焦炉工外周血P21、P53蛋白的检测

目的　了解接触煤焦油沥青的焦炉工外周血中P2 1、P5 3蛋白表达水平及其在肺癌高危人群筛检中的意义。方法　采用P2 1、P5 3免疫组化染色试剂盒 ,对 5 6名焦炉工和 40名对照者的外周血进行检测。结果　 5 6例焦炉工中有 13例P2 1蛋白阳性 ,12例P5 3蛋白表达阳性。阳性率分别为 2 3 2 %和 2 1 4% ;40名对照者外周血中各有 2例P2 1、P5 3蛋白阳性 ,阳性率为 5 0 % ,两组间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。对焦炉工按是否吸烟与工龄进行分组比较 ,未发现P2 1、P5 3组间差异。结论　煤焦油沥青可使接触者外周血中P2 1、P5 3蛋白表达水平升高。     

热休克蛋白70与多环芳烃相关肺癌关系的研究

目的 分析热休克蛋白70抗体(HSP70-Ab)与多环芳烃(PAH)相关肺癌的关系,为PAH相关肺癌发病机制及诊断指标的研究提供参考依据.方法 采用Western Blot免疫印迹-酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测PAH相关肺癌患者(肺癌组,52例)、非肿瘤性肺病者(配比组,34例)和健康者(健康组,30例)血浆中HSP70-Ab的抗体滴度.结果 肺癌组不同抗体滴度组阳性检出率显著高于配比组和健康组(均P<0.05),配比组、健康组各滴度组间比较差异无显著性(均P>0.05).logistic回归分析表明,接触苯并(a)芘[B(a)P]、同时接触粉尘及B(a)P与HSP70-Ab(1:40)密切相关(分别为OR=5.107 4,P=0.043 3和OR=2.787 4,P=0.020 9).结论 HSPT0可能与PAH相关肺癌患病有关,血浆HSP70-Ab高滴度(1:40)可能是PAH相关肺癌的血清学标志物.     

肺癌组织P33ING1的表达及其与P53蛋白的关系

[目的 ]探讨侯选抑癌基因ING1(inhibitorofgrowth 1)产物P33ING1蛋白在肺癌组织中的表达及其与P5 3蛋白的关系[方法 ]Western免疫印迹法检测肺癌组织、距癌肿 3cm组织及距癌肿 5cm组织中P33ING1与P5 3蛋白质的表达。 [结果 ]本研究收集了 13例肺鳞癌 ,6例肺腺癌 ,1例小细胞肺癌和 1例大细胞肺癌患者的肺癌组织、距癌肿 3cm和 5cm的组织 ,P33ING1蛋白在肺癌组织中的表达明显低于距癌肿 5cm组织 ,P33ING1蛋白减低 6 0 % ;P33ING1蛋白在肺癌组织中表达的条带密度与距癌肿 5cm组织条带密度之比为 1∶1 2。肺癌组织中有 11例检出突变型P5 3表达增高 ( 5 5 % ) ,突变率与文献报道( 5 0 %～ 6 0 % )接近 ;P5 3蛋白的表达在 3组之间无显著差异。P5 3突变的肺癌组织中有 7例P33ING1蛋白的表达减低( 6 3 6 % ) ,无P5 3突变的肺癌组织中有 5例P33ING1蛋白表达减低 ( 5 5 6 % ) ,经相关分析二者无直线相关关系。 [结论 ]检测到P33ING1蛋白在肺癌组织中表达减低 ,说明它可能与肺癌的发生发展有关 ;有文献报道P33ING1与P5 3蛋白在抑癌功能上相互依赖 ,但本研究初步表明二者在表达量上无直线相关关系 ,这与相关文献报道不相一致 ,有待扩大样本量做进一步探讨     

