肾上腺肿瘤P53及c—myc癌基因表达研究

为探讨肾上腺肿瘤发病机理，为鉴别肿瘤良恶性及其分级分期提供依据，收集３４例肾上腺恶性肿瘤应用ＳＰ法作Ｐ５３及ｃｍｙｃ免疫组化检测，并与２５例肾上腺良性瘤及１２例非瘤肾上腺组织对比。结果显示：肾上腺恶性瘤Ｐ５３阳性率４７１％，良性瘤８０％，非瘤组织无表达；肾上腺恶性肿瘤ｃｍｙｃ阳性率３８２％，良性瘤及非瘤组织无表达；Ｐ５３表达与肾上腺恶性瘤临床分期相关，ｃｍｙｃ与其临床分期不相关，均可用于良恶性瘤鉴别。     

前列腺癌MDR－PGP170与突变P53表达

应用单克隆抗体（ＭＤＲ－Ｃ２１９、ＰＡｂ－ＤＯ－１）免疫组化技术对３８例石蜡包埋的前列腺癌与１５例良性前列腺增生（ＢＰＨ）组织切片中的ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的表达进行了比较研究。结果显示：在３８例前列腺癌切片中ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３蛋白的阳性表达率为７１．０％和６０．５％，１５例ＢＰＨ组织中仅３例（２０．０％）显示ＭＤＲ－ＰＧＰ阳性染色，突变Ｐ５３在所有ＢＰＨ中未见阳性染色。在高分化、中等分化和低分化前列腺癌中ＭＤＲ－ＰＧＰ的阳性表达率为５３．８％、７８．５％和８１．１％。突变Ｐ５３的阳性表达率为３０．８％、７１．４％和７２．７％。结果提示：（１）ＭＤＲ－ＰＧＰ的过度表达是前列腺癌产生抗药的主要机制；（２）ＭＤＲ－ＰＧＰ与突变Ｐ５３的过度表达可能是前列腺癌细胞适存、转化、增殖与进展的重要方式；（３）突变Ｐ５３的过度表达对ＭＤＲ－１基因可能具有调节与增强效应。     

肾细胞癌bc1－2、P53、ER、PR的表达及临床意义

为了更好地选择估价肾细胞癌预后的指标，应用免疫组化技术检测５４例肾细胞癌中ｂｃ１－２、Ｐ５３蛋白及雌、孕激素受体的表达。ｂｃ１－２阳性３８例（７０．４％），Ⅰ、Ⅱ级肿瘤阳性３３例，Ⅲ、Ⅳ级肿瘤阳性５例（Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３蛋白阳性１０例（１８．３％），对照组无一例阳性（Ｐ＜０．０５）；ＥＲ、ＰＲ阳性分别为２９例（５７．７％）、３９例（７３．７％）。ｂｃ１－２蛋白表达与ＥＲ、ＰＲ呈正相关（Ｐ＜０．０１，ｒ＝０．４５２），与Ｐ５３蛋白表达呈负相关（Ｐ＜０．０１，ｒ＝－０．４２１）。结果提示：ｂｃ１－２蛋白的表达有助于肾细胞癌预后的评估     

P53及c—myc共同表达与输尿管癌生物学行为的关系

为在分子水平上了解原发性输尿管癌发生、发展的机理，采用免疫组化法对１８例原发性输尿管癌和１４例输尿管息肉组织中Ｐ５３及ｃｍｙｃ表达及共同表达的意义进行了研究。结果：正常输尿管组织Ｐ５３及ｃｍｙｃ表达呈阴性；输尿管息肉分别为１４２９％及３５７１％；输尿管癌为５５５６％及８８８９％，共同表达阳性４４４４％。结论：Ｐ５３及ｃｍｙｃ基因在输尿管肿瘤的发生和发展过程中起着一定作用，共同表达阳性对于判定病理分级、分期，肿瘤复发及患者生存率以及输尿管息肉是否存在恶变潜在性等意义明显优于单一表达。     

