应用HPLC检测血红蛋白Constant Spring

目的探讨应用高效液相色谱技术（HPLC）检测血红蛋白Constant Spring（HbCS）的可行性,并分析其血液学特点。方法检测HbCS携带者的HPLC及血常规;采用Gap—PCR技术和反向斑点杂交试验检测α地贫基因及突变。结果使用HPLC检测258例HbCS患者,不同组与基因检测的诊断符合率为HbH—CS病组100％,αCSα/-α组83．33％,αCSα/-αα组57．4％。不同组HbCS携带者血液学指标有差异,HbH—CS病组表现为H病血液表型,αCSα/-αα血液表型为正常下限或稍低于正常值;αCSα/-α血液表型介于以上二者之间。结论HPLC法可以作为人群筛查血红蛋白ConstantSpring简易、有效、准确的的方法;结合血液学可以大致判断HbCS携带者的基因型。     

血红蛋白Constant Spring的表型与基因型分析

目的 分析血红蛋白Constant Spring(hemoglobin Constant Spring,HbCS)携带者基因型和表现型的关系,探讨HbCS对血液学指标的影响规律.方法 检测HbCS携带者的血常规和血红蛋白电泳.采用跨越断裂点-PCR、反向点杂交方法确认α-、β-地中海贫血(以下简称地贫)突变.结果 HbCS合并--SEA/αα或HbQS表现为HbH病的特征,与αCSα/-α或HbCS杂合子比较,差异有显著的统计学意义.αCSα/-α与HbCS杂合子对表型的影响较小.HbCS合并β地中海贫血,其血液学表型表现为β地贫的特征.上述各型变异阳性病例中,仅有57.6%的样品血红蛋白电泳检测为阳性结果.结论 HbCS杂合子与其它类型地贫突变合并存在时,不同基因型组合可出现较大差异的表型变化.另外,对此类复合地贫仅用血红蛋白电泳较易漏诊和误诊,对其确诊需要依赖基因型分析.     

全自动毛细管电泳技术在柳州市新生儿地中海贫血筛查的应用及价值

目的探究全自动毛细管电泳技术在柳州市新生儿地中海贫血筛查的应用及意义。方法选择柳州市10971名新生儿为研究对象,采取全自动毛细管电泳技术对其足跟血进行检测,收集并记录数据,来探究全自动毛细管电泳技术在柳州市新生儿地中海贫血筛查的临床意义。结果全自动毛细管电泳技术测定10971名新生儿足跟血标本。HBbarts的阳性（α地中海贫血）例数为1129例,所占比例为10．29％,而其中含量范围0—10％（静止型＋轻型）为1108例,占阳性比例的98．14％（1108／1129）;HBA区〈9％（可疑B地中海贫血）的有1064名,所占比例为9．70％。结论全自动毛细管电泳技术具有操作简单、结果明了、准确率高等优点,能较准确的进行地中海贫血的筛查,具有较高的临床价值,值得在基层推广。     

全自动毛细管血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用

目的探讨全自动毛细管血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用。方法对我院送检1605份患者标本应用法国Sebia毛细管电泳分析系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血,通过自动扫描系统分析,检测血红蛋白（Hb）各组分的含量。结果在送检的1605例标本中,应用全自动血红蛋白电泳检出α地中海贫血表型阳性181例,阳性率为11.21%;β地中海贫血表型阳性224例,阳性率为13.96%;α、β混合地中海贫血6例,阳性率0.37%;其他血红蛋白病17例,阳性率1.06%。结论全自动毛细管血红蛋白电泳电泳区带清晰,扫描定量准确,可以定量检测HbA,HbF,HbA2的含量。可以将地中海贫血初步分类为α地中海贫血或β地中海贫血,有效地筛查出高危患者,为地中海贫血的诊断提供重要依据。     

4411例新生儿血红蛋白毛细管电泳地中海贫血筛查的探讨

目的探讨新生儿血红蛋白毛细管电泳地中海贫血筛查的应用价值。方法对采用毛细管血红蛋白电泳筛查新生儿地中海贫血资料进行回顾性总结。结果4411例新生儿血红蛋白毛细管电泳筛查,检出异常血红蛋白523例,阳性率11．89％,其中,检出d地中海贫血473例（其中HbBart’s胎儿水肿综合症1例,出生时已死亡：HbBart’s含量〈70％为467例;HbCS5例）,阳性率10．72％。β-地中海贫血15例（HbE杂合子15例）,阳性率0．34％。检出异常血红蛋白病（即HbD和HbJ杂合子）35例,阳性率0．79％。结论新生儿脐血红蛋白毛细管电泳地中海贫血筛查主要以d为地中海贫血主,β-地中海贫血很难筛查,除非出现HbE带,筛查阳性者建议做地贫基因检测或DNA序列测序分析。     

