低频超声增强双氢青蒿素诱导前列腺癌 PC-3细胞凋亡的生物学效应研究

目的研究低频超声能否增强双氢青蒿素(DHA)对前列腺癌PC-3细胞种植瘤的致凋亡作用,并探讨其对DHA诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡增敏作用的机理。方法采用前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠种植瘤模型,20只实验裸鼠随机分为4组:空白对照组、单纯DHA组、单纯超声组和超声+DHA组,经过13d共计7次药物或加超声干预后,采用免疫组织化学法(SP)检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、VEGF、Caspase-3及CHOP的表达水平。结果观察瘤体外形见空白对照组与单纯超声组肿瘤体积稍大,切开瘤体见内部均有明显液化坏死区域,免疫组织化学结果显示超声+DHA组、单纯DHA组和单纯超声组的Bcl-2及VEGF表达均低于空白对照组,超声+DHA组、DHA组和超声组的Bax、Caspase-3及CHOP表达均高于空白组。结论对正常细胞不致明显损伤的低频超声,可致前列腺癌PC-3种植瘤细胞相关凋亡基因的改变,DHA可单独致PC-3细胞凋亡及相关基因的改变,超声能明显增强DHA诱导前列腺癌PC-3种植瘤细胞凋亡作用。     

米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的实验研究

我国前列腺癌发病率呈逐年上升趋势，而且激素非依赖型前列腺癌治疗效果不佳。米非司酮（mifepristone，RU486）是一种类固醇激素受体拮抗剂，近年来有研究表明其具有抗肿瘤的活性，能诱导一些肿瘤细胞凋亡，如乳腺癌、子宫颈癌等，但其诱导肿瘤细胞的凋亡机制还不完全清楚，在激素非依赖型前列腺癌方面的研究较少。本研究旨在探讨米非司酮诱导激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制。     

熊果酸诱导前列腺癌细胞株PC-3凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人前列腺癌细胞株PC-3细胞周期、凋亡的影响及其作用机制.方法:人前列腺癌细胞株PC-3以不同浓度的UA作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(4 methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT),免疫组织化学SP法,流式细胞术(Flow cytometry,FCM),Western blot等实验方法检测PC-3细胞的增殖抑制情况,细胞周期和凋亡率的变化,以及细胞内bcl-2、bax 2个重要的细胞凋亡相关基因和细胞凋亡相关特殊蛋白cox-2、caspase 3表达的变化.结果:UA对PC-3细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强.24、48 h和72 h 3个时间段UA分别作用于PC-3细胞后的IC_(50)分别为50.87、37.91 μmol/L和27.86μmol/L;熊果酸作用后PC-3细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G_1期,进入S期的细胞减少.UA能够诱导PC-3细胞凋亡,经过24、48 h和72h 3个时间段UA浓度50μmol/L作用后,细胞凋亡率为6.21%、7.81%和13.31%;细胞内bcl-2和cox-2的表达随着药物浓度增加逐渐减少;bax和caspase 3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加.结论:UA能够抑制PC-3细胞的增殖,并使细胞大量累积于G_1期,进入s期的细胞减少.可能通过使bcl-2和cox-2的表达减少、bax和caspase 3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡.     

原花青素诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的机制研究

目的：探讨原花青素在体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡的机制。方法：体外培养人前列腺癌PC-3细胞株,用100,200,300μg／ml原花青素作用24h。荧光素标记的连接素V（Annexin V—fluoresein isothiocyanate,Annexin V—FITC）和碘化吡啶（propidium iodide,PI）双染检测原花青素对PC-3细胞凋亡的影响,采用流式细胞术检测以不同浓度原花青素作用后PC-3细胞线粒体膜电位（△ψm）的变化。结果：100μg／ml原花青素作用细胞24h,5．64％的细胞出现早期凋亡,84．7％的P03细胞呈现线粒体膜电位降低;300vg／ml原花青素组P＆3细胞凋亡率和坏死率分别为44．86％、50．81％。结论：源花青素可在体外诱导PC-3细胞凋亡,其机制与降低线粒体膜电位有关。     

白藜芦醇诱导前列腺癌细胞系PC-3凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇（resveratroi，Res）诱导人前列腺癌细胞系PC-3凋亡及其机制。方法应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、软琼脂集落生长试验和流式细胞术测定Res对PC-3的增殖抑制、集落生长抑制、周期阻滞和诱导凋亡作用，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测对凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响。结果Res具有时间和剂量依赖性增殖抑制、G0／G1期阻滞和诱导凋亡作用，作用72hIC50为0．39g／L，Res0．1g／L作用2天对PC-3细胞集落生长抑制率为88．9％，Res0．5g／L作用2天G0／G1期细胞比例从42．30％增高至75．20％。Res可以下调beb2基因／蛋白，上调bax的表达。结论Res可能通过抑制PC-3细胞的集落生长、增殖抑制、G0／G1期阻滞、下调bcl-2基因，上调bax基因表达等作用机制诱导前列腺癌细胞凋亡。     

