特发性高草酸尿大鼠模型的建立

目的 建立特发性高草酸尿(IH)的大鼠模型.方法 将第1代72只SD大鼠(雌雄各半)分别置于大鼠代谢笼中,在适应饮食5 d后收集连续2 d的24 h尿,用离子色谱仪测定24 h尿草酸排泄量.将第1代大鼠中尿草酸排泄量最高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配,按同样的方法检测其子代(作为近交系)的24 h尿草酸排泄量,再选择尿草酸排泄量最高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配.依此类推,连续对每代大鼠进行检测、筛选和近交传代至第5代.结果 根据第1代大鼠的检测值确定大鼠24 h尿草酸排泄量的正常值范围(x ±2s):雄性为(4.82±2.94) mg;雌性为(5.21±3.26) mg.第5代近交系大鼠24 h尿草酸排泄量(x ±s):雄性为(12.54±2.46) mg (n=16);雌性为(13.51±2.63) mg (n=16).将24 h尿草酸排泄量高于正常值范围且在2.5倍以内的大鼠定义为IH大鼠,则在第5代近交系大鼠中,雌、雄性IH大鼠的出现率均超过90%.结论 该实验建立的IH大鼠模型可稳定传代,可用于IH的病因学研究.     

线粒体途径在慢性低氧高二氧化碳小鼠骨骼肌凋亡中的作用

目的探讨线粒体途径在慢性低氧高二氧化碳小鼠骨骼肌凋亡中的作用。方法成年storage protect feature(SPF)级雄性C57BL/6小鼠16只随机分成两组:正常对照组(n=8)和实验组(n=8),将实验组小鼠置于常压低氧高二氧化碳舱内,通过氮气调节舱内氧浓度,使其维持在9%～11%,通入二氧化碳使其浓度维持在5%～6%,每天8h,共4周。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测骨骼肌细胞胞质内半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)的含量,荧光实时定量PCR法检测胞浆内细胞色素C(Cyt-C)及细胞凋亡因子Bax、Bcl-2基因的表达情况。结果与正常对照组相比,实验组骨骼肌细胞内的caspase-3含量增加(P<0.05),Cyt-C mRNA表达增多,Bax mRNA表达增多,而Bcl-2 mRNA表达减少,Bcl-2/Bax比值下降。结论线粒体途径可能参与了慢性低氧高二氧化碳小鼠骨骼肌细胞的凋亡,Bcl-2/Bax比值下降可能是促进骨骼肌线粒体途径凋亡的重要因素。     

肠源性高草酸尿大鼠模型的建立

目的：建立肠源性高草酸尿的大鼠模型。方法随机选取30只雌性SD大鼠置于大鼠代谢笼中适应性喂养7 d之后收集24 h尿,记录尿量,采用离子色谱仪测定其草酸浓度,计算正常大鼠在该条件下24 h尿草酸排泄量。菠菜汁灌胃处理大鼠,再测定灌胃后24 h尿草酸排泄量。对比灌胃菠菜汁前后,大鼠24 h尿草酸排泄量的差别;分组对照实验,随机选取20只雌性SD大鼠,随机分成A组和B组,B组灌胃菠菜汁,A组灌胃等量纯净水,其他条件相同,比较两组24 h尿草酸排泄量。结果反复测定,正常大鼠灌胃菠菜汁前24 h尿草酸排泄量为（0.53±0.18） mg,灌胃菠菜汁后第1天为（1.93±0.36） mg,第3天为（1.85±0.38） mg,第7天为（2.03±0.39） mg;A组（0.44±0.12） mg,B组（1.68±0.38） mg。结论大鼠在灌胃菠菜汁之后其尿液24 h草酸排泄量明显增加,大概增加3~4倍,说明每天对大鼠进行定量定浓度的菠菜汁灌胃,可以使其保持长期的高草酸尿状态,该方法建立的肠源性高草酸尿大鼠模型简便可行,可广泛用于其他方面的研究。     

