核因子-κB在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的作用及不同药物的影响

目的探讨核转录因子-kappaB(NF-κB)在急性重症胰腺炎肺损伤发病中的作用及不同药物的影响。方法经胆胰管逆行注射去氧胆酸钠复制大鼠急性重症胰腺炎肺损伤模型。采用凝胶电泳迁移率改变。(EMSA)法检测肺泡巨噬细胞中NF-κB活性,同时应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺泡巨噬细胞中诱生性一氧化氮合酶基因(iNOS mRNA)的表达情况,并检测一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的含量和肺组织病理学改变。结果模型组NF-κB活性增强、iNOS mRNA出现高表达,相应的TNF-a、NO、iNOS均明显高于假手术组。地塞米松和善宁可以下调NF-κB活性,减少iNOS mRNA表达,减轻肺损伤程度,而凯复定则无明显作用。结论急性重症胰腺炎肺损伤时,NF-κB活化,进而启动TNF-α、iNOS、NO大量表达,在发病中起着十分重要的作用。地塞米松和善宁可以通过调节NF-κB活化等多种途径,防止肺组织的进一步损害。     

血必净注射液对脓毒症大鼠低氧诱导因子-1α及其靶基因诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察血必净注射液对脓毒症大鼠低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及其靶基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 104只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,血必净组于CLP后2、12、24、36、48、60 h经阴茎背静脉注射血必净注射液4 ml/kg,其余各组注射等量生理盐水.各组分别于CLP后6、12、24、72 h分别活杀大鼠取肝脏,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织HIF-1α和iNOS的蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α和iNOS的mRNA表达.结果 与正常对照组比较,模型组CLP后6 h HIF-1α和iNOS蛋白表达均迅速升高,其中HIF-1α蛋白表达24 h升高幅度最明显,iNOS蛋白表达12 h达高峰,随时间延长逐渐降低,但至72 h差异仍有统计学意义(P<0.05或P<0.01);血必净治疗组HIF-1α、iNOS 蛋白表达受到明显抑制,CLP后12、24、72 h HIF-1α、iNOS蛋白表达均较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01).模型组CLP后6 h HIF-1α、iNOS mRNA表达开始升高,12 h均达高峰,随时间延长逐渐降低,但至72 h仍明显高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);血必净注射液能显著抑制肝组织HIF-1α、iNOS mRNA表达升高,CLP后6、12、24、72 h肝组织HIF-1α、iNOS mRNA表达均明显下调,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 血必净注射液能抑制脓毒症大鼠HIF-1α及其靶基因iNOS的表达.     

一氧化氮对急性出血坏死性胰腺炎肺组织Toll样受体2/4 mRNA表达的影响

目的研究一氧化氮(NO)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肺组织Toll样受体(TLR)2/4表达的影响。方法采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠注射制造AHNP大鼠模型,动物分为假手术组、胰腺炎组和L精氨酸(LArg)治疗组。RTPCR方法检测肺组织TLR2和TLR4mRNA表达变化。结果与假手术组比较,胰腺炎组大鼠从3h时肺组织TLR2/4mRNA表达开始增高,在12h时肺组织TLR2/4mRNA表达达到峰值;同时肺损伤加重,肺组织TNFα浓度升高,NO浓度逐渐降低(P<0.05)。给予LArg治疗后,NO浓度明显升高,TLR2/4mRNA表达降低,肺损伤程度减轻,肺组织TNFα浓度降低(P<0.05)。结论急性出血坏死性胰腺炎时,肺组织内TLR2和TLR4mRNA表达上调,肺组织损伤加重。NO可以明显抑制AHNP肺组织TLR2/4mRNA的表达,从而减轻肺损伤。     

