抗痫灵对癫痫大鼠脑电图及海马NMDAR1表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮点燃癫痫大鼠模型脑电图及海马NMDAR1表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠60只,体质量180～220g,随机分成空白组、模型组、抗痫灵高、中、低剂量组、丙戊酸钠(VPA)组各10只。点燃后各组大鼠描记脑电图,低温条件下迅速断头取脑,用免疫印迹(Westernblot)方法观察各实验组大鼠海马的NMDAR1活性变化。结果:抗痫灵组、丙戊酸钠组、模型组阳性细胞表达与空白组相比有显著性差异(P0.05),抗痫灵组显著低于模型组(P0.01)。结论:抗痫灵对戊四氮点燃大鼠癫痫发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低模型大鼠海马NMDAR1活性有关。     

中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织海马凋亡相关因子C-fos蛋白表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠海马组织中C-fos蛋白表达水平的影响,探讨中药复方抗痫灵治疗癫痫的可能作用机制。方法:将90只Wistar大鼠随机分成空白对照组(10只),戊四氮(PTZ)腹腔注射(ip)法造模组(80只)。将戊四氮所诱导成功的癫痫大鼠随机分成5组,分别为癫痫模型组,丙戊酸钠治疗组,抗痫灵低剂量治疗组,抗痫灵中剂量治疗组,抗痫灵高剂量治疗组。观察大鼠痫性发作时,空白组、模型组及治疗各组大鼠行为,并采用免疫组化方法检测大鼠脑组织中海马C-fos蛋白表达,采用实时荧光定量(Real time PCR)方法检测大鼠海马组织中C-fos mRNA的相对表达。结果:各治疗组大鼠C-fos蛋白阳性目标面密度值较模型组均显著降低,差异具有统计学意义(P0.01),但均未达到空白组水平(P0.01);西药组和中药中剂量组的阳性目标面密度值与其他各组相比差异具有统计学意义(P0.05);各治疗组之间相比差异无统计学意义(P0.05),模型组大鼠海马中C-fos mRNA表达较模型组均显著降低,差异具有统计学意义(P0.05),但均未达到空白组水平(P0.01)。结论:中药复方抗痫灵对癫痫病的抗痫作用可能是通过降低癫痫大鼠大脑内C-fos的水平从而抑制神经元细胞的凋亡而达到抗癫痫作用的。     

中药复方对戊四氮致痫大鼠海马PKCα表达的干预作用

目的：观察戊四氮（PTZ）致痫大鼠海马神经元PKCα表达以及中药复方AAP的影响。方法：健康成年雄性Wistar大鼠,随机分为6组（n=24）：正常组（Normal）;②模型组（PTZ）;③中药大剂量组（AAPl）、④中药中剂量组（AAPm）、⑤中药小剂量组（AAPs）、⑥西药丙戊酸钠组（VPA）。复制戊四氮致痫大鼠模型,于致痫后12h、2天、5天、7天相应时间点取材,制备脑标本;免疫组化技术检测海马神经元PKCα表达。结果：正常组海马内PKCα阳性细胞表达较少;与正常组相比,模型组大鼠海马PKCα阳性细胞表达增加（P〈0.05）,差异显著;与模型组比较,中药AAPl、AAPm、AAPs各组PKCα阳性表达减少;7天,与模型组及VPA组相比,中药AAPl、AAPm、AAPs各组PKCα阳性表达降低,P〈0.05,差异显著。与PTZ组相比,VPA组海马CA3区PKCα阳性表达无显著差异（P〉0.05）。结论：PKCα在PTZ致痫大鼠海马中表达增强,可能在癫痫发作中起作用;中药复方AAP可降低致痫大鼠海马PKCα表达,有一定脑保护作用。     

抗痫灵对癫痫大鼠脑内nNOS活性影响的实验研究

目的:观察中药抗痫灵对戊四氮点燃癫痫大鼠模型的影响,进一步探讨从调节一氧化氮合酶(nNOS)的nNOS(神经元型)亚型代谢的角度探讨抗痫灵的抗癫痫作用机制。方法:动物模型采用戊四氮点燃大鼠模型。免疫印迹(Western blot)方法观察实验各组大鼠大脑海马nNOS的活性变化。结果:抗痫灵组、丙戊酸钠组、模型组阳性细胞表达与正常对照组相比,有显著性差异(P0.05),模型组较正常对照组大鼠脑nNOS内活性显著升高(P0.01),中药组显著低于模型组(P0.01)。结论:抗痫灵对戊四氮点燃大鼠癫痫发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低模型大鼠脑内nNOS活性有关。     

