MMP-2、MMP-9在自体移植静脉表达及活性变化

目的 探讨自体移植静脉基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达及活性的变化.方法 建立兔自体静脉旁路移植模型后3、7、28 d切取移植静脉,取对侧未移植静脉为自身对照.行HE和Verhoeff弹性纤维染色观察组织病理变化,计算机病理图像分析系统测量新生内膜厚度及面积,半定量逆转录-PCR检测静脉壁MMP-2和MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9活性,应用免疫组化法检测MMP-2蛋白表达.结果 术后7、28 d移植静脉内膜明显增生.与未移植静脉相比,术后3 d,移植静脉MMP-2、MMP-9 mRNA表达已明显增高,7 d达峰值(P＜0.01),术后28 d渐下降至正常水平,但MMP-9 mRNA表达仍维持较高水平.术后三个时间点移植静脉壁MMP-2、MMP-9活性显著增加.结论 自体移植静脉MMP-2、MMP-9表达及活性显著增强,促进移植静脉内膜增生.     

辛伐他汀对自体移植静脉内膜增生的抑制作用

目的 研究辛伐他汀对自体移植静脉内膜增生的影响.方法 48只健康成年家兔随机均分为辛伐他汀治疗组(A组)和生理盐水对照组(C组).建立自体静脉旁路移植模型,术后3、7、28 d切取移植静脉,观察组织病理变化,测量新生内膜厚度及面积,检测静脉壁增殖细胞核抗原(PCNA)表达,RT-PCR检测静脉壁基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9活性.结果 与C组比较,A组术后内膜增生、移植静脉壁阳性细胞数以及MMP-2、MMP-9 mRNA表达和活性均明显减少(P<0.05).结论 辛伐他汀可抑制自体移植静脉内膜增生,其作用机制可能是通过抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖并限制其向内膜迁移而实现的.     

MMP-2、MMP-9在大鼠皮肤创面愈合过程中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9在大鼠皮肤创面愈合过程中表达的动态及其相关性。方法 42只大鼠制作大鼠背部皮肤创面模型后按取创面皮肤时间随机均分为七组,即在创面形成后1、12、24h及3、7、14、21d切取背部皮肤创面标本,采用免疫组化法检测标本中MMP-2及MMP-9的表达。另取3只正常大鼠背部皮肤标本作为对照。结果正常大鼠皮肤中MMP-2、MMP-9几无表达;背部皮肤创面形成后,MMP-2逐渐升高,14d达峰,21d仍高于正常水平;MMP-9迅速升高,在24h-7d呈高水平表达,后逐渐降至较低水平;MMP-2与MMP-9的表达水平在12h,3、7、14、21d时呈正相关,在24h时呈负相关。结论在大鼠创面愈合过程中MMP-2和MMP-9的表达有一定规律,并且二者相互影响。     

bFGF反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法 Wistar大鼠48只,分为反义寡核苷酸(AODN)组、正义寡核苷酸(SODN)组、随机寡核苷酸(RODN)组、空白对照组。将含300μg寡核苷酸的F127多聚凝胶溶液涂于移植静脉及吻合口外周,对比术后1周、2周移植静脉平均内膜及中膜厚度。并检测血管壁细胞内bFGF蛋白表达。结果术后1周、2周,AODN组内膜厚度、内膜/中膜及bFGF阳性细胞率均小于其它各组,差异均有显著性(P<0.05)。而SODN组、RODN组,空白对照组之间比较,均无显著性差异(P>0.05)。术后2周,SODN组、RODN组、空白对照组内膜增生较术后1周时明显,差异有显著性(P<0.05)。结论 bFGF反义寡核苷酸通过对bFGF基因表达的抑制作用,达到了抑制移植静脉内膜增生的目的 。     

