癌症高表达蛋白Hec 1与染色体不稳定性

癌症高表达蛋白Hec1是纺锤体检验点信号途径中的一个蛋白,在有丝分裂期位于着丝粒。Hec1-Nuf2复合物是招募纺锤体检验点复合物Mad1/Mad2的重要结构基础。Hec1蛋白可以与26S蛋白酶体亚基相互作用抑制其降解细胞周期素功能。Hec1是用酵母双杂交方法寻找与Rb相互作用蛋白时发现的,Rb可通过与Hec1相互作用调节Smc1与DNA的结合能力,从而参与M期调控。Hec1主要在G2/M期表达,激酶Nek2磷酸化Hec1是其发挥功能的关键。Hec1在一些肿瘤细胞中高表达并且在部分肿瘤组织中表现扩增。Hec1基因的功能异常会引起严重的染色体分离障碍,从而导致染色体不稳定,而染色体不稳定性与肿瘤的发生、发展密切相关。所以Hec1可能成为肿瘤基因治疗的一个新的靶点。     

PTTG ESP1在A549 SPC-A-1细胞株S G2/M期的表达

目的探讨PTTG(pituitary tumortransforming gene)、ESP1(estradiol-stimulated protein 1)在A549、SPC-A-1细胞S、G/M期的表达.方法用双胸苷同步化法同步化A549、SPC-A-1细胞及MRC-5细胞,分别收集S、G2/M期总RNA,做Realtime PCR.结果PTTG在A549细胞和SPC-A-1细胞的S期表达比G2/M期表达高,在MRC-5细胞的在S、G2/M期中P1TG均无表达;ESP1在A549细胞与SPC-A-1细胞及MRC-5细胞的S期表达均比G2/M期表达低.结论PTTG在MRC-5的S、G2/M期都无表达,在A549、SPC-A-1的S期比G2/M期表达增高,提示肿瘤细胞的染色体非整倍体与PTTG的表达增高有关;ESP1在MRC-5和A549、SPC-A-1的S期比G2/M期表达低,说明细胞中姐妹染色体的分离主要依靠于ESP1在G2/M期被激活,而导致姐妹染色体的分离.     

细胞周期及其调控研究进展

细胞周期是指正常连续分裂的细胞从前一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的连续动态过程，也是多阶段、多因子参与的精确而有序的调控过程，可分为5期：即G0期(Gap0。静息期)、G1期(Gap1，DNA合成前期)、S期(DNA synthesis phase，DNA合成期)、G2期(DNA合成后期)、M期(Mitosis，有丝分裂期)，有两个主要限制点，即G1／S限制点(控制细胞从G1期进入S期，能防止受损的碱基复制，修复染色体中的突变)和G2／M限制点(细胞一分为二的控制点．     

Cdc2激酶与肿瘤的相关性研究进展

细胞周期蛋白依赖性激酶Cdc2在细胞周期调控中起着调控G2至M期的作用.在G2后期Cdc2与周期蛋白B(Cyclin B)结合形成Cdc2-Cyclin B激酶复合物,称有丝分裂促进因子(MPF),促使细胞从G2期进入M期.MPF是真核细胞有丝分裂G2~M期转换所必需的蛋白激酶,是调节细胞进入有丝分裂期最关键的蛋白酶[1].当Cdc2过表达时往往会导致细胞恶性增殖,形成肿瘤.     

小鼠窦前卵泡培养成熟后卵母细胞纺锤体的变化

目的小鼠窦前卵泡体外培养得到成熟卵母细胞,观察卵母细胞的染色体和纺锤体形态,分析其变化及原因。方法完整小鼠窦前卵泡培养12 d,得到的卵母细胞进行免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察纺锤体和染色体的形态和分布。结果经过体外培养,得到GV、M I、MⅡ期卵母细胞分别占总数27.9%、37.2%、34.9%;GV期卵母细胞存在完整的染色质圆环,11.8%的M I期卵母细胞显示正常纺锤体和染色体;38.5%的MⅡ期卵母细胞显示正常的纺锤体和染色体。结论小鼠窦前卵泡经体外培养后能够得到成熟的MⅡ期卵母细胞,但是其效率较低。原因可能是卵母细胞骨架结构的异常使染色体分离障碍,部分卵母细胞停留于M I期;同时成熟卵母细胞的受精率低也与纺锤体异常有关。     

纺锤体组装检测点基因BubR1的研究进展

BubR1是酵母细胞有丝分裂监测点基因家族Mad3的同源基因,在哺乳动物中高度保守,其编码的蛋白是纺锤体检测点的重要组成成分之一.BubR1通过参与监测有丝分裂过程中微管与着丝点间的结合状态,感受着丝点上张力的情况来确保染色体的正确分离,以及细胞有丝分裂过程.BubR1的表达水平与纺锤体检测点的功能存在一定的剂量依赖效应,该基因一旦缺失将引起大量非整倍体的产生,从而引发纺锤体检测点的妥协反应.近来有关BubR1的功能和作用机制等方面引起了越来越多研究人员的关注.研究发现,BubR1不仅监控细胞有丝分裂的正常过程,而且在细胞减数分裂、DNA损伤应答、肿瘤、不孕和衰老等方面也发挥着重要的作用.     

