Survivin siRNA诱导人腺样囊性癌SACC-83细胞凋亡的实验研究

目的 应用RNA干扰技术靶向阻断Survivin基因表达,探讨其对人腺样囊性癌SACC-83细胞的诱导凋亡作用.方法 实验设空白对照组,RNA干扰阴性对照组和RNA干扰组.将RNA干扰载体通过Lipofection介导转染腺样囊性癌细胞.采用倒置显微镜观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡峰;透射电镜观察细胞凋亡超微结构.结果 转染细胞48 h后RNA干扰组细胞形态学发生改变,呈典型的细胞凋亡形态.流式细胞仪检测在细胞周期G1/G0期前出现亚二倍体凋亡峰,电镜超微结构可见凋亡小体.空白对照组,RNA干扰阴性对照组无此变化.结论 Survivin siRNA干扰能诱导体外培养的人腺样囊性癌SACC-83细胞发生凋亡,以Survivin 为靶点有望成为肿瘤基因治疗的可行性.     

结肠恶性黑色素性神经鞘瘤1例并文献复习

目的 探讨恶性黑色素性神经鞘瘤的病理形态学特征及鉴别诊断要点。方法 应用光镜、免疫组化及电镜等方法对1例结肠恶性黑色素性神经鞘瘤进行组织学观察并复习文献。结果 组织形态主要由大小较一致的圆形、多边形细胞和束状、编织状排列的梭形细胞构成，细胞异型性明显。免疫组化以MBP、NSE、HMB45、S-100和vimentin阳性为特点。电镜下细胞内可见Ⅱ～Ⅳ期黑色素小体，细胞外有不完整的基底膜及长间距胶原。结论恶性黑色素性神经鞘瘤少见，发生于结肠尤为罕见。病理诊断应结合病史、形态学特征、免疫组化及超微结构。超微结构特点是确诊的最重要依据。     

沉默ATF5对卵巢癌裸鼠成瘤的影响

目的研究沉默人转录激活因子5（ATF5）后对卵巢癌SKOV-3细胞体外增殖、凋亡及体内成瘤的影响,探讨人类卵巢癌基因治疗的新途径。方法将慢病毒携带的小干扰RNA感染卵巢癌SKOV-3细胞（实验组）,空载体转染的卵巢癌SKOV-3细胞（空载体对照组）和卵巢癌SKOV-3细胞（空白对照组）进行对照,对比观察细胞的生长状态;MTT法检测细胞的增殖生长情况;罗氏凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况;分别于裸鼠皮下接种3组卵巢癌SKOV-3细胞,观察各组裸鼠的存活状态、种植瘤生长情况;RT-PCR检测瘤组织中ATF5mRNA的表达;Western-Blot方法检测瘤组织中ATF5蛋白的表达;苏木素-伊红染色（HE染色）观察瘤组织生物学形态变化。结果经转染ATF5基因的小干扰RNA后,在相同培养时间内3组细胞的增殖和生物学形态没有明显差异,但实验组细胞凋亡数量较其他两组明显增多。皮下接种成瘤后,3组裸鼠的成瘤率没有明显区别,实验组与空载体对照组和空白对照组相比,肿瘤成瘤时间晚,生长缓慢;移植瘤ATF5mRNA表达及蛋白表达降低;细胞分裂象明显减少,凋亡现象明显。结论沉默ATF5对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,这可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。     

细胞周期素G1反义硫代脱氧寡核苷酸抑制HL-60细胞在裸鼠体内生长的实验研究

目的：探讨细胞周期素G1(cyclin G1)反义硫代脱氧寡核苷酸对HL-60细胞在裸鼠体内生长的抑制作用。方法：将裸鼠随机分成对照组、正义寡核苷酸(SON)组、反义寡核苷酸(ASON)组，其中SON组和ASON组接种转染的HL-60细胞(HL-60／S和HL-60／AS)前接受3Gy的^60Co照射；将各组HL-60细胞接种于裸鼠皮下连续观察裸鼠的出瘤时间、瘤体大小，计算抑瘤率；病理切片用苏木精．伊红染色，电镜观察移植瘤组织的结构和细胞形态变化；用流式细胞仪(FCM)和RT-PCR分别检测cyclin G1蛋白和mRNA水平的表达；电镜和FCM检测细胞凋亡。结果:①cyclin G1 ASON组与SON组和对照组比较，对HL-60细胞在裸鼠体内生长有明显抑制作用，抑瘤率为69．4％。成瘤率、瘤重、瘤体积明显小于SON组和对照组。②镜下见cyclin G1 ASON组的HL-60细胞部分细胞形态发生改变，核分裂象少见，细胞的异型性较小，并且有凋亡细胞出现。结论:cychn G1 ASON能明显抑制HL-60细胞在裸鼠体内的生长，并且促使部分细胞发生凋亡。     