柴贝止痫汤对颞叶癫痫大鼠 GABAARα1 NMDAR1 表达的影响

目的：本研究通过比较不同药物干预下对GABAARα1、NMDARl表达的影响,探讨柴贝止痛汤抑制颞叶癫痫发作的分子病理机制。方法：腹腔注射氯化锂一匹罗卡品制成颞叶癫痫模型,通过免疫组织化学方法和显微图像分析技术检测大鼠颞叶、海马的1一氨基丁酸受体（GABAARα1）和谷氨酸受体（NMDAR1）的表达。结果：GABA．Rod的表达,与空白模型组比较,柴贝止痫汤组、柴贝止痫汤联合卡马西平组癫痫大鼠海马CAI、CA3区及颞叶皮层的GABA。Red亚单位表达均明显增强,有高度显著性差异（P〈0．01）,但柴贝止痫汤组与柴贝止痫汤联合卡马西平组之间无显著性差异（P〉0．05）。与正常组比较,空白模型组和卡马西平组癫痫大鼠海马CA1、CA3区及颞叶皮层的GABAARα1表达均明显减少,有高度显著性差异（P〈0．01）。NMDARl的表达,与正常组比较,柴贝止痫汤组、柴贝止痛汤联合卡马西平组、卡马西平组、空白模型组海马CAl、CA3区及颞叶皮层的NMDAR1表达均明显增高,有显著性差异（P〈0．05）,但柴贝止痫汤组、柴贝止痫汤联合卡马西平组、卡马西平组、空白模型组各组之间无显著性差异（P〉0．05）。结论：柴贝止痫汤可以提高GABAARα1的表达,而对NMDAR1无明显影响。对GABAARα1表达的调节是柴贝止痫汤控制癫痫的可能机理之一。     

银杏叶提取物对戊四氮诱导大鼠癫痫发作和Cav3．2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（GBE）对戊四氮（PTZ）慢性致痫大鼠模型癫痫发作的影响及脑保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组：PTZ致痫组、PTZ＋丙戊酸（VPA）组、PTZ＋VPA＋GBE组、生理盐水（NS）对照组,每组10只,观察各组大鼠的行为学、脑电图（EEG）、电迷宫正确率和颞叶海马T型ca2＋通道Car3．2表达变化。结果PTZ＋VPA组、PTZ＋VPA＋GBE组和NS组发作级别为0-Ⅱ级,EEG正常或少量棘慢波,EEG总功率差值及颞叶海马Cav3．2水平较PIE组显著降低,差别有统计学意义（P〈0．05）;相比于PTZ＋VPA组,PTZ＋VPA＋GBE组颞叶海马Cav3．2表达明显减少,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论GBE能降低Car3．2水平,显著降低癫痫大鼠发作级别、减少脑部异常放电和改善认知功能,有辅助抗癫痫和脑保护作用。     

抗痫灵对戊四氮诱导癫痫大鼠海马区Bcl-2mRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠海马Bcl-2mRNA及其蛋白表达的影响。方法:观察大鼠痫性发作行为;采用免疫组化方法检测大鼠脑组织中海马Bcl-2蛋白的表达;采用实时荧光定量(Real timePCR)方法检测大鼠海马组织Bcl-2mRNA的相对表达。结果:经过中药复方抗痫灵治疗6周后,大鼠痫性发作行为明显减少;海马区抑制凋亡基因Bcl-2mRNA及其蛋白表达均升高。结论:抗痫灵能减少癫痫发作次数,上调海马区抑凋亡基因Bcl-2mRNA及其蛋白表达。     

针刺对戊四氮致痫大鼠抗癫痫机制的研究

目的:探讨针刺对戊四氮(PTZ)致痫大鼠抗癫痫的作用机制.方法:将实验大鼠分为NS组、PTZ组和针刺组,造模后观察各组大鼠癫痫发作的行为学表现,采用免疫组化法检测大脑皮质及海马caspase-3在36 h和72 h时间点免疫反应性,采用半定量RT-PCR法检测海马bcl-2、bax蛋白表达.结果:针刺组大鼠癫痫发作较P...     