血红蛋白毛细管电泳和血液学指标在地贫筛查中的诊断价值

目的探讨毛细管电泳法检测血红蛋白和血液学指标在地中海贫血筛查中的诊断价值。方法收集中山大学附属第一医院东院在2016年1月至2017年7月期间进行地中海贫血筛查的患者6416例,其中血红蛋白电泳、血液学指标和基因检测数据齐全的病例152例,分析联合毛细管电泳法和血液学指标筛查地贫的效能。结果152例同时进行了毛细管电泳、血细胞分析、基因检测的病例中,疑似地贫患者的符合率为55.4%,异常血红蛋白者的符合率为80%,单纯MCV、MCH或电泳异常者的符合率为14.5%,筛查正常者的符合率达90.9%;筛查总符合率为37.6%。其中MCV、MCH具有较高的灵敏度和特异性,RBC有较高的灵敏度,但特异性低;电泳结果具有较高的灵敏度,对β-地贫患者的检出具有很高的诊断价值,并可以检测出异常血红蛋白带;毛细管电泳联合MCV、MCH筛查地中海贫血具有较高的灵敏度和特异性。结论单纯血细胞分析或单纯电泳结果在地贫筛查中诊断价值一般,联合血细胞分析和毛细管电泳结果在地贫筛查中诊断价值高。     

脐血毛细管电泳在产前诊断重型地中海贫血中的应用

目的探讨脐血毛细管电泳在产前诊断重型地中海贫血中的应用价值。方法对71例夫妻双方患有同型地中海贫血的孕妇进行脐静脉穿刺术,抽取脐血同时进行地中海贫血基因检测和血红蛋白毛细管电泳。结果重型α地中海贫血胎儿脐血Hb Bart’s含量高达72.9%∽89.8%,而Hb H病、轻型α地中海贫血及静止型α地中海贫血胎儿脐血Hb Bart’s含量分别为18.4%∽24.3%、2.1%∽5.7%及0.3%∽0.6%,正常胎儿脐血中未检出Hb Bart’s。重型β地中海贫血胎儿脐血Hb A含量极低,为0%∽0.6%,而轻型β地中海贫血胎儿和正常胎儿脐血Hb A含量分别为2.2%∽5.2%和2.5%∽9.4%。脐血Hb Bart’s和Hb A定量分析能准确的检出胎儿重型地中海贫血。结论毛细管电泳具有操作简便及自动化的优点,能准确诊断胎儿重型地中海贫血,可以作为产前诊断的一种常规方法。     

毛细管区带电泳分离珠蛋白肽链

目的介绍一种可快速分离临床样品珠蛋白肽链的新技术。方法用未涂层毛细管，酸性尿素、ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、巯基乙醇、磷酸盐电泳缓冲液，采用毛细管区带电泳法，对ＨｂＡ标准品、６０名正常人、１３例β地中海贫血患者及１例ＨｂＨ病患者，进行毛细管电泳分离其珠蛋白肽链。结果用纳升级样品，在４０分钟内即能一次性分离出α、β、Ｇγ、δ和Ａγ５种珠蛋白肽链；电泳图基线平稳，目标峰清晰，电泳重复性良好；时间变异系数在３％以内，峰面积变异系数在４％以内。另外对６０名正常人及１４例地中海贫血患者珠蛋白肽链含量进行了分析。结论毛细管区带电泳技术能成功地分离珠蛋白肽链，该技术具有简便、快速、高效、样品用量少等优点，适用于对临床样品进行血红蛋白病的快速诊断。     

应用毛细管电泳技术进行高效、准确的微卫星位点自动基因组扫描

目的 探索适用于大规模基因组扫描的、真正自动化的微卫星基因分型实验方法。方法 应用多重PCR将多个微卫星位点同时扩增，产物通过MegaBACE毛细管电泳测序仪进行电泳，其结果由Genetic Profiler软件自动分析。观察PCR效率不同时以及PCR体系中盐离子对分型结果的影响。结果 通过1次PCR和电泳能得到96个样品10个位点的分型结果，且自动分型的结果精确、可靠。其基因分型的效率是平板电泳的两倍。结论 应用毛细管电泳和Genetic Profiler自动分析软件进行微卫星基因组扫描效率高，节省了人力，有效地避免了人为差错，适用于基因作图、尤其是多基因疾病的基因定位、法医学及人类进化等研究。     

毛细管电泳的最新进展

毛细管电泳是近年发展最快的分离分析技术之一。它具有高灵敏度、高分辨率、高速度等优点 ,广泛应用于各个领域。随着毛细管电泳技术的不断发展 ,逐渐出现了非水毛细管电泳 ,毛细管阵列电泳 ,毛细管电泳免疫分析 ,毛细管电色谱手性拆分等分支     

南宁地区琼脂糖凝胶电泳产前筛查地贫16198例结果分析

目的评价琼脂糖凝胶电泳在产前地中海贫血（地贫）筛查中的价值。方法采用琼脂糖凝胶电泳对16 198例外周血或胎儿脐血进行Hb分析,其中4 242例进行地贫基因检测。结果 16 198例检出β地贫1390例,异常Hb 495例,异常Hb病133例,异常检出率12.46%。与基因检测结果比较,电泳筛查β地贫、HbH病和HbCS的灵敏度和特异度为93.57%和96.25%、100%和69.74%及99.64%和62.52%,以HbA2≤2.45%、2.65%筛查α1、α2地贫的灵敏度和特异度分别为68.44%和64.11%、63.81%和52.79%。电泳筛查胎儿脐血α地贫的灵敏度和特异度为89.94%和98.58%,其中对中间型、重型α地贫筛查灵敏度和特异性均为100%。结论广西地区地贫发生率较高,琼脂糖凝胶电泳筛查β地贫的灵敏度和特异度较好,能准确的筛出胎儿脐血中间型、重型α地贫;在胎儿脐血和外周血中筛查轻型和静止型α地贫的灵敏度和特异度差异较大,且胎儿脐血优于外周血。     