彩色多普勒超声对中孕期胎鼠心肌细胞凋亡的影响及其远期效应

目的:探讨彩色多普勒超声照射对中孕期胎鼠心肌细胞凋亡的影响及其远期效应,从而为彩色多普勒超声临床安全应用提供实验依据。方法:将24只孕14dSD大鼠按取材时间不同随机等分为胚胎组和幼仔组,再各自等分为照射30min组和对照组。胚胎组于照射后24h剖宫取胎鼠心肌标本,幼仔组于出生后10d取材。HE染色光镜观察组织细胞结构,TUNEL法检测凋亡细胞,激光共聚焦显微图像分析仪检测荧光强度,透射电镜观察超微结构的变化。结果:各组光镜下观察未见心肌组织细胞结构异常;TUNEL法检测结果,胚胎对照组心肌组织内可见散在凋亡细胞,幼仔各组心肌组织内凋亡细胞则更稀少;胚胎照射30min组凋亡细胞较易观察到,部分区域可见较密集的凋亡细胞。胚胎照射30min组犤(0.48±0.42)IU犦与胚胎对照组荧光强度犤(4.08±0.54)IU犦比较,差异有显著性意义(t=2.45,P<0.05);幼仔照射30min组和幼仔对照组荧光强度差异无显著性意义(P>0.05)。胚胎照射30min组心肌电镜检查发现染色质浓缩边集、线粒体、内质网肿胀等超微结构变化。结论:彩色多普勒超声照射30min以上可引起中孕胎鼠心肌细胞凋亡,但这种影响在幼仔期消失。     

三氧化二砷抗裸鼠肺癌移植瘤药效学研究

目的:探讨三氧化二砷(A s_2O_3)对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法:建立肺癌移植瘤模型。随机分为5组,每组6只,A s2O33组分别给予A s2O310、5、2m g/kg体重,腹腔注射;生理盐水(N S)组给予等体积的生理盐水,用法同A s_2O_3组;顺铂组(D D P)组按1m g/kg体重给药。用药2周后,观察用药前后肿瘤生长情况、裸鼠体重变化,测量肿瘤大小,流式细胞仪检测瘤细胞凋亡,取瘤组织行病理学检查和瘤细胞超微结构观察。结果:A s_2O_3组肿瘤大小均较N S组明显缩小(P<0.01);大、中剂量的A s_2O_3瘤组织细胞凋亡增多,病理可见以中度坏死为主,小剂量以轻度坏死为主。电镜下大、中剂量A s_2O_3组可见肿瘤细胞凋亡征象。结论:A s_2O_3对裸鼠肺癌移植瘤有显著的抗肿瘤作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是A s_2O_3三氧化二砷的抗肿瘤机制之一。     

咪达唑仑对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制效应及机制

目的探讨咪达唑仑对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制效应及机制。方法建立人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,共建模成功12只,分为咪达唑仑组与对照组各6只。咪达唑仑组腹腔注射咪达唑仑0. 8 mg/kg,1次/d;对照组给予生理盐水注射。20 d后观察2组荷瘤裸鼠体质量和皮下移植瘤体积变化。处死裸鼠,运用苏木精-伊红染色法(HE)观察咪达唑仑对肺癌移植瘤细胞形态的作用效应;依据细胞凋亡检测法(TUNEL)检测移植瘤中细胞凋亡情况;采用免疫组织化学染色法(IHC)观察移植瘤组织细胞中核蛋白质Ki-67的改变,采用蛋白质印迹法(Western-blot)观察移植瘤组织中信号传导转录激活因子3(STAT3)的改变。结果与对照组相比,咪达唑仑组移植瘤质量、肿瘤体积均显著较小(P 0. 05或P 0. 01); HE染色显示咪达唑仑组移植瘤组织发生大面积坏死; TUNEL法显示咪达唑仑组细胞凋亡数显著高于对照组,IHC染色表明咪达唑仑干预后显著下调移植瘤组织中核蛋白质Ki-67蛋白的表达,咪达唑仑组STAT3蛋白表达显著下调(P 0. 05)。结论咪达唑仑可能是通过调控STAT3的表达显著抑制A549移植瘤组织的生长,诱导肿瘤细胞凋亡。     

