跨膜蛋白16A在人正常月经周期子宫内膜表达的初步研究

目的:研究跨膜蛋白16A(TMEM16A)在人正常月经周期子宫内膜的表达变化。方法:收集人正常月经周期增殖期及分泌期的子宫内膜,共48例。采用免疫组织化学染色法检测TMEM16A蛋白的定位表达,实时荧光定量PCR测定TMEM16A mRNA表达水平,Western Blot法测定TMEM16A蛋白表达水平。结果:TMEM16A蛋白主要表达于分泌中晚期子宫内膜的腔上皮和腺上皮细胞;与增殖期相比,分泌期子宫内膜中TMEM16A mRNA和蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:TMEM16A在人正常月经周期不同时期子宫内膜存在差异性表达,其可能受到卵巢雌孕激素的调节,并参与子宫内膜容受性的建立。     

解剖、生理和组胚学

060679骨桥蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达/马彩虹…∥生殖医学杂志.—2006,15(1).—1～5用免疫组化法对51例人正常月经周期子宫内膜骨桥蛋白(OPN)蛋白质进行定位和定量检测,Western blot法测定增殖期及分泌期OPN蛋白水平,采用RT-PCR法检测18例人正常月经周期子宫内膜增殖期及分泌期OPN mRNA的表达。结果:OPN蛋白质主要分布在正常子宫内膜腺上皮细胞,增殖早期、中期无表达,增殖晚期出现,分泌中期、晚期表达最强。月经期子宫内膜上皮细胞表达较强。OPNmRNA表达分泌期强于增殖期(P<0.05)。Westernblot检测结果显示,正常子宫…     

原位杂交检测Epo,VEGF基因在子宫内膜异位症组织中的表达

目的: 探讨细胞因子Epo, VEGF基因在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达情况及其与临床分型间的关系. 方法: 应用原位杂交方法,检测38例EMs组织及35例正常子宫内膜Epo, VEGF mRNA的组织定位和表达强度. 结果: Epo, VEGF mRNA均以腺体细胞胞质表达为主,细胞核少量阳性. EMs组织中Epo, VEGF mRNA表达增高明显(3.08±0.48,2.95±0.43),高于正常对照组子宫内膜(0.55±0.46,0.45±0.42)(P<0.001);EMs组Epo, VEGF mRNA在增殖期和分泌期表达无明显差异(P>0.05);EMs组Epo, VEGF mRNA表达有相关性(C＝0.733, P<0.001),且Epo mRNA表达随AFS分期增加而升高(P<0.01). 结论: Epo, VEGF mRNA过度表达、转录所引起的局部新生血管生成增强可能是子宫内膜异位症发生的机制之一.     

子宫内膜腺癌组织中核干细胞因子和增殖细胞核抗原的表达

目的:探讨子宫内膜腺癌(EMC)组织中核干细胞因子(NS)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达与临床病理特性、预后的关系.方法:采用RT-PCR方法检测15例正常子宫内膜、26例子宫内膜增生过长及52例子宫内膜癌标本中NS mRNA的表达情况,应用免疫组织化学SP法检测PCNA蛋白的表达情况.结果:EMC与正常子宫内膜和子宫内膜增生过长组织问NS mRNA和PCNA蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05),且二者的表达与EMC的病理分级、临床分期有关(P<0.05),PCNA蛋白的表达还与EMC的浸润深度有关(P<0.05).在子宫内膜腺癌组织中NS mRNA和PCNA的表达呈正相关(r＝0.609,P<0.05).EMC复发组和未复发组间NS mRNA和PCNA表达差异有统计学意义(P<0.05).结论:EMC组织中NS mRNA的表达与肿瘤的恶性程度密切相关,且其与细胞的增殖活性及EMC的复发有关.     