多药耐药基因mdr1及其表达产物Pgp与p53、EGFR相关性研究进展

多药耐药现象（ＭＤＲ）是恶性肿瘤难以治愈的重要原因之一。目前对ＭＤＲ现象机制的研究主要集中在多药耐药基因ｍｄｒ１及其表达产的 Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐｇｐ）、ＤＮＡ拓扑异构酶Ｈ（Ｔｏｐｏ Ⅱ）、谷胱甘肽流转移酶（ＧＳＹ）、多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）等方面［１·２］。研究表明以上几种常见机制并不都表现在一种ＭＤＲ细胞中,但以ｍｄｒ１基因及其产物Ｐｇｐ介导的耐药最为常见。随着研究的深人［２－２３］,发现许多癌基因、抑癌基因如Ｐ５３、ＥＧＦＲ、Ｃ、ｅｒＢ－２、ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｒ…     

大肠癌患者粪便中C-erbB-2扩增和p53突变的检测及临床意义

目的　建立大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变的检测方法,探讨大肠癌的基因诊断的临床意义。 方法　以差异聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 、 Ｐ Ｃ Ｒ单链构象多态性分析（ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ） 银染技术,分别检测大肠癌患者粪便 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变。 结果　１４ 例中查出 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增７ 例（５０ ％ ） ,ｐ５３ 突变８ 例（５７ ％ ） ,二基因联合检出１１ 例（７９ ％ ） 。２ 例粪便潜血试验（ Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ） 阴性中,１ 例 Ｃｅｒｂ Ｂ２扩增及ｐ５３ 突变均阳性,另１ 例ｐ５３ 突变阳性。 结论　联合多基因检测能对大肠癌的基因诊断提供更多的帮助,粪便 Ｄ Ｎ Ａ 标本的 Ｃｅｒｂ Ｂ２ 扩增及ｐ５３ 突变分析可为筛查尚无出血或 Ｆ Ｏ Ｂ Ｔ 假阴性的大肠癌及大肠癌高危个体的一种新的有效手段。     

MRP真核表达载体的构建及其在人膀胱癌中的表达

多药耐受（ＭＤＲ）是导致化疗失败的重要原因。研究表明：ｍｄｒ１／Ｐｇｐ介导的ＭＤＲ是膀胱癌ＭＤＲ的重要机制,但不是唯一机制。新近发现的多药耐受相关蛋白（ＭＲＰ）基因是介导ＭＤＲ的一种肯定机制［１］,我们将ＭＲＰ基因转入膀胱癌细胞,并初步观察了其介导的ＭＤＲ及ＭＲＰ的表达。材料和方法　真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋）／ＭＲＰ１的构建：含全长ＭＲＰ１ｃＤＮＡ的载体ＰＪ３Ω／ＭＲＰ１由荷兰癌症研究所的ＭａｒｃｅｌＫｏｏｌ博士赠送。用限制性内切酶ＮｈｅＩ、ＮｏｔＩ完全消化ＰＪ３Ω／ＭＲＰ１和ｐｃＤ…     

p53单抗M126在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨Ｍ１２６与膀胱移行细胞癌的组织学分级和病理分期之间的关系。方法用ＰＣＲ扩增编码ｐ５３Ｎ端１８０个氨基酸的ＤＮＡ片断并将其克隆在谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）的表达质粒ＰＧＥＸ２Ｔ中。用重组质粒转化大肠杆菌，诱导产生ｐ５３ＧＳＴ融合蛋白，免疫小鼠，制备Ｍ１２６单抗。用Ｍ１２６对６０例膀胱移行细胞癌石蜡切片进行免疫组化染色，结果４６例（７７％）表达融合蛋白，平均阳性细胞指数为（３４５±２９．０）％，并与肿瘤的组织学分级和病理分期相关（Ｐ＜０００１，Ｐ＜００５）。与进口单抗ＰＡｂ１８０１相比较，Ｍ１２６识别不同的抗原表位，染色强度和阳性细胞指数均明显增高，而且对不经微波修复的抗原也有很好的反应性。结论作为第一株国产抗ｐ５３单抗，Ｍ１２６将在肿瘤ｐ５３表达和突变的研究中发挥重要的作用     

