、5 3.1% )高于妇科组 (2 5 %、15 % ) ,两组差异有显著性 (P <0 .0 1) ;(2 )内异症患者血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率明显高于正常妇女组 (0 %、0 % ) ,两组差异有显著性 (P<0 .0 1) ;(3)妇科组及正常妇女组血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率较低 ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :检测抗碳酸酐酶抗体对诊断子宫内膜异位症及探讨其发病机制有重要价值