月经过少子宫内膜中基质金属蛋白酶-11及基质金属蛋白酶抑制物-1表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-11(MMP-11)和基质金属蛋白抑制物-1(TIMP-1)在月经过少患者子宫内膜中的表达与月经过少发病机制的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法检测MMP-11蛋白和TIMP-1蛋白在月经过少子宫内膜和正常子宫内膜中的表达.结果:月经过少组子宫内膜MMP-11蛋白表达在增殖期腺上皮和间质均显著低于正常子宫内膜(P＜0.05,P＜0.05);月经过少组子宫内膜腺上皮中TIMP-1蛋白表达,在增殖期和分泌期均显著低于正常子宫内膜(P＜0.05,P＜0.05).而间质细胞TIMP-1蛋白表达在增殖期和分泌期与正常子宫内膜间质细胞差异无显著性(P＞0.05,P＞0.05).结论:MMP-11可能参与了子宫内膜的重建、增生.MMP-11的调节为多因素调节,TIMP-1仅是其中因素之一.     

Cyclin G1在正常月经周期人子宫内膜表达的周期性变化

目的分析细胞周期素G1(Cyclin G1)在正常月经周期人子宫内膜表达的周期性变化,以初步探讨其生理意义。方法采用免疫组化方法观察15例增殖期,11例分泌早期,15例分泌中晚期子宫内膜上皮细胞和基质细胞Cyclin G1蛋白的表达;采用地高辛标记的RNA探针进行原位杂交检测子宫内膜标本Cyclin G1 mRNA的表达。结果1在增殖期子宫内膜上皮细胞仅有少量Cyclin G1蛋白表达,在分泌早期上皮细胞其表达逐渐升高,尤以在分泌期的中、晚期表达量增加最为明显,并定位在细胞核中。在基质细胞中,Cyclin G1蛋白仅在分泌中晚期有表达。2Cyclin G1 mRNA的阳性信号定位在细胞浆,并且Cyclin G1 mRNA在子宫内膜表达的时空特点与蛋白质水平的表达具有一致性,即Cyclin G1的mRNA在分泌期子宫内膜上皮细胞表达较明显,基质细胞在分泌中晚期出现表达。结论Cyclin G1在人子宫内膜细胞中的表达具有明显的时空特点,其在子宫内膜的表达特点与孕激素周期性分泌一致。     

多囊卵巢综合征患者子宫内膜细胞色素P450的表达

目的 :探讨细胞色素P45 0芳香化酶 (aromatasecytochromeP45 0 ,P45 0arom)mRNA及蛋白在多囊卵巢综合征 (polycysticovarysyndrome ,PCOS)患者子宫内膜上的表达及意义。 方法 :分别用原位杂交和免疫组织化学及Westernblotting方法检测 31例PCOS患者和 30例因输卵管不通而不孕或男性不孕的对照组 (15例增殖期 ,15例分泌期 )的子宫内膜上的P45 0arommRNA及蛋白的表达。结果 :PCOS患者子宫内膜上P45 0arommRNA呈强阳性表达 ,而对照组为弱表达或阴性表达 ;PCOS患者子宫内膜上P45 0arom蛋白呈弱到强阳性表达 ,对照组为阴性到阳性表达 ,两者比较差异有显著性 ;PCOS患者增殖期与单纯增生比较 ,P45 0arom蛋白表达 ,差异无显著性。结论 :PCOS患者子宫内膜上P45 0arom的异常升高可能促进雄激素在子宫内膜局部转化为雌激素 ,在子宫内膜病变中起一定作用     

瘦素及其受体系统在子宫内膜的表达

目的　研究瘦素 (Leptin)及其受体 (Obgenereceptor ,Ob -R)在子宫内膜的表达 ,探讨Leptin对女性生殖的影响。方法　分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测Leptin、具信号传导功能的Leptin长受体 (Ob -Rb)在子宫内膜 (39例 ,增殖期 2 4例 ,分泌期 15例 )的表达。结果　 (1)Leptin、Ob -RbmRNA及其蛋白在人的子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达。 (2 )Ob -Rb蛋白在分泌期子宫内膜的表达明显高于增殖期 ,差异有极显著性P <0 0 1)。Leptin蛋白在不同期子宫内膜的表达差异无显著性。 结论　瘦素和瘦素受体系统在孕卵着床和种植过程中可能发挥重要作用。     

