CD2AP在足细胞中的生理功能研究

CD2相关蛋白(CD2 associated protein,CD2AP)是新近发现的足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)分子。近年来的研究发现,CD2AP在足细胞内与多种结构蛋白相互作用,参与了足细胞多种重要的生理过程,并在蛋白尿的发生、发展中发挥着重要作用。文章综述了CD2AP的分子结构及其在肾脏足细胞中的表达分布,深入探讨CD2AP的生理功能及作用机制。     

CD2AP在肾脏病学的研究进展

CD2AP是新发现的一种肾小球足细胞裂孔膜蛋白。CD2AP / 小鼠表现为先天性肾病综合症,出生后6~7周将死于肾功能衰竭;CD2AP / 小鼠肾脏病理表现类似于人类FSGS。CD2AP基因突变可能与人类一些肾脏疾病的发病有关。此外,CD2AP还可能通过与其他裂孔膜蛋白相互作用,在足细胞信号转导和功能调节过程中发挥重要作用。     

CD2AP、F-actin在肾病大鼠中的表达及意义

目的：观察CD2-associated protein（CD2AP）、肌动蛋白微丝（F-actin）在氨基核苷肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义。 方法： 通过建立大鼠氨基核苷肾病模型，采用免疫组织化学、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时点肾病大鼠肾小球中的表达和分布变化，采用荧光技术检测肾小球F-actin含量的变化。 结果： ①肾小球足细胞CD2AP的表达在肾病模型建立的早期即有下调；在肾病大鼠蛋白尿的高峰期，CD2AP的表达明显下降（P<0.01）；在肾病大鼠的疾病恢复期，CD2AP的表达逐步恢复正常。②肾小球足细胞CD2AP表达量的变化与肾病大鼠24 h尿蛋白的变化呈负相关（r=-0.865，P<0.01）。③在肾病大鼠蛋白尿的高峰期，肾小球F-actin含量明显下降（P<0.05）。④肾小球CD2AP蛋白表达量和肾小球F-actin荧光定量变化呈正相关（r=0.873，P<0.01）。 结论： ①CD2AP、F-actin的表达变化在蛋白尿的发生机制中有着重要作用。②CD2AP可能是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。     

Expression of CD2AP on podocytes with different pathological types of nephrotic syndrome

目的 观察不同病理类型的原发性肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患者肾小球足细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)的表达,探讨其与足细胞损伤的关系.方法 选取原发性NS患者54例,10例同期肾肿瘤切除患者正常肾组织作为对照.肾活检后常规染色观察肾脏组织病理改变,肾组织行免疫荧光法CD2AP和肾小球上皮细胞蛋白-1(GLEPP1)双重标记,对肾小球CD2AP的表达进行定位;分别用real time PCR和免疫组化SP法检测组织中CD2AP的表达,采用real time PCR检测nephrin的表达,透射电镜观察足细胞的结构变化,并定量测量足突密度.结果 (1)NS患者肾小球中CD2AP的表达及nephrin的表达下调,足细胞足突不同程度融合,足突密度降低.(2)病理表现为微小病变性肾病(minimal change disease,MCD)、局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)和膜性肾病(membranous nephropathy,MN)的NS患者CD2AP表达及nephrin表达较对照组明显降低,且CD2AP与nephrin表达呈正相关,病理表现为MCD和FSGS的NS患者CD2AP表达与足突密度呈正相关.结论 本研究首次发现原发性NS患者肾小球足细胞中CD2AP的表达降低,且在MCD和FSGS中与足细胞病变程度相关,提示CD2AP低表达在足细胞病变为主的肾小球疾病中发挥重要作用.CD2AP有利于诊断足细胞病变的早期检测,对CD2AP表达减低进行早期干预可能有助于延缓疾病进展.     

