Dkk1对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的影响

目的：探讨经典Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1对骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）成骨分化的影响。方法：以C3H10T1/2为目的细胞,通过重组腺病毒介导BMP9过表达,联用重组腺病毒Dkk1抑制经典Wnt信号通路。检测各处理组碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性变化、钙盐沉积、骨钙素（osteocalcin,OC）、骨桥素（osteopontin,OPN）变化;体内异位成骨实验分析Dkk1对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响。结果：BMP9可诱导C3H10T1/2细胞成骨分化;Dkk1显著降低BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP活性（F=1 467.21,P=0.000）、钙盐沉积、OC（F=32.95,P=0.000）和OPN（F=127.23,P=0.000）蛋白表达;异位成骨模型中Dkk1抑制BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化和骨块成熟。结论：Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1可降低BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化可能需要经典的Wnt信号通路参与。     

R-spondin1在促进人骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用

目的:研究Wnt信号通路激活剂R-spondin1在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的作用.方法:用0、5、10、20 μg/L R-spondin1处理hBMSC,利用荧光素酶实验检测R-spondin1对hBMSC中Wnt信号通路的作用,Western blot检测R-spondin1对Wnt信号通路下游靶基因β-catenin蛋白表达的影响;在成骨分化培养基中添加20 μg/L R-spondin1诱导hBMSC成骨分化,检测R-spondin1对早期成骨分化指标ALP活性及成骨分化晚期钙沉积、成骨分化标志物OSX、OCN和成骨分化关键转录因子RUNX2表达的影响.结果:R-spondin1增强hBMSC中Wnt信号通路,R-spondin1增强ALP活性和钙沉积,促进OSX、OCN及RUNX2的表达.结论:R-spondin1增强hBMSC中Wnt信号通路的作用,促进hBMSC成骨分化.     

Wnt信号通路调控间充质干细胞成骨分化的研究进展

Wnt通路作为调控细胞生长、发育和分化的重要信号途径一直是医学研究的热点。近年来的研究表明,Wnt信号通路在调控间充质干细胞（MSCs）成骨分化过程中发挥重要作用,其机制已成为骨组织工程研究的热点,也为骨质疏松症等疾病的治疗提供了新思路。该文对Wnt信号通路调控MSCs成骨分化的研究进展进行综述。     

Sdccag3通过Wnt通路对高脂血症大鼠种植体骨结合的影响

目的 探讨Sdccag3在高脂环境中通过Wnt信号通路影响骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂成骨分化以及高脂血症大鼠种植体周围骨结合的能力。 方法 构建高脂血症大鼠模型以及高脂环境培养BMSCs并进行成骨诱导,慢病毒载体过表达/沉默结肠癌抗原3(Sdccag3)的表达,采用RT-PCR、Western blotting、Micro-CT以及硬组织切片HE染色、油红O染色、免疫荧光染色等方法检测高脂环境中Sdccag3对大鼠骨代谢以及BMSCs分化平衡的影响。 结果 高脂成骨诱导BMSCs后过表达Sdccag3,下调成脂分化指标脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ),并上调Wnt信号通路标志基因低密度脂蛋白受体相关蛋白 5(LRP5)、LRP6、β-catenin及Wnt5a、Wnt5b,上调成骨分化指标碱性磷酸酶(ALP)、 Runt相关的转录因子2(Runx2);在高脂血症大鼠种植体周围骨组织中,过表达Sdccag3可上调Wnt信号通路标志基因并抑制周围脂形成,沉默LRP5会下调Sdccag3、成骨分化指标,上调成脂分化指标,与沉默Sdccag3表达一致。 结论 高脂血症促进种植体周围脂肪形成并抑制Sdccag3表达;过表达Sdccag3抑制BMSCs成脂分化并降低高脂血症大鼠种植体周围的成脂,促进成骨,促进Wnt信号通路标志基因表达。     

