兔脂肪间充质干细胞向胰岛素样分泌细胞分化及鉴定

脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）最早由Zuk[1]等人于2001年从抽脂术中抽取的脂肪组织中分离培养,近年来已成为医学领域乃至整个生命科学领域的研究热点.ADSCs是一种来源于脂肪组织中的多能干细胞,和骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）类似,也有很强的增殖能力和分化潜能.ADSCs能在不同的诱导微环境下向不同的组织细胞（如脂肪细胞、成骨细胞、内皮细胞、心肌细胞和神经细胞等）分化[1].本实验在体外分离培养兔的脂肪间充质干细胞,通过相应的试剂使其诱导分化为类胰岛素分泌细胞,并研究其生物学特性,以期为临床采用ADSCs治疗Ⅰ型糖尿病提供理论依据.     

脂肪源性干细胞的定向分化潜能及临床应用前景

脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是一种具有自我更新与多向分化潜能的成体间充质干细胞。在特定诱导条件下,ADSCs具有跨越胚层分化的潜能。本文就ADSCs的定向分化潜能及其作为细胞治疗与组织工程的种子细胞、基因治疗载体的临床应用前景进行综述。一、ADSCs的生物学特性ADSCs是由Zuk等[1]于2001年首次从人吸脂术的脂肪悬液中得到的一种间充质干细胞。     

干细胞与心肌梗死

干细胞(stem cells)是一类具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞,根据来源的不同,可分为胚胎干细胞(ESC)和成体干细胞。ESC是从着床前囊胚的内细胞团或原始生殖细胞中分离出来的,具有全能性。成体干细胞的分化能力有限,但具有“可塑性[1]。1998年美国生物学家Thomson[2]与Gear     

不同品系大鼠皮下脂肪源干细胞诱导分化能力的比较

目的:对比SD大鼠和Wistar大鼠皮下脂肪源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)体外诱导分化能力,为ADSCs的进一步应用提供实验依据。方法:SD大鼠和Wistar大鼠各6只取腹股沟脂肪垫,培养扩增ADSCs,相差显微镜下观察两个品系来源的ADSCs的形态。用第4代细胞进行成骨和成脂诱导,分别用茜素红和油红O染色观察向成骨细胞分化后的矿化结节和向脂肪细胞分化后的脂质沉积。结果:两个品系来源的ADSCs在细胞形态上没有显著区别,都能进行成骨和成脂诱导分化。结论:SD大鼠和Wistar大鼠腹股沟脂肪垫来源的ADSCs诱导分化能力差异无显著性。     

骨髓间充质干细胞及其向神经元细胞分化的研究进展

早期的干细胞研究主要集中在骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)上。现在发现骨髓中除了造血干细胞以外,还存在一类骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)。BMSCs是与HSC截然不同的一类干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能,能分化为成骨细胞、脂肪细胞、成肌纤维细胞、软骨细胞、内皮细胞、心肌细胞,神经元样细胞[1-2]。在新近的研究中,人们还发现它可以向内胚层及外胚层的细胞分化[3-4],具有     

肝干细胞的研究进展

干细胞(stem cell)是指在适当条件下,具有自我复制、自我更新以及全能或多能分化能力的细胞群. 目前,人们根据干细胞分化能力的不同将其分为3类:①全能干细胞(totipotential stem cells):可以分化形成所有的成体组织细胞,甚至发展成完整的个体,如胚胎干细胞; ②多能干细胞(multi- potential stem cells):具有多向分化潜能,可以分化形成除自身组织以外的其他组织细胞,如造血干细胞、间充质干细胞等;③专能干细胞(unipotenital stem cells):维持某一特定组织细胞的自我更新,如肠上皮细胞等.……     

骨肽对骨髓间充质干细胞TGF-β1表达的影响

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种来源于骨髓的具有多向分化潜能的成体干细胞,可在体外培养,具有自我更新能力;在一定的诱导条件下,MSCs具有向成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、脂肪细胞等多向分化的能力[1].同时因其具有取材方便,易于分离培养,体外扩增快,且自体骨髓干细胞移植不易产生免疫排斥等优点而备受重视,成为组织工程、细胞治疗、基因治疗等领域的研究热点.     