一氧化氮对细菌性肺炎大鼠炎症介质的影响

目的探讨吸入一氧化氮(NO)对肺炎克雷白杆菌肺炎大鼠肺部炎症介质的影响。方法健康大鼠随机分为肺炎组(P)和正常对照(C)组,P组气道注入肺炎克雷白杆菌(约1.3×108cfu只),然后分组(n=8～10)干预24h:吸入空气(PA)、NO(20×10-6,PNO)、低氧(FiO20.4,PLO)、低氧加NO(PLONO)、高氧(FiO21.0,PHO),高氧加NO(PHONO);C组吸入空气(CA)或NO(CNO)。测定肺组织原生型和诱生型NO合酶(cNOS和iNOS)活性,肿瘤坏死因子α(TNFα)和细胞间黏附分子1(ICAM1)蛋白水平及mRNA表达。结果PA组iNOS活性显著高于CA组(P<0.01),cNOS活性显著低于CA组(P<0.01);PNO、PLO、PLONO、PHO及PHONO组均可使被抑制的cNOS活性增强,PHO及PHONO可抑制iNOS活性增加;TNFα水平PA和PHONO组均显著高于CA组(P<0.01),PNO、PLO和PLONO组均显著低于PA组(P<0.01);ICAM1水平PA组显著高于CA组(P<0.01),PNO、PLONO和PHONO组分别低于PA、PLO和PHO组(P<0.01)。各组肺组织TNFα、ICAM1、内皮细胞型NOS和iNOSmRNA表达差异均无显著性。结论吸入NO和或氧气对肺炎大鼠肺内cNOS及iNOS活性具有不同调节作用;吸入NO可抑制肺组织ICAM1表达;吸入NO和或低浓度氧可降低TNFα表达。吸入NO可能通过调节急性炎症反应介质预防炎症性肺损伤。     

严重烧伤后小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子的变化及免疫功能机制

背景：严重烫伤导致机体免疫系统各方面的功能紊乱，活化的巨噬细胞可分泌许多生物活性递质。烧伤后巨噬细胞功能紊乱与信号转导的关系目前尚不清楚。目的：观察严重烫伤后不同时相点及运用特异性NF—κB抑制剂吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)后小鼠腹腔巨噬细胞内NF—κB活性、IκB—α的表达及肿瘤坏死因子(TNF—α)的变化，从信号转导的角度探讨巨噬细胞功能紊乱的机制。设计：随机对照的实验研究。单位：创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室。材料：实验于1999—01／06在第三军医大学烧伤研究所实验室(国家级)完成。实验动物为健康清洁级近交系昆明小白鼠30只。干预：以小鼠常规烫伤模型造成体表面积15％Ⅲ度烫伤实验按烫伤前及伤后不同时相随机分为6组，即0(正常对照组)，2，6，12，24，48h组。收集腹腔巨噬细胞采用放射免疫法检测TNF—α的含量，电泳迁移率改变分析法测NF—κB的活性，免疫印迹法测IκB—α的表达，反转录—PCR测TNF—α mRNA的表达。主要观察指标：①检测TNF—α的含量，②测定NF—κB的活性，③检测IκB-α的表达。④测TNF—α mRNA的表达。结果：烫伤后巨噬细胞分泌TNF—α亢进，于伤后12h达到高峰，为(1085．65&;#177;122．99)ng／L，较正常对照组明显增高(t=14.92，P&;lt;0．01)。NF—κB活性于伤后明显活化，于2h达到了高峰(t=13．31，P&;lt;0．01)，为(56．8&;#177;73)RDU，早于TNF—α的增多。与正常对照组相比．IκB—α的表达于烫伤后2h显著下降(t=4．23，P&;lt;0．01)，达到0．632&;#177;0.086，以后上升，至24h达到高峰(t=7．06，P&;lt;0．01)，为1．161&;#177;0．097，48h稍降(t=4．82，P&;lt;0．01)，为1．149&;#177;0.167以伤后12h为调控点，予PDTC后NF—κB活性及TNF—α mRNA表达量均显著下降(P&;lt;0．01)。结论：烫伤后NF—κB活性及TNF—α表达明显增强，IκB—α对NF—κB在高水平上维持着一种制约关系。烫伤后小鼠腹腔巨噬细胞内NF—κB信号途径参与TNF—α表达的调控。     

靶向TNF-α基因shRNA干扰片段的筛选和重组体的构建

本研究利用RNA干扰技术，筛选出可以高效、特异性抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的小发夹状RNA（shRNA）片段，设计并构建重组质粒，进行序列分析，为探索TNF-α相关疾病的基因治疗提供新途径。取原代培养小鼠腹腔巨噬细胞，置于15％ DMEM中，调细胞浓度为2×10^7／L，接种于6孔板，3ml／well；细胞用脂多糖（LPS）激活，ELISA法测不同时间培养上清中TNF—α的浓度；将针对TNF-α基因的5段shRNA干扰片段的表达框经PCR扩增、纯化后，与转染试剂混合转染入巨噬细胞，细胞用LPS激活24小时后用ELISA法测培养上清中TNF-α的浓度，RT—PCR法测细胞TNF-α mRNA的表达；将最有效抑制TNF-α表达的干扰片段插入质粒载体，转化Ecoli DH5α感受态菌株，提取质粒，进行测序分析。结果表明：LPS刺激巨噬细胞24小时后，细胞分泌TNF—α达高峰；转染了干扰序列1的细胞培养上清中TNF—α浓度与对照组相比下降最明显（P〈0．05），达59．46％，TNF—α mRNA的表达被抑制了61．2％；将干扰序列1DNA序列克隆到载体上，经测序鉴定确实为所需序列。结论：成功筛选出靶向TNF-α基因的shRNA干扰片段并构建重组质粒，可进一步利用克隆所得到的shRNA干扰TNF-α mRNA的表达，为TNF—α相关疾病的基因治疗提供新手段。     

