蠲痹汤对类风湿关节炎大鼠模型细胞因子的影响

目的:观察蠲痹汤对类风湿关节炎大鼠关节炎指数(AI)、血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10水平的影响,探讨蠲痹汤治疗类风湿关节炎的免疫机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤对照组、蠲痹汤高/低剂量组,制备类风湿关节炎大鼠模型,给药组以不同剂量蠲痹汤灌胃,对照组代以生理盐水,检测AI、血清细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平明显上升,IL-10、IL-4水平明显下降(P0.01);与模型对照组比较,蠲痹汤高、低剂量均能明显降低实验大鼠AI和血清TNF-α、IL-1β水平(P0.05或P0.01),对IL-4水平无影响(P0.05),蠲痹汤高剂量组能显著升高模型大鼠IL-10水平(P0.01)。结论:蠲痹汤对类风湿关节炎模型大鼠TNF-α等炎症因子具有干预作用,提示蠲痹汤可通过抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1的表达,促进抗炎细胞因子IL-10的分泌,从而达到治疗RA的效果。     

宣痹汤对大鼠佐剂性关节炎模型滑膜病理形态学的影响

《温病条辨》宣痹汤功能清热利湿，通络止痛。临床上常用其治疗湿热痹阻型类风湿性关节炎，且疗效确切。类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种慢性进行性的自身免疫性疾病，以关节滑膜炎及对称性、破坏性的关节病变为主要特征。目前，尚缺乏治疗RA疗效好、副作用小的药物，因而研制高效低毒的抗嘞物一直是人们关注的热点。本实验通过观察宣痹汤对AA大鼠原发病变、继发病变及滑膜病理学的影响，初步探讨其治疗RA的可能机制。     

当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠滑膜MMP-9的影响

目的研究当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠的滑膜组织中MMP-9的影响,进一步探讨该药物的作用机制。方法用Mtb诱导实验性类风湿性关节炎大鼠模型,并随机分为4组,空白对照组、当归拈痛汤组、模型组以及作为阳性对照的雷公藤组。经过实验阶段的干预后,检测各组大鼠关节滑膜组织的MMP-9水平。结果与阳性对照组和模型对照组相比,当归拈痛汤组显著降低模型大鼠关节滑膜中MMP-9水平(P0.05)。结论当归拈痛汤可以下调模型大鼠关节滑膜组织中的MMP-9水平,提示其作用机制可能与调控MMP-9水平相关。     

基于NLRP3信号通路探讨三痹汤对佐剂型关节炎大鼠的治疗作用及机制探讨

目的：探讨三痹汤对佐剂型关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠的治疗作用以及对NLRP3信号通路的影响,明确其作用机制。方法：60只Wistar大鼠随机分为空白组（Control）、模型组（Model）、来氟米特组（来氟米特片,LeF）和三痹汤高剂量组（SBT－H）、三痹汤中剂量组（SBT－M）、三痹汤低剂量组（SBT－L）,每组各10只。采用弗氏完全佐剂制备大鼠AA模型,各组于初次免疫1周后开始灌胃相应药物。连续灌服21 d,至免疫后28 d处死大鼠。观察大鼠一般状态、足容积、关节炎指数（AI）、踝关节滑膜组织病理形态。采用ELISA法检测白介素（IL）－1β、IL－18含量。采用PCR法和免疫组化法检测NLRP3 mRNA和NLRP3、Caspase－1蛋白的表达水平。结果：与Control比较,Model大鼠踝关节肿胀和病理损伤程度严重,在第7～28天足容积显著升高（P < 0.05）,IL－1β、IL－18含量、NLRP3 mRNA蛋白表达水平及NLRP3、Caspase－1蛋白表达明显上升（P < 0.05）;与Model比较,SBT－H、SBT－M、SBT－L、LeF组踝关节肿胀和病理损伤程度均有不同程度的改善,在第7～28天足容积及关节炎指数均显著下降（P < 0.05）,IL－1β、IL－18含量、NLRP3 mRNA蛋白表达水平及NLRP3、Caspase－1蛋白表达明显下降（P < 0.05）;踝关节肿胀和病理损伤程度改善程度依次为SBT－H > SBT－M > SBT－L;与SBT－H组比较,SBT－L、IL－1β、IL－18含量上升（P < 0.05）,SBT－M、SBT－L组NLRP3 mRNA蛋白表达及NLRP3、Caspase－1蛋白水平明显升高（P < 0.05）;与LeF组比较,SBT－H踝关节肿胀和病理损伤程度改善程度基本一致,SBT－M、SBT－L组IL－1β、IL－18含量上升（P < 0.05）,SBT－H组IL－1β、IL－18含量差异无统计学意义（P > 0.05）,SBT－L组NLRP3 mRNA蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）,SBT－M、SBT－L组NLRP3、Caspese－1蛋白表达水平升高（P < 0.05）,SBT－H组NLRP3、Caspese－1蛋白表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：三痹汤可通过抑制NLRP3信号通路的激活,降低大鼠血清IL－1β、IL－18水平,改善佐剂型关节炎大鼠滑膜损伤的程度。     

麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎软骨组织形态及MMP-3、MMP-9表达的影响

目的 观察麝香乌龙丸对大鼠佐剂性关节炎软骨组织形态及MMP-3、MMP-9表达的影响,探讨其对佐剂性关节炎软骨组织破坏作用机制.方法 从40只大鼠中随机抽取1O只作为正常组,其余30只大鼠用完全弗式佐剂(FCA)复制佐剂性关节炎模型,并将其随机分为模型组、麝香乌龙丸1g/(kg·d)组、麝香乌龙丸2g/(kg·d)组,灌胃,连续30 d.HE染色、Masson染色观察软骨组织形态学变化,免疫组化检测软骨中MMP-3、MMP-9的表达.结果 麝香乌龙丸低、高剂量组均能减轻软骨病理改变,与模型组比较具有显著差异(P＜0.01);麝香乌龙丸高剂量组优于麝香乌龙丸低剂量组治疗(P＜0.05).麝香乌龙丸低、高剂量组均能降低软骨中MMP-3.MMP-9表达,与模型组比较具有显著差异(P＜0.01);高剂量治疗优于低剂量治疗(P＜0.05).结论 麝香乌龙丸能够阻止大鼠佐剂性关节炎软骨破坏,其机制与抑制MMP-3、MMP-9的高表达和胶原过度降解有关.     

蠲痹汤加减对风寒湿痹型类风湿关节炎患者关节液中炎症因子，血清MMP-3，OPG及RANKL的影响

目的:探讨风寒湿痹型类风湿关节炎(RA)应用蠲痹汤加减治疗的临床效果,及对患者关节液中炎症因子、生活质量的影响。方法:选取天津中医药大学第一附属医院2015年1月—2017年1月收治的134例RA患者,采用随机数字表法均分为两组。两组患者均给予相同的非药物治疗,对照组在此基础上予以美洛昔康+甲氨喋呤治疗,观察组予蠲痹汤加减治疗。比较两组患者中医证候疗效,治疗前后理化指标、关节液炎症因子水平、生活质量评分及血清基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3),骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核转录因子-κB受体活化因子(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)表达水平,并观察不良反应。结果:治疗12周后,观察组中医证候疗效有效率为94.0%,对照组为82.1%,观察组优于对照组(P0.05)。与治疗前比较,两组患者治疗12周后红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation tate,ESR)值及血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),类风湿因子(rheumatoid factor,RF)水平均明显降低(P0.05),且观察组下降更明显(P0.05)。两组患者治疗12周后关节液肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白细胞介素(interleukin,IL)-17水平均明显低于治疗前(P0.05),观察组降低更明显(P0.05)。与治疗前相比,两组患者治疗12周后生理健康总评(physical component summary,PCS),心理健康总评(mental component summary,MCS)评分均明显上升(P0.05),观察组升高更明显(P0.05),与治疗前比较,两组患者治疗后MMP-3及RANKL水平降低,OPG水平升高(P0.05)。与对照组比较,观察组治疗后RANKL水平明显降低(P0.05)。结论:风寒湿痹型RA应用蠲痹汤加减治疗更能有效缓解或消除患者的症状体征、减轻机体炎症反应,延缓病情进展,提高生活质量,疗效更优。     