不同来源干细胞神经向分化能力的研究现状

背景:神经系统变性病、脑卒中后遗症、颅脑及脊髓损伤等难治性疾病,多为大量神经元坏死、功能缺失.成年哺乳类动物中枢神经系统损伤后再生能力差,几乎无法产生新的神经元,完成自我修复.因此使损伤或变性的中枢神经组织恢复功能是人类多年来一直未能解决的治疗难题.干细胞的研究应用给神经系统疾病患者带来了希望.目的:干细胞的研究已成为近年的研究热点,检索不同来源干细胞神经向分化的相关文献,对不同来源干细胞神经向分化能力进行比较.方法:应用计算机检索Pubmed相关文献,英文检索词"neuronal differentiation"分别于"embryonic stem cells 、bone marrow mesenchymal stem cells、adipose derived mesenchymal stem cells、peripheral blood stem cells、umbilical cord blood ctem cells"组合检索.搜索以1995-01-01/2009-12-31相关文献,并限定文献语言种类为English.对资料进行初审,并查看每篇文献后的参考文献.筛选近年来不同来源干细胞神经向分化的所有文献.结果与结论:理想的种子细胞应具有创伤小,易于获得,易于体外扩增,不涉及免疫排斥致瘤性及伦理学问题等.目前尚未发现具有以上优点的种子细胞.对于理想种子细胞不仅要考虑取材和法律问题更重要的细胞的定向分化能力.神经系统干细胞移植的种子细胞可以根据干细胞神经向分化能力的选择,由于目前对于各种干细胞神经向分化能力的研究存在很大差别,所以尚不能确定理想的种子细胞.未来的研究需要进一步研究不同来源干细胞的神经向分化能力.     

脂肪干细胞治疗面部老化的研究进展

脂肪干细胞(Adipose-derived stemcells,ADSCs)是一种来源广泛、含量丰富、分离简单的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),属于成体干细胞的一种,被认为是脂肪组织中具有干细胞特性的细胞群,具有多向分化的潜能[1]。AD-SCs经过一定的定向培养后,可以分化为成骨细胞、软骨细胞、     

脂肪来源干细胞诱导表皮细胞化的研究现状与进展

背景：脂肪干细胞通过向表皮细胞进行诱导可以对难愈创面的修复提供理想的解决方法。目的：通过分析总结近10年以来脂肪干细胞的研究方法和思路,期待能为脂肪干细胞诱导表皮细胞化提供总结和探索。方法：由第一作者分别以＂干细胞、脂肪干细胞＂、＂ADSCs、adipose derived stem cells＂为检索词,应用计算机检索重庆维普（VIP）期刊全文数据库以及万方数据库2001-01/2010-10有关文章,纳入有关脂肪干细胞组织工程的文献。排除与研究目的无关和内容重复者。保留26篇文献做进一步分析。结果及结论：脂肪干细胞作为一种种子细胞,有望在一定的条件下定向诱导分化成为表皮细胞,并且提高诱导分化率和扩增能力,最终达到临床治疗使用的目的。其具有的来源丰富、易于获得、有多向分化潜能、相容性好、对患者损伤小等特点无疑是其他众多间充质干细胞所无法比拟的。但同时,脂肪干细胞在无免疫力的移植受体上表现的肿瘤样无限增生特性,在进入临床试验前仍需要寻找并建立合适的动物模型进行长期观测以确定其移植后的安全性;其次,脂肪干细胞向表皮细胞诱导尚无一安全稳定并行之有效的培养、诱导方式;以及在批量提取生产脂肪干细胞的过程中,如何保障细胞质量的均一稳定性仍然有待进一步研究。     