中暑病人血浆中热应激蛋白(HSP70)及其抗体水平的意义

目的　探讨中暑病人热应激蛋白 (HSP70 )及其抗体水平变化和其在中暑发生中的可能作用。方法　应用Westernblot法 ,测定血浆HSP70水平 ;应用酶联免疫反应技术测定血浆HSP70抗体滴度。结果　HSP70在高温中暑组为 42 11.2± 12 86 .2 (积分光密度 )、重症中暑组为 4137.8±12 0 7.5 ,与对照组 (6 0 43.5± 135 4.8)比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。中暑病人HSP70抗体水平在 1∶10、1∶2 0、1∶40阳性率分别为 5 4.1%、48.9%、2 1.6 % ,显著高于对照组 (2 6 .7%、13.8%、0 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70水平的下降和HSP70抗体的出现在中暑发生过程中具有一定的作用。     

子宫内膜热休克蛋白表达与习惯性流产的相关性研究

目的 :探讨习惯性流产与热休克蛋白 (HSP)表达的关系。方法 :选取 36例不明原因习惯性流产患者作为观察组 ,40例正常妊娠、要求人工流产者作为对照组 ,分别选取其蜕膜组织做常规染色 ;免疫组织化学染色 (S-P法 )标记 HSP70和 HSP90 a在蜕膜组织中的表达。结果 :HSP70阳性表达在观察组和对照组蜕膜组织中分别为 72 .2 %和 42 .5% (P<0 .0 1 ) ;HSP90阳性表达在观察组和对照组蜕膜组织中分别为 66.7%和 45.0 % (P<0 .0 5)。结论 :在习惯性流产患者中 ,HSP通过持续诱导炎症反应和免疫反应、引起体内激素紊乱、子宫敏感性增强等多种原因而导致流产     

卵巢粘液性肿瘤神经内分泌分化及与P53蛋白表达关系的研究

目的　研究卵巢粘液性肿瘤的神经内分泌分化与肿瘤病理组织学分型、分级、临床分期以及P5 3蛋白表达的关系。方法　应用免疫组织化学技术对 76例卵巢粘液性肿瘤 (良性 :2 0例 ,交界性 :2 4例 ,恶性 32例 )中的神经内分泌细胞的检出率、形态特点、分布方式以及P5 3蛋白表达进行了观察。结果　CgA检出率 ,良性、交界性和恶性肿瘤 ,分别是 4 5 0 %、83 3%、81 3% ,癌和交界瘤的阳性率显著大于良性瘤 (P <0 0 1) ,交界瘤和癌无差异 (P >0 0 5 ) ,囊腺癌各分级之间、不同临床分期之间无差异 (P >0 0 5 ) ,宫颈内膜样型和肠型之间无差异(P >0 0 5 )。P5 3蛋白表达阳性组 2 1例 ,阴性组 5 5例 ,CgA检出率分别是 85 7%、5 4 5 % ,P5 3蛋白阳性组的CgA阳性率显著大于阴性组 (P <0 0 2 5 )。CgA阳性细胞绝大多数与肿瘤细胞排列一致 ,形态相似。结论　卵巢粘液性肿瘤由良性向恶性转化过程中 ,神经内分泌细胞的检出率逐渐增加。神经内分泌细胞的检出率与P5 3蛋白的表达关系密切 ,表明在卵巢粘液性肿瘤中P5 3抑制基因的变化可能是影响神经内分泌细胞分化过程的重要因素。     