人血树突状细胞联合LPAK细胞体外诱导肝癌细胞株凋亡的形态学观察

研究人外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)联合LPAK(lymphokine and PHA activatedkiller)细胞体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡的作用,并进行形态学分析。实验分LD(BEL-7402 LPAK DC),L(BEL-7402 LPAK),D(BEL-7402 DC)和 B(BEL-7402)四组,采用中性红摄入比色法检测细胞毒活性,原位末端标记(TUNEL)技术、电镜技术观察细胞的光镜形态和超微结构。结果显示,D组与B组比较吸光度值无显著性差异(P>0.05),即无杀伤活性;LD组与L组比较,细胞毒活性为LD组>L组(P<0.01)。光镜下凋亡的肿瘤细胞呈TUNEL阳性,细胞核染成棕黄色或深棕色,大小不等,形态也不一;电镜下肿瘤细胞核染色质凝聚、固缩和胞质浓缩,凋亡小体多见;少部分LPAK细胞内形成自噬体,发生自噬性凋亡。结论提示,人血DC联合LPAK细胞能有效地诱导肝癌细胞凋亡,在此过程中LPAK细胞同时发生自噬性凋亡。     

彩色多普勒超声对中孕期胎鼠心肌细胞凋亡的影响及其远期效应

目的：探讨彩色多普勒超声照射对中孕期胎鼠心肌细胞凋亡的影响及其远期效应，从而为彩色多普勒超声临床安全应用提供实验依据。方法：将24只孕14d SD大鼠按取材时间不同随机等分为胚胎组和幼仔组，再各自等分为照射30min组和对照组。胚胎组于照射后24h剖宫取胎鼠心肌标本，幼仔组于出生后10d取材。HE染色光镜观察组织细胞结构，TUNEL法检测凋亡细胞，激光共聚焦显微图像分析仪检测荧光强度，透射电镜观察超微结构的变化。结果：各组光镜下观察未见心肌组织细胞结构异常；TUNEL法检测结果，胚胎对照组心肌组织内可见散在凋亡细胞，幼仔各组心肌组织内凋亡细胞则更稀少；胚胎照射30min组凋亡细胞较易观察到，部分区域可见较密集的凋亡细胞。胚胎照射30min组[(0．48&;#177;0．42)IU]与胚胎对照组荧光强度[(4．08&;#177;0．54)IU]比较，差异有显著性意义(t=2．45，P&;lt;0．05)；幼仔照射30min组和幼仔对照组荧光强度差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。胚胎照射30min组心肌电镜检查发现染色质浓缩边集、线粒体、内质网肿胀等超微结构变化。结论：彩色多普勒超声照射30min以上可引起中孕胎鼠心肌细胞凋亡，但这种影响在幼仔期消失。     

黄芩苷对高致瘤HL-60细胞裸鼠移植瘤模型的体内抑瘤作用和机制探讨

本研究旨在探讨黄芩苷对高致瘤人白血病HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的体内抑瘤作用及其作用机制。制备高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为6组:阴性对照组(注射5%NaHCO3),黄芩苷25、50和100 mg/kg剂量组,联合用药组(黄芩苷50 mg/kg+VP16 2 mg/kg)和VP16 4 mg/kg阳性对照组,每组10只裸鼠。采用腹腔注射方式给药,14 d后每组处死5只裸鼠,对剥取的瘤块称重计算抑瘤率;通过电子显微镜观察瘤组织超微结构,病理组织学观察裸鼠各主要脏器结构改变,瘤块组织蛋白检测信号转导通路指标。观察裸鼠生存时间。结果表明,黄芩苷可抑制裸鼠HL-60细胞皮下移植瘤的生长,呈剂量依赖性。瘤组织病理组织学和透射电子显微镜检查结果显示,黄芩苷组和联合用药组的肿瘤坏死和细胞凋亡现象较阴性对照组多见。黄芩苷可能通过抑制Akt活性,下调p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达来抑制裸鼠异种移植瘤的增长。联合用药组裸鼠中位生存时间明显长于阴性对照组(P<0.05)。结论:黄芩苷可抑制高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的生长,诱导瘤组织中HL-60细胞的凋亡,其机制之一可能与抑制Akt活性并下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关;黄芩苷与VP16联用可明显提高荷瘤裸鼠的中位生存期,具有协同抗高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的作用。     