Screening for TP53 mutations in osteosarcomas using constant denaturant gel electrophoresis (CDGE)

We have previously developed conditions to screen for TP53 point mutations inside the conserved domains II–V of the gene by using constant denaturant gel electrophoresis (CDGE). The present study reports conditions for screening more of the codons in the frequently mutated region exon 5–8 and for detecting mutations in sequences encoding functional domains in the N- and C-terminal part of the protein. The ability of the CDGE technique to detect mutations was studied using controls with known sequence deviations. The resolution power of the technique to separate different types of mutations was tested by using seven different single base pair mutants all residing in a stretch of four base pairs. All mutants were separated from the wild type. The established CDGE screening strategy was then used to look for mutations in DNA from 28 osteosarcomas. Six (21.5%) of the samples were shown to have a TP53 mutation, and the exact characterization was performed by direct sequencing. All of these were within the frequently reported mutated region exon 5–8. © 1993 Wiley-Liss, Inc.     

Fabrication and testing of high-performance detection sensor for capillary electrophoresis microchips

This study presents a new approach for high-performance detection sensors for MEMS-based capillary electrophoresis chips to substitute laser induced fluorescence (LIF) detection systems. The developed sensors easily integrate with well-known microfabrication techniques for glass-based microfluidic devices. Three-dimensional gold electrodes are structured in enveloping side channels by sputtering and patterned using a standard “lift-off” process. The variations in the capacitance between the electrodes in the side channels are measured as different samples and ions pass through the detection region of the capillary electrophoresis separation channel. Samples of beer, white wine and milk are each mixed in different buffer solutions, then successfully separated and detected using the developed device. The proposed high-performance detection sensors have microscale dimensions and provide a critical step towards the realization of the lab-on-a-chip concept.     

2000例全自动琼脂糖凝胶电泳检测血红蛋白异常结果分析

目的分析2000例血红蛋白电泳结果,探讨全自动琼脂糖凝胶电泳在地中海贫血中的应用.方法采用全自动琼脂糖凝胶进行血红蛋白(Hb)电泳,测定异常Hb、Hb A2及Hb-F含量,同时采用Hb-F碱变性试验对同一标本进行Hb-F含量测定.结果检测临床标本2000例,发现异常Hb 90例,其中Hb H26例,Hb Bart′s 56例,HbE2例,其它异常Hb快速带6例.测定HbA2含量的批内CV＜5%,批间CV＜8%.发现HbA2增高者(含量＞4.0%)140例,同时伴有HbF增高者60例.对于HbF碱变性试验测得HbF含量异常高者(含量＞3.1%),琼脂糖凝胶电泳可以分辨出HbF区带,且可进行扫描定量,测出的HbF含量与HbF碱变性试验基本一致.结论全自动琼脂糖凝胶电泳分辨率极高,能够分辨出极微量异常Hb,准确分析出HbA2及HbF异常增高者,为地中海贫血的诊断提供准确可靠的数据.     

A Novel immunofluorescence capillary electrophoresis assay system for the determination of chloramphenicol in milk

An immunofluorescence capillary electrophoresis technique is described for the detection of chloramphenicol where the analyte was allowed to compete with a chloramphenicolfluorescein conjugate for binding to polyclonal anti‐chloramphenicol antibody. The bound and unbound forms of the chloramphenicol‐fluorescein conjugate were then analyzed by capillary zone electrophoresis with laser‐induced fluorescence detection, which permitted direct quantitation of the extent of immunocomplex formation. The amount of unbound conjugate in the reaction mixture was proportional to the quantity of chloramphenicol in the sample. Using this assay, it was possible to detect concentrations as low as 0.1–0.5 ng ml^‐1 of chloramphenicol in a standard buffer and at least 01 ng ml^‐1 of chloramphenicol in milk after extraction with ethyl acetate using a simple protocol. This highly sensitive procedure was rapid, requiring less than 30min to complete. The immunofluorescence capillary electrophoresis system should be similarly applicable to the assay of a wide variety of analytes.     

毛细管电泳多重PCR诊断杜氏/贝氏进行性肌营养不良

目的用毛细管电泳技术结合多重PCR方法分析DMD基因缺失位点,以建立一种快速、准确、适用于临床的DMD的诊断技术.方法将对缺失热区18对引物分成两套,用毛细管电泳分析7个DMD/BMD家系中的7名患者的二步多重PCR产物.结果毛细管电泳能快速、准确分离18对引物多重PCR产物,判断出DMD基因缺失位点.结论毛细管电泳定量PCR方法能高效、准确、快速诊断缺失型DMD患者,具有很好临床应用价值.