抗核糖体P0蛋白抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用

目的 研究抗核糖体P0蛋白抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的临床诊断意义.方法 分别用基因重组的核糖体P0蛋白和纯化的核糖体P蛋白作为抗原榆测126例SLE患者和145例非SLE自身免疫病患者血清中抗P0抗体和抗P抗体;同时对126例SLE患者采用线性免疫分析检测抗dsDNA抗体、抗SmD1抗体、抗核小体抗体、抗SSA60抗体、抗SSB抗体等,比较以上抗体在系统性红斑狼疮临床诊断中的意义.结果 SLE患者抗核糖体PO蛋白抗体的阳性率为38.89%,非SLE自身免疫病患者组为2.07%,两组之间差异有统计学意义(X2=56.59,P<0.01);SLE患者组中,抗P0阳性牢高于抗P蛋白抗体阳性率(X2=19.36,P<0.001);抗核糖体P0蛋白抗体诊断SLE的特异性为97.93%,抗dsDNA抗体和抗核糖体P0蛋白抗体单独阳性率较高,分别为15.08%和9.52%;抗SmD1抗体和抗核小体抗体单独阳性率较低,分别为3.17%和3.97%.结论 抗核糖体P0蛋白抗体对SLE患者有高特异性和较高的敏感性,对抗dsDNA抗体、抗SmD1抗体、抗核小体抗体等抗体阴性的SLE患者有尤其重要的临床应用价值.     

沙漠负重行军者热休克蛋白与一氧化氮的关系

目的　探讨沙漠干热环境负重应激行军者热休克蛋白 (HSPs)与机体一氧化氮 (NO)及其一氧化氮合成酶 (NOS)的关系。方法　对在沙漠干热环境中 15kg负重、分别以 3 5km/h和 5 0km/h速度行军 1,2 ,3h的 57名战士和 14名对照血浆HSP70和HSP2 7、NOS和NOS等进行研究。结果　在 15kg负重条件下 ,不管是 3 5km /h还是5 0km /h ,各行军组HSP70与对照组及各行军时间组间HSP70均无显著性差异 (P >0 0 5) ;各行军时间组HSP2 7明显高于对照组 (P <0 0 5) ,各行军时间组间HSP2 7无显著性差异 (P >0 0 5) ;各行军时间组NO明显低于对照组(P <0 0 5)。 3 5km /h行军 3h组NO明显低于行军 1,2h组 (P <0 0 5) ;3 5km/h行军 1h组NOS明显高于对照和行军 3h组 (P <0 0 5) ;5 0km/h行军 2h组NOS明显低于对照和其它行军时间组 (P <0 0 5)。结论　沙漠干热环境应激负重行军者血浆HSP2 7与NO及其NOS密切相关 ,HSP70与NO及其NOS关系不大     

风湿热患儿血液热休克蛋白70的表达

目的　探讨热休克蛋白 70 (HSP70 )在儿童急性风湿热 (ARF)中的作用。　方法　采用Westernblot技术检测ARF活跃期、静止期及健康对照组血液单个核细胞HSP70表达情况 ,并与血沉 (ESR)、C反应蛋白 (CRP)进行相关分析。　结果　活跃期组HSP70呈高表达 ,静止期组表达降低 ,正常对照组呈低表达 ,活跃期组与静止期组及正常对照组比较 ,有显著差异 (P <0 .0 1) ;静止期组与正常对照组 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。活跃期组血液HSP70表达与ESR、CRP呈正相关。　结论　ARF患儿血液HSP70表达可作为判断风湿活跃的一项实验指标     

热暴露不同时期大鼠肝与心肌细胞热休克蛋白70的表达

目的　研究热暴露不同阶段对大鼠肝与心肌细胞热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响 ,为探讨HSP70在细胞水平的表达机制 ,以及HSP70对热暴露机体的意义提供实验依据。方法　采用人工热气候室 [(34± 1)℃、湿度 6 0 % ],建立热暴露动物模型。SD大鼠 80只分为对照组和热暴露组 ,每组又分为 2、7、14、2 8d 4个时段。取肝与心肌组织做免疫组化SP法染色 ,应用图像分析系统分析组织HSP70含量的变化。结果　在热暴露的 4个时段 ,热暴露组肝 (灰度值分别为 137.0± 5 .1、137.0± 5 .2、137.8± 7.1、139.2± 5 .2 )与心肌 (灰度值分别为 15 6 .1± 4 .4、15 5 .1± 6 .2、15 5 .4± 4 .5、15 6 .2±5 .1)细胞的HSP70表达均明显强于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;适应时段对HSP70的表达强度无明显影响。热暴露 2d时HSP70在核内表达强于胞浆 ,肝枯否氏细胞HSP70阳性表达率明显高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;热暴露 2d与 2 8d时血清中肝与心肌细胞胞内酶浓度明显增高。结论　受热早期机体的重要器官会产生损伤性改变 ;HSP70高表达可作为组织细胞受损伤的标志 ;延长受热时间 ,机体产生热暴露 ,HSP70的高表达在此期热暴露的产生中起到重要作用 ;过长时间受热 ,机体将失去对热的适应 ,HSP7     