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞的体内外作用及可能的机制

目的观察三氧化二砷（As203）在体内外对人肝癌SMMC-7721细胞抗肿瘤作用。方法不同浓度的As203作用于SMMC-7721细胞48h,采用MTT法测定细胞的存活率;荧光显微镜观察细胞形态变化;FITC-Annexinv／P1双标记检测SMMC-7721细胞的凋亡;比色法检测Caspase．3活性变化。用As203在SMMC-7721肝癌细胞荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,12d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重,并通过免疫组化法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达。结果As203能显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,半数抑制率浓度为（18．17±2．10）μmol／L;显微镜下可见有典型的细胞凋亡形态学改变,As203处理组SMMC-7721细胞凋亡率与对照组相比显著增加,As203可提高SMMC-7721细胞的Caspase-3活性。As203瘤内注射肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52．37％,免疫组化结果显示As203能明显上调与细胞凋亡相关因子Bax和Caspase．3的表达和下调Bcl-2的表达。结论As203能抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长,诱导SMMC-7721细胞凋亡;As203能抑制SMMC-7721细胞的体内致瘤能力。     

人参皂苷Rg1参与诱导小鼠多潜能干细胞的研究

目的:观察人参皂苷Rg1对鼠胚成纤维细胞(MEF)向诱导多潜能干细胞(iPSCs)诱导转化效率的影响。方法:采用经典四因子的逆转录病毒载体感染,在细胞感染后3 d内在MEF培养基里加入人参皂苷Rg1(0、0.3、1、3、10μg/mL),进行iPSCs诱导及鉴定。结果:人参皂苷Rg1(1μg/mL)组可明显提高iPSCs的诱导效率,诱导效率为(0.0450±0.0019)%,人参皂苷Rg1(0μg/mL)组为(0.0100±0.0033)%,所获iPSCs经鉴定为阳性。结论:人参皂苷Rg1可能在提高小鼠iPSCs的诱导效率方面发挥一定作用。     

异种脐血干细胞移植胶原性关节炎小鼠Bcl-2和Bax的表达（英文）

背景：类风湿性关节炎的发生发展与滑膜细胞及淋巴细胞的增殖与凋亡不平衡密切相关,其滑膜细胞存在细胞凋亡过程的异常。目的：观察异种、异基因双份脐血干细胞移植对Ⅱ型胶原性关节炎小鼠Bcl-2和Bax表达的影响。方法：弗氏完全佐剂＋Ⅱ型胶原诱导C57BL/6（H-2b）小鼠,建立Ⅱ型胶原性关节炎小鼠模型。小鼠二次免疫接种后第2天,模型组、正常对照组尾静脉注射生理盐水,细胞移植组将脐血造血干细胞注入小鼠尾静脉内（其中单份剂量2×106/50g;双份剂量：每份1×106/50g,共2×106/50g）。甲氨喋呤阳性对照组小鼠灌胃甲氨蝶呤,每次0.0175g/kg,每5天1次,共6次。结果与结论：移植后第42天全部处死动物取膝及肘以下关节组织,病理组织学显示正常对照组关节面光滑,滑膜层未见炎性细胞浸润,软骨细胞形态正常;模型组滑膜组织高度增生,大量的炎性细胞浸润,软骨面破坏;甲氨蝶呤阳性对照组、单份脐血造血干细胞移植组滑膜组织可见轻度增生,少量炎性细胞浸润,双份脐血造血干细胞移植组关节软骨表面光滑,未见破坏,有极少量炎性细胞浸润。免疫组织化学检测显示,双份脐血造血干细胞移植组Bax、Bcl-2的表达低于单份脐血造血干细胞移植治疗组（P〈0.05）;与正常对照组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结果说明双份脐血干细胞在一定数量及作用时间内可诱导Ⅱ型胶原性关节炎小鼠滑膜细胞凋亡,对滑膜组织损伤起保护作用。     