Wnt5a与肿瘤的研究进展

Wnt信号通路参与成体细胞增殖、分化和凋亡过程。信号转导通路包括经典的Wnt通路和非经典Wnt/JNK通路及Wnt/Ca2＋通路等。信号转导通路出现异常导致肿瘤生成。Wnt基因最初是在小鼠的乳腺癌中发现的,目前在哺乳动物中已发现19个Wnt家族。其中Wnt5a主要介导非经典Wnt/Ca2＋通路,但也可以激活经典Wnt通路。Wnt5a的多种肿瘤中出现表达增高、降低或缺失。本文旨从Wnt5a的两面性、Wnt信号通路的调节和Wnt5a与肿瘤的关系三个方面进行综述。     

Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+和Wnt3a/Frizzled通路的生理及病理学研究进展Research progress in physiology and pathology of Wnt5a/Frizzled-2/Ca2+ and Wnt3a/Frizzled pathways

Wnt信号通路是一种古老且高度保守的信号通路,由Wnt配体蛋白、Wnt受体及其相关附件组成。Wnt通路可分为依赖β-连环蛋白（β-catenin）的经典信号通路和非依赖β-catenin的非经典信号通路两大类。Wnt3a和Wnt5a可分别激活经典的Wnt/β-catenin通路和非经典的Wnt/ Ca²⁺信号通路。2种通路在神经和心血管等各系统中广泛分布,参与调控胚胎发育、细胞增殖分化和癌症等重要生理和病理过程。Wnt5a/Frizzled-2/Ca²⁺通路刺激成骨细胞和肺上皮细胞生成,维持成熟海马的突触可塑性和结构并营养神经元,加剧损伤后神经细胞和心肌细胞中的钙超载,维持心脏发育,在癌症的发生发展过程中起促进或抑制的双重作用。Wnt3a/Frizzled通路参与炎症反应并起抗炎作用,减少阿尔茨海默病等疾病中的神经元凋亡,与Frizzled-1或Frizzled-2结合可分别促进或抑制心脏成纤维细胞分化,促进肿瘤增殖、迁移和侵袭。现综述Wnt5a/Frizzled-2/Ca²⁺和Wnt3a/Frizzled信号通路在胚胎发育、炎症、神经系统、心血管系统和癌症发生过程中的异常激活和抑制引起的生理及病理变化以及对疾病的发生发展及修复的影响,为Wnt信号通路在多系统生理及病理状态下作为研究和治疗靶点提供思路。     

Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂与骨质疏松

Wnt/β-catenin信号通路是重要的细胞信号转导途径,在细胞的增殖、分化中发挥重要作用。目前的研究表明Wnt/β-catenin信号通路在骨代谢中发挥重要作用,该通路的异常与骨质疏松的发生有关。Wnt/β-catenin拮抗剂可以抑制Wnt/β-catenin信号通路,导致通路表达异常,进一步研究Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂,设计出阻断该通路拮抗剂的物质,可为骨质疏松的治疗提供一种新的途径。     

Wnt信号通路在脑卒中疾病中作用的研究进展

Wnt信号通路是由配体蛋白Wnt和膜蛋白受体结合激发的一组多下游通道的信号转导途径,分为经典和非经典Wnt通路。其在多细胞生物体轴分化过程中起重要作用,参与了器官发生、大脑形成、海马回发育、生长锥重建、轴突形成,能够多环节、多靶点参与神经元的增值、分化、抑制迁移。脑卒中属急性脑血管疾病,具有高发病率、高死亡率、高复发率。Wnt通路是调控细胞生长、增殖、分化的关键途径,无论是在正常的神经发生、还是神经系统疾病形成和发展过程中,均有Wnt信号通路的参与。Wnt信号通路对神经干细胞的增殖分化发挥着决定作用,为很多脑损伤疾病提供启发与研究方向。研究Wnt通路与中枢神经系统细胞的作用可以为脑卒中在实验机制研究与临床针刺康复治疗提供新的依据与思路。     

经典Wnt信号通路与精神分裂症

精神分裂症是一种重性精神病性障碍,病因和机制尚未明确,但目前普遍认为是由多个微效基因协同并与环境因素共同作用导致的疾病。由多基因组成的信号通路及通路间的相互作用在精神分裂症发病中可能起重要作用。与中枢神经系统发育和功能维持密切相关的经典Wnt信号通路近年来受到较多关注。许多针对Wnt信号通路与精神分裂症的关联研究均表明,精神分裂症患者细胞内Wnt信号通路异常。文章就目前针对经典Wnt信号通路在精神分裂症发病中潜在作用的相关研究作一综述。     