p16和cyclin D1在膀胱癌中的表达及其相关性研究

目的研究ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１在膀胱癌组织中的表达,探讨其与膀胱癌生物学行为的关系。方法应用免疫组化法观察５０例膀胱癌ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达情况。结果（１）膀胱癌组织中ｐ１６阳性率为４４％,明显低于正常膀胱粘膜（Ｐ＜０．０１）;ｃｙｃｌｉｎＤ１阳性率为６２％,明显高于正常膀胱粘膜（Ｐ＜０．０１）。随着肿瘤恶性程度的增高和临床分期的进展,ｐ１６阳性率下降,ｃｙｃｌｉｎＤ１阳性率升高。ｐ１６在未复发组、存活组的表达率显著高于复发组、死亡组（Ｐ＜０．０１）。ｃｙｃｌｉｎＤ１在存活组的表达率显著低于死亡组（Ｐ＜０．０５）。（２）ｐ１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达呈负相关。（３）有１５％的病例存在ｐ１６和ｃｙｃｌｉｎＤ１同时表达或失表达。结论ｐ１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１异常表达在膀胱癌的发生、发展过程中起重要作用。     

人乳头瘤病毒DNA相关序列与p53基因突变对大肠癌生物学行为的影响50例报告

目的探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达的关系及其对大肠癌生物学行为的影响。方法采用ＰＣＲ方法检测大肠癌及癌旁组织、肝转移灶中ＨＰＶＤＮＡ相关序列。并应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化技术分别检测ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达。结果在５０例大肠癌中,检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ相关序列２６例（５２０％）,其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ４例（８０％）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ２２例（４４０％）。ｐ５３基因突变率为５６０％。ｐ５３蛋白表达阳性率为４２０％。ＨＰＶＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达呈正比关系。结论ＨＰＶＤＮＡ相关序列可促进细胞转化、致ｐ５３基因突变、抑制细胞的凋亡,与大肠癌的发生发展有密切关系。     

p53、p16、Cyclin D1表达与胃癌增殖细胞核抗原的关系

目的 探讨ｐ５３、ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与胃癌细胞增生状况的关系。方法 采用免疫组化ＡＢＣ法检测５８例胃癌中ｐ５３、ｐ１６、ＣｙｃｌｉｎＤ１和ＰＣＮＡ的表达状况,并对ＰＣＮＡ免疫阳性细胞作半定量分析。结果 ｐ５３、ｐ１６、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性表达率分别为５１．７％（３０／５８）、４８．３％（２８／５８）、５３．４％（３１／５８）;ｐ５３、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性组织中,单位面积ＰＣＮＡ阳性     

大肠癌组织胃泌素与c—myc,c—fos表达的关系

目的 研究大肠癌组织中胃泌素与癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ表达的关系,以探讨胃泌素对大肠癌的促增殖作用机理。方法 采用免疫组化ＳＰ法检测４８例大肠癌患者癌组织及癌旁粘膜胃泌素和癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ的表达。结果 大肠癌组织胃泌素阳性率为３９．５８％,高分化腺癌明显高于低分化和粘液腺癌（Ｐ〈０．０５）。癌组织的ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｆｏｓ表达阳性率显著高于癌旁粘膜和正常粘膜。胃泌素阳性组癌组织ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｆｏｓ表达阳性率分别为７８．９４％和７３．６８％,胃泌素阴性组分别为３７．９３％和３１．０４％,差异均有显著性意义（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）。结论 部分大肠癌细胞通过自分泌方式产生胃泌素,可能通过增加ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ等癌基因的表达,从而刺激癌细胞的价值。     