蟾蜍干预对大鼠肾病模型CD2AP表达的影响

目的 探讨CD2-associated protein（CD2AP）在蟾蜍干预阿霉素肾病模型肾小球中的表达及意义。方法 通过建立阿霉素（ADR）肾病模型，用蟾蜍等干预后，采用免疫组织化学技术观察各组模型大鼠肾小球中CD2AP的表达变化。结果 蟾蜍能使肾小球足细胞CD2AP的表达上调。结论 蟾蜍对肾病大鼠模型病理损伤的修复可能与CD2AP表达上调有关。     

肾病综合征患儿CD8~+细胞的变化

<正> 近年来国外一些研究认为,肾病综合征(NS)与CD8+比值增高紧密相关。但国内这方面研究还较少。为此,我们对20例NS患儿发病期CD8+活性与同年龄组健康儿童进行对照比较,以期发现一些有助于辅助诊断或考核疗效,判断预后的参考指标。 材料和方法 一、病例选择,按1981年全国儿科肾病协作组制订的统广诊断标准,单纯性肾病综合征12例,男女各6例,平均年龄6.6岁;肾炎性肾病综合征8例,男6例女2例,平均年     

CD28/B7-1与儿童肾病综合征

CD28/B7-1是一对参与机体特异性免疫应答极其重要作用的分子.CD28主要存在于T淋巴细胞表面,而B7-1为CD28的配体之一,可表达于肾脏足突细胞.初步研究显示,B7-1分子参与了足突细胞病变的发生发展,而肾脏足突细胞参与了肾病综合征病理免疫反应过程,尤其在微小病变型肾病综合征中起主导作用.国内外学者已经着手相关动物实验及少量临床试验的研究,并取得一定成果.通过阻断CD28/B7-1信号而抑制肾病综合征的发生发展过程,将为儿童肾病综合征的临床治疗提供新的思路.     

CD2相关蛋白启动子区域保守序列的功能分析

目的 在不同物种间通过保守序列分析和荧光素酶功能测定的方法寻找发现CD2相关蛋白(cD2AP)基因启动子重要的调节成分.方法 用BLAST分析软件进行序列比较和同源分析不同种系CD2AP启动子序列,构建人CD2AP启动子不同的缺失变异载体,转染来自不同种类的细胞,测定荧光素酶活性,并用全反式维甲酸处理,观测其对CD2AP启动子活性的影响.结果 在人、牛、猪的CD2AP推断的启动子区域进行同源比较发现推断的sp1(specific protein 1)和下游启动子成分高度进化保守,进行性缺失荧光素酶分析表明在人胚肾细胞株HEK-293、非洲绿猴肾细胞株Vero、仓鼠肾细胞株BHK-21中人CD2AP启动子活性有相似的形式,ATG上游500 bp有基本的启动子活性,再向上100 bp启动子活性增加10倍,两个推断的Sp1位点位于该100 bp区域内,全反式维甲酸可下调CD2AP启动子的活性.结论 我们初步发现推断的Sp1位点和下游启动子成分在CD2AP启动子调控中起重要作用.     

老年原发性肾病综合征患者肾组织和外周血CD62P的表达及意义

目的研究老年原发性肾病综合征(APNS)患者外周血和肾组织CD62P表达水平的变化,并探讨CD62P在APNS病理过程中的作用.方法采用流式细胞术和直接免疫荧光法,对36例APNS患者外周血和肾活检组织CD62P的表达进行研究.结果APNS患者外周血CD62P的表达明显高于正常对照组,有显著性差异(P＜0.01);肾组织CD62P的表达32例(88.89%),表达部位主要在肾小球系膜区和毛细血管袢,与常规肾脏病理检查所观察到的病变部位及其病变程度相一致.正常对照组肾组织中无CD62P表达.结论CD62P在APNS患者外周血和肾组织中表达增强,CD62P可能参与了APNS的病理过程,外周血和肾组织CD62P的变化可反映APNS的病情严重程度,具有重要的临床价值.     

