动态浊度法在复方甘油细菌内毒素检测中的应用

目的:探讨使用MB-80微生物动态检测系统应用动态浊度法进行复方甘油细菌内毒素检测的可行性.方法:确立动态浊度法检测复方甘油细菌内毒素的方法,然后将18份复方甘油样本使用动态浊度法和凝胶法进行检测,比较结果是否一致.结果:动态浊度法和凝胶法实验结果一致.结论:使用MB-80微生物动态检测系统应用动态浊度法检测复方甘油细菌内毒素是可行的.     

体液内毒素及深部真菌快速定量检测方法

目的:应用MB-80微生物快速动态检测系统,建立快速体液内毒素及深部真菌定量检测方法. 方法:在无菌条件下,留取20例正常人、10例严重腹腔革兰阴性菌感染及5例深部真菌感染病人的血浆,经前处理后,用MB-80系统动态浊度定量法,1 h完成检测.内毒素检测采用鲎试验动态浊度法,通过检测真菌细胞壁上1-3-β-D-葡聚糖的含量来反映深部真菌的水平.经计算机光电检测动态浊度变化,计算出内毒素及真菌含量. 结果:本法操作快速、简便,前处理过程标准化,结果重复性好,两种物质的检测可以同时在一台仪器上进行.正常人血浆内毒素和真菌水平在(2.03±2.32)ng/L和(2.46±2.15)ng/L,符合试剂盒提供的正常值范围(均<10 ng/L).严重感染病人不同时相点血浆内毒素含量范围在50～3 958 ng/L.深部真菌感染病人血浆真菌含量范围在20～ 2 381 ng/L. 结论:应用MB-80微生物快速动态检测系统,可以定量检测体液内毒素及真菌实际含量,作为临床上早期难以确诊的内毒素血症和深部真菌感染的辅助性诊断手段.     

氯化钠注射液内毒素检测方法的探讨

目的采用凝胶定性法和动态浊度定量法对氯化钠注射液细菌内毒素检测比较,以选择内毒素检测的适宜方法。方法在两种试验环境下,分别应用凝胶法和动态浊度法对3个厂家批次的氯化钠注射液进行细菌内毒素检测,对检测结果进行对比分析。结果凝胶法在净化环境下通过无菌操作所得的检测结果未出现假阳性,而普通试验环境下则发现了两份假阳性(60份供试样品,占3.33%);动态浊度法在两种试验环境下所得结果一致,内毒素实测值均<0.00735EU/ml,未出现内毒素实测值超标现象。结论凝胶法检测内毒素试验易受试验环境的影响,普通试验环境下易出现假阳性结果;动态浊度法检测内毒素则不受试验环境影响,在普通实验室即可开展,且操作简单,应成为氯化钠注射液内毒素检测方法的首选。     

血站采血用品细菌内毒素检测的临床意义

目的：通过检测一次性采血器材和注射用液体制剂的细菌内毒素含量，杜绝不合格产品进入血站，为医疗用血机构提供安全、合格的血液制品。方法：对12份检测标本用动态浊度法检测。结果：12份检测标本有2份内毒素含量超标，合格率为83．33％。结论：早期、有效检测一次性采血器材和注射用液体制剂的细菌内毒素是预防内毒素血症发生的重要措施。     

免疫荧光层析试纸条法检测食用油中的黄曲霉毒素B_1

目的建立快速检测食用油中黄曲霉毒素B1的免疫荧光层析试纸条法,用于鉴别正规的食用油和地沟油。方法应用自行研制的免疫荧光层析试纸条,对20份检验合格的食用油样本和10份地沟油样本进行免疫荧光试纸条法检测,同时采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法作比较;采用含黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素M2、黄曲霉毒醇、黄曲霉毒素Q1的模拟样本进行特异性检测。结果本免疫荧光层析试纸条法的检测下限为5μg/L;20份检验合格的食用油样本均未检出黄曲霉毒素B1,10份地沟油中有8份检出含有黄曲霉毒素B1,荧光免疫层析试纸条法和LC-MS/MS法具有高度的相关性,r0.950 0;对于其他的黄曲霉毒素具有高度特异性。结论用免疫荧光层析试纸条法检测地沟油中黄曲霉毒素B1是可行的。     