芳香烃受体(Ahr)蛋白介导类风湿关节炎(RA)骨破坏机制研究的实验设计

【立论依据】 近年发现,芳香烃受体蛋白(Aryl hydrocarbon receptor, Ahr)与RA骨破坏密切相关,可能成为RA的潜在治疗靶点。 【设计思路】 Wnt信号通路是成骨分化成熟的必需信号,干扰Wnt信号通路可显著抑制成骨。我们的前期实验结果显示升高的Ahr抑制了成骨细胞的分化发育和功能。为此,我们推测Ahr的内源性配体可能会拮抗Wnt蛋白与受体的结合;或Ahr作为胞内蛋白可能会促进β-catenin磷酸化降解;以及Ahr入核后可能直接或通过抑制Wnt信号通路而间接抑制成骨的靶基因转录,最终导致RA骨破坏。 【实验内容】 本实验将通过测定关节炎小鼠Ahr活化后成骨细胞分化成熟中各期标志性分子表达量的变化,明确Ahr活化对关节炎小鼠成骨细胞分化、发育和功能的抑制作用;通过测定Ahr活化后各期成骨细胞相关转录因子表达量的变化,明确Ahr活化对关节炎小鼠各期成骨细胞转录因子的抑制作用;通过测定Ahr活化后各期成骨细胞Wnt信号通路相关分子表达量的变化,探讨Ahr抑制Wnt信号通路分子降低成骨的机制;最后通过体内实验评估Ahr对关节炎骨破坏的影响。 【材料】 胶原诱导关节炎小鼠,分离的小鼠骨髓间充质干细胞,Ahr激动剂(TCDD)和抑制剂(DIM),real-time PCR、蛋白质印迹、免疫化学染色、流式细胞术、MTT、CHIP等实验方法中需要的各种试剂及设备。 【可行性】 相关文献显示Ahr激动剂可抑制成骨细胞分化发育,拮抗Ahr可改善关节炎症状,这为深入研究提供了理论依据;我们的前期结果显示RA模型鼠关节成骨细胞高表达Ahr;Ahr表达量与骨密度负相关,原代培养关节炎小鼠成骨细胞的成熟度下降,这为本实验设计提供了数据支持。 【创新性】 本实验的设计理念是依据目前对Ahr与自身免疫病的研究进展及RA骨破坏病理改变机制的最新认识,即Ahr与RA骨破坏密切相关;本实验设计的科研假说是通过文献汇总提出的,具有一定原始创新性,即Ahr直接或干扰Wnt信号通路促进骨破坏;本实验设计如能获得预期结果,可能为RA骨破坏新机制的揭示提供实验数据,也可为同时抑制炎症和骨破坏的RA防治理念提供新靶标。     

Wnt/β-catenin信号通路与肾脏疾病

wnt信号通路的异常调节已经在许多疾病中被研究,包括肾脏疾病。wnt信号通路传导主要分为两类：经典wnt信号通路、非经典wnt信号通路。其中对经典wnt信号通路,即wnt/β-catenin的研究最为深入。wnt/β-catenin信号通路在肾脏的产生、损伤修复及其他肾脏疾病中有着重要的作用。但是wnt/β-catenin如何影响相关肾脏疾病的机制仍不是非常明确。本文简单总结了近来wnt/β-catenin信号通路与肾脏疾病的相关进展。     

Wnt信号转导通路与肺癌的研究近况

Wnt信号转导通路(简称Wnt通路)是一条在进化上保守的信号途径,在胚胎发育和中枢神经系统形成中起关键作用,可调控细胞的生长、迁移和分化。它主要由经典Wnt/β-连环蛋白信号途径和非经典的Wnt信号途径(Wnt/平面细胞的极性途径和Wnt/Ca2+途径)组成。近年来的研究发现,它是一条与肿瘤有密切关系的信号转导通路,其在肺癌发生、发展中所起的重要作用也逐渐被揭示。     

Wnt家族基因敲除小鼠胚胎发育异常的研究现状

Wnt信号分子家族调控着多个组织脏器的胚胎发育.本文对目前已建立的Wnt经典传导通路的代表基因Wnt1以及Wnt非经典通路的代表基因Wnt5a等 Wnt家族基因敲除小鼠模型的胚胎发育异常进行综述.     