大蒜根尖细胞有丝分裂发生异常现象的报告

目的: 报道大蒜根尖细胞有丝分裂中的异常现象.方法: 常规染色体压片法.结果: 用矿泉水培养的3批不同大蒜根尖有丝分裂相中均出现了滞后染色体、染色体断片、染色体桥、多极化等染色体畸变现象.结论: 大蒜根尖细胞有丝分裂中存在染色体异常现象,是遗传学实验中观察染色体变异的好材料.     

胃癌分子靶向药物治疗的现状与展望（下）

2 细胞周期相关的靶向药物 2. 1 Aurora 激酶抑制剂 Aurora 激酶（ A、B 和 C） 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,其调节不同有机体的有丝分裂进程,控制着丝粒的成熟、分离及有丝分裂的进行、纺锤体的形成和染色体的排列。     

骨肉瘤细胞中H3K79me2，3参与有丝分裂期调控的研究

目的：为了研究组蛋白3第79位赖氨酸二甲基化和三甲基化（H3K79me2,3）水平在骨肉瘤细胞有丝分裂期的变化及对有丝分裂期进程的影响。方法：利用细胞周期同步化方法,观察骨肉瘤细胞U2OS在有丝分裂期前中期到出有丝分裂期各阶段H3K79me2,3水平的变化;并用特异性抑制剂EPZ5676抑制H3K79甲基化水平,用Western blot及活细胞荧光激光共聚焦检测其对有丝分裂期进程的影响。结果：在骨肉瘤细胞U2OS中,H3K79me2,3水平在有丝分裂期前中期下降,并随着细胞出有丝分裂期,H3K79me2,3水平逐渐增加,使用抑制剂进一步降低其在有丝分裂期的水平并抑制其随后的增加,对有丝分裂期中期到后期的转化过程影响不明显,但会引起姐妹染色单体分离错误出现的比例增高（χ2=4.99,P=0.026）。结论：H3K79me2,3水平在骨肉瘤有丝分裂期前中期降低,并随着细胞出有丝分裂期逐渐升高,这种变化可能与确保姐妹染色单体正确分离的相关调控有关。     

Nek2与肿瘤及其耐药性研究进展

Nek2是NIMA相关蛋白激酶家族中一个成员,是一种特殊的染色体不稳定（chromosomal instability,CIN）基因,Nek2蛋白是调节有丝分裂进程关键的蛋白,在中心体分离、纺锤体形成和有丝分裂进程中起重要作用。笔者分别从Nek2在肿瘤染色体不稳定、有丝分裂纺锤体组装监控点、中心体分裂和肿瘤耐药性中所起的作用来阐述Nek2与肿瘤的关系。     

磷酸二酯酶3A在小鼠受精卵早期发育中的表达

目的:研究磷酸二酯酶3A(PDE3A)在小鼠受精卵第1次有丝分裂中的表达.方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法检测小鼠受精卵在第1次有丝分裂的G1、S、G2及M期,在mRNA水平PDE3A的表达.结果:在mRNA水平,PDE3A在G2、M期的表达较G1、S期明显增高.结论:小鼠受精卵中有PDE3A基因的表达;在小鼠受精卵第1次有丝分裂过程中,PDE3A在mRNA水平的表达具有阶段特异性,因而,PDE3A很可能参与对受精卵早期发育的调控.     

新发现的细胞周期抑制剂-p27

细胞周期是指正常连续分裂的细胞从前一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂完成所经历的连续的动态过程 ,此过程的顺序经过Ｇ1期、Ｓ期、Ｇ2期、Ｍ期 4个阶段。通过细胞周期 ,细胞实现ＤＮＡ的复制、染色体凝缩和分离、中心体的复制和分离、纺锤体的形成和伸长、核膜的破裂与再形成等过程 ,协调上述过程的是细胞周期素—周期素依赖激酶 (ｃｙｃｌｉｎ -ＣＤＫ)复合体 ,其中ｃｙｃｌｉｎｓ是调节亚单元 ,ＣＤＫｓ为催化亚单位 ,反应底物为Ｒｂ蛋白 ,通过Ｒｂ蛋白的磷酸化而实现细胞周期的转换 (正调控 ) ;同时ＣＤＫｓ又受ＣＤＫＩＳ(细胞周期蛋…     

Polo样蛋白激酶1参与有丝分裂调控的研究进展

作为细胞周期的关键环节,有丝分裂过程受到严格而精细的调控,随着对有丝分裂调控的探讨与拓展,也逐渐加深了人们对生命本质的理解。研究发现Polo样蛋白激酶1(PLK1)参与细胞有丝分裂调控的各环节,该文拟归纳总结Plk1在有丝分裂中诸如CDK1-Cyclin B复合物的激活、纺锤体形成、染色体分离和胞质分裂这些过程中的研究进展,并描绘PLK-1在有丝分裂调控中的作用与意义,为进一步深入探讨PLK-1与有丝分裂调控指出可能的发展方向。     