硝基精氨酸-赖氨酸三肽对大鼠一氧化氮合酶抑制作用的研究

目的:研究硝基精氨酸赖氨酸三肽对组成型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS )的抑制程度.方法:①用大鼠腹腔巨噬细胞作培养,检测硝基精氨酸赖氨酸三肽对iNOS的抑制程度.②用大鼠离体主动脉条孵育,检测硝基精氨酸赖氨酸三肽对cNOS的抑制程度.结果:①硝基精氨酸赖氨酸三肽(1×10-4 mol/L )可显著抑制大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO,P<0.01),较NG硝基 L精氨酸(LNNA)作用增强(P<0.0 1).②硝基精氨酸赖氨酸三肽(1×10-4 mol/L)可显著减少大鼠腹腔巨噬细胞内环磷酸鸟苷 (cGMP)水平(P<0.01),较LNNA 作用增强(P<0.05).③与LNNA相比,硝基精氨酸赖氨酸三肽(1.5×10-4 mol/L)对大鼠主动脉壁cNOS的抑制程度减小(P<0.05).结论:①硝基精氨酸赖氨酸三肽抑制大鼠腹腔巨噬细胞内iNO S活性显著强于LNNA,而抑制大鼠血管壁cNOS活性显著弱于LNNA .     

生脉注射液对蛋白激酶C调控LPS诱导iNOS基因表达的影响

目的：探讨生脉注射液对蛋白激酶C调控LPS诱导单核／巨噬细胞iNOS基因表达的影响。方法：用蛋白激酶C（protein kinase C,PKC)活性测定法研究LPS对PKC的激活作用及Griess还原法测定NO的生成；用基因重组技术构建iNOS荧光素酶报告基因载体；用基因转染及报告基因检测等方法研究生脉注射液调控LPS刺激RAW264．7细胞对iNOS启动子活性的诱导作用及其与PKC的关系。结果：生脉注射液可负调节LPS刺激RAW264．7细胞引起的PKC磷酸化激活和膜移位，并可延长PKC抑制剂H－7下调NO作用时间；荧光素酶表示基因实验结果显示，生脉注射液可抑制iNOS启动子的转录活性，并可增强H－7和钙离子通道阻滞剂Verapamil作用。结论：生脉注射液抑制LPS刺激RAW264．7细胞所致的NO生成增加，其机制之一可能是通过抑制PKC激活和细胞钙增加而影响iNOS启动子的转录活性。     

钛颗粒通过NF-κB信号通路上调炎症因子表达

目的研究假体磨损颗粒是否通过核转录因子-κB（NF-κB）信号途径上调巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、肿瘤坏死因子仪（TNF-α）表达。方法培养小鼠巨噬细胞,用不同浓度钛颗粒刺激以及刺激不同时间,通过Elisa和RT-PcR方法检测细胞MIF、TNFα的表达量以及与DNA结合的NF-κB（p65）的蛋白量。结果不同浓度钛颗粒刺激24h后,随着钛浓度增加,MIF、TNF仪蛋白量和TNFα mRNA表达逐步增加。0．1％钛颗粒刺激后,MIF、TNFα蛋白在12h开始显著性升高,24h达到高峰,36h开始下降;与DNA结合的NF-κB蛋白量在1h开始升高,3h达到高峰,6h开始下降。用PDTC阻断后,MIF、TNFα蛋白的表达明显被抑制。结论钛颗粒刺激后,先是NF-κB活化,然后上调MIF和TNF仪表达。通过这些炎症因子,假体磨损颗粒促进假体周围炎症反应,导致假体无菌性松动。     

创伤性休克致急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α IL-18mRNA表达的变化及地塞米松的影响