CD2相关蛋白在肾脏细胞中的分布及其在足细胞中的作用

目的 观察CD2相关蛋白(cD2AP)在肾脏不同细胞系中的表达分布,及其与足细胞裂孔隔膜分子nephrin和细胞骨架蛋白F-actin之间的联系.方法 以DMEM培养基培养人肾小球系膜细胞(HMC)和人肾小管上皮细胞系(HK-2),RPMI 1640培养基培养条件永生化小鼠足细胞系.以RT-PCR及Western blotting方法检测足细胞内CD2AP和nephrin的表达.间接免疫荧光结合激光共焦方法观察CD2AP在HMC、HK-2、未分化及已分化足细胞中的表达情况,及CD2AP与nephtin在足细胞中的共存.直接免疫荧光结合激光共焦方法观察F-actin在足细胞的表达及其与CD2AP的共存.结果 CD2AP均匀分布于HK-2及未分化足细胞的核周及胞浆,而不表达于HMC细胞.在足细胞分化过程中,CD2AP的分布发生了变化,出现向周边聚集的现象.CD2AP与足细胞裂孔隔膜分子nephrin及细胞骨架蛋白F-actin在足细胞中存在共定位关系.结论 CD2AP表达于上皮来源的肾脏固有细胞.CD2AP在足细胞中的分布特点,提示CD2AP可能参与足细胞的分化过程,并与裂孔隔膜分子功能及细胞骨架凋节有关.     

Cell coat of podocytes in patients with nephrotic syndrome

Renal biopsies from 23 patients with the nephrotic syndrome and five patients with slight or no proteinuria were examined for the presence of cell coat of podocytes by light and electron microscopy. Of those with nephrotic syndrome, five had minimal change disease, nine focal glomerular sclerosis, six membraneous nephropathy and three amyloidosis. Colloidal iron and phosphotungstic acid stains were used for the demonstration of anionic and neutral polysaccharide components of the cell coat. On light microscopy, the colloidal iron reaction showed a reduction in intensity of the stain in glomeruli of patients with massive proteinuria, as compared to those with slight or no proteinuria. On electron microscopy, only the cell coat lining the surface of the foot processes disappeared parallel to the loss of these structures, while the coat covering the surface facing the urinary space remained unchanged with both stains.     

PLCE1基因突变与激素耐药性肾病综合征的关系

磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1，PLCE1) 基因定位于常染色体10q23.32-q24.1,其编码蛋白为磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1, PLCε1)。PLCε1蛋白是最新发现的一种磷脂酶C(phospholipase C,PLC)同工酶，在成熟的肾小球足细胞表达,参与肾小球毛细血管袢的形成和正常发育。近来发现PLCE1 基因突变可以引起常染色体隐性遗传性肾病综合征。PLCE1基因移码或无义突变可导致婴儿早发性肾病综合征，其病理特征为弥漫性肾小球硬化(diffuse mesangial sclerosis，DMS)；而错义突变可导致局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis，FSGS)。但其确切发病情况及机制目前尚不清楚，本文就PLCE1基因及其编码蛋白与激素耐药性肾病综合征之间的关系作一简要综述。     

Disseminated cryptococcosis in a patient with nephrotic syndrome

Disseminated cryptococcosis mainly occurs in patients with impaired cell mediated immunity. We present a case of disseminated cryptococcosis in a non-HIV patient with nephrotic syndrome who never received immunosuppression. Cultures of bone marrow aspirate, cerebrospinal fluid analysis and histology of skin lesions were all consistent with Cryptococcus neoformans infection. Treatment with amphotericin B followed by fluconazole was successful and in the course of two months when, the skin nodules disappeared.     

低CD40L表达在儿童单纯性肾病综合征低IgG血症发生中的作用

为研究单纯性肾病综合征低IgG血症的发生机制。采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR ) ,流式细胞术 (FCM )等方法检测患儿外周血T淋巴细胞表面CD40配体 (CD40L )表达。结果在发作期CD40LmRNA及蛋白质表达降低 ,恢复期其表达可接近正常水平 ,且CD40L表达量与血清IgG水平呈显著正相关。体外实验中加入CD40单克隆抗体 (CD40mAb )可使患儿PBMC产生IgG及其亚类水平增高 ,但仍未达正常水平。单纯性肾病综合征低IgG血症的发生是综合因素作用的结果 ,CD40L信号减弱导致免疫球蛋白 (Ig )同种型转换障碍是因素之一。