Aurora激酶A调控卵母细胞减数分裂的分子机制

Aurora激酶A(AURKA)是Aurora激酶家族成员,其参与有丝分裂进入、中心体成熟和分离、双极纺锤体组装和稳定以及染色体的凝集和分离。AURKA在减数分裂过程中发挥的作用与有丝分裂类似,但其具体作用机制以及其与有丝分裂的异同尚不清楚。因此本文从AURKA在卵母细胞减数分裂中的定位与活化,及其在调控纺锤体形成、纺锤体组装检查点活化以及动粒-微管附着纠错等方面进行综述,对比AURKA在有丝分裂和卵母细胞减数分裂中的异同,为今后进一步揭示细胞分裂调控机制以及癌症和生殖等相关临床研究奠定理论基础。     

阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成及细胞凋亡的影响

①目的探讨阿克拉霉素对Hela细胞染色体形成的影响机制及与细胞凋亡的关系。②方法　MTT测定阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值。不同浓度阿克拉霉素作用于Hela细胞24h后,制备染色体,Giemsa染色、观察。应用吖啶橙和嗅乙啶双荧光染色及DNA凝胶电泳检测细胞凋亡。Western-blot分析丰胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)含量变化。③结果　阿克拉霉素对Hela细胞的IC50值为6.83μg/ml。染色体分析表明,阿克拉霉素作用于Hela细胞一定时间后,染色体凝集不规则.正常M期染色体形成受阻。细胞凋亡检测可见不同药物组差异显著。Western-blot分析表明,高浓度药物处理组Caspase-3表达比对照组显著增加。④结论　阿克拉霉素能够阻止Hela细胞染色体形成与分离.导致细胞G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡。Caspase-3在Hela细胞凋亡中发挥重要作用。     

关于染色质的结构

染色质(chromatin)是间期细胞在电镜下所见的纤维状细丝,而染色体(chromosome)则是细胞进行有丝分裂时在光镜下所见的棒状结构。当细胞周期由间期进入有丝分裂期时,染色质高度螺旋卷曲密集成染色体。这样看来,染色质与染色体在化学组成上是基本相同的。大多数人认为,二者均由组蛋白、DNA、非组蛋白染色体蛋白质(Nonhistone chromosomal protein缩写为NHCP)以及RNA所组成。各组成成分之     

正常人与白血病患者骨髓细胞间期染色体的诱导及增殖潜能的分析

以细胞融合技术将间期细胞与有丝分裂期细胞融合,前者可被诱导而显示间期染色体(即PCC,Prematurely condensed chromosome),其形态特征依赖于间期细胞在融合时所处的生长时相。G_1期在细胞周期中占据最重要的地位,G_1期染色体形态变异也较大。     

G2／M 期阻滞因素及常用诱导方法

细胞周期检查点（ checkpoint ）是真核细胞为保证染色体数目的完整性及细胞周期正常运转而存在的重要控制机制。虽然正常细胞存在多个周期检查点,但肿瘤细胞普遍存在G1期检查点缺陷,并且肿瘤细胞在DNA损伤后,都有选择性地滞留于G2期的趋势。因此G2／M期检查点成为肿瘤治疗的一个诱人靶标［1］。当把肿瘤细胞长时间阻滞于G2／M期,一方面能够抑制肿瘤的生长,另一方面使肿瘤细胞累积DNA损伤而触发凋亡［2］,起到治疗肿瘤的效果,而采用此种治疗策略的前提就是要用有效的方法把肿瘤细胞阻滞于G2／M期。当前,国内外对G2／M期阻滞的研究主要集中于周期素依赖激酶1（CDK 1）和细胞周期素B（Cyclin B）的信号调控和细胞骨架对有丝分裂的影响,本文就G2／M阻滞的因素及常用的G2／M阻滞方法作一回顾,为发现G2／M期阻滞的新机制和方法奠定基础。     

Aurora-A在细胞有丝分裂中作用及与肿瘤关系

有丝分裂过程的偏差会造成中心体扩增、染色体异常分离以及非整倍体的产生,导致基因组不稳定,从而引发肿瘤.为使姊妹染色单体和其他细胞成分能够均等地进入子细胞,需要一系列蛋白质的可逆的磷酸化作用,这其中包括Aurora激酶家族[1].     

牛带绦虫染色体标本制作的实验研究

目的探讨绦虫染色体标本制作的影响因素。方法采用RPMI-1640培养液加秋水仙素体外培养—低渗处理—空气干燥技术,观察1640培养液不同液量、培养时间、秋水仙素不同剂量及不同的低渗液在标本制作过程中的效应。结果牛带绦虫成节生殖细胞有丝分裂指数在培养4h最高;培养液量以每节片6ml的1640培养液最好;秋水仙素剂量以0.1mg/ml为适宜,有良好的促进有丝分裂的作用;低渗液处理以0.075M氯化钾为佳,染色体清晰、分散程度好。结论以0.1mg/ml秋水仙素的1640培养液(6ml每节片)在37℃连续培养牛带绦虫生殖细胞4h,然后用0.075M氯化钾低渗空气干燥技术制作的染色体标本,效果最佳。