脂肪来源干细胞诱导表皮细胞化的研究现状与进展

背景:脂肪干细胞通过向表皮细胞进行诱导可以对难愈创面的修复提供理想的解决方法.目的:通过分析总结近10 年以来脂肪干细胞的研究方法和思路,期待能为脂肪干细胞诱导表皮细胞化提供总结和探索.方法:由第一作者分别以"干细胞、脂肪干细胞"、"ADSCs 、adipose derived stem cells" 为检索词,应用计算机检索重庆维普(VIP)期刊全文数据库以及万方数据库2001-01/2010-10 有关文章,纳入有关脂肪干细胞组织工程的文献.排除与研究目的无关和内容重复者.保留26 篇文献做进一步分析.结果及结论:脂肪干细胞作为一种种子细胞,有望在一定的条件下定向诱导分化成为表皮细胞,并且提高诱导分化率和扩增能力,最终达到临床治疗使用的目的.其具有的来源丰富、易于获得、有多向分化潜能、相容性好、对患者损伤小等特点无疑是其他众多间充质干细胞所无法比拟的.但同时,脂肪干细胞在无免疫力的移植受体上表现的肿瘤样无限增生特性,在进入临床试验前仍需要寻找并建立合适的动物模型进行长期观测以确定其移植后的安全性;其次,脂肪干细胞向表皮细胞诱导尚无一安全稳定并行之有效的培养、诱导方式;以及在批量提取生产脂肪干细胞的过程中,如何保障细胞质量的均一稳定性仍然有待进一步研究.     

骨髓间充质干细胞成骨诱导及在骨组织工程中的应用研究进展

骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是骨髓基质细胞中具有多向分化潜能的干细胞，它可以向骨、软骨、肌组织、脂肪、神经等多种组织分化。骨髓间充质干细胞以其它干细胞无可比拟的优越性成为骨组织工程种子细胞的理想来源，成为干细胞研究的热点。近年来国内外学对其成骨诱导的生物学特性及在骨组织工程中应用进行了广泛而深入的研究。本就骨髓间充质干细胞成骨诱导及在骨组织工程中的应用研究进展作一综述。[第一段]     

干细胞治疗骨质疏松症的可能与可行

背景：药物治疗骨质疏松并不理想,近年来越来越多的科学家尝试采用干细胞移植方法治疗骨质疏松症。目的：旨在探究通过干细胞治疗骨质疏松的进展,以促进其临床应用。方法：由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库（CNKI）1997-05/2011-10相关文献。在标题、摘要、关键词中以＂stem cell,osteoporosis,bone metabolism,osteoporosisbone marrow mesenchymal stem cells（BMMSCs）,Adipose-derived stem cells（ADSCs）或＂干细胞,骨质疏松,骨代谢,骨髓间充质干细胞,脂肪源干细胞＂为检索词进行检索。选择文章内容与干细胞治疗骨质疏松有关者,同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章。结果与结论：初检得到144篇文献,根据纳入标准选择50篇文献进行综述。应用干细胞治疗骨质疏松主要是通过增加成骨细胞的数量来达到治疗目的,常用的方法有干细胞移植及诱导干细胞分化。干细胞可以从根本上治疗骨质疏松,并且能避免药物治疗的毒副作用,具有广阔应用前景。     

脂肪来源干细胞在慢性创面愈合中作用的研究进展

慢性创面难愈或不愈是目前整形外科亟待解决的难题。脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)除具有与其他间充质来源干细胞类似的性质外,还具有取材方便、来源充足及体型雕塑等优点,成为近年来再生医学领域的研究热点。大量研究表明,ADSCs可通过多种机制促进慢性创面愈合,被认为是一种非常有前景的治疗策略。因此,本文就ADSCs的分离纯化及其在慢性创面修复中的作用机制等作一综述。     

