补肾法对IL—1诱导的破骨细胞性骨吸收及破骨细胞MMP—9

用从出生２４小时的乳鼠长骨中分离出来的破骨细胞，从１月龄大鼠长骨中分离出来 的骨在质细胞，建破骨细胞培养和破骨细胞、骨髓基质细胞培养系。在白细胞介素－１（ＩＬ－１α）作用的同时，加入不同剂量的密骨片药液，分别与牛骨片共同培养２０小时。计数骨片形成的陷窝数及测算吸收陷窝面积。并采用原位杂交技术，研究密骨细胞基质金属蛋白酶９（ＭＭＰ－９）ｍＲＮＡ表达的调控。结果显示，在基质细胞存在的条件下，ＩＬ－１可     

密骨片对破骨细胞基质金属蛋白酶-9mRNA表达的影响

目的:探讨白细胞介素-1(IL-1)诱导的破骨细胞性骨吸收过程中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA 的表达及补肾中药密骨片的调控作用。方法:从出生24 h 的乳鼠长骨中分离破骨细胞,从1月龄大鼠长骨中分离骨髓基质细胞,建立破骨细胞培养和骨髓基质细胞、破骨细胞培养系。在重组 IL-1α(rhIL-α)作用的同时,加入不同剂量的密骨片药液,分别与牛骨片共同培养20 h,计数骨吸收陷窝数及测算陷窝面积;并采用原位杂交技术研究破骨细胞 MMP-9 mRNA 的表达。结果:在基质细胞存在的条件下,IL-1可使骨吸收活性提高2～4倍,MMP-9 mRNA 呈高表达;而用密骨片药液处理后,MMP-9 mRNA 表达下降,作用呈量效关系。结论:密骨片可对抗 IL-1对基质细胞的影响,抑制破骨细胞重要的蛋白分解酶 MMP-9的表达而减少骨吸收。     

补肾法对实验性骨质疏松MMP—9及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

为了探讨补肾法治疗绝经后骨质疏松症的分子作用环节，本研究以成年卵巢切除大鼠作为骨质疏松实验模型，通过斑点杂交技术，在ｍＲＮＡ水平分析模型组，密骨片组及假手术组骨组织基质金属蛋白酶（ＭＭＰ－９）和Ⅰ型胶原表达。通过原位杂交技术，研究两个基因ｍＲＮＡ在骨细胞的分布。结果显示，模型组大鼠ＭＭＰ－９和Ⅰ型胶原表达均较假手术组高，而密骨片治疗后，两个基因表达均下降。原位杂交显示ＭＭＰ－９ｍＲＮＡ主要在破骨细胞，骨髓单核细胞和一些骨基质表面衬细胞中表达，Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ则定位于成骨细胞。提示ＭＭＰ－９在骨质疏松骨丢失过程中起重要作用；骨质疏松病理过程中，骨吸收和骨形成均增加，骨呈高转换状态，密骨片治疗作用主要是降低骨转换率，维持骨量，其发生是由于相关基因表达改变的结果     

中药含药血清对体外培养鼠破骨细胞的影响

目的 :研究骨康抑制破骨细胞性骨吸收的机理。方法 :新鲜牛皮质骨经锯式切片机横切成 5 0um厚0 .5cm× 0 .5cm大小骨片 ,参照已建立的破骨细胞分离培养方法 ,从新生SD大鼠四肢长骨分离破骨细胞。原代破骨细胞培养 2 4小时后 ,加入含药血清培养 7天。结果 :发现培养的细胞具有典型破骨细胞的形态特点。结果可见破骨细胞能在骨片表面形成吸收陷窝 ,其形态多样 ,随时间延长 ,陷窝扩大 ,数量增多 ,而骨康含药血清可抑制骨陷窝数量。结论 :这说明含药血清可直接抑制破骨细胞的功能 ,骨康抑制骨吸收的功能可能与其直接抑制破骨细胞功能有关。     

增骨Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号对体外破骨细胞的影响

为阐明增骨Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号序贯疗法治疗骨质疏松症的机理.从新生1天内的兔长骨骨干分离出破骨细胞,与骨磨片、盖玻片及添加增骨Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号后共同培养,用相差显微镜及光镜观察骨吸收陷窝形态与破骨细胞形态变化,并进行骨陷窝计数.结果显示增骨Ⅰ号明显增加吸收陷窝数目(P＜0.01),破骨细胞形态小、数多、核少;增骨Ⅱ号明显抑制吸收陷窝数目(P＜0.01),破骨细胞形态大、数少、核多;增骨Ⅲ号对破骨细胞无影响(P＞0.05).表明增骨Ⅰ号能激活破骨细胞活性,增骨Ⅱ号能抑制骨吸收,增骨Ⅲ号对破骨细胞无作用.     