细胞周期蛋白A及P21在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达

目的探讨细胞周期蛋白A(CyclinA)及P21在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法采集子宫内膜异位症患者(观察组)在位内膜(25例)和异位子宫内膜(28例)以及其他良性疾病患者的子宫内膜(对照组35例),用免疫印迹、RT-PCR、免疫组化的方法检测CyclinA和P21表达。结果cyclinAmRNA在异位内膜增生期与分泌期表达量(1.24±0.10)、(1.33±0.21)均明显高于在位内膜(0.72±0.26)、(0.42±0.22)及对照组(0.68±0.09)、(0.35±0.06)(P0.05)。CyclinA蛋白在异位内膜增生期与分泌期表达量(0.95±0.10)、(0.91±0.18)均明显高于在位内膜(0.53±0.08)、(0.27±0.11)及对照组(0.47±0.11)、(0.22±0.09)(P0.05)。在位内膜CyclinA表达量与对照组相比均无显著性差异(P0.05)。P21mRNA在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.21±0.01)、(0.54±0.35)均明显高于在位内膜(0.09±0.06)、(0.28±0.02)及异位内膜(0.06±0.01)、(0.13±0.00)(P0.05)。P21蛋白在对照组内膜增生期与分泌期表达量(0.74±0.13)、(1.13±0.15)均明显高于在位内膜(0.59±0.21)、(0.62±0.29)及异位内膜(0.40±0.36)、(0.43±0.33)(P0.05)。CyclinA在对照组内膜增生期表达高于分泌期(P0.05),P21在对照组内膜分泌期表达高于增生期(P0.05),而两者在异位内膜表达均失去周期性(P0.05),两者在异位内膜中表达呈显著负相关(r=-0.738,P0.01)。结论CyclinA及P21异常表达可能在子宫内膜异位症异位内膜增殖中起重要作用。     

Expression of nucleophosmin in glandular epithelium of non-pregnant human endometrium during the menstrual cycle

Background  Nucleophosmin plays a critical role in embryonic development. This study aimed to examine the expression pattern of nucleophosmin in glandular epithelium of human endometrium during the menstrual cycle.

Methods  Endometrial tissues used for this study were obtained from 46 non-pregnant patients who underwent hysterectomy which had been performed to treat benign diseases. Nucleophosmin expression was assessed by in situ hybridization and immunohistochemistry.

Results  At the early-, mid- and late-proliferative phase, nucleophosmin mRNA was highly expressed in glandular epithelium of human endometrium. At the secretory phase, the expression of nucleophosmin mRNA was reduced in glandular epithelium in early-secretory phase, and the expression in mid- and late-secretory phases was not detected. Similarly, nucleophosmin protein was strongly expressed in endometrial glands throughout the proliferative phase, but was gradually reduced during secretory phase.

Conclusion  Nucleophosmin mRNA and protein are expressed in glandular epithelium of human endometrium throughout the menstrual cycle.

     

水通道蛋白2在人不同时期子宫内膜中的表达

目的探讨水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)在人不同时期子宫内膜中的表达特点及其意义。方法采用免疫组织化学技术、W estern印迹方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对87例(其中增生期23例,分泌早期30例,分泌中期34例)来自生育年龄妇女不同月经周期的子宫内膜行AQP2的检测。结果AQP2阳性着色主要分布于人子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞的胞膜和胞质;W estern印迹证实了AQP2在人子宫内膜中的表达,半定量分析发现增生期内膜AQP2的相对表达量为1.03±0.10,显著低于分泌早期(1.33±0.14,P<0.05)和分泌中期(1.63±0.15,P<0.01);分泌早期和中期相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AQP2在人子宫内膜中表达,且其表达量随月经周期而变化,表明其可能在性激素作用下的子宫内液体平衡过程中起一定作用。     