骨组织工程中脂肪间充质干细胞的作用

背景:目前常采用在骨缺损处充填自体骨、异体骨、人工合成骨替代品等方法进行骨缺损修复,但临床效果均不理想.研究表明脂肪间充质干细胞具有多种分化能力及很强的增殖潜力,可将其诱导分化成骨.目的:分析脂肪间充质干细胞在骨组织工程中的应用情况,以明确脂肪间充质干细胞是否可以作为骨组织工程中的种子细胞.方法:应用计算机检索Medline数据库(1999-01/2008-12),以adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,adipose mesenchymal stem cells,adipose stem cell;osteogenic induction,osteogenic inducement,bone induction,osteoblastic induced;chondroblast induction,cartilage induction;bone tissue engineering,tissue engineering bone,tissue engineering of bone为检索词;应用计算机检索清华同方数据库(2003-01/2008-12),以脂肪间充质干细胞、成骨诱导、成软骨诱导、骨组织工程为检索词.结果与结论:共收集361篇关于脂肪间充质干细胞与骨组织工程相关的文献,中文246篇,英文115篇.排除发表时间较早、重复及类似研究,纳入29篇符合标准的文献.脂肪间充质干细胞体外扩增和自我更新能力很强,传代培养易于获得大量有分化能力的细胞,是真正意义上的具有多向分化潜能的干细胞,脂肪间充质干细胞在一定的培养条件下,可定向分化为成骨细胞、软骨细胞及骨细胞和肌肉细胞,配合合适的支架后可以应用到骨组织工程中,可以作为骨组织工程中的种子细胞.     

脂肪间质干细胞多系分化潜能及应用前景

学术背景:脂肪间质干细胞是一类可以自我更新和多向分化的成体干细胞,体内外在一定诱导条件下,可以向脂肪、骨、软骨、肌肉、神经等组织类型的细胞分化,具有广阔的临床应用前景和研究价值。目的:综述脂肪间质干细胞的多系分化研究进展。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1999-01/2007-07的相关文献,检索词"adipose tissue-derived stem cell,cell differentiation,stem cell",并限定文章语言种类为English。共检索到104篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①文章所述内容应与脂肪间质干细胞密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:①重复性研究。②Meta分析。文献评价:文献的来源主要是通过对脂肪间质干细胞多系分化潜能及应用前景方面内容进行汇总分析。所选用的33篇文献中,16篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:①人脂肪间质干细胞表型特征与骨髓间质干细胞非常相似,CD105,STRO-1和CD166是一直被用来鉴别具有多系分化潜能细胞的常用标记物。②脂肪间质干细胞来源于中胚层,与其他成体干细胞一样具有自我更新和多向分化的能力,通过体外诱导可分化为间充质系的成骨细胞、软骨细胞、成脂细胞;同时还可以跨胚层分化,即横向分化,向非间充质系的心肌细胞、骨骼肌细胞、神经细胞等分化。③与其他干细胞相比,脂肪间质干细胞取材容易、数量充足、能避免引起道德争论;明显减轻患者痛苦,且患者行自体移植可克服免疫排斥;此外在体外适当条件下可导入外源基因,作为基因治疗的目的基因载体。结论:脂肪间质干细胞不仅具有多系分化潜能,还能够跨胚层分化,可作为组织工程的种子细胞来源,具有广阔的临床应用及基础研究前景,为今后的细胞治疗、基因治疗提供新视野。     

慢性粒细胞白血病患者骨髓间充质干细胞的分离培养及成脂分化

目的建立慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）患者骨髓间充质干细胞分离纯化培养方法,为慢性粒细胞白血病的后续研究提供实验基础。方法采用密度梯度离心联合贴壁筛选法分离纯化骨髓间充质干细胞（Bone marrowmesenchymal stem cells,BMSCs）,并用地塞米松、牛胰岛素、吲哚美辛、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤诱导BMSCs向脂肪细胞分化。油红O染色,倒置显微镜下观察结果。结果成功分离得到BMSCs,倒置显微镜下观察到BMSCs呈细而长的梭形生长,或多角形生长。诱导48h后出现脂滴,3周后油红O染色显示80%的BMSCs分化为脂肪细胞。结论可以从CML患者的骨髓中分离纯化出间充质干细胞,在体外诱导的条件下,间充质干细胞能向脂肪细胞分化。     