健骨胶囊含药血清对体外培养破骨细胞活性和骨吸收作用的影响

目的：观察健骨胶囊含药血清对体外培养新生大鼠破骨细胞活性与骨吸收的干预作用。方法：3天给药法制备健骨胶囊含药血清;机械分离培养法将新生大鼠四肢长骨干体外分离和培养破骨细胞,应用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,阳性破骨细胞计数、骨片吸收陷窝形态分析,评价健骨胶囊对破骨细胞的活性与骨吸收的作用。结果：健骨胶囊能减少体外破骨细胞的TRAP阳性细胞数及骨片吸收陷窝面积。结论：健骨胶囊含药血清对破骨细胞的活性与骨吸收具有抑制作用,为健骨胶囊治疗原发性骨质疏松症提供血清药理学依据。     

健骨颗粒对体外破骨细胞整合素αV及β3 mRNA表达的影响

目的:探讨补肾健脾中药健骨颗粒对体外破骨细胞整合素(Itg)αV、β3mRNA表达的影响。方法:采用破骨前体细胞系诱导培养法,通过M-CSF和RANKL诱导剂诱导RAW264.7细胞,分化为成熟破骨细胞。分别用健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预,运用实时荧光定量PCR法检测ItgαV、β3mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,骨陷窝和骨吸收面积计算分析。结果:经M-CSF和RANKL诱导后,RAW264.7细胞的形态特征、TRAP染色均符合成熟破骨细胞特异性表现;含药血清组破骨细胞ItgαV、β3mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P<0.05),同时骨磨片的骨吸收陷窝数和面积亦呈同样变化趋势。结论:RAW264.7细胞经诱导分化后可以获取成熟破骨细胞;健骨颗粒能有效抑制破骨细胞Itgαv、β3 mRNA表达,影响破骨细胞功能活性。     

中药骨康对破骨细胞活性及凋亡的影响

为研究中药治疗骨质疏松症的作用机理.采用体外分离培养大鼠破骨细胞并分为空白组、固邦组和骨康组,分别添加相应的药物血清共同培养,然后进行指标检测.结果骨康组HE染色可见破骨细胞胞浆浓缩、核固缩深染,有的细胞出现核碎裂,TRAP阳性细胞数明显减少,象牙骨片上的吸收陷窝数量及面积减少,流式细胞仪监测时在G1期前出现凋亡峰,共聚焦显微镜观察可见细胞凋亡征象.检测结果接近固邦组,但与空白组具有显著性差异.表明中药骨康是通过抑制体外培养的破骨细胞活性并能诱导破骨细胞凋亡,而起到抑制骨吸收的作用的.     

升麻三萜皂苷对破骨细胞形成分化的影响及机制研究

目的 探究升麻三萜皂苷（Cimicifuga triterpene saponins）对破骨细胞形成分化和骨吸收功能的影响,并基于网络药理学探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法测定升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇对骨髓巨噬细胞（bone marrow macrophages,BMMs）增殖活性的影响;抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrateresistant acid phosphatase,TRAP）染色测定破骨细胞数目;磷酸苯二钠法测定破骨细胞的TRAP活性;鬼笔环肽染色观察破骨细胞F-actin环的形成;甲苯胺蓝染色检测破骨细胞在牛皮质骨骨片上形成的骨吸收陷窝;Western blotting分析破骨细胞标志基因和蛋白的表达。采用GeneCards和DisGeNET数据库获取破骨细胞功能的靶点,应用Cytoscape 3.7.1软件,采用蛋白互作的方式,筛选升麻三萜皂苷调控破骨细胞功能的核心靶点,并采用DAVID 6.8对核心靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。结果 升麻三萜皂苷对BMMs增殖无显著影响,升麻三萜皂苷阿克特素、升麻环氧醇苷、升麻醇均可减少破骨细胞的数目,抑制破骨细胞TRAP活性和F-actin环的形成,显著抑制破骨细胞活化T细胞核因子1（nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1）、原癌蛋白Fos（oncogene Fos,c-Fos）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP9）和组织蛋白酶（cathepsin K,CTSK）的表达（P＜0.05、0.01）,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝的面积（P＜0.01）。网络药理学分析表明升麻三萜皂苷主要通过丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路调控破骨细胞的骨吸收功能。结论 升麻三萜皂苷通过MAPK通路抑制BMMs诱导的破骨细胞的形成分化和骨吸收,可为抗骨质疏松新药的研发提供先导化合物。     

“肾主骨”理论与破骨细胞骨吸收

从骨的现代定义及“肾主骨”理论的内涵出发,结合实验研究分析肾主骨与抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)活性、骨吸收陷窝对破骨细胞骨吸收机制的影响作用,为中药防治破骨细胞骨吸收类疾病及其作用机制研究提供思路.     

