黄花夹竹桃中强心苷类成分的UPLC-QTOF/MS快速鉴定

目的:应用超高效液相色谱-高分辨质谱联用方法(UPLC-QTOF/MS)对黄花夹竹桃枝中的强心苷类成分进行速鉴定,为含有黄花夹竹桃的复杂混合样品的快速分析提供了一种有效的方法。方法:黄花夹竹桃枝经甲醇冷浸提取,大孔吸附树脂层析,将黄花夹竹桃中总强心苷类成分富集到95%乙醇洗脱部位,通过超高效液相色谱将各种强心苷类成分较好分离,根据高分辨质谱得到各成分的分子量,推测出其中6个主要成分的可能结构。结果:试验通过UPLC-QTOF/MS方法鉴定出黄花夹竹桃中主含的6种强心苷类成分,分别为黄花夹竹桃黄夹苷B、黄夹次苷D、黄花夹竹桃次苷甲、黄夹臭蚁醛苷、黄花夹竹桃次苷乙以及单乙酰次苷乙。结论:该实验方法简便快捷,结果准确可靠,可做为黄花夹竹桃中强心苷类化合物的快速鉴别分析方法。     

桑寄生及其夹竹桃科寄主植物强心苷含量相关性研究

目的 考察桑寄生及其寄主植物夹竹桃、黄花夹竹桃强心苷含量的关系.方法 采用比色法测定寄生在夹竹桃、黄花夹竹桃寄主植物上的桑寄生与其寄主夹竹桃、黄花夹竹桃强心苷含量.结果 夹竹桃寄主的桑寄生枝的强心苷含量为0.33mg/g,叶的强心苷含量为0.98mg/g,分别是寄主枝、叶强心苷含量的4.3%和15.6%;黄花夹竹桃寄主的桑寄生枝的强心苷含量为0.27mg/g,叶的强心苷含量为0.84mg/g,分别是寄主枝、叶强心苷含量的11.5%和84.0%.结论 寄生植物会以不同量的形式累积其寄主植物的特征性成分.     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分相关性分析

目的:建立超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)的红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分鉴定方法,以桂花树寄主的红花寄生及其寄主桂花树样品为对照,通过与强心苷对照品或文献报道比对,鉴定其中的强心苷化学成分,分析红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分的相关性,并且评价寄主对桑寄生药材质量影响。方法:采集红花寄生及其寄主夹竹桃样品,用桂花寄主及其红花寄生为对照样品,样品用70%乙醇超声提取。采用ACQUITY UPLC HSS T3C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),以流动相0. 1%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速0. 6 m L·min~(-1),柱温40℃,进样量0. 5μL。以Masslynx4. 1软件分析数据,根据正、负离子模式质谱数据及元素组成分析,结合强心苷对照品和相关文献,对红花寄生及其寄主夹竹桃强心苷成分进行鉴定,并分析各成分之间的相关性。结果:共鉴定出26个强心苷成分,其中夹竹桃寄主鉴定出强心苷成分25个,夹竹桃寄主的红花寄生鉴定出强心苷成分5个,桂花寄主及其红花寄生没有强心苷。结论:UPLC-Q-TOFMS/MS技术能快速、准确、全面地鉴定夹竹桃及其红花寄生强心苷成分,红花寄生本身不含强心苷,其强心苷为来自其寄主夹竹桃。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的夹竹桃寄主及其桑寄生强心苷成分相关性研究

建立超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)的夹竹桃寄主及其桑寄生强心苷成分鉴定方法,评价寄主对桑寄生药材质量影响。采集夹竹桃寄主及其桑寄生样品,用桑树寄主及其桑寄生为对照样品,样品用70%乙醇超声提取。使用ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以流动相0.1%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速0.6 mL·min~(-1),进样量0.5μL,柱温40℃。根据正、负离子模式质谱数据及元素组成分析,结合强心苷对照品和相关文献,对夹竹桃寄主及其桑寄生强心苷成分进行鉴定,并分析它们之间的相关性。共鉴定出强心苷化合物29个,其中夹竹桃寄主强心苷28个,夹竹桃寄主的桑寄生强心苷5个,桑树寄主及其桑寄生没有强心苷。采用液质联用技术能快速、准确、全面地鉴定寄主夹竹桃及其桑寄生强心苷成分,结果为评价寄主对桑寄生药材质量影响提供参考依据。     