自拟川黄三七汤防治自体移植静脉再狭窄的实验研究

目的研究自拟川黄三七汤对兔颈外静脉移植至股动脉后再狭窄的防治作用,并探讨可能的机制。方法 50只新西兰大白兔,随机分为实验组(川黄三七组)、对照组(生理盐水组)。实验组术前3d开始采用灌胃法给予川黄三七汤,对照组给与等量生理盐水,1次/d,直至术后取材。所有动物于术日建立自体静脉旁路移植模型:利用显微外科技术将颈外静脉端侧吻合于股动脉,于术后4周取血管桥标本,同时取0.5cm移植静脉作为正常静脉参照。光镜下观察、测定移植静脉内膜中膜厚度变化。扫描电镜观察近吻合口处和中央部静脉桥的管腔狭窄程度,管腔增生面积与管腔面积比(S1/S2),统计学分析各组间差异。结果移植4周后,各组静脉均有内膜及中膜较正常颈静脉明显增厚表现,实验组内膜及中膜增厚较对照组轻。两组静脉桥的管腔狭窄程度进行比较存在明显差异。结论川黄三七汤能抑制动脉化静脉内膜及中膜增厚,有减轻桥静脉狭窄的作用。     

银杏叶提取物对犬低温体外循环下肺MMP-2和MMP-9 mRNA的影响

目的探讨银杏叶提取物EGb(Ginkgo biloba Extract,EGb)对犬低温体外循环时肺组织MMP-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA表达的影响。方法将14只健康杂种犬随机分为对照组(C组)和银杏叶提取物组(EGb组),每组7只。EGb组在麻醉后开胸之前给予银杏叶提取物8 mg/kg溶于0.9%生理盐水100 mL静脉滴注,C组以等量生理盐水静脉滴注。体外循环60 min,心脏复跳并循120 min后取肺组织用半定量RT-PCR检测基质金屈蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达水平。结果与C组比较,EGb组肺组织MMP-2和MMP-9 mRNA的表达水平明显下调。结论银杏叶提取物可下调犬低温体外循环时肺MMP-2、MMMP-9 mRNA的表达。     

罗格列酮对糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA表达的影响

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）配体罗格列酮对糖尿病大鼠血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）浓度和外周血单核细胞mRNA表达的影响。方法：30只SD大鼠随机分为三组，对照组、糖尿病组和罗格列酮组，每组10只。糖尿病组和罗格列酮组腹腔注射链脲霉素制作糖尿病大鼠模型后，罗格列酮组以罗格列酮灌胃，5mg·kg^-1·d^-1，共28d，对照组和糖尿病组以等量0.9％氯化钠溶液灌胃，比较治疗前、后的血清MMP-9浓度的变化，分离外周血单核细胞，RT-PCR检测MMP-9mRNA的变化。结果：处理28d后血清MMP-9浓度明显降低（P〈0.01），外周血单核细胞MMP-9mRNA表达量明显降低。结论：罗格列酮可以降低糖尿病大鼠血清MMP-9及外周血单核细胞MMP-9mRNA袁达．提示冀可能通过抑制MMP-9表达稳定动脉粥样锺化斑块．     

瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化大鼠血管损伤及MMP-2、MMP-9和PKC表达的影响

目的 探究瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化大鼠血管损伤的保护作用,以及对基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和蛋白激酶C(PKC)表达的影响.方法 将90只大鼠随机分为对照组、模型组和瑞舒伐他汀组,每组30只,模型组和瑞舒伐他汀组给予高脂鼠粮并复制颈动脉球囊损伤模型.检测颈总动脉内膜、中膜厚度,RT-PCR法检测颈总动脉内MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA和PKC mRNA表达水平,Western blotting法检测颈总动脉内MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和PKC蛋白表达水平.结果 瑞舒伐他汀组与模型组比较,精神恢复较快,毛发色泽光滑,活动量较大,体质量增加速度较快;瑞舒伐他汀组内膜厚度/中膜厚度比值、MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA、PKC mRNA、MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和PKC蛋白表达水平与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.001).结论 瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化大鼠颈总动脉损伤有保护作用,保护作用机制可能为下调MMP-2,MMP-9和PKC表达水平.     