三痹汤对佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜病理改变的影响及其机制研究

目的:观察三痹汤对佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜组织内的病理变化及关节滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、调节活化蛋白(RANTES)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-17(IL-17)表达的影响,探讨其作用机制。方法:采用随机数字表法将所有大鼠分为空白对照组、模型对照组、三痹汤高剂量组、三痹汤中剂量组、雷公藤对照组,每组12只,除空白对照组外余4组均用弗式完全佐剂诱导佐剂性关节炎大鼠模型。造模后8d开始灌胃给予相应药物或生理盐水,连续给药21d。于实验期间每周对各组大鼠进行关节炎症评分;治疗结束后处死大鼠,取双侧膝关节滑膜组织,光镜下观察关节滑膜病理变化,免疫组化检测关节滑膜TNF-α、MCP-1、RANTES、TGF-β、IL-17的表达。结果:与空白对照组比较,造模后各组大鼠关节滑膜组织炎性改变严重,经三痹汤或雷公藤治疗后,病理改变明显改善。与模型对照组比较,三痹汤高剂量组原发足于第3周后、继发足于第2周后关节炎症评分明显减少(P0.05);与雷公藤对照组比较,三痹汤高剂量组于第2周时继发足关节炎症评分明显降低(P0.05)。与空白对照组比较,各组大鼠滑膜TNF-α、MCP-1、RANTES、TGF-β和IL-17表达明显增加(P0.05);与模型对照组比较,三痹汤中、高剂量和雷公藤能下调滑膜组织中TNF-α、MCP-1、RANTES、IL-17表达,上调TGF-β表达,差异均具有统计学意义(P0.05);与雷公藤对照组比较,三痹汤中剂量组MCP-1表达明显增高(P0.05),TGF-β、IL-17表达明显降低(P0.05),三痹汤高剂量组RANTES、IL-17表达明显降低(P0.05)。结论 :三痹汤通过下调关节滑膜TNF-α、MCP-1、RANTES、IL-17表达,上调TGF-β表达,从而抑制细胞炎性因子,减轻关节肿胀及滑膜细胞增生,进而延缓关节损伤。     

三痹汤对佐剂型关节炎大鼠血清TNF-α及IL-1的影响

目的:观察三痹汤对大鼠佐剂性关节炎模型足跖肿胀度及血清细胞因子的影响,探讨其确切作用机制.方法:用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型,容积法测量关节肿胀程度;ELISA法观察细胞生长因子TNF-α及IL-1表达水平.结果:与本组给药前相比,三痹汤高、中剂量组左、右后足跖肿胀度及TPT组右后足跖肿胀度明显减轻,有统计学意义(P＜0.05).与给药后模型对照组比较,三痹汤高、中剂量组及TPT组大鼠左、右足跖肿胀度明显减轻,有统计学意义(P＜0.05);与TPT组相比,三痹汤组高、中剂量组左、右足跖肿胀度无明显变化.无统计学意义(P＞0.05);与模型对照组比较,三痹汤组高、中剂量组及TPT组TNF-α、IL-1含量明显降低,有统计学意义(P＜0.01);与TPT组相比,三痹汤组高、中剂量组TNF-α、IL-1含量无统计学意义(P＞0.05).结论:三痹汤对AA大鼠关节炎症有一定的抑制作用,并能降低血清中TNF-Ω及IL-1表达水平,其作用机制可能与免疫调节有关.     

宣痹汤对AA大鼠模型滑膜组织病理改变的影响

目的：观察宣痹汤对大鼠佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）的治疗作用及对从大鼠模型关节滑膜病理的影响。方法：用弗氏完全佐剂（CFA）诱导大鼠从模型，容积法测量关节肿胀程度并进行关节评分（AI），光镜下观察滑膜组织HE染色切片，免疫组织化学法观察滑膜细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达水平。结果：与模型组比较，宣痹汤治疗组及雷公藤组大鼠继发关节肿胀度显著降低（P〈0．01或P〈0．05），关节炎指数（AI）显著降低（P〈0．01或P〈0．05），关节病理积分显著降低（P〈0．01或P〈0．05），VEGF表达水平显著降低（P〈0．01）。结论：宣痹汤对从大鼠关节炎症有一定的抑制作用，并能降低滑膜组织中VEGF表达水平，其作用机制可能与免疫调节有关。     

清痹片对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织病理学改变的影响

目的:观察清痹片对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织病理形态学的影响。方法:光镜下对CIA大鼠滑膜炎性细胞浸润、滑膜细胞进行评分,观察其组织形态学的改变。结果:CIA模型组大鼠关节滑膜炎细胞浸润明显;而清痹片各给药组及尼美舒利组其病理改变较模型组明显减轻(P<0.05)。模型组大鼠组织形态学改变明显:关节滑膜高度增生,呈乳头状突起,细胞排列不规则,可见大量的炎性细胞浸润等;而各给药组组织形态学改变显著减轻。结论:清痹片能有效减轻CIA大鼠滑膜组织的病理形态学改变,对RA滑膜增生及关节破坏有一定的抑制作用。     