Comparison of p53 expression in proximal and distal gastric cancer: Histopathologic correlation and prognostic significance

Background: The overexpression of p53 has been found to be correlated with prognosis of some carcinomas, including gastric cancer, but no studies have reported on its relationship to the location of gastric cancer. In the present study, we compared the p53 expression of proximal and distal gastric cancer concerning histopathology and prognosis. Methods: A total of 170 tumors in the patients with proximal (80 cases) and distal (90 cases) gastric cancer were studied by immunohistochemical methods. Results: p53 immunopositivity was detected in 28.8% of all tumors. The p53-positive expression in proximal gastric cancer was higher than in distal gastric cancer (38.8% vs. 20.0%, p<0.05). A 5-year survival analysis showed that there is no significant difference between tumors that are p53 positive and p53 negative. No correlation was found between p53 expression and histopathology of gastric cancer. Conclusion: p53 nuclear staining is not useful as a prognostic indicator or as a parameter in gastric cancer.     

p53、bcl-2、c-erbB-2在胃癌及癌前病变中表达的意义

目的：研究p53、bcl-2、c-erbB-2基因在胃癌及癌前病变中的表达，探讨其与胃癌发生的关系。方法：采用免疫组化SABC法，检测p53、bcl-2、c-erbB-2基因蛋白在98例胃癌、39例肠上皮化生、40例不典型增生和20例正常胃粘膜中的表达。结果：①p53在胃癌中的阳性表达率为55．1％，早期胃癌和进展期胃癌分别为50．0％，55．4％；在肠上皮化生中的表达率为12．8％，与早期胃癌比较有统计学差异（P〈0．05），随不典型增生程度的加重p53的表达率逐渐升高，依次为5％，20％，60％，其中轻中度与重度不典型增生差异有统计学意义（P〈0．05），而在正常胃粘膜中未见p53表达②bcl-2在正常胃粘瞑中有弱阳性表达（10．0％），在不典型增生中为50．0％，在胃癌中为44．9％，不典型增生与胃癌中的表达均显著高于正常胃粘膜（P〈0．05）。③c-erbB-2在胃癌中的阳性表达率为55．1％，其中在早期胃癌中的表达率较低（16．7％），在重度不典型增生和进展期胃癌中的表达率较高，分别为60．0％和57．6％，二者与早期胃癌比较差异有统计学意义（P〈0．05）。④c-erbB-2表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0．05），与胃癌分化程度无关（P〉0．05）；bcl-2表达与胃癌的分化程度有关（P〈0．05），低分化者bcl-2表达率高，与淋巴结转移，浸润深度无关（P〉0．05）；p53表达与上述临床病理因素均无关（P〉0．05）。结论：p53，bcl-2，c-erbB-2参与了胃粘膜的癌变过程。     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临床意义

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性的病例有较高的复发率和死亡率。表明ｐ５３基因突变及其蛋白过度表达在甲状腺癌的发生和发展过程中起重要作用，是预后不良的标志。     

胃癌p53表达与其病理组织学和预后的关系

目的探讨不同部位胃癌的ｐ５３表达与其预后的相关性。方法采用免疫组化的方法对１７０例贲门癌和胃窦癌的ｐ５３表达及病理组织学和预后进行研究。结果在１７０例胃癌中ｐ５３阳性表达率为２８８％,其中胃底贲门癌的ｐ５３阳性表达率高于胃窦癌（３８８％∶２００％,Ｐ＜０．０５）。ｐ５３阳性组与ｐ５３阴性组的５年生存率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ｐ５３蛋白表达不仅与５年生存率无关,而且与早期或进展期胃癌、胃癌的部位、有无淋巴结转移、有无局部淋巴管与血管浸润等无关。结论本研究结果表明,胃底贲门癌的ｐ５３免疫蛋白表达较胃窦癌高,但ｐ５３蛋白核染色不能作为判断胃癌预后的指标或参数。     