穿心莲中有效成分不同提取方法的比较研究

目的:考察不同方法和溶剂组成对提取穿心莲中主要有效成分的影响.方法:药材分别采用不同的溶剂以冷浸、温浸、热回流、超声辅助、微波辅助等方法提取,高效液相色谱法测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯,紫外-可见分光光度法测定总黄酮.结果:以内酯总量为指标,提取率以85%乙醇冷浸最高,酸水冷浸最低.总黄酮的提取率以85%乙醇冷浸和微波辅助提取较高,碱水提取最低.有效成分提取率随溶剂中乙醇含量上升而增加.结论:85%乙醇冷浸提取穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯和总黄酮效果最好,微波辅助提取则充分表现出时间短、效率高、能耗少的特点.     

蜂胶提取工艺的改进

目的:通过研究工艺改进前后蜂胶提取物总黄酮含量及出膏率的变化,得到改进提取工艺参数。方法:以总黄酮含量为考察指标,对温浸法、超声提取法、冷浸法等3种提取方法以及提取温度进行考察;以总黄酮含量和出膏率为考察指标,采用L934正交设计对乙醇体积分数、提取时间、乙醇用量、提取次数4个因素进行考察;比较蜂胶除蜡前后总黄酮含量和出膏率的变化。结果:蜂胶最佳提取工艺为10倍量75%乙醇温浸3次,每次2 h。蜂胶除蜡后提取,总黄酮含量增加14.43%,出膏率降低61.71%。结论:蜂胶除蜡后,不降低有效部位含量同时可大大降低出膏率,利于制剂,该方法优于传统直接提取有效部位工艺,且简便可行。     

黄芩中黄芩苷提取工艺的研究

目的探讨黄芩中黄芩苷的最佳提取工艺。方法选取温浸法、煎煮法、加碱温浸法中较佳方法,考察粒度、次数、提取时间和次数、分离方式等因素对黄芩苷收率的影响。结果煎煮法效果优于其他两种方法,煎煮法提取黄芩苷的最佳工艺条件为:粒度40目,煎煮2次,物料比1∶10和1∶5,时间60min和30min,双层滤布过滤再离心分离,70℃保温60min,酸沉静置3h抽滤,50%乙醇洗涤2次,干燥得黄芩苷产品。黄芩苷收率可达13.67%,其含量为85.7%,黄芩苷在pH3.98低温水浴液中性质较稳定。结论该实验结果为大规模提取生产黄芩苷提供理论依据。     

荔枝核中总皂苷的提取工艺优选

目的:以荔枝核为原料,采用乙醇浸提和超声波辅助提取法对荔枝核中总皂苷进行提取工艺优选。方法:以人参Rg1为对照品,采用香草醛-高氯酸比色法测定皂苷含量。乙醇浸提法选用浸提时间、液固比、温度、乙醇浓度作为影响因素,超声波辅助提取法选超声波提取时间、液固比、乙醇浓度作为影响因素。结果:乙醇浸提法提取皂苷的最佳工艺参数提取时间为3 h,液固比22∶1,70%乙醇80℃提取,总皂苷质量分数为1.714%。超声波辅助提取皂苷的最佳工艺参数为70%乙醇提取50min,液固比22∶1,总皂苷的提取率为1.818%。结论:超声波辅助提取法的提取效果优于乙醇浸提法。     

基于综合评分的中药复方“鼻敏康”提取工艺研究

目的:优选中药复方“鼻敏康”的最佳提取工艺并建立黄芪甲苷的HPLC-ELSD 含量测定方法。方法:采用加热回流法,乙醇为提取溶剂,以浸膏率及黄芪甲苷含量为指标,对乙醇浓度、提取时间、液料比和提取次数进行单因素考查,优选出对浸膏率及黄芪甲苷含量较大影响的3个因素,按照L9（34）安排正交试验优选复方制剂鼻敏康的提取工艺。黄芪甲苷含量测定采用Diamonstil C18（250 mm*4.6 mm,5 μm）色谱柱,流动相为水（A）-乙腈（B）,洗脱梯度：0~45 min,22%B;45~60 min,22%~32%B,流速1.0 mL·min-1,漂移管温度100oC,载气为N2,载气流速2.5 L·min-1,柱温：30oC。结果: 复方制剂鼻敏康最佳提取工艺为8倍量70% 乙醇, 每次1.5 h,提取3 次,结果表明乙醇浓度和提取次数存在显著性影响,最终确定提取工艺为8 倍量70% 乙醇, 每次加热回流1.5 h,提取2 次;黄芪甲苷含量测定线性范围为0.87~8.72 μg,回归方程Y =1.545 4X+5.875 9,r =0.999 7,平均收率95.05%,RSD 值为2.64%。结论: 优选的提取工艺稳定合理可行,适用于工业生产。     