当归拈痛汤对佐剂性关节炎大鼠血清中MMP-3表达的影响

目的 探讨当归拈痛汤高、中、低剂量对佐剂性关节炎大鼠血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)表达的影响及其治疗作用.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模犁组、当归拈痛汤高剂量组、中剂量组和低剂量组,采用弗氏完全佐剂造模,观察不同时间点各组大鼠的疼痛指数、肿胀指数等.在灌服当归拈痛汤18d后.用ELISA法检测MMP-3在血清中的表达.结果 各组致炎后不同时间关节肿胀度、疼痛指数差异显著;与模型组比较,各用药组的MMP-3表达显著减少.结论 当归拈痛汤高、中剂量对大鼠佐剂性关节炎有较好的治疗作用,其降低血清MMP-3含量可能是治疗类风湿关节炎的机制之一.     

秦艽不同配伍对风寒湿痹模型大鼠MMP-3及TIMP-1的影响

目的:观察秦艽寒热不同配伍药对对风寒湿痹型类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型大鼠踝关节基质金属蛋白酶-3 (matrix metalloproteinase-3,MMP-3),基质金属蛋白酶组织抑制物-1 (matrix metalloproteinase tissue inhibitor-1,TIMP-1)的影响。方法:选取80只SD大鼠并随机分为正常组,Ⅱ型胶原组,风寒湿病证模型组,雷公藤多苷片组(6 mg·kg~(-1)),单味秦艽组(25 g·kg~(-1)),秦艽配伍威灵仙(秦威组,25 g·kg~(-1)),秦艽配伍桑寄生(秦桑组,25 g·kg~(-1))、秦艽配伍防己(秦防组,25 g·kg~(-1)),共8组,每组10只。采用注射Ⅱ型胶原乳剂诱导并给予风寒湿刺激制备风寒湿RA大鼠模型。模型建立完成后正常组,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组大鼠给予生理盐水,各给药组给予相应药液灌胃。实验过程中,每3 d测量1次大鼠左后足跖厚度,计算足跖肿胀度;实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(AI)评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清类风湿因子(RF)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测踝关节MMP-3,TIMP-1的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测踝关节MMP-3,TIMP-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,Ⅱ型胶原组及风寒湿病证模型组足跖肿胀度,AI评分,血清RF含量,踝关节MMP-3蛋白表达水平,MMP-3 mRNA明显升高(P 0. 05,P 0. 01),踝关节TIMP-1蛋白表达水平,TIMP-1 mRNA显著降低(P 0. 01);与风寒湿病证模型组比较,各给药组足跖肿胀度,AI评分及血清RF含量均有不同程度降低,其中秦威组降低最显著(P 0. 01); Western blot及Real-time PCR结果显示,与风寒湿病证模型组比较,各给药组踝关节MMP-3蛋白表达水平及MMP-3 mRNA表达水平均显著降低(P 0. 01),以秦威组降低最明显,雷公藤多苷片组、秦威组及秦桑组大鼠踝关节TIMP-1蛋白表达水平及TIMP-1 mRNA表达水平均有所升高,以秦威组升高最显著(P 0. 01)。结论:对于风寒湿痹型类风湿关节炎,平温相配的秦威组疗效优于平平相配的秦桑组、平寒相配的秦防组及单味秦艽组,实验结果与中医"寒者热之"的原则基本相符。该配伍治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的机制可能与其可以减少MMP-3,升高TIMP-1的表达,减轻关节软骨破坏有关。     

蓬草除痹汤对CIA大鼠滑膜组织病理形态学的影响

目的观察蓬草除痹汤对胶原诱导型关节炎大鼠(CIA)滑膜组织病理形态学的影响。方法建立牛Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠类风湿性关节炎模型,随机分为蓬草除痹汤高、中、低剂量组、雷公藤组及空白组,各组连续给药6W,观察对滑膜组织病理学改变,进行评分,从滑膜细胞增生、纤维组织增生、炎性细胞浸润和巨噬细胞浸润4个方面评价大鼠关节滑膜的病理学变化。结果蓬草除痹汤中、高剂量组及雷公藤组对滑膜组织的病理学改变与模型组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论蓬草除痹汤可以降低CIA大鼠滑膜的病理学评分,抑制滑膜细胞增生、纤维组织增生、炎性细胞浸润和巨噬细胞浸润。     