目的　探讨创伤性休克致急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 18mRNA表达水平的变化及地塞米松对其的影响。方法　将大鼠随机分为正常对照组、创伤性休克生理盐水处理组、创伤性休克地塞米松治疗组 3组 ,在创伤性休克打击前予地塞米松 (10mg/kg)对治疗组预处理 ,测定正常对照组、创伤性休克生理盐水处理组及地塞米松治疗组 1、2、4、6、8h各时点肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 18mRNA表达水平。结果　大鼠遭受创伤性休克打击后 ,肺泡巨噬细胞TNF -αmRNA表达明显增加 ,2h即达高峰 (P <0 0 1) ,然后逐步下降 ,但 8h仍高于正常水平 (P <0 0 5 ) ;IL - 18mRNA表达亦显著增加 ,4h达高峰 (P <0 0 1) ,然后逐步下降 ,8h恢复至正常水平 ;地塞米松能显著降低肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 18mRNA的峰值浓度及各时点值 ,并能一定程度改善PaO2 及肺组织损伤。结论　创伤性休克早期大鼠肺泡巨噬细胞TNF -α、IL - 18mRNA表达均增加 ,地塞米松能抑制TNF -α、IL - 18mRNA的表达 ,在ALI早期应用能减轻病变。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

ICIQ-SF问卷在尿失禁诊断中的应用研究

目的：分析ICIQ-SF问卷对于诊断不同类型尿失禁（UI）的价值。方法：对2007年8月—2009年7月期间北京大学深圳医院泌尿外科就诊的118例UI女性患者进行研究。由患者自行填写ICIQ-SF问卷表,然后接受尿动力学检查。分别计算ICIQ-SF诊断不同类型UI的敏感性、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值和似然比LR值。结果：根据ICIQ-SF问卷,46/118例（39%）患者表现为压力性UI,18/118例（15%）为急迫性UI,54/118例（46%）为混合性UI。ICIQ-SF诊断压力性UI、急迫性UI和混合性UI的敏感性分别为58%,52%和75%;特异性分别为74%,95%和63%。ICIQ-SF诊断压力性UI、急迫性UI和混合性UI阳性预测价值分别为61%,72%,38%;阴性预测价值分别为72%,88%,89%。结论：ICIQ-SF问卷对于诊断不同类型UI具有重要的临床意义。ICIQ-SF问卷在临床实践中具有良好的应用前景。     

床头抬高报警器对ICU护士床头抬高达标率的影响

目的探讨有效提高ICU护士对机械通气患者床头抬高达标率的方法。方法根据病房单元的布局,将连云港市第一人民医院综合ICU的15张病床分为试验组(1~7床)和对照组(8~13床和15床),将综合ICU的39名护士随机分入试验组(n=19)和对照组(n=20)。两组病床均用量角器标示床头抬高角度,试验组病床安装自制床头抬高报警器,对照组常规管理。每天检查床头抬高角度5次(08:00、12:00、14:00、18:00、01:00),比较两组护士床头抬高的达标率。结果试验组护士对床头抬高30°~45°的达标率为100%,对照组为46.8%;且试验组在各个时间点对床头抬高30°~45°的达标率均高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.01)。结论使用床头安装床头抬高报警器能有效提高ICU护士对机械通气患者床头抬高30°~45°的达标率。     

护士长管理素质与护士工作压力相关性的调查与分析

目的 :探讨病房护士长的管理素质与护士工作压力的相关性。方法 :采用问卷调查法对 12 5名护士进行调查 ,调查结果用相关性分析进行统计学处理。结果 :护士长的管理素质与护士工作压力呈负相关。结论 :病房管理者只有努力提高自身的管理素质才能相应地减轻护士的工作压力     

Arthritis of the base of the thumb

The purpose of this article is to outline the pathophysiology and epidemiology of arthritis of the base of the thumb. The usual presentation and diagnosis will be discussed along with the current conservative treatment options. Surgical treatment options are determined by the stage of the arthritis as well as the demands of the patient. The current standard surgical treatment options will be reviewed along with their results in the literature.     

血红蛋白分析对地中海贫血筛查的评估

目的:评估血红蛋白分析对地中海贫血(Thal)诊断能力。方法:用HLC-723G7自动血红蛋白分析仪对以临床表现流行病学资料和醋纤薄膜电泳等确定的115例Thal患者进行血红蛋白分析,结合分子诊断评估诊断价值。结果:以HbA2≥5.5%作为血红蛋白分析对β-Thal的诊断标准,则与DNA分析的符合率为81.5%;以HbA2≤2.5%为仪器对α-Thal的诊断标准,则与DNA分析的符合率为92.5%。结论:血红蛋白分析可提供α、βThal的诊断信息,若能结合更多的临床和DNA分析数据,可作为α、β地中海贫血的确诊手段。