天麻素对戊四氮致痫大鼠的脑保护作用

目的：探讨天麻素对戊四氮致痫大鼠的神经元、星形胶质细胞和血管内皮的保护作用。方法：Wistar大鼠,随机分成5组,对照组,戊四氮（PTZ）致痫组,丙戊酸钠（VPA）干预组,小剂量天麻素（Gs）干预组和大剂量天麻素（Gb）干预组。每组分4个时间点：12小时、48小时、5天和7天。HE染色观察海马区组织学改变,免疫组化检测海马区的GFAP和CD34变化。结果：除对照组无痫样发作外,其余各组全部出现Racine分级Ⅳ-Ⅴ级痫样的发作。HE染色示PTZ组海马区神经元及血管内皮细胞变性、坏死显著;VIA组和天麻素组损害较轻。免疫组化结果显示PTZ纽GFAP染色在海马区和血管有高表达,5天达高峰;CD34表达水平在48小时以内较低,5天达高峰;与VPA组、Gs组和Gb组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：天麻素能减轻戊四氮致痫大鼠海马区神经元、星形胶质细胞和血管内皮细胞的损伤,从多个层面保护脑组织,减轻由癫痫导致的损伤。     

抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠行为的影响及其对海马神经元的保护作用。方法观察模型组、抗痫煎剂低剂量组、抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组的大鼠痫性发作,采用免疫组化染色法观察Bcl-2蛋白的表达。结果抗痫煎剂高剂量组、丙戊酸钠组与模型组相比,癫痫发作潜伏期差异有统计学意义。抗痫煎剂低、高剂量组、丙戊酸钠组较模型组Bcl-2细胞增多。结论抗痫煎剂对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元有一定的保护作用。     

抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑电图及脑组织病理形态学的影响

目的:通过观察中药复方抗痫灵对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑电图及脑组织病理形态学的影响,探讨其抗痫的作用机制。方法:采用光镜及尼氏体染色的方法观察大鼠脑组织的病理形态学变化。结果:经中药复方抗痫灵治疗6周后,戊四氮致痫大鼠海马区神经元的变性、坏死均不同程度的减轻。结论:中药复方抗痫灵能够不同程度减缓癫痫发病过程中海马区神经元的变性、坏死,从而减少癫痫的发作次数及发作症状。     

温针灸百会穴和神门穴对癫痫大鼠细胞凋亡因子P53的影响

目的：通过观察温针灸百会、神门穴对戊四氮点燃癫痫大鼠细胞凋亡因子P53及行为学的变化,为临床使用温针灸百会、神门穴治疗癫痫提供实验依据。方法：取健康成年雄性SD大鼠腹腔注射戊四氮（35.0 mg/kg）点燃大鼠癫痫模型,参照Racine的6级评分标准,记录行为学表现。造模成功后分为空白组6只、温针灸10天组6只、温针灸20天组6只、针刺10天组6只、针刺20天组6只和模型组6只共6组,温针灸组及针刺组大鼠均选取百会、神门穴。治疗每日1次。模型组、空白组不给予任何治疗。治疗结束后,用免疫组化法测定海马区脑切片中P53含量变化。结果：空白组与模型组,模型组与温针灸组相比较大脑海马回脑切片中P53含量均有显著改变（P〈0.01）;温针灸组与针刺组相比P53水平显著改变（P〈0.05）;温针灸对癫痫大鼠行为有明显改善。结论：戊四氮致痫大鼠的机制与P53有相关性,温针灸百会及双侧神门穴可以改善癫痫大鼠细胞凋亡因子P53水平,温针灸在改善癫痫大鼠细胞凋亡因子P53及行为上优于针刺方法。     

抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织中海马区c-fos蛋白表达的影响

目的:研究中药复方抗痫灵抑制癫痫的发病机制。方法:采用免疫组化方法和实时荧光定量PCR(Real timePCR)方法检测大鼠脑组织中海马c-fos蛋白表达的影响。结果:经中药复方抗痫灵治疗6周后,致痫大鼠脑组织海马区c-fos蛋白阳性表达显著降低。结论:中药复方抗痫灵可能通过减少戊四氮致痫大鼠脑组织海马区c-fos蛋白的阳性表达,对癫痫有明显的抑痫作用。     