MMP-9、TIMP-1在曲张大隐静脉中的表达及意义

目的：研究基质金属蛋白酶9（MMP-9）与基质金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）在曲张大隐静脉中的表达及其与发病机制的关系。方法：收集佳木斯大学附属第一医院2012-11～2013-09,血管外科手术治疗的大隐静脉曲张患者31例（40条肢体）,其中男19例,女12例,年龄35～71岁,平均51.25岁。标本均取自大隐静脉主干曲张最显著部位。根据CEAP临床分级法,将40条患肢分为C1～C3组（24条肢体）和C4～C6组（16条肢体）。对照组选择同期佳木斯大学附属第一医院血管外科和骨外科,因外伤或动脉硬化闭塞症（排除下肢静脉曲张和静脉曲张家族史）而截肢的正常大隐静脉10例。其中男7例,女3例,年龄25～67岁,平均48.10岁。实验组与对照组均采用免疫组织化学染色法检测MMP-9、TIMP-1蛋白在大隐静脉中的表达。结果：MMP-9可在正常大隐静脉壁中少量表达,而在曲张大隐静脉壁中表达明显增高（P〈0.05）,C4～C6组和C1～C3组表达率无统计学意义（P〉0.05）。TIMP-1也可在正常大隐静脉壁中表达,而在曲张大隐静脉壁中表达明显增高（P〈0.05）,C4～C6组和C1～C3组表达率无统计学意义（P〉0.05）。结论：MMP-9、TIMP-1的异常表达可能参与了大隐静脉曲张的血管重塑过程。     

尼莫地平对早期脑出血大鼠AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达的影响

目的：探讨尼莫地平对早期脑出血周边组织AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达及由脑出血引起的继发性脑水肿与AQP4、MMP-9的关系。方法：制做脑出血大鼠模型,分为假手术组,脑出血组及尼莫地平组,分别观察6h、1d、3d、5d、7d等5个时间点出血周边脑组织含水量、AQP4mRNA、MMP-9mRNA。结果：（1）脑出血组3d含水量达到高峰,第7天明显下降,但仍高于正常水平;尼莫地平组3d含水量达高峰,但低于脑出血组。（2）脑出血组AQP4mRNA、MMP-9mRNA的表达逐渐升高,3d达到高峰,7d明显下降,5个时间点明显高于假手术组。（3）尼莫地平组大鼠脑水肿程度、AQP4mRNA、MMP-9mRNA表达逐渐升高,3d达到高峰,明显低于脑出血组。（4）脑出血的水肿程度与AQP4mRNA、MMP-9mRNA呈正相关。结论：（1）AQP4、MMP-9参与了出血性脑水肿损伤的过程。（2）尼莫地平可以抑制AQP4、MMP-9的表达,进而减轻脑水肿的程度。     

原发性肝癌基质金属蛋白酶-9的表达与肿瘤侵袭关系

目的 探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在原发性肝癌中的表达及其与肝癌侵袭的关系。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测比较28例肝癌组织和癌旁组织中MMP-9基因的表达水平。结果 MMP-9 mRNA在肝癌组织中存在过度表达，显著高于癌旁组织（P〈0．01）；伴有门静脉癌栓的肝癌组织中MMP-9mRNA表达值显著高于不伴有门静脉癌栓者（P〈0．01），MMP-9mRNA与术前AFP、肿瘤大小、TNM分期等无关。结论 MMP-9基因的过度表达与肝癌的侵袭密切相关，可以作为预后判断指标。     

湿润暴露疗法/湿润烧伤膏对慢性创面组织中MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨湿润暴露疗法/湿润烧伤膏(MEBT/MEBO)作用MMP-2和MMP-9促进慢性创面愈合的机制。方法90只Wistar大鼠随机分为5组:MEBO组、贝复新组、慢性组、急性组和空白组,每组18只,构建慢性难愈合创面模型。采用ELISA、Western blot和qRT-PCR技术,检测d 3、14创面组织中MMP-2和MMP-9表达变化。结果(1)与慢性组相比,MEBO组和贝复新组创面愈合时间明显缩短且愈合率升高(P<0.05);且生长情况及病理形态学改变更好;(2)与慢性组相比,d 3标本匀浆中,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均增高(均P<0.05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9均降低(P<0.05);(3)与慢性组相比,d 3标本,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达量均增高(P<0.05);而d 14,MEBO组和贝复新组MMP-2和MMP-9表达均降低(P<0.05)。结论MEBT/MEBO促进慢性创面愈合可能与调控MMP-2和MMP-9,来参与ECM的降解与重塑相关。     

血晶素诱导HO-1表达增加及对急性肺损伤小鼠MMP-2、MMP-9 mRNA的影响

目的 通过复制急性肺损伤模型,探讨血晶素诱导血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）的表达对于小鼠急性肺损伤的影响.方法 利用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹方法检测急性肺损伤小鼠肺组织基质金属蛋白酶-2 （matrix metalloproteinas-2, MMP-2）、MMP-9 mRNA和HO-1蛋白的表达.结果 血晶素加脂多糖组和对照组比较,HO-1蛋白表达明显增高 （P〈0.05）;脂多糖组与对照组比较,MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA表达差异有统计学意义（P〈0.05）,血晶素加脂多糖组与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 HO-1降低了急性肺损伤小鼠肺组织MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,对于小鼠的急性肺损伤有保护作用.     