钙拮抗剂对高草酸尿导致的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca~(2+)]i)和细胞凋亡的影响,并了解钙拮抗剂硝苯地平对该影响的保护作用.方法 60只雄性SD大鼠随机分成饮水组(只饮去离子水)、硝苯地平组(饮去离子水,并灌喂硝苯地平10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、诱石组(饮1%乙二醇去离子水)、诱石+硝苯地平干预组(共3组,饮1%乙二醇去离子水,并分别灌喂硝苯地平 3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只,连续处理4周.测定各组大鼠24 h尿草酸浓度;TUNEL技术检测肾小管上皮细胞凋亡指数;应用Flou-3/AM荧光指示剂测定大鼠肾近曲小管细胞内Ca~(2+)的荧光强度.结果 诱石组和诱石+硝苯地平干预组24 h尿草酸浓度均高于饮水组和硝苯地平组(P<0.01).与饮水组相比,诱石组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数和肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度均明显增加(P<0.01).诱石+硝苯地平(3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1))干预组Ca~(2+)荧光强度分别为诱石组的76.7%、62.7%和56.4%,量效关系显著(r＝0.839,P<0.01).肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度与肾小管上皮细胞凋亡指数密切相关(r＝0.826,P<0.01).结论 高草酸尿可使大鼠肾小管上皮细胞[Ca~(2+)]i及细胞凋亡水平显著增加,钙拮抗剂硝苯地平对此有明显的干预效果.     

钙拮抗剂对高草酸尿导致的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2+]i)和细胞凋亡的影响,并了解钙拮抗剂硝苯地平对该影响的保护作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分成饮水组（只饮去离子水)、硝苯地平组（饮去离子水,并灌喂硝苯地平10 mg·kg-1·d-1）、诱石组（饮1%乙二醇去离子水）、诱石＋硝苯地平干预组（共3组,饮1%乙二醇去离子水,并分别灌喂硝苯地平 3、6、10 mg·kg-1·d-1）,每组10只,连续处理4周。测定各组大鼠24 h尿草酸浓度;TUNEL技术检测肾小管上皮细胞凋亡指数;应用Flou-3/AM荧光指示剂测定大鼠肾近曲小管细胞内Ca2+的荧光强度。结果 诱石组和诱石＋硝苯地平干预组24 h尿草酸浓度均高于饮水组和硝苯地平组（P<0.01）。与饮水组相比,诱石组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数和肾小管上皮细胞内Ca2+荧光强度均明显增加（P<0.01）。诱石＋硝苯地平(3、6、10 mg·kg-1·d-1)干预组Ca2+荧光强度分别为诱石组的76.7％、62.7％和56.4％,量效关系显著（r＝0.839,P<0.01）。肾小管上皮细胞内Ca2+荧光强度与肾小管上皮细胞凋亡指数密切相关（r＝0.826,P<0.01）。结论 高草酸尿可使大鼠肾小管上皮细胞[Ca2+]i及细胞凋亡水平显著增加,钙拮抗剂硝苯地平对此有明显的干预效果。     

大鼠饮食相关性高草酸尿症和高钙尿症的实验研究

目的探讨饮食钙和饮食草酸两因素对大鼠24小时尿草酸总排泄量和24小时尿钙总排泄量的影响。方法将24只大鼠随机分为低剂量钙组（A组）、中等剂量钙组（B组）及高剂量钙组（C组）,连续喂养4 d,每组在4 d内分别依次给予剂量递减的饮食草酸。测量大鼠每天的24小时尿量、尿草酸浓度、尿钙浓度、尿肌酐浓度并计算24小时尿草酸总排泄量和24小时尿钙总排泄量。其中,尿草酸浓度用HPLC法检测,尿钙浓度和尿肌酐浓度用自动生化分析仪检测。用重复测量方差分析和多元方差分析对结果进行统计。结果对24小时尿草酸总排泄量在不同时间点比较,第3天和第1天相比下降（P=0.010）,第4天和第1天相比下降（P=0.000）,第4天和第2天相比下降（P=0.034）,第4天和第3天相比下降（P=0.032）,其余差异未见有统计学意义。对24小时尿钙总排泄量在不同时间点比较,第2天和第1天相比差异有统计学意义（P=0.037）,其余差异未见有统计学意义（P〉0.05）。结论 24小时尿草酸总排泄量随饮食钙摄入量提高而降低,随饮食草酸摄入量降低而降低。适当范围内补钙对24小时尿钙排泄量影响不大,而过度补钙可能会引起高钙尿症。     

Bcl-2家族在线粒体细胞凋亡途径中的作用

细胞凋亡是细胞的程序性死亡,而在此过程中线粒体途径是主要的内在途径。在此途径中Bcl-2家族起着相当重要的作用。在Bcl-2家族中主要分为促凋亡因子和抗凋亡因子,本文就Bcl-2家族的特点及其在线粒体细胞凋亡途径中的作用作以综述。     

自噬在草酸诱导人肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的:探讨细胞自噬在草酸诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2损伤中的作用.方法:选择1 mmol/L的草酸干预HK-2细胞2 h建立细胞损伤模型,予以3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理抑制细胞自噬,应用光学显微镜观察细胞形态,通过蛋白质印迹法检测自噬标志蛋白质LC3II的表达,通过MTT法、流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡...     