微生物快速动态检测系统保养与常见故障排除

0引言 我院于2010年引进了MB-80微生物动态快速检测仪,该检测仪是一种细菌快速体外检测系统,采用光电转换原理,通过测定生物试剂与微生物细胞的特定成分反应产生的吸光度、透光率的变化,建立反应时间与微生物含量关系的标准曲线,从而定量测定样品的微生物含量。本人在3 a的使用过程中积累了一些心得体会,现将该仪器日常使用保养、工作中遇到的常见故障及处理过程介绍如下。     

食品中副溶血性弧菌检测能力验证分析

目的通过参加CNAS(中国合格评定国家认可委员会)食品中副溶血性弧菌检测能力验证计划,对实验室检测检测能力及质量进行确认。方法采用国标法及实时荧光PCR法对标识为VP-162考核样品及超市随机抽取的50份动物性海水产品进行副溶血性弧菌定性检测,通过检测结果比较进行方法评价。结果 VP-162考核样品中检出副溶血性弧菌,考核结果为满意。随机抽取的50份动物性海水产品,干制生化试剂及API20E均检出6份(检出率12.0%),全自动微生物生化鉴定系统检出5份(检出率10.0%),实时荧光PCR法检出8份(检出率16.0%)。结论实时荧光PCR检测结果准确、灵敏、快速,在运用国标法进行检测过程中,采用生化鉴定试剂与全自动微生物生化鉴定系统分别进行鉴定时,其鉴定结果存在一定差异。     

2009-2011年襄州区生活饮用水水质监测结果分析

目的为全面了解襄州区饮用水水质现状,对襄州区2009年以来的水质检测结果进行分析,随机抽取生活饮用水(井水和末梢水)进行了微生物及理化20项指标的检测。方法按照《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006抽样监测,依据《生活饮用水卫生标准》GB5749-2006进行卫生学评价。结果 2009年检测268份,合格80份,合格率29.85%,2010年检测233份,合格128份,合格率54.94%,2011年检测324份,合格199份,合格率61.42%(χ2=62.60,P<0.01)。不合格项目以微生物指标为主(菌落总数不合格率2009年55.60%,2010年35.19%,2011年27.78%),不合格率呈现逐年降低趋势(χ2=17.14,P<0.01)。理化不合格项目以总硬度(2009年8.96%,2010年6.44%,2011年7.72%)和锰(2009年6.34%,2010年9.01%,2011年6.48%)为主,差异无统计学意义(P>0.05)。结论我区饮水不合格指标以微生物为主,理化不合格指标相对稳定,建议部分饮水水源需要改善,饮水消毒需进一步加强。     

荧光原位杂交法快速检测粪便难辨梭菌

目的 建立量子点标记的荧光原位杂交方法以快速检测粪便中的难辨梭菌.方法 采用量子点-亲和素-生物素-DNA探针直接与粪便中难辨梭菌进行荧光原位杂交,同时与难辨梭菌分离培养、难辨梭菌毒素A、B检测结果比较.结果 20份临床腹泻粪便标本中,10份标本毒素检测结果阳性,此10份中有8份培养与原位杂交结果同时阳性;10份毒素检测结果阴性标本的培养与原位杂交结果均阴性;荧光原位杂交法与培养法的符合率为100%,毒素检测法具有更高的敏感度.结论 荧光原位杂交法检测难辨梭菌具有快速、简便、特异的特点,可用于临床粪便标本的检测.     

某市血液透析现状及透析用水和透析液质量合格情况调查

目的了解某市血液透析现状及透析用水和透析液合格情况。方法对该市36所开展血液净化项目的医疗机构血液透析现状进行调查,并同时采集透析用水及透析液分别进行微生物检验(包括常规和低温培养方法)及现场ATP水样检测。结果 13.89%的水处理设备使用时间在1年内,5.56%的设备使用超过10年。砂滤等净化设备超过1年未更换的机构占77.78%,72.22%的滤芯式过滤器更换时间3个月,反渗水供水管道使用时间超过10年的占2.78%。77.78%的医疗机构使用成品A液,72.22%使用成品B液,集中提供A液的医疗机构占22.22%,集中提供B液的医疗机构占19.44%,自配桶装B液的医疗机构达8.34%。36所医疗机构微生物日常检测均合格,但有80.56%检测结果长期为"0"值;现场采集的透析用水及透析液ATP检测均合格;常温微生物检验1份超标,2份达干预值;低温培养法4份超标,6份达干预值;不同级别医疗机构之间3种检测方法合格率比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论该市透析用水及透析液的质量总体较好,大部分医疗机构重视水处理设备的日常维护,定期检测透析用水和透析液的质量,但是微生物检测技术有待提高,日常检测结果异常或达到干预值需要分析原因和不断改进。     