黄芩籽种壳中总黄酮提取工艺的研究

目的确定黄芩籽种壳中总黄酮的最佳提取工艺。方法正交设计水冷浸法、醇冷浸法、醇回流提取法、水煎煮法四种工艺的提取因素进行实验,用紫外分光光度法测定黄芩籽种壳总黄酮含量。结果乙醇回流提取法(回流时间1.0h,回流次数2次,乙醇含量为60%时)得到黄芩籽种壳总黄酮得量最多,为8.37%;乙醇冷浸法所得总黄酮含量1.87%;水冷浸法和水煎煮法提取效率最低。结论乙醇回流法工艺稳定且收率高,适用于工业生产中提取黄芩籽种壳总黄酮。     

正交实验优化独活总香豆素的渗漉提取工艺

[目的]研究独活总香豆素的最佳渗漉提取工艺。[方法]采用L9(34)正交实验法,考察乙醇浓度、料液比、浸泡时间对独活提取物中蛇床子素、二氢山芹醇乙酸酯、二氢山芹醇、二氢山芹醇当归酸酯含量的影响。[结果]乙醇浓度为影响独活总香豆素渗漉提取效果的主要因素,最佳提取工艺为75%乙醇,料液比为1∶8,浸泡8 h。[结论]此方法可作为独活总香豆素的最佳渗漉提取工艺。     

针刺对局灶性脑缺血大鼠海马神经元细胞[Ca2+]i的影响

[目的]研究脑缺血不同时点大鼠海马神经元内游离Ca2+浓度[Ca2+]i及醒脑开窍针刺对其影响,探讨醒脑开窍针刺法早期干预对脑缺血的治疗作用。[方法]建立大脑中动脉所致局灶性脑缺血(MCAO)模型,采用醒脑开窍针刺法治疗,采用激光扫描共聚焦显微技术动态观察脑组织海马CA1区锥体细胞[Ca2+]i在不同时间点的变化。[结果]与正常组大鼠相比,模型组大鼠脑组织海马CA1区锥体细胞内游离[Ca2+]i(以细胞内Ca2+相对荧光强度表示)在局灶性脑缺血1 h时升高,持续升高至缺血24 h时(P<0.05)。假手术组与正常组相比[,Ca2+]i变化差异无统计学意义(P>0.05)。相应时间点非穴位针刺组与模型组[Ca2+]i比较,无统计学意义(P>0.05)。在相应时间点,醒脑开窍针刺组[Ca2+]i低于模型组(P<0.01)。[结论]急性局灶性脑缺血后大鼠海马神经细胞[Ca2+]i随缺血时间的延长而持续升高,提示细胞内钙超载;醒脑开窍针刺组能有效调节缺血区的[Ca2+]i,提示在缺血后针刺治疗效果越早越好,为临床及早应用针刺治疗缺血性脑血管病提供了理论依据。     

荷叶碱降尿酸的1H-NMR代谢组学研究

[目的] 研究荷叶碱对高尿酸血症小鼠的作用,筛选与高尿酸血症代谢有关的生物标志物。[方法] 采用小鼠长期给药氧嗪酸钾模型,连续给药14 d后,运用核磁共振氢谱（¹H-NMR）技术同时检测高尿酸血症小鼠的血浆和尿液样本。[结果] 通过¹H-NMR分析方法在血浆和尿液样品中共筛选出9个潜在生物标志物。[结论] 荷叶碱对高尿酸血症小鼠的代谢组学研究表明高尿酸血症的病理过程主要涉及到酪氨酸代谢、柠檬酸代谢、精氨酸与脯氨酸代谢以及糖酵解和糖异生代谢途径,预示着这些潜在生物标志物不仅在早期疾病诊断中起重要作用,而且在预防高尿酸血症中也有重大意义。     

藜芦有效成分提取工艺优化

[目的]借助正交实验与统计分析软件（JMP）实验设计模型优化藜芦有效成分的提取工艺。[方法]采用单因素实验、正交实验优化乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取次数,通过分析芥芬胺和藜芦胺的含量差异确定提取工艺。[结果]模型所得最佳工艺参数与正交实验结果相符,为乙醇体积分数70%,时间2 h,提取3次,液料比15∶1（mL/g）。在此工艺下,芥芬胺和藜芦胺含量分别为1.60、2.98 mg/g,相对标准偏差（RSD）分别为1.0%、1.1%。[结论]该提取工艺稳定,可用于藜芦中有效成分的提取。     