线粒体途径在幽门螺杆菌诱导胃癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体途径在幽门螺杆菌(H.pylori)诱导胃痛细胞凋亡中的作用.方法 采用流式细胞术检测H.pylori NCTC 11637诱导的SGC-7901细胞凋亡,RT-PCR和Western blot法检测H. Pylori感染对线粒体途径相关基凶和蛋白表达的影响,并观察Caspase抑制剂对H. Pylori所致SGC-7901细胞凋亡的影响.,结果 H. Pylori能够在体外直接诱导SGC-7901细胞凋亡,6、12、24 h和48 h的凋亡率分别为6.30%、11.57%、8.63%和7.22%;H. Pylori能够呈时间依赖性地上调SGC-7901细胞的Bax蛋白表达,并促进Caspase-9和3的激活;Caspase-9和3抑制剂能够显著抑制NCTC 11637所致的SGC-7901凋亡,而Caspase-8抑制剂仪能部分抑制约20%NCTC 11637所致的SGC-7901凋亡.结论 H.pylori可引起SGC-7901细胞Bax基因和蛋白表达升高,激活Caspase-9和Caspase-3,且主要通过线粒体途径诱导细胞凋亡.     

线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用

目的 探讨线粒体途径在温热化疗诱导胃癌细胞AGS凋亡中的作用.方法 应用人胃癌细胞株AGS,根据不同实验处理分为常温对照(NT)、单纯温热(HT)、常温化疗(NTCT)和温热化疗(HTCT)四组.Western blotting法检测AGS细胞中Bax、Bcl-2蛋白及其线粒体胞质蛋白中细胞色素C的表达,实时PCR检测其Bax、Bcl-2的mRNA表达;分别测定各组AGS细胞Caspase 3和Caspase 9的酶活性变化.结果 与NT、HT、NTCT组比较,HTCT组AGS细胞Bcl-2蛋白表达下调而Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2显著上升;线粒体胞质蛋白中细胞色素C表达增加;Caspase 9和Caspase 3的酶活性显著增高.结论 HTCT可引起AGS细胞Bcl-2、Bax基因和蛋白表达水平发生改变,促使其细胞色素C由线粒体释放进入细胞质,从而诱导细胞凋亡.     

ErbB2 mRNA表达和细胞凋亡在柔红霉素致大鼠心肌病中的作用

目的研究柔红霉素对心肌细胞的损伤及致心肌病的机制。方法建立柔红霉素致大鼠心肌病的模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌组织ErbB mRNA表达。光学显微镜下观察心肌病理改变,采用TdT介导的脱氧核苷酸缺口末端标记技术(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,超声检查心脏射血功能,检测大鼠心肌组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。结果与对照组比较,柔红霉素损害的大鼠心脏组织ErbB2 mRNA表达下降(P＜0．05),凋亡指数增加(P＜0．01),病理积分升高(P＜0．05),左室射血分数下降(P＜0．05),ROS、MDA产生增加(P＜0．05),SOD、GSH- PX活性减低(P＜0．05)。结论Neuregulin-ErbB信号传导削弱所致的凋亡和脂质过氧化损伤参与柔红霉素心肌病的发生。     

过表达Bcl-2肾小管上皮细胞株的建立及Bcl-2逆转录病毒对抗肾小管上皮细胞凋亡的研究

目的 建立稳定过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞,探讨Bcl-2过表达对抗大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用.方法 Bcl-2逆转录病毒感染培养肾小管上皮细胞株HK-2,经G418抗性筛选,PCR鉴定并命名为HK-2Bcl-2;原位杂交检测细胞Bcl-2 mRNA表达水平;甘油诱导大鼠急性肾功能衰竭模型,采用含重组Bcl-2浓缩逆转录病毒液,感染大鼠肾小管上皮细胞,采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白表达,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡变化.结果 PCR和原位杂交显示G418抗性细胞克隆过表达Bcl-2;甘油注射后大鼠出现急性肾功能衰竭,Bcl-2逆转录病毒感染肾小管上皮细胞后,Bcl-2蛋白表达上调,并能显著对抗肾小管上皮细胞凋亡.结论 成功建立过表达Bcl-2蛋白的肾小管上皮细胞株HK-2Bcl-2;Bcl-2逆转录病毒显著抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡.     