长脉冲Nd:YAG 1064nm激光对不同表型红色毛癣菌形态学的影响

目的探讨长脉冲Nd:YAG 1 064 nm激光对临床分离不同表型红色毛癣菌形态学的影响。方法长脉冲Nd:YAG 1 064 nm激光分别以200 J/cm2、400 J/cm2、600 J/cm2能量体外照射含有等菌量的红色毛癣菌Y菌落(绒毛型)和红色毛癣菌N菌落(沟纹型),将激光照射前后的菌落制备成标本,分别在扫描电镜(SEM)及透射电镜(TEM)观察其形态结构变化。结果对绒毛型T.rubrum Y菌落,随着激光照射能量的增加,与对照组相比,绒毛型T.rubrum Y菌丝的形态结构破坏明显。表现为SEM下,菌丝结构变得粗糙、表面有凹陷、局部形成膨大,皱瘪非常明显;TEM下,菌体双层细胞壁及细胞器结构模糊或破坏,胞浆内可见脂滴和空泡变性,髓样小体及蛋白凝固体(为凋亡的表现),甚至菌体崩解、坏死。对沟纹型T.rubrum N菌落,随着激光照射能量的增加,与对照组相比,沟纹型T.rubrum N菌丝的形态结构破坏不显著。表现为SEM下菌丝结构变得弯曲、粗糙,表面有少量凹陷,菌丝局部膨大,无明显皱瘪;TEM下,菌体双层细胞壁及细胞器结构模糊或不连续,胞浆内可见脂滴和空泡变性,无凋亡及坏死表现。结论绒毛型红色毛癣菌Y菌落在激光照射后,其菌丝形态发生明显变化;而沟纹型红色毛癣菌N菌落在激光照射后,其菌丝形态变化相对较小。     

RNAi-chk1在抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长作用的实验研究

目的观察chk1-RNAi联合放疗对Lewis肺癌细胞的抑制及凋亡情况。方法以脂质体Lipofectimine-2000介导,将chk1-536的siRNA表达载体转染小鼠Lewis肺癌细胞株,将其分为空白对照组、错义序列组、siRNA组,2Gy照射组、2Gy照射+错义序列组、2Gy照射+siRNA组。应用MTT法检测转染细胞抑制率、流式细胞术分析转染siRNA后细胞的凋亡,并应用RT-PCR检测转染细胞chk1-mRNA表达水平。结果 chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞,与对照组相比较生长增殖受抑制、细胞凋亡增加;MTT法检测和流式细胞术分析示:chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞生长增殖受抑制,细胞凋亡增加(P<0.05);同时,RT-PCR法检测该组细胞中chk1mRNA表达量下降(P<0.05)。并且siRNA转染可增加2Gy照射引起的Lewis肺癌细胞凋亡。结论针对chk-1的RNAi可以提高Lewis肺癌细胞的抑制率及放疗引起的肿瘤细胞的凋亡,对肿瘤有治疗作用,与放疗有协同作用。     

加压氧对人喉咽癌裸鼠皮下移植瘤的作用

目的观察加压氧对人喉咽癌裸鼠皮下移植瘤的作用。方法将40只雄性裸鼠随机分为空白对照组A1（成瘤5d后处死）、空白对照组A2（成瘤10d后处死）、加压氧组B1（成瘤后加压氧暴露5d后处死）、加压氧组B2（成瘤后加压氧暴露10d后处死）,每组10只,接种喉咽鳞癌Fadu细胞建立裸鼠喉咽癌移植瘤模型,分别暴露于空气中和加压氧中,实验结束后处死各组裸鼠,观察和记录肿瘤质量、体积,计算肿瘤质量抑制率和体积抑制率,并进行组织病理学观察。结果各组肿瘤组织病理学检查均示肿瘤为低分化鳞状细胞癌。加压氧组B1肿瘤质量抑制率为20.1%,体积抑制率为20.5%;加压氧组B2肿瘤质量抑制率为13.7%,体积抑制率为10.3%。结论加压氧对裸鼠喉咽癌移植瘤生长有一定的抑制作用。     