Temporospatial expression of cyclin G1 in normal human endometria

OBJECTIVE: To study the temporospatial expression of cyclin G1 protein and mRNA in normal human endometrium and its physiological implications. METHODS: Human endometria samples were taken from 15 women in proliferative phase, 11 in early secretory phase, and 15 in mid-late secretary phase. Cyclin G1 protein and mRNA in the normal human endometria were measured by immunohistochemistry and in situ hybridization, respectively. RESULTS: The expression of cyclin G1 protein in the epithelium cells was low in proliferative phase. The expression increased at early secretary phase and reached the highest at mid-late secretary phase. The expression of cyclin G1 protein in stromal cells only appeared at mid-late secretary phase. The cyclin G1 protein was localized in nucleus. The expression of cyclin G1 mRNA was localized in cytoplasma, but had similar cycles as the expression of cyclin G1 protein. CONCLUSION: The expression of Cyclin G1 in normal human endometria is progesterone dependence.     

Lymphocytes and perforin expression in endometrium during the menstrual cycle

Ｔｈｅｕｔｅｒｉｎｅｃａｖｉｔｙｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｅｓｗｉｔｈｔｈｅｅｘｔｅｒｎａｌｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｉｓｔｈｅｒｅｆｏｒｅｅｘｐｏｓｅｄｔｏｆｏｒｅｉｇｎａｎｔｉｇｅｎｓ Ｉｔｄｏｅｓｎｏｔｈａｖｅａｃｏｍｐｌｅｘｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｌｙｍｐｈｎｏｄｅｓａｎｄｒｅｔａｉｎｓｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆａｐｒｉｍｉｔｉｖｅｓｕｒｆａｃｅｅｐｉｔｈｅｌｉａ 1Ｐｒｅｖｉｏｕｓｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎｔ…     

子宫内膜异位症和子宫腺肌病P450arom和COX-2mRNA的表达及意义

目的研究细胞色素芳香化酶P450（P450arom）基因和环氧化酶-2（cox-2）基因在子宫内膜异位症（EMs）和子宫腺肌病（AM）在位和异位内膜中的表达及相关性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测22例正常子宫内膜、42例EMs及33例AM的在位和异位内膜中P450arom mRNA和COX-2mRNA的表达,并进行相关性分析。结果P450arom mRNA在正常子宫内膜无表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=28．777,q=4．624～10．282,P〈0．01）。P450arom mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异有显著性（q=2．964、2．655,P〈0．01、0．05）。COX-2mRNA在正常子宫内膜无表达或弱表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=21．307,q=2．583～7．905,P〈0．01）;在正常子宫内膜、EMs在位和异位子宫内膜中分泌期表达高于增殖期,差异均有显著性（t=4．401～15．865,P〈0．05）;在AM表达不随月经周期变化。COX-2mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异均有显著性（q=2．623、5．908,P〈0．05）。P450arom mRNA和COX-2mRNA在EMs的表达与rAFS分期均无相关性。P450arom mRNA与COX-2mRNA在EMs中的表达水平呈正相关（r=0．964,P〈0．01）;在AM中的表达水平亦呈正相关（r=0．813,P〈0．01）。结论P450arom和COX-2与EMs和AM的发病相关,二者协同作用促进EMs和AM的发生发展。     