pax2基因在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 探讨pax2基因在大鼠慢性肾小管间质纤维化过程中的表达及其对肾小管上皮细胞转分化的可能作用.方法 大鼠5/6肾切除造模,分别于术后2、4、6、8、10、12周取左肾皮质,采用逆转录(RT)-PCR及免疫组织化学的方法检测模型组和正常对照组的pax2和α-SMA的表达.结果 病变组织见系膜细胞和基质增生,间质炎症细胞浸润,基底膜变厚.5/6肾切除模型组大鼠在术后第2周出现pax2 mRNA的强表达,第4周达高峰,与正常对照组比较P＜0.05,此后下降至痕量表达;α-SMA mRNA也在术后第2周表达逐渐增强,第8周达高峰,与正常对照组比较P＜0.05,此后逐渐下降.免疫组织化学染色显示,5/6肾切除模型组pax2蛋白的表达、肾小管上皮细胞中α-SMA的表达与pax2 mRNA、α-SMA mRNA的表达趋势相同.结论 在大鼠慢性肾间质纤维化的过程中,受损的肾小管上皮细胞可向肌成纤维细胞转分化,肾小管发育胚胎基因pax2在此过程中的一过性表达可能起到重要的作用.     

富氢水对高草酸尿所致大鼠肾小管上皮损伤的保护作用研究

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及富氢水对该影响的作用.方法 56只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(饮用去离子水,去离子水灌喂)、单纯诱石组(饮用1％乙二醇溶液,去离子水灌喂)、单纯富氧水对照组(饮用去离子水,氧化还原电位- 140 mV的高浓度富氢水灌喂)、氢氧化镁对照组(饮用1％乙二醇溶液,氢氧化镁溶液灌喂)以及高、中、低浓度富氢水干预组(饮用1％乙二醇溶液,氧化还原电位- 140 mV、- 110 mV或- 60 mV的富氢水灌喂),每组8只,连续处理4周.测定各组大鼠24 h尿草酸浓度,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡指数(AI),测定肾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 单纯诱石组、氢氧化镁对照组和高、中、低浓度富氢水干预组24h尿草酸浓度均显著高于空白对照组和单纯富氢水对照组(P＜0.05).单纯诱石组肾小管上皮细胞AI显著高于空白对照组(P＜0.05),高、中、低浓度富氢水干预组肾小管上皮细胞AI分别为单纯诱石组的46.8％、60.0％、92.6％,呈显著量效关系(r=-0.724,P ＜0.05).富氢水浓度与肾组织SOD活性呈显著正相关(r =0.683,P＜0.05),与肾组织MDA含量呈显著负相关(r=-0.736,P＜0.05).结论 高草酸尿可造成肾小管上皮细胞凋亡增加,富氢水对此有显著的保护性作用.     

bMSCs移植对单侧输尿管结扎大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞（bMSCs）移植对单侧输尿管结扎（UUO）模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法自Wistar大鼠股骨和胫骨分离bMSCs,经体外传代培养、成脂诱导及鉴定后制备细胞悬液。54只Wistar大鼠随机分为假手术对照组（n=18）、bMSC注射组（bMSC组,n=18）和生理盐水注射组（PS组,n=18）。bMSC组和PS组大鼠于UUO模型建立的同时经下腔静脉分别注入bMSCs和等体积生理盐水。于建模后第3、7和14天分批处死大鼠并采集肾脏组织标本,RT—PCR技术检测肾小管细胞FasL mRNA表达,免疫组化染色检测FasL蛋白表达及分布;TUNEL法检测肾小管细胞凋亡,计算凋亡指数。结果与假手术组比较,bMSC组和PS组建模后各时间点FasL mRNA及蛋白表达均明显上调,肾小管细胞凋亡指数显著增加（均P〈0．05）。建模后第3、7天时,bMSC组FasL mRNA和蛋白表达的上调幅度及肾小管细胞凋亡指数的增加程度均明显低于PS组（P〈0．05）;至建模后第14天时,bMSC组与PS组各项检测指标比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论静脉注入bMSCs对UUO模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡有短期抑制作用。     

脑源性神经营养因子前体对脑卒中后抑郁大鼠行为学及额前皮质凋亡信号通路的影响

目的:探讨外源性给予脑源性神经营养因子前体(brain-derived neurotrophic factor precursor,proBDNF)后脑卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)大鼠额前皮质凋亡信号通路蛋白的表达变化。方法:在55只健康成年雌性SD大鼠中,随机选取25只作为PSD...     