三个不同品种甘草多糖的含量测定

[目的]建立甘草多糖含量定量的测定方法,为评估甘草药材的质量提供方法.[方法]甘草样品经95％乙醇除去小极性的杂质后,采用水提醇沉的方法,再通过多步除杂质得精制多糖.采用苯酚-硫酸法测定甘草多糖与葡萄糖的换算因子,并以此测定不同品种甘草药材中多糖的含量.[结果]三个不同品种间甘草生药中甘草多糖的含量为光果＞胀果＞乌拉尔.乌拉尔甘草多糖平均加样回收率为98.23％,RSD为1.63％.[结论]此方法简便可行,甘草多糖供试液在4h内显色稳定,重复性较好,平均加样回收率高,可作为甘草多糖的含量测定方法.     

白花蛇舌草中环烯醚萜苷类成分的提取工艺优选

目的:优选白花蛇舌草中总环烯醚萜苷的提取工艺,为该药材的资源开发与利用提供参考。方法:以车叶草苷为指标成分,采用紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量,检测波长548 nm。以浸膏得率和总环烯醚萜苷含量的综合评分为指标,通过正交试验考察乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取次数对白花蛇舌草中总环烯醚萜苷提取工艺的影响。结果:总环烯醚萜苷最佳提取工艺为乙醇体积分数90%,料液比1∶8,提取时间2 h,提取数2次。总环烯醚萜苷质量分数22.85%。结论:优选的提取工艺稳定合理,为白花蛇舌草中总环烯醚萜苷提取的工业化生产提供实验依据。     

香加皮不同提取部位体外抗肿瘤活性实验研究

[目的]筛选香加皮的抗肿瘤活性部位.[方法]用大孔吸附树脂柱层析法对香加皮的和60%乙醇回流提取物进行分段处理,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各提取部位体外抗肿瘤活性.[结果]70%乙醇洗脱部位对体外肿瘤细胞表现出抑制活性,并在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性.95%乙醇洗脱部位的抑制作用较弱.而水洗脱物和20%乙醇洗脱物则未呈现出抗肿瘤活性.在各提取部位中70%乙醇提取物活性最强.[结论]70%乙醇提取部位是香加皮主要的体外抗肿瘤活性部位.     

五田保肝颗粒的提取工艺研究

[目的] 优化五田保肝颗粒的提取工艺。[方法] 采用正交实验设计,以干膏得率、总黄酮含量和五味子醇甲含量为评定指标,通过多指标综合评分优选五田保肝颗粒的提取工艺。[结果] 最佳提取工艺条件为12倍量40%乙醇提取3次,每次2 h。[结论] 所确定的最佳提取工艺合理,有效成分提取效率高。     

正交试验优选复方牛黄胶囊的提取工艺

目的:优选复方牛黄胶囊的提取工艺。方法:采用UV测定总皂苷含量,检测波长分别为560,545 nm。以总皂苷质量为评价指标,选择加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,采用L9(34)正交试验优选复方牛黄胶囊的水提工艺;选择乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间及提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验优选醇提工艺。结果:最佳水提条件为加10倍量水浸泡0.5 h,煎煮3次,每次2 h;最佳醇提工艺为加8倍量70%乙醇煎煮3次,每次2 h。结论:优化的提取工艺稳定可行,为复方牛黄胶囊的临床推广提供实验依据。     

独一味镇痛止血有效部位的富集工艺

目的:对独一味镇痛止血有效部位的富集工艺进行研究。方法:采用二甲氨基苯甲醛法测定总环烯醚萜含量、HPLC测定8-epideoxyloganic acid含量,以正交试验法和单因素试验法筛选提取工艺和大孔吸附树脂分离条件。结果:最佳提取工艺为用10倍量60%乙醇渗漉提取,浸泡36 h,渗漉速度5 mL·min-1.kg-1。纯化工艺为将提取物上聚酰胺柱,水洗脱部分上XDA-7大孔吸附树脂,收集30%醇洗脱部分。结论:XDA-7型树脂对独一味中环烯醚萜苷的富集能力优于其他树脂。洗脱溶剂30%乙醇能较好地洗脱环烯醚萜苷类成分。