烹调油烟致大鼠肺组织癌前病变机理探讨

[目的 ]　探讨烹调油烟致大鼠肺组织癌前病变的可能机理。 [方法 ]　采用免疫组织化学染色方法检测了染毒及对照组鼠肺组织中HSP70 、P53 及PCNA蛋白表达情况。 [结果 ]　HSP70 、P53 及PCNA蛋白在染毒动物肺组织中均有不同程度的表达 ,阳性率与病变程度呈正相关。 [结论 ]　COF能诱导HSP70 、P53 及PCNA在大鼠肺组织中高表达。HSP70 与P53共表达可能在COF诱导癌前病变的过程中起到协同作用     

热休克蛋白70双向免疫印记鉴定及抗体制备

目的验证肺癌组织中热休克蛋白70（HSP 70）表达量,从肺癌组织中获得HSP 70并初步制备其人源性抗体,为进一步研究其生物功能和临床应用奠定基础。方法收集肺癌组织和癌旁组织标本,应用双向电泳-免疫印记方法验证HSP 70的表达量,经过亲和层析和离子交换层析方法获得肺癌组织中HSP 70作为抗原,经过四轮亲和-吸附-洗脱,从人源性肺癌噬菌体单链抗体库中初步筛选其抗体。结果双向电泳-免疫印记结果表明,肺癌组织HSP 70表达量高于癌旁组织。凝胶电泳和免疫印记结果表明,从肺癌组织中获得了人源性HSP 70,以此HSP 70作为抗原,初步筛选出了其抗体。结论人源性HSP 70及其人源性特异结合抗体的获得,为进一步研究其抗肺癌的临床应用提供了基础依据。     

焦炉逸散物对焦炉工氧化还原物及P53和P21表达的影响

目的 观察接触焦炉逸散物(coking oven emissions,COE)的焦炉工血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(T-SOD)水平,以及外周血淋巴细胞P53、P21蛋白质表达.方法 选择焦炉作业工人56人为接触组,非焦炉作业工人40人为对照组.采用硫代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化快速比色法,分别测定血清MDA含量和T-SOD水平,并用免疫组织化学法,检测外周血淋巴细胞P53及P21蛋白质表达.结果 接触组血清MDA含量[(5.35±2.29)mnol/ml]明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),血清T-SOD水平[(100.04±10.75)NU/ml]明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);接触组外周血P53及P21蛋白质表达阳性率分别为21.4%和23.2%,均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 COE可导致职业性接触人群MDA含量增高及T-SOD水平降低,P53和P21蛋白质表达阳性率增高.     

SYBR Green染色法检测肺癌及癌旁组织端粒酶活性

目的 研究TRAP－SYBR Green染色法定性检测端粒酶活性的方法及端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达，并探讨端粒酶的表达与P53之间可能的关系。方法 采用TRAP－SYBR Green染色法检测36例肺癌、36例癌旁组织、8例肺部良性病变组织和A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达，并利用免疫组化技术检测肺癌组织P53蛋白表达水平。结果 TRAP－SYBR Green染色法可检测出5个A549肺腺癌细胞所表达端粒酶活性。83．3％（30／36）的肺癌组织，3／8肺部良性病变组织，19．4％（7／36）的癌旁组织表达端粒酶活性。端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关性。在30例表达端粒酶活性的肺癌组织中P53呈现过度表达的占80％（24／30），端粒酶活性与P53蛋白表达水平之间具有相关关系。结论 TRAP－SYBR Green染色法是一种较为灵敏、快速、简便的定性检测端粒酶活性的方法；端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一；端粒酶P53之间的关系有待进一步阐明。     