预输注RelB shRNA慢病毒修饰树突细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

背景:肝移植后的排斥反应是威胁患者和移植物长期存活的主要原因。诱导受者产生特异性免疫耐受是解决排斥反应的理想措施。目的:探讨RNAi RelB树突状细胞预输注诱导大鼠肝移植特异性免疫耐受的可能性。方法:将近交系雄性清洁级DA(RT1a)大鼠和近交系雄性SPF级Lewis(RT11)大鼠分别作为供、受体,行原位肝移植手术。术前随机配对分为4组:①对照组,受体鼠移植前不做预输注。②治疗组:受体鼠移植前7d静脉输注供体大鼠RNAi RelB树突状细胞(5×106)。③未成熟树突状细胞组:受体鼠移植前7d静脉输注供体大鼠未成熟树突状细胞(5×106)。④成熟树突状细胞组:受体鼠移植前7d静脉输注供体大鼠成熟树突状细胞(5×106)。结果与结论:与对照组、未成熟树突状细胞组以及成熟树突状细胞组相比,治疗组移植肝的平均生存时间显著延长。移植后第7天,治疗组天冬氨酸转氨酶,总胆红素水平低于对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组(P<0.01),移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组天冬氨酸转氨酶,总胆红素均有轻微下降,两组比较差异仍有显著性意义(P<0.01)。移植后第7天,与治疗组比较,对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平升高(P<0.01),而白细胞介素4、白细胞介素10下降(P<0.01);移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平均有下降,白细胞介素4、白细胞介素10水平均有升高,两组比较差异仍有显著性意义(P<0.01)。对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组移植后第7天排斥活动指数为8.0-9.0。未成熟树突状细胞组第14天肝细胞、内皮细胞坏死及汇管区炎性细胞浸润进一步增多。治疗组移植后第7天排斥活动指数为6.0-8.0,第14天时排斥活动指数为4.0-5.0。结果提示RNAi RelB树突状细胞预输注可以减轻移植肝排斥程度,延长移植肝生存时间,这是通过间接途径实现的,其机制可能与T细胞的调节和无能有关。     

低频低功率超声联合微泡对DU145细胞及PC3细胞早期凋亡的影响

目的比较低频低功率超声联合微泡造影剂对人前列腺癌DU145细胞与PC3细胞早期凋亡率的不同影响。方法使用低频低功率超声连续波辐照人前列腺癌DU145细胞和PC3细胞悬液60 s,实验中两种细胞系各分为4组:空白对照组(A组)、单纯微泡组(B组)、单纯超声组(C组)和超声联合微泡组(D组),辐照后细胞继续培养24 h,流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况,透射电镜观察细胞形态改变。结果两种细胞D组的早期细胞凋亡率明显高于其余各组(P﹤0.01),C组亦均高于A组(P﹤0.05),A、B组之间差异无统计学意义;两种细胞经相同处理后,C、D组PC3细胞的早期细胞凋亡率均高于DU145细胞(P﹤0.01)。透射电镜下两种细胞D组可见癌细胞体积变小变圆,空泡增多,有明显的凋亡小体形成,PC3细胞内还可见大量的自噬体出现。结论低频低功率超声联合微泡造影剂能明显诱导人前列腺癌细胞的早期凋亡,且对PC3细胞早期细胞凋亡作用强于DU145细胞。     

Egrl启动子介导的HSV-TK／GCV联合放疗对卵巢癌细胞的治疗作用

目的探讨Egrl启动子介导的HSV-TK／GCV自杀基因系统与放疗联合治疗卵巢癌的疗效。方法以MTT方法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞凋亡和坏死情况,倒置光学显微镜和电子显微镜观察治疗前后细胞形态学变化,并与单纯的辐射治疗比较。结果辐射一基因治疗对卵巢癌H08910细胞有生长抑制和凋亡诱导作用,效果明显优于单纯的放疗,干预60h、72h、96h后,辐射．基因治疗组的细胞增殖抑制率分别达到（56．88±5．35）％、（69．09±3．43）％、（86．91±0．75）％,而单纯辐射组对应的细胞增殖抑制率仅为（21．93±11．37）％、（37．99±7．24）％、（69．55±3．26）％。干预48h后,辐射．基因治疗组的细胞死亡率为26．01％（凋亡率：19．45％;坏死率：6．56％）,明显高于单纯辐射组的12．47％（凋亡率：8．68％;坏死率：3．79％）和阴性对照组的4．41％（凋亡率：2．52％;坏死率：1．89％）。细胞形态学观察结果也显示辐射．基因治疗组细胞呈现了典型的凋亡形态学特征,细胞生长状态远不如单纯辐射组和阴性对照组。结论辐射．基因联合应用具有较好的协同和互补效应,比单一的放疗具有更强的抗肿瘤作用。