试论肝脾不调证

本文对脾不调证的病理机制，临床表现，证治方药，临床应用进行了阐述。肝脾不调证即肝失疏泄，脾失健运所表现的证候，肝病可及脾，脾病亦可及肝。     

电针对家兔视前区-下丘脑前部温度感受神经元放电的影响

<正> 针刺可以降低体温已经动物实验和临床实践证明,但其作用机理尚未完全清楚,特别是对体温调节中枢的作用报道甚少。本工作以家兔视前区-下丘脑前部(PO-AH)温度感受神经元自发放电为指标,观察电针对其放电活动的影响,探讨针刺对体温调节中枢的调整作用。方法家兔18只,雌雄不拘,体重1.7～2.3公斤,以氨基甲酸乙酯(1克/公斤)静脉麻醉。手术包括气管插管,小脑延髓池引流和开颅。手术后,兔头固定于立体定向仪上,     

胸部危险穴位针刺安全深度的研究

随机抽样取５１具较新鲜成年人尸体，其中男尸２１具，女尸３０具，定穴、冰冻后，用解剖学断面方法切割，然后等化冻后，测量穴位皮肤浅点至引起危险的深点之间的距离，用统计学方法处理测量得到的数据。经研究，得到胸部２３个危险穴位引起危险的平均深度，并对胸部２３个危险穴位提出了针刺安全深度。     

带蒂骨膜瓣移植修复负重区关节软骨缺损的实验研究

为探讨带蒂骨膜瓣再生软骨的机理及修复负重区关节软骨缺损的可行性,在兔右股骨内髁造成全层软骨缺损,实验组用逆运脉血流方向切取的带蒂骨膜瓣,对照组用游离骨膜移植修补。分别于术后2、4、8、12周处死实验动物,作肉眼及组织学观察。结果显示,带蒂骨膜瓣的再生软骨能力优于游离骨膜,更适宜于修复负重区关节软骨缺损。     

电刺激兔耳穴对胆囊收缩的影响

本实验发现电刺激兔耳肝胆穴后,胆囊缩小,胆囊颜色变淡,其缩小反应最早在刺激后1分钟时出现,多在刺激后10分钟左右收缩开始明显,一般持续30～40分钟。取刺激后15～25分钟所得的胆囊长径和宽径乘积的平均值,与刺激前比较,差异显著。这一结果不但由体外观察到有关耳穴与肝胆脏器的相关关系。也为临床上采用耳压排石疗法提供了理论基础。     

针刺抑制胃不同部份牵拉反应的实验性研究

<正> 以往我们曾在胃大部切除术病人术前、术中记录了病人指(趾)血管容积脉搏波幅的变化.在动物实验中记录了电刺激内脏大神经时腹肌肌电反应,证明了这两项生理指标对探讨內脏疼痛反应的规律和评定临床腹部手术的针麻效果上具有一定价值.本文利用胃牵拉反应的动物模型记录了腹肌     

RECENT DEVELOPMENT IN THE STUDY OF THE MECHANISM OF THE CORRELATION BETWEEN THE EXTERIOR AND THE VISCERA OF A HUMAN BODY

<正> The ancient medical science of our country looks upon a human body as a monolithic whole. According to this "concept of th.e whole" the exterior(body surface)of a human body is correlated with its viscera(internal organs)through the proper channels and collaterals. There are records of such findings as the twelve channels linking with the viscera in-     

THE OBSERVATION OF THE THERAPEUTIC EFFECT ON THE PATIENTS WITH GASTRELCOMA BY THE TREATMENT OF MOXIBUSTION

Gastriculcer,acommonlyandfrequentlyencountereddisease,iscalled"epigastra1gia"intheTCM,anditischaracterisedbylongcourseofdisease,repeatedattackandprotractedstateofillness.Inthatpaper,thirty-fourcasesofgas-trelcomaweretreatedbymoxibustionandamedicinegroupwasusedacontro1.Theresultshowedthatthetherapeuticeffectofthemoxi-bustiongroupwasbetterthanthatofthemedicinegroup.GENERALDATAInthe34patientswithgastriculcer,18men,16women;theagewasbetween2Oand64yearsold,anaverape36.4;thediseasecoursebetween…     

论《内经》经络的诊断及针刺手法

本文归纳了《内经》经络之望色，切脉，内脏病变在经络循行的特定部位以及经络腧穴之反映，来说明经络的诊断作用，并且分述了针刺治疗的手法：进针前手法，进针时手法，进针后之补泻手法。     

肝阳虚证探析

本文以阴阳普遍存在的法则及藏象学说为依据，从有关肝阳虚的理论依据，肝阳的生理功能，肝阳虚的病因病机，证治等方面阐述了肝阳的生理特点与肝阳不足的辨证论治。