燃煤型砷中毒患者皮肤P53mt蛋白的表达

目的研究P53mt蛋白在燃煤型砷中毒患者皮肤中的表达情况。方法根据病理学诊断结果将患者分为癌变组（A组,18例）、癌前组（B组,11例）和一般病变组（C组,39例）,P53mt蛋白的检测用免疫组化两步法。结果A、B、C3组P53mt蛋白阳性细胞密度分别为38.07±29.00、17.16±15.00和4.05±8.24,3组间差异有显著性（A和CP<0.01,A和BP<0.01,B和CP<0.05）,而正常组未发现阳性表达;A、B、C3组的阳性率分别为88.89%、72.73%和25.64%（A和CP<0.01,B和CP<0.05）;3组间阳性分级构成差异有显著性（P<0.01）,A组Ⅱ、Ⅲ级占38.89%,而B、C两组仅分别为9.09%和2.56%。结论燃煤型砷中毒致皮肤癌变过程中,P53mt基因起一定作用。P53mt蛋白的检测可用于燃煤型砷中毒病变皮肤的良、恶性鉴别。     

P53、CD44及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨P53、CD44及表皮生长因子受体（EGFR）在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法收集某医院2007年1月-2009年6月经手术切除及穿刺活检病理确诊,且随访资料完整的非小细胞肺癌患者87例,利用免疫组织化学技术检测其标本中P53、CD44及EGFR的表达。结果P53、CD44及EGFR在87例NSCLC中的表达阳性率分别为49．4％,60．9％及67．8％。Ⅲ-Ⅳ期P53表达低于Ⅰ～Ⅱ期（40．3％US．66．7％,P=0．036）;鳞癌患者CD44表达较腺癌高（82．8％vs.49．1％,P=0．003）;淋巴结转移的患者EGFR表达较无淋巴结转移高（74．6％vs53．6％,P=0．023）。P53与CD44正相关（P=0．035）。结论联合检测P53、CD44及EGFR在非小细胞肺癌中的表达对于判断预后和指导治疗可能具有实用价值。     

抑癌基因ING_1、P21/WAF_1、P53蛋白在宫颈癌中的表达

目的: 研究ING1、P21 /WAF1、P53基因蛋白在宫颈癌组织中的表达、意义及相互关系。方法: 对 69例宫颈癌鳞状上皮组织、21例宫颈原位癌组织、18例宫颈不典型增生组织应用免疫组化法, 检测P33ING1、P21 /WAF1 和P53的表达情况,并选择 10例正常宫颈组织作对照。分析各指标间的相关性。结果: P33ING1在正常宫颈组织中表达全部为阳性, 而宫颈不典型增生组织中P33ING1的阳性表达率为 72 2% (13 /18); 宫颈原位癌组织中P33ING1的阳性表达率为 57 1% (11 /21); 宫颈浸润癌组织中P33ING1的阳性表达率为 59 4% ( 41 /69 )。PING1在原位癌、浸润癌的表达明显低于正常组织和不典型增生 (P<0 01 )。P33ING1与P21 /WAF1、P53表达有相关性 (P<0 01)。结论: ING1 是抑癌基因, 其蛋白P33ING1在宫颈癌中低表达, 对宫颈癌的发生、发展起重要作用。P33ING1、P21 /WAF1、P53表达具有相关性。     