脂肪干细胞的体外诱导与分化

背景:应用脂肪干细胞来作为组织工程的种子细胞是近年来组织工程研究中的一个活跃领域,大量的研究表明在不同的条件下脂肪干细胞可以向机体的不同组织分化.目的:对国内外脂肪干细胞体外诱导分化的现状及新进展作一综述.方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2000-01/2010-10关于脂肪干细胞的文章,在标题和摘要中以"脂肪干细胞,体外分化潜能,种子细胞,转基因"或"Adipose-derived stem cells,cell differentiation in vitro,seeded cell,gene transfaction"为检索词进行检索.选择文章内容与脂肪干细胞体外分化有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到112篇文献,最终入选28篇文献进行综述.结果与结论:脂肪干细胞是存在于脂肪组织中的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞群体.它具有多向系分化潜能,除可以分化为间充质来源的脂肪、骨、软骨以及骨骼肌、心肌等细胞,也可诱导分化为来源于外胚层的神经细胞以及具有功能性的血管内皮细胞.此外脂肪干细胞还具有造血支持作用以及可被腺病毒等高度转染等优点,可以作为基因转移良好的靶细胞.     

间充质干细胞研究进展

<正>间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是1类具有自我更新能力及多向分化潜能的成体干细胞。在不同的诱导条件下可以分化为许多不同的组织,如骨、软骨、脂肪、内皮、肌肉、神经和上皮组织等。MSCs可以从成体多种组织获得,分离方法简便,体外培养方便,便于自体移植、外源基因转染及表达调控等,在细胞治疗、基因治疗及组织再生及     

不同来源的人脂肪干细胞体外成脂诱导分化能力的比较

目的：对同一个体不同部位来源的脂肪干细胞体外成脂诱导分化的能力进行比较，为脂肪干细胞的进一步应用提供实验依据。 方法：实验于2004-11／2005-05在中国协和医科大学整形外科医院研究中心完成。提取5例女性临床吸脂患者（平均年龄32岁）8个部位（大腿前侧、臀上部；臀上部、上腹部；髂腰部；上腹部；背部、上臂）脂肪抽吸组织中的间充质干细胞，体外进行成脂诱导分化。在对照培养基（含体积分数0．1胎牛血清的DMEM培养基）中培养的第l代脂肪干细胞，以3&;#215;10^-4细胞／皿接种到35mm培养皿中，将对照培养基更换为成脂诱导培养基，进行成脂诱导，每周换液2次，以加入对照培养基的培养皿设为阴性对照。继续培养2周，分别取诱导后的细胞和阴性对照细胞各两皿进行油红O染色，以证实细胞中有无脂滴形成。通过油红O染色及阳性细胞记数，分别对来源于3例患者的2个不同部位的脂肪抽吸标本中的脂肪干细胞向成脂细胞分化的能力进行定性和半定量检测，采用卡方检验对不同细胞的成脂诱导分化率进行测定。 结果：①脂肪干细胞成脂诱导分化能力的测定结果：从不同个体的每100mL脂肪抽吸组织中提取的平均脂肪干细胞数目有所不同，从2.45&;#215;10^8-／100mL-1.25&;#215;10^9个／100mL不等；但从同一个体不同部位的脂肪中所获得的干细胞数目却比较近似；根据各例细胞成脂诱导分化率，可得出5例患者8个部位细胞的平均成脂诱导分化率为36．2％。经统计学分析证实同一个体不同部位来源的细胞具有不同的成脂分化能力，获得的平均干细胞数目与年龄无关（r=0．098，P=0．817），而细胞的成脂分化能力与年龄呈明显负相关（r=-0．568，P〈0．01。②成脂诱导后脂肪干细胞形态变化及油红O染色定性结果。脂肪干细胞经诱导后体积增大，分化为成脂细胞，细胞浆中可见许多大小不等的橙红色脂滴，多者可占整个细胞体积的80％-90％，细胞核缩小或偏于细胞的一侧，呈阳性；而在普通培养基中生长的对照细胞未见体积增大和脂滴形成，呈阴性。 结论：患者年龄越大，成脂分化率越低，且同一患者不同部位来源的脂肪抽吸组织中的脂肪干细胞在成脂诱导分化能力上存在差异。提示利用脂肪干细胞进行相关实验时，在患者年龄和取材部位上应有所选择，进一步分析有可能找到获取脂肪干细胞的最佳部位。