佳木斯市血液净化中心透析用水及透析液细菌污染情况调查

目的了解佳木斯市透析用水、透析液的细菌污染状况。方法采集佳木斯市8家医院反渗水及透析液标本,对反渗水及透析液标本进行细菌培养和菌落计数,用鲎试剂定性检测内毒素。结果反渗水细菌培养有2家医院阳性,细菌总数均为300 CFU/ml,内毒素检测均〈2 EU/ml;A浓缩透析液内毒素均〈2 EU/ml;B浓缩透析液内毒素均〈2 EU/ml;透析器入口细菌培养3家阳性,内毒素检测有2家〉2 EU/ml。结论目前,佳木斯市部分血液净化中心仍存在反渗水及透析液的细菌污染,应定期检测反渗水、透析液的内毒素水平及进行细菌培养,定期消毒反渗水装置及透析液容器,对减少热源反应至关重要。     

血浆中(1-3)-β-D葡聚糖的检测对早期诊断深部真菌感染的价值

目的探讨血浆中(1-3)-β-D葡聚糖检测在诊断深部真菌感染中的临床价值。方法应用MB-80微生物动态快速检测系统定量检测深部真菌感染组、细菌感染组和健康对照组血浆标本中(1-3)-β-D葡聚糖的含量。结果深部真菌感染组(1-3)-β-D葡聚糖含量[(121.22±135.56)pg/ml]明显高于细菌感染组[(19.10±14.10)pg/ml]和健康组[(16.47±13.58)pg/ml],经统计学分析,差异均具有统计学意义(P0.01);而细菌感染组与健康对照组相比较,则差异无统计学意义(P0.05)。结论血浆(1-3)-β-D葡聚糖检测可以较早地为临床医生提供可靠的深部真菌感染信息,是一种实用并且极具价值的真菌感染的早期诊断方法。     

机采血小板细菌污染状况分析

[目的]分析在现有条件下机采血小板细菌污染出现的概率,为血液安全监测体系的建立提供依据。[方法]用Bact/Alert 3D微生物监测系统对798份机采血小板进行细菌污染检测,阳性标本作细菌鉴定。[结果]798份血小板中1例阳性,阳性率为0.12%,经鉴定为放线菌。[结论]现有的机采血小板采集模式是安全的,采用Bact/Alert 3D微生物监测系统有助于监测机采血小板的安全性。     

建立可吸收医用膜细菌内毒素检查的新方法

[目的]检验粘克^TM可吸收医用膜是否符合生物材料的热原要求,建立粘克^TM可吸收医用膜的细菌内毒素检查方法。[方法]按《中华人民共和国药典》2005年版附录及GB/16175-1996规定,同时采用热原检查法和细菌内毒素检查法对粘克^TM可吸收医用膜72h的浸提液样品进行检测。[结果]该浸提液对细菌内毒检测不产生干扰,细菌内毒素试验结果为阴性。同时受试家兔体温升高均低于0.6℃,并且3只家兔体温升高总和低于1.4℃。[结论]粘克^TM可吸收医用膜不含引起机体发热的内毒素或致热原,符合医用生物材料的使用标准。用细菌内毒素检查法替代家兔热原法对该可吸收膜进行热原检查是可行的。     

创伤合并海水浸泡动物感染实验研究

目的了解创伤合并海水浸泡动物细菌感染的特点。方法制作兔背部创伤动物实验模型并分成对照组和实验组。实验组致伤后放海水浸泡20 min,对照组致伤后不浸泡。用手工法和全自动微生物分析仪进行细菌学鉴定,用微生物动态快速测定系统检测血浆内毒素含量,全血白细胞数用显微镜计数法。结果创伤合并海水浸泡后,伤口如果不经过消毒处理,12 h后细菌数量显著增加,主要细菌为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、创伤弧菌和金黄色葡萄球菌;血液中可检出大肠埃希菌和创伤弧菌;内毒素含量和白细胞数显著升高。结论创伤合并海水浸泡后可导致多种细菌感染,感染时间提前且程度加重。     