加味独活寄生汤对胶原诱导性关节炎大鼠关节炎症的影响

目的:观察加味独活寄生汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节炎症的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠90只,随机分为正常对照组、模型对照组、来氟米特治疗组、加味独活寄生汤高、中、低剂量组共6组。除正常对照组6只,于大鼠尾根部每只0.2mg im胶原乳剂制成关节炎大鼠模型,造模后,每组选择造模成功的大鼠分别6只,来氟米特组按10 mL·kg-1给予来氟米特ig,加味独活寄生汤高、中、低剂量组按44,22,11 g·kg-1给予加味独活寄生汤ig,对照组ig相同体积的蒸馏水,每天1次,连续12周。分别观察治疗后0,2,4,6,8,10,12周大鼠体质量、关节炎症指数(AI)、足爪指标、关节病理变化情况。结果:与模型组比较,加味独活寄生汤高、中、低剂量组与来氟米特组对关节炎大鼠AI有显著改善作用,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);各治疗组较模型组体质量、足爪均有显著改善(P<0.05,P<0.01);对踝关节软骨病理改善方面,高剂量组与模型组比较有改善。结论:加味独活寄生汤对CIA大鼠关节炎症有明显改善作用,是治疗类风湿关节炎的有效方剂。     

三痹汤治疗类风湿性关节炎32例疗效观察

目的 观察三痹汤治疗类风湿性关节炎（RA）临床疗效及作用机制。方法 59例RA分为治疗组32例和对照组27例,治疗组应用三痹汤治疗,对照组应用雷公藤多甙片为主治疗,2组均2个月为1个疗程,1个疗程后观察2组止痛及消肿起效时间。结果 治疗组和对照组总有效率分别为87．5％、66．7％,2组比较有极显著性差异（P＜0．01）;2组止痛及消肿起效时间比较,治疗组明显短于对照组（P＜0．01）,关节疼痛复发率治疗组也短于对照组（P＜0．01）。结论 三痹汤治疗类风湿性关节炎疗效确切。     

三痹汤加味治疗类风湿性关节炎45例临床观察

类风湿性关节炎是一种慢性的，全身性疾患，目前病因不明，以其侵犯关节的方式为主要特征，关节炎症有时可缓解，但如果持续经久，往往造成进行性的关节破坏和畸形，最终导致不同程度的残废：本病遍及世界各地，各种族与民族均有发病。女性发病率是男性的2-3倍。任何年龄均可发病，发病年龄随着年龄的增长而增加。女性发病的高峰在40-60岁。目前治疗类风湿关节炎的药物和方法众多，许多患有关节炎的病人因此得到了收益，     

虎威通痹汤对佐剂关节炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴的影响

目的:观察虎威通痹汤对佐剂关节炎大鼠IL-23/IL-17炎症轴的影响。方法:将40只雄性 SD 大鼠随机分为对照组、模型组、虎威通痹汤组、甲氨蝶呤组,每组10只。虎威通痹汤组、甲氨蝶呤组分别给予相应药物灌胃,对照组和模型组予等体积0.9%氯化钠溶液。干预28 d后,比较各组大鼠足跖肿胀程度、关节滑膜组织病理学形态及血清IL-23、IL-17、IL-6、TNF-α表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠足跖肿胀度增加,关节滑膜损伤明显,血清IL-23、IL-17、IL-6、TNF-α水平上调。与模型组比较,虎威通痹汤组大鼠足跖肿胀程度减轻,滑膜损伤改善,血清IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23水平下调。与甲氨蝶呤组比较,虎威通痹汤组血清IL-23、IL-6水平降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:虎威通痹汤可减轻佐剂关节炎大鼠炎症反应,改善滑膜组织损伤,其机制可能与抑制IL-23/IL-17炎症轴有关。     

中药痹愈汤对类风湿关节炎骨破坏和修复的实验研究

目的:探讨痹愈汤、甲氨蝶呤(MTX)对SD大鼠类风湿关节炎(RA)骨破坏、修复的作用机制和疗效。方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的SD大鼠关节炎模型,将50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,大剂量、中剂量痹愈汤组,MTX组,造模后10天,开始给药,30天后取双侧踝关节切片进行骨保护素(OPG)mRNA和核刺激因子-KB受体配体(RANKL)mRNA原位杂交实验。结果:大、中剂量痹愈汤组和MTX组比模型组和正常组明显上调OPG的平均光密度和计数。其中大剂量痹愈汤组优于MTX组和中剂量痹愈汤组。大、中剂量痹愈汤组,MTX组和模型组均比正常组上调RANKL的平均光密度和计数。结论:中药痹愈汤、MTX通过上调OPG的表达,提高了OPG/RANKL的比例,从而竞争性抑制RANK和RANKL的结合,最终抑制了破骨细胞生成和活化,延缓关节周围的骨的破坏。