戊四氮致癫痫大鼠海马HSP70表达的初步研究

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在不同发作级别的癫痫大鼠海马结构的表达及意义。方法采用戊四氮致痫模型,随机分为对照组和模型组,模型组按癫痫发作级别又分为Ⅰ级、Ⅲ级、Ⅴ级组。采用免疫组织化学方法观察不同级别癫痫发作海马内HSP70表达的变化;常规病理学染色观察各组海马区神经元的受损情况。结果对照组与Ⅰ级组海马结构内未见HSP70免疫反应阳性细胞,而Ⅲ级组、Ⅴ级组海马各区的HSP70阳性细胞数与对照组比较逐渐增多（P〈0．05）。病理检查发现,Ⅲ级、Ⅴ级组海马结构内存在受损异常神经元．Ⅴ级组更明显。结论戊四氮致痫癫痫模型中,随着发作级别的增加,海马结构内神经元损伤渐加重,HSP70的表达亦逐渐增加,提示海马结构HSP70的表达与癫痫发作严重程度有关。     

抗痫方对癫痫模型大鼠海马神经元γ-氨基丁酸A受体α1表达的影响

目的:观察抗痫方对戊四氮致痫大鼠海马神经元γ-氨基丁酸A受体α1(GABAARα1)表达的影响。方法:120只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、抗痫方大剂量组、小剂量组和丙戊酸钠组,每组24只。对照组和模型组分别给予生理盐水每日4 ml/kg灌胃;抗痫方各组分别给予大、小剂量(10.26 g/kg、5.13 g/kg)灌胃,西药组给予丙戊酸钠每日20 mg/kg灌胃,每日1次,连续7 d。造模第1天,除对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(PTZ)75 mg/kg,复制急性癫痫模型;于致痫后12 h、2 d、5 d、7 d相应时间点取材,制备脑标本,免疫组化检测大鼠海马GABAARα1表达。结果:与对照组比较,模型组GABAARα1免疫反应阳性表达减少(P<0.05);与模型组比较,抗痫方大、小剂量组GABAARα1阳性表达增加(P<0.05)。结论:抗痫方可提高GABAARα1表达,降低神经元兴奋性,有脑保护作用。     

电针“太阳”透“百会”对PTZ致痫大鼠海马pCREB及NSE的影响

摘要：目的：观察电针透刺“太阳”透“百会”对戊四氮( PTZ) 致痫大鼠行为学、海马内pCREB及NSE表达情况,探讨其抗痫的机制。方法：采用随机分组将32只大鼠动物分成空白组、模型组、西药组及电针透穴组,每组各8只。除空白组外,采用戊四氮（PTZ）腹腔注射将其余24只大鼠制备为癫痫模型。记录各组大鼠一般状态、行为学改变等情况,免疫组化法及Western-blot检测海马组织pCREB及NSE表达变化情况。结果：模型组、西药组及电针透穴组与空白组比较,体质量明显降低;模型组大鼠海马组织的pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显升高,具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,西药组、电针透穴组大鼠的体质量均明显增加、痫性发作潜伏期延长、高等级痫性发作减少,差异具有显著性差异(P＜0.05);与模型组比较,电针透穴组pCREB及NSE阳性细胞数及细胞核蛋白浓度明显降低,具有显著性差异(P＜0.05)。结论：头部电针透穴可改善PTZ致痫大鼠一般状态,减轻痫性发作,延长发作潜伏期,可降低海马组织pCREB及NSE表达,其抗痫机制可能通过减轻神经元损伤实现。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑细织中SS、5-HT和ATP酶的影响