Wnt及其拮抗剂在肿瘤发生中的作用

Wnts家族是重要的细胞信号分子，在细胞的增值、分化及肿瘤的发生中发挥蘑要作用。Wnt配体通过与细胞膜上的两种受体分子相互作用发动信号传导。Wnt受体包括Frizzled受体家族和LDL相关蛋白家族。Wnt的拈抗剂分为两类，sFRP类和DKK类。sFRP类的成员包括sFRP、Wif-1和Cerberus，他们直接与Wnt配体结合，从而改变了他们与Wnt复合体结合的能力；DKK类只结合Wnt受体复合体的一个亚基。sFRPs和DKKs均能激活规则途径。在某些情况下，一种拮抗剂能抑制另一种拈抗剂的作用。研究揭示Wnt的异常激活与多种肿瘤的发生或转移有关，因此深入研究Wnt信号通路，设计出阻断Wnt通路的物质，可为将来癌症的治疗提供一种可行性的途径。     

Wnt信号通路的生物学效应及其与肺部疾病的关系

Wnt信号转导通路(Wnt通路)是一条在进化上保守的信号途径,它主要由经典Wnt/β-catenin信号途径和非经典的Wnt信号途径(Wnt/平面细胞的极性途径和Wnt/Ca2+途径)组成。其生物学效应广泛,可调控细胞的黏附、迁移、增生和凋亡等。作为一条与多种疾病密切关系的信号转导通路,其在肺部疾病发生、发展中所起的重要作用也逐渐被揭示。     

Wnt信号通路在强直性脊柱炎发病过程中的作用

强直性脊柱炎(AS)是一种病因复杂、发病隐匿且具有潜在致残性的血清阴性脊柱关节病。其关节病理变化过程可以归结为附着点炎、骨侵蚀、骨赘形成三个阶段,骨赘形成致关节融合强直最终导致残疾。AS的骨赘形成过程及机制尚不清楚。经典Wnt和骨形态发生蛋白信号通路在调节成骨细胞功能及骨形成中发挥重要的协同作用。     

在Sox2阳性细胞敲除β-catenin对小鼠内耳发育和极性的影响

 目的 探究经典Wnt/β-catenin信号通路的核心蛋白β-catenin敲除对小鼠内耳发育和极性的影响。方法 在胚胎小鼠内耳感觉上皮的前体细胞(Sox2阳性细胞)条件敲除β-catenin,观察内耳大体结构改变情况。对基底膜和椭圆囊斑、球囊斑行免疫荧光染色,观察毛细胞数量、排列和极性的变化情况。结果 与对照组比较,β-catenin条件敲除后,听泡体积变小,耳蜗和前庭器变小,前庭感觉上皮毛细胞减少(P<0.01)。耳蜗静纤毛方向紊乱,动纤毛在位置和数量上发生变化,前庭毛细胞方向也产生散在性紊乱。结论 β-catenin调控小鼠内耳发育和毛细胞极性,经典Wnt/β-catenin信号通路可能与非经典Wnt/PCP通路共同调控耳蜗伸展和内耳平面细胞极性。     

经典Wnt/β-catenin信号通路中的双向调控

In recent years,Wnt/β-catenin signaling has been identified as a key player in embryogenesis and human diseases.Canonical Wnt signaling pathway is controlled by a variety of classic molecules like Wnt,β-catenin,Axin,APC,GSK-3β and CK1,which interact and coordinate to regulate the expressions of cell signaling molecules.The latest evidences suggest that some components of the Wnt/β-catenin signaling,like APC,GSK-3β,CK1,Dkk2 and WISE,play dual roles different from what they have been thought previously.Here w...