P16、P53和Survivin在子宫内膜病变中的表达及临床意义

目的探讨P16、P53和Survivin蛋白在子宫内膜病变中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测P16、P53和Survivin蛋白在30例正常子宫内膜组织、50例子宫内膜增生组织及70例子宫内膜癌组织中的表达情况。结果 P16在正常子宫内膜组织中的表达率高于在子宫内膜增生组织及子宫内膜癌组织中的表达率,差异有统计学意义(P <0.05);P53和Survivin在正常子宫内膜组织中的表达率低于子宫内膜增生组织及子宫内膜癌组织中的表达率,差异有统计学意义(P <0.05);P53、P16和Survivin 3项指标联合检测的敏感度为95.14%,特异度为56.23%,高于单一指标的检测结果。结论 P16、P53和Survivin蛋白在子宫内膜病变中的表达反应了子宫内膜病变的进展过程,其联合检测对早期判断子宫内膜病变的程度有重要价值。     

高危型人乳头瘤病毒检测对细胞学结果为意义不明的非典型鳞状细胞和低度鳞状上皮内病变的管理价值

目的 探讨第二代杂交捕获试验(Hc-2)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA对细胞学结果为意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)和低度鳞状上皮内病变(LSIL)的管理价值.方法 收集细胞学结果为ASCUS(178例)和LSIL(108例)的HR-HPV感染情况,以敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值来评价Hc-2检测HR-HPV DNA在宫颈病变筛查中的价值.结果 Hc-2检测HR-HPV DNA对于ASCUS中病理结果为宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ及其以上级别病变的敏感度为89.83%(53/59),特异度为53.78%(64/119),阳性预测值为49 07%(53/108),阴性预测值为91.43%(64/70):对于LSIL中CIN Ⅱ及其以上级别病变的敏感度为97.62%(41/42),特异度为22.73%(15/66),阳性预测值为44.57%(41/92),阴性预测值为93.75%(15/16).结论 HR-HPV DNA检测是一种管理细胞学结果为 ASCUS和LSIL病例的有效手段.

Abstract：

Objective To discuss the significance of high-risk human papilloma virus ( HR-HPV) detection by hybrid capture 2 (Hc-2) in managing the women with atypical squamous cell of undetermined significance (ASCIIS) and low grade squamous intraepithelial lesion (LSIL) of thin prep liquid-based cytology (TCT). Methods One hundred and seventy-eight women with ASCUS and 108 women with LSIL were studied. The infection of HR-HPV in the women was analyzed. And sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) were used to evaluate the significance of HR-HPV detection by Hc-2 in managing the women with ASCUS and LSIL of TCT. Results Sensitivity,specificity, PPV and NPV of HR-HPV DNA detection by Hc-2 in screening CIN II or above in ASCUS were 89.83% (53/59),53.78% (64/119), 49.07% (53/108), 91.43% (64/70) respectively,and in LSIL were 97.62%(41/42),22.73%(15/66), 44.57%(41/92), 93.75%( 15/16) respectively. Conclusion HR-HPV detection by Hc-2 is an effective measure in managing the women with ASCUS and LSIL of TCT.     

P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1基因蛋白在沥青烟暴露小鼠肺组织中的表达

[目的]探讨沥青烟对小鼠肺组织形态及基因蛋白P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1表达的影响。[方法]建立沥青烟亚急性染毒小鼠模型，将120只昆明种健康小鼠随机分为3组，即1个对照组和2个染毒组，染毒组进行不同浓度（55、165mg,／m^3）和不同时间（30、60d）染毒，光镜下观察肺组织形态改变，采用免疫组化S-P法，对P53、P21、Cyclin D1染色，观察P53、P21和Cyclin D1基因蛋白表达。[结果]不同浓度、不同时间染毒小鼠肺组织形态有不同程度改变，高浓度染毒组出现不典型增生。小鼠肺组织P53基因蛋白表现为低浓度染毒30d组，未见阳性表达；高浓度染毒60d组呈强阳性表达（P〈0．01）。P21^WAF/CIP1基因蛋白表达低浓度染毒30d呈阳性表达；高浓度染毒60d组表达明显下调（P〈0．01）。Cyclin D1基因蛋白表达同P53基因蛋白表达。[结论]随着染毒浓度和染毒时间的增加，肺组织增生逐渐明显，P53和Cyclin D1基因蛋白的表达呈上升趋势，P21^WAF/CIP1呈下降趋势。