p53、bcl-2和nm23基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的　研究胃癌组织中bcl 2、p5 3和nm2 3基因的表达及其与临床病理的关系 ,探讨bcl 2、p5 3和nm2 3基因与胃癌生物学行为的相关性。方法　采用免疫组化方法对 80例胃癌组织、3 7例不典型增生癌旁组织及 2 0例正常胃粘膜组织中的bcl 2、p5 3和nm 2 3基因的表达情况进行检测。 结果　bcl 2蛋白在胃癌癌旁轻、中、重度不典型增生组织中的表达阳性率分别为 7.1%、18.1%和 2 5 .0 % ,其在各组间表达的差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ,bcl 2蛋白在高分化胃癌组织中的表达阳性率为 78.2 % ,明显高于在低分化胃癌组织中的表达 (4 8.5 % ,P<0 .0 5 )。p5 3在高分化胃癌组织中的表达阳性率为 72 .5 % ,明显低于低分化胃癌组织的 86.2 % (P<0 .0 5 )。nm 2 3在高分化胃癌组织中的表达阳性率为84.3 % ,明显高于低分化胃癌组织的 17.2 % (P<0 .0 5 )。伴有淋巴结转移的胃癌组织中nm 2 3的表达阳性率为 5 4.5 % ,低于无淋巴结转移者的表达阳性率 (85 .7% ,P<0 .0 5 )。p5 3与bcl 2在胃癌组织中的表达呈明显负相关。结论　bcl 2、p5 3和nm 2 3的表达与胃癌细胞的分化程度密切相关 ,对患者预后有重要参考价值。     

结直肠癌患者血清p53抗体与肿瘤p53蛋白表达关系的研究

目的　探讨结直肠癌患者血清p5 3抗体与肿瘤组织p5 3蛋白表达的关系 ,评价其能否间接反映p5 3基因的突变。方法　对 13 2例手术治疗的结直肠腺癌患者和 3 6例非肿瘤患者进行血清p5 3抗体定性检测。结直肠癌标本行p5 3蛋白免疫组化染色。结果　结直肠癌组中 5 3例 (4 0 .2 % )血清p5 3抗体阳性 ,而对照组仅 1例 (2 .9% )阳性 (P <0 .0 1)。在 75例p5 3蛋白染色阳性者中 5 1例 (68.0 % )血清p5 3抗体阳性 ;而 5 7例p5 3蛋白染色阴性的患者中 ,仅 2例 (3 .5 % )血清p5 3抗体阳性。结直肠癌血清p5 3抗体阳性率与肿瘤组织p5 3蛋白免疫组化染色阳性反应有明显关系 (P<0 .0 1)。结论　血清p5 3抗体能反映结直肠癌p5 3蛋白的阳性表达 ;检测血清p5 3抗体是间接判定P5 3基因突变的一种可靠而简便的方法。     

突变型p53与Nampt在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的：探讨突变型p53（mutp53）和尼克酰胺磷酸核糖转移酶（Nampt）在胃癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法：用免疫组化法检测68例胃癌患者胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中p53（免疫组化检测到的p53主要为mutp53）与Nampt的表达,分析mutp53与Nampt表达与患者临床病理因素及预后的关系。 结果：胃癌组织中mutp53与Nampt的阳性表达率均明显高于癌旁正常胃黏膜组织（均P<0.05）;mutp53的高表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,而Nampt的高表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（均P<0.05）。胃癌组织中,p53表达与Nampt表达呈明显正相关（r=0.982,P<0.05）。p53阳性表达患者的中位生存期明显短于阴性表达患者,且在p53阳性表达患者中,Nampt同时阳性患者的中位生存期明显短于Nampt阴性患者（均P<0.05）。结论：mutp53与Nampt的表达均与胃癌的恶性生物学行为相关,且两者存在一定的关联性,同时高表达患者预后差。