子宫内膜周围淋巴结区素和N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶表达及其对胚胎着床的影响

目的:探讨人子宫内膜周围淋巴结区素(peripheral lymph node addressin,PNAd)及N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(GlcNAc-6-sulfotransferase,GlcNAc6ST)表达特点及其与胚胎着床的关系.方法:对75例子宫内膜(增生期12例为健康妇女;分泌期63例为不孕症患者,含分泌早期27例,分泌中期36例)采用免疫组织化学法和半定量蛋白免疫印迹法检测PNAd的表达,实时荧光定量PCR法检测41例分泌期内膜GlcNAc6ST mRNA.对63例不孕症(男性因素17例,输卵管因素46例)行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗,临床妊娠29例,非妊娠34例,分析两组间PNAd和GlcNAc6ST表达的差异.结果:(1)PNAd位于腔上皮和腺上皮细胞胞膜和胞浆,增生期表达较弱,分泌期强表达.PNAd蛋白免疫印迹呈现至少4条带,对应Sgp200、CD34、MAdCAM-1,GlyCAM-1四种分子,表达水平呈两两正相关.分泌期Sgp200、CD34、MAdCAM-1表达高于增生期,差异有统计学意义.各病例均表达GlcNAc6ST mRNA,与PNAd各分子水平无相关.(2)妊娠组CD34、GlyCAM-1表达高于非妊娠组,差异有统计学意义;两组GlcNAc6ST mRNA水平差异无统计学意义.(3)妊娠组与非妊娠组年龄、受精方式、hCG注射日子宫内膜厚度、累积胚胎评分、移植胚胎平均分等差异无统计学意义.结论:月经周期子宫内膜PNAd表达呈动态变化.分泌期CD34、GlyCAM-1表达增强可能是人类胚胎着床的促进因素.PNAd表达降低可能是部分不孕症的潜在原因.     

子宫内膜异位症患者肝细胞生长因子及其受体c-Met的表达

OBJECTIVE: To study the role of hepatocyte growth factor (HGF) and its receptor (c-Met) in the pathogenesis of endometriosis. METHODS: In situ hybridization and immunohistochemistry method was used to examine HGF mRNA and protein expression in eutopic and ectopic endometrium obtained from 54 women in reproductive age with endometriosis confirmed by laparoscopy and histological examination (including 28 cases of stages I/II and 26 of stages III/IV) and from the endometrium of 24 healthy fertile women. RESULTS: In patients with endometriosis, the positivity rate of HGF/c-Met expression was similar in the eutopic and ectopic endometria, but the number of positive cells and expression intensity were much higher in ectopic endometrium. The positive expression rate varied little between the proliferative and secretory stages of the endometrium. Compare with the healthy controls, patients with endometriosis of stages I/II and III/IV had significantly elevated positivity rate of HGF and c-Met expressions in either eutopic and ectopic endometrium, but without significant difference between the two patient groups (P<0.01). The rate of strong c-Met protein expression was significantly higher in III/IV endometriosis than in the controls, without statistical difference between other groups. CONCLUSION: The expressions of HGF and c-met gene are correlated with the pathogenesis of endometriosis, which is preceded by eventful changes in the biological behavior of the eutopic endometrium.     

新疆汉族和维吾尔族妇女子宫内膜异位症中Bcl-2、Bax、survivin的表达及意义

目的：探讨凋亡调节基因Bcl-2、Bax、survivin在汉族和维吾尔族（维族）妇女子宫内膜异位症（EMs）中的表达及意义。方法：44例EMs患者，汉族22例，维族22例；30例非EMs及非内膜病变者作为对照组，汉族15例，维族15例，应用免疫组化法检测EMs患者和对照组子宫内膜组织不同族别、不同时期（增生期、分泌期）及在位内膜、异位内膜中Bcl-2、Bax的表达，同时采用原位杂交法检测survivin的表达。结果：Bcl-2、Bax、survivin主要定位于子宫内膜的腺上皮。（1）维、汉族对照组子宫内膜增生期Bcl-2的表达高于分泌期（P〈0.05），子宫内膜增生期、分泌期survivin都弱表达，差异无统计学意义（P〉0．05）。EMs患者异位、在位内膜中Bcl-2和survivin的表达较对照组明显增强，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）维、汉族对照组子宫内膜增生期和分泌期Bax都强表达，差异无统计学意义（P〉0．05）。EMs患者在位及异位内膜中Bax表达均比对照组减弱，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：EMs中凋亡调节基因的表达与无EMs者不同，促凋亡基因表达减弱，抑制凋亡基因表达增强，有利于异位内膜的种植生存和发展。维族和汉族EMs凋亡基因Bcl-2、Bax、survivin表达无差异。