西安铁路局2006—2009年生活饮用水微生物指标监测结果分析

目的了解西安铁路局管内生活饮用水微生物污染状况,为卫生行政部门决策提供依据。方法用4年时间对812份生活饮用水的微生物指标,按国家有关标准方法进行检测和评价。结果 812份水样的微生物指标中合格737份,合格率90.8%,其中集中式水源合格率为95.8%;分散式水源合格率为85.3%。从2006年至2009年微生物指标检测合格率逐年升高。75份不合格样品中分散式水源的各项微生物指标不合格样品数均高于集中式水源,且各项微生物指标不合格的样品数从2006年至2009年均呈下降趋势。结论集中式水源的微生物检测情况明显好于分散式供水水源,2006—2009年西安铁路局水源微生物检测结果合格率逐年提高与不断加大水源卫生监督、监测力度有关。     

乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素凝胶法的检测

目的建立乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测方法和质量标准,检测样品中的内毒素含量。方法中国药典2010年版三部细菌内毒素检测法(凝胶限度试验、凝胶半定量试验)。结果选用λ为0.5 EU/ml的鲎试剂,采用凝胶限度法对乙型脑炎减毒活疫苗进行细菌内毒素检查,样品经稀释至80倍或以上稀释度后对内毒素检查均无干扰,确定该疫苗的内毒素限度值为40 EU/ml[即20 EU/剂(0.5 ml)]。凝胶限度试验结果显示,疫苗每1 ml中含内毒素的量均小于40EU,即每1次人用剂量(0.5 ml)中含内毒素的量均小于20 EU。凝胶半定量测定结果显示,1人份规格疫苗中含内毒素的量为2.50～10.00 EU/ml(平均5.36 EU/ml);5人份规格疫苗中含内毒素的量为1.50～6.00 EU/ml(平均3.02 EU/ml)。结论凝胶法两种试验均可用于乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测,与凝胶半定量试验相比,凝胶限度试验更为简便、且易于操作;采用凝胶限度法本研究建立了乙型脑炎减毒活疫苗细菌内毒素检测方法和质量标准;凝胶半定量法测定结果用准确数据显示该疫苗的内毒素含量均在人体安全限度以内。     

两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用

[目的]比较直接法与常规法对血培养阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验的一致率,证明血培养阳性标本快速直接药敏试验的准确性和可行性。[方法]对2009年6月～2010年6月期间360份阳性血液标本进行直接药敏试验和常规药敏试验比较。[结果]360例血培养标本经血培养仪报警为阳性的135例,其中经常规法鉴定出G-杆菌102株,G+球菌33株,直接法鉴定出G-杆菌89株,G+球菌25株。两种方法菌种鉴定总一致率为83.7%,其中肠杆菌科鉴定一致率为86.3%,G+球菌一致率75.7%。两种方法对所有阳性标本细菌药敏结果的总一致率较高,对G-菌及G+菌药敏结果无显著差异。[结论]血培养阳性标本直接药敏试验结果是快速和准确的,它能够缩短阳性血培养的报告时间,降低病人的死亡率。     

ABX MICROS 60与BC-3000血液分析仪性能与准确性的对比

目的评价ABXMICROS60(以下简称ABX)与BC-3000plus(以下简称BC-3000)2台产地不同的血液分析仪的主要性能,观察2种血液分析仪测定WBC、RBC、HGB、HCT、PLT的结果是否一致。方法所检测的新鲜全血为常规标本和质控液,在ABX与BC-3000血液分析仪组成的检测系统上测定,进行仪器的性能评价对比。结果2种仪器检测的结果比较为WBCt=0.6686t0.05(19),P0.05;RBCt=0.0304t0.05(19),P0.05;HGBt=0.5446t0.05(19),P0.05;HCTt=0.4986t0.05(19),P0.05;PLTt=1.4330t0.05(19),P0.05。差异均无统计学意义。结论检测ABX和BC-3000血液分析仪性能良好,均能满足血液常规分析的一般要求。2台仪器的结果差异无统计学意义。