依那普利对大鼠肾间质纤维化中肾小管上皮细胞凋亡的作用

目的：观察依那普利对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨依那普利抗肾间质纤维化的 作用机制。方法：将24只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、模型组(n=8)和依那普利治疗组(n=8)。对模型组和依 那普利治疗组大鼠行左侧输尿管结扎术,建立单侧输尿管梗阻(unilateral urethral obstruction,UUO)模型。术后14 d处 死大鼠,留取梗阻侧肾组织分别进行HE和Masson染色,观察各组大鼠肾组织病理改变,用脱氧核糖核苷酸末端转移 酶介导的缺口末端标记法[terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated (dUTP) nick end-labeling,TUNEL]染色检查肾小 管上皮细胞凋亡,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测Fas相关死亡结构域(Fas-associated death domain,FADD)、凋亡蛋 白酶活化因子-1(apoptotic protease activating factor-1,APAF-1)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的 蛋白表达。结果：HE染色、Masson染色显示模型组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较假手术组明显增高(均 P<0.05),依那普利治疗组肾间质损伤指数、肾间质纤维化指数均较模型组明显降低(均P<0.05)。TUNEL染色显示模 型组肾小管上皮细胞凋亡计数较假手术组明显增多(P<0.05),依那普利治疗组肾小管上皮细胞凋亡数较模型组明显减 少(P<0.05)。免疫组织化学及蛋白质印迹法显示模型组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较假手术组明显 增多(均P<0.05),依那普利治疗组肾组织FADD,APAF-1和CHOP的蛋白表达均较模型组明显降低(均P<0.05)。结论： 依那普利可通过抑制UUO大鼠的肾小管上皮细胞凋亡而起到抑制肾间质纤维化的作用。     

bMSCs移植对单侧输尿管结扎大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞(bMSCs)移植对单侧输尿管结扎(UUO)模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 自Wistar大鼠股骨和胫骨分离bMSCs,经体外传代培养、成脂诱导及鉴定后制备细胞悬液.54只Wistar大鼠随机分为假手术对照组(n=18)、bMSC注射组(bMSC组,n=18)和生理盐水注射组(PS组,n=18).bMSC组和PS组大鼠于UUO模型建立的同时经下腔静脉分别注入bMSCs和等体积生理盐水.于建模后第3、7和14天分批处死大鼠并采集肾脏组织标本,RT-PCR技术检测肾小管细胞FasL mRNA表达,免疫组化染色检测FasL蛋白表达及分布;TUNEL法检测肾小管细胞凋亡,计算凋亡指数.结果 与假手术组比较,bMSC组和PS组建模后各时间点FasL mRNA及蛋白表达均明显上调,肾小管细胞凋亡指数显著增加(均P<0.05).建模后第3、7天时,bMSC组FasL mRNA和蛋白表达的上调幅度及肾小管细胞凋亡指数的增加程度均明显低于PS组(P<0.05);至建模后第14天时,bMSC组与PS组各项检测指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 静脉注入bMSCs对UUO模型大鼠肾小管上皮细胞凋亡有短期抑制作用.     

细胞凋亡在实验性急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能障碍中的作用

目的 :探讨细胞凋亡在大鼠急性重症胰腺炎 (ASP)肠道粘膜屏障功能障碍中的作用。方法 :用胰胆管内注射 5 %牛磺胆酸溶液复制大鼠ASP模型。分别对ASP大鼠假手术 (shumoperation ;SO)组和正常组 (normal;N)大鼠 (SO)于术后 3、6、12、2 4h取末端回肠粘膜进行光镜、电镜观察 ,并用分子生物学标记 (TUNEL)方法研究肠粘膜上皮细胞的凋亡。结果 :ASP组大鼠除制模 2 4h光镜下可见肠粘膜上皮细胞脱落外 ,其它时相点肠粘膜均保持完整 ,电镜观察制膜各相点均可见典型凋亡细胞 ,TUNEL法显示制膜 3、6、12、2 4hASP组肠粘膜上皮细胞凋亡指数较假手术组显著增加P均 <0 .0 1,且于术后 6h达峰值 ,凋亡细胞主要分布于肠粘膜隐窝部。结论 :ASP大鼠早期肠粘膜上皮细胞凋亡明显增加 ,上皮细胞凋亡增加可能也参与了ASP时肠道粘膜屏障功能障碍的病理生理过程     

Effect and mechanism of adrenomedullin on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury

<正>Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin ( AM ) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were randomly divided into 4 groups: control group,IRI group, empty plasmid group and AM group. One week after re-