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织中生长抑素（ss）、5一羟色胺（5-HT）和ATP酶的影响,探讨灵芝孢子粉的抗癫痫作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠30只,分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉组,每组10只。癫痫模型组采用戊四氮腹腔注射＋0．9％NaCl溶液灌胃;灵芝孢子粉组采用戊四氮腹腔注射＋灵芝孢子粉灌胃;空白对照组采用0．9％NaCl溶液腹腔注射＋0．9％NaCl溶液灌胃。各组分别干预28天后断头取脑,行免疫组化染色法和比色法,观察脑组织中SS、5-HT和ATP酶含量变化。结果①灵芝孢子粉组和癫痫模型组均达到癫痫模型“点燃”标准。②免疫组织化学染色显示：癫痫模型组大脑皮质及海马SS免疫反应阳性细胞数比空白对照组明显增多,差异具有统计学意义（P〈0．01）;灵芝孢子粉组大脑皮质及海马SS免疫反应阳性细胞比癫痫模型组数减少,差异具有统计学意义（P〈0．01）;③癫痫模型组海马5-HT含量明显低于空白对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;灵芝孢子粉组海马5-HT含量比癫痫模型组增多,差异具有统计学意义（P〈0．05）。④癫痫模型组大脑皮质及海马ATP酶含量低于空白对照组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;灵芝孢子粉组高于癫痫模型组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠脑皮质和海马区SS的含量,同时能提高脑组织中5-HT和ATP酶的含量,使神经元兴奋性减弱,减轻癫痫的发作,从而降低癫痫发作给神经系统带来的损伤。     

抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织海马区p53表达的影响

目的:观察中药复方抗痫灵对戊四氮致痫大鼠脑组织细胞凋亡因子p53表达的影响,从分子生物学水平探讨癫痫的发病机制.方法:采用免疫组化方法和实时荧光定量PCR(Real time PCR)方法,检测大鼠脑组织海马区p53表达的影响.结果:经中药复方抗痫灵治疗6周后,致痫大鼠脑组织海马区p53蛋白阳性表达明显减少.结论:中药复方抗痫灵能够通过降低致痫大鼠脑组织海马区p53蛋白的阳性表达,对癫痫有明显的抑痫作用.     

天麻素穴位注射对戊四氮致痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的:探究天麻素穴位注射对戊四氮致痫模型大鼠行为学及脑内海马区凋亡调控因子Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法:通过腹腔注射戊四氮建立癫痫大鼠模型。按随机数字表法分为空白组(N组)、模型组(M组)、穴注组(AI组)及西药组(SV组),每组各30只。观察记录大鼠行为学变化,并于致痫后处死大鼠,取脑组织海马区以SABC法检测Bcl-2、Caspase-3阳性细胞数,并以RT-PCR及Western Blot分别检测Bcl-2、Caspase-3 mRNA及其蛋白的表达。结果:除N组外,其余各组大鼠均有不同程度的痫性发作。与M组比较,AI组及SV组均可提升癫痫大鼠脑组织海马区中Bcl-2阳性细胞数、基因及蛋白的表达,差异显著(P 0. 05),而AI与SV组比较无明显差异(P 0. 05);同时AI组及SV组可有效降低癫痫大鼠脑组织海马区中Caspase-3阳性细胞数、基因及蛋白的表达,与M组比较差异显著(P 0. 05),且AI与SV组比较无明显差异(P 0. 05)。结论:天麻素穴位注射可有效抑制癫痫模型大鼠痫性发作,并可显著上调致痫模型大鼠脑组织海马区中抗凋亡因子Bcl-2的表达,下调其凋亡因子Caspase-3的表达,此治法治疗癫痫疗效确切。     

愈痫灵颗粒对戊四氮致痫大鼠BDNF表达与认知障碍的影响

目的:探讨愈痫灵颗粒(YXLG)对痫性大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)表达与认知障碍的影响。方法:选取150只清洁级SD大鼠,从中随机选取10只作为正常组。其余动物用戊四氮(PTZ)造模。将符合模型标准的大鼠随机分为4组,即愈痫灵颗粒组、拉莫三嗪组、丙戊酸钠组和模型组。用跳台实验、开场实验测试大鼠的学习、记忆能力,采用免疫组织化学方法检测BDNF在海马内表达的变化。结果:开场实验:抗痫药物干预后,各组学习、记忆成绩比较有显著差异(P0.01),模型组与愈痫灵颗粒组比较有显著差异(P0.01)。跳台实验:抗痫药物干预后,各组反应期和潜伏期及学习、记忆成绩比较有显著差异(P0.01),模型组与正常组比较有显著差异(P0.01),愈痫灵颗粒组与正常组比较无显著差异(P0.05)。BDNF表达:各组大鼠海马BDNF阳性细胞平均灰度值与平均光密度比较有显著差异(P0.01),模型组与愈痫灵颗粒组比较有显著差异(P0.01)。结论:提高PTZ致痫大鼠海马区BDNF的表达是愈痫灵颗粒改善癫痫大鼠认知功能的机制之一。