小柴胡汤冲剂对子宫内膜异位症大鼠MMP-9和MMP-2基因表达的干预作用

目的：研究小柴胡汤冲剂对子宫内膜异位症大鼠治疗作用及其相关机制。方法：采用外科手术法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成空白组,去势组,小柴胡汤低、中、高剂量组及丹那唑组,检测各组给药前后大鼠异位内膜体积变化,同时通过RT-PCR法和免疫印迹法检测各组在位和异位子宫内膜组织中MMP-9和MMP-2的mRNA和蛋白表达水平。结果：与空白组相比,小柴胡汤中剂量组和高剂量组子宫内膜异位症大鼠的异位内膜体积显著变小（P<0.05）;MMP-9和MMP-2蛋白在大鼠在位和异位组织中均有表达,且与空白组相比,小柴胡汤中剂量组和高剂量组均能显著抑制在位和异位组织中大鼠MMP-9和MMP-2的mRNA和蛋白表达（P<0.05）,而低剂量组无显著变化（P>0.05）。结论：小柴胡汤能显著抑制MMP-9和MMP-2基因表达,这可能是其治疗子宫内膜异位症的机制之一。     

川崎病冠脉损伤与MMP-2 MMP-9关系的实验研究

目的 测定川崎病（KD）小鼠基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的浓度和冠脉损伤（CAL）的程度，探讨其之间的相关性。方法 制备干酪乳杆菌细胞壁提取物LCWE （2.5 mg/mL）。4~6周龄BALB/C雄性小鼠80只，分为实验组与对照组，每组40只。实验组单次腹腔注射LCWE 1 mg，对照组予以等量磷酸缓冲盐溶液（PBS）注射。观察并记录小鼠实验过程中的一般情况及体质量变化；分别于注射后第1、3、7、28天取小鼠血清测定MMP-2、MMP-9浓度，并观察心脏、肝脏切片病理变化。结果 腹腔注射LCWE后，第3、7天实验组小鼠体质量、心脏重量、心脏重量/体质量均较对照组降低，差异有统计学意义（P<0.05）。实验组小鼠MMP-2、MMP-9浓度在实验前期均有逐渐上升趋势，而至第28天浓度降低，与对照组相比，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 LCWE可导致小鼠CAL，MMP-2、MMP-9是能较好反映KD冠脉损伤的指标，或能为KD患儿的早期诊断提供依据。     

乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9 表达与人乳头状瘤病毒16/18 感染的关系及其临床病理意义

目的探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达与人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染的关系及其临床病理意义。方法回顾性选取2015年3月至2018年5月蚌埠医学院第二附属医院收治的90例乳腺癌病人乳腺癌组织为研究对象(乳腺癌组),同时选取同期该院85例良性乳腺疾病切除病变周围正常乳腺组织作为对照(对照组)。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平;免疫组织化学法检测组织中MMP-2、MMP-9蛋白表达;采用原位杂交法检测HPV16/18感染情况。回顾性分析乳腺癌病人临床病理资料,比较MMP-2、MMP-9表达、HPV 感染与病人临床病理特征关系。结果乳腺癌组病人MMP-2、MMP-9 mRNA 表达水平(1.58±0.13、2.14±0.11)及其蛋白阳性表达率(77.78%、80.00%)均显著高于对照组(1.00±0.05、1.02±0.07、27.06%、17.65%)(P<0.05);乳腺癌组HPV16/18-DNA阳性率［71.11%(64/90)］显著高于对照组［12.94%(11/85)］(P<0.05);MMP-2、MMP-9表达及HPV16/18阳性表达均与淋巴结转移、临床分期、绝经状态、雌激素受体(ER)阳性相关(P<0.05);MMP-2、MMP-9表达与HPV感染呈正相关(P<0.05)。结论乳腺癌病人乳腺癌组织中MMP-2、MMP-9表达水平明显升高,与HPV16/18感染呈正相关,均与病人临床病理特征密切相关。HPV感染可能引起基质金属蛋白酶表达增高,从而促进乳腺癌的发生发展。