双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞UCHL1基因转录调节的影响及机制

目的：探讨双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对前列腺癌PC-3细胞泛素羧基末端水解酶1（ubiquitin carboxyl-ter－minal hydrolase L1,UCHL1）基因转录调节的影响及机制。方法：将PC-3细胞分为空白组、DHA组及5-杂氮-2’脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,５-Aza-CdR）组（2.5 μmol/L 5-Aza-CdR）。空白组为不加药物;DHA组根据浓度的不同再分为DHA1、DHA2、DHA3、DHA4组,DHA终浓度分别为12.5、25、50、100 μmol/L。培养48 h后,收集细胞。应用real-time PCR检测 UCHL1及 DNA甲基化转移酶（DNA methyltransferase,DNMTs）的mRNA表达;亚硫酸氢盐基因组测序法（bisulfite genomic sequencing,BGS）检测UCHL1 CpG岛的甲基化状态;Western blot法检测 UCHL1蛋白的表达。结果：DHA和５-Aza-CdR分别处理细胞后,UCHL1的启动子甲基化水平明显降低（χ2=150.1,P=0.000; χ2=127.7,P=0.000）;UCHL1 mRNA表达水平明显上调（P均<0.05）;UCHL1蛋白表达水平上升（P均 <0.05）,双氢青蒿素处理后甲基化转移酶的 mRNA表达减少（P均<0.05）。结论：DHA可逆转 PC-3细胞 UCHL1基因的甲基化状态,其可能通过下调DNMTs的表达而影响 DNA的甲基化过程。     

VP-16诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡的研究

为研究ＶＰ－１６对雄激素非依赖性前列腺癌细胞ＰＣ－３凋亡的诱导作用,应用ＨＥ染色观察细胞的形态学改变,以ＤＮＡ凝胶电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）分析细胞凋亡和细胞周期分布,同时应用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究ＶＰ－１６对ＰＣ－３细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明,（１）凋亡的ＰＣ－３细胞呈明显的形态学改变;（２）ＤＮＡ断裂呈梯形变化;（３）ＰＣ－３细胞凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和时间延长逐渐增高;（４）ＶＰ－１６能够明显抑制ＰＣ－３细胞ＤＮＡ的合成。提示ＶＰ－１６可诱导前列腺肿瘤细胞凋亡。     

苦参碱对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:探讨苦参碱治疗前列腺癌的可行性及机制。方法:用不同药物浓度苦参碱诱导PC-3M细胞不同时间后,在相差倒置显微镜观察细胞形态;用MTT法测细胞的增殖抑制情况;用流式细胞仪(FCM)进行细胞凋亡率检测;RT-PCR法检测PC-3M细胞内bcl-2、bax基因表达水平。结果:用苦参碱干预后随着药物浓度增加PC-3M细胞株生长明显受抑制;在FCM上可见凋亡率逐渐增加;PC-3M细胞中bcl-2 mRNA表达水平逐渐下调,bax mRNA表达水平逐渐上调,且呈时间-浓度依赖性。结论:苦参碱体外能有效抑制前列腺癌细胞株生长,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调bcl-2表达及上调bax水平有关。     

丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。 方法：前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量丁酸钠作用后,相差显微镜观察细胞形态变化,MTT测定丁酸钠对PC-3M细胞的增殖抑制率,吖啶橙/溴化乙锭染色检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡峰。 结果：丁酸钠对PC-3M细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性;并使PC-3M细胞产生凋亡形态学变化;细胞周期被阻滞于G₁/G₀期和G₂/M 期,S期细胞减少,有亚G₁峰出现。结论：丁酸钠对PC-3M细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。     

青蒿琥酯诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡

目的研究青蒿琥酯(artesunate,ART)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡以及细胞内游离Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响。方法ART处理PC-3细胞后,透射电镜观察细胞超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,激光共聚焦扫描显微镜检测PC-3细胞[Ca2 ]i变化。结果ART诱导PC-3细胞发生典型的凋亡形态学变化和G2/M期阻滞;ART100,10,1μmol/L组及阳性对照组的凋亡率分别是8.9%,10.7%,21.0%,24.6%,均高于阴性对照组(P<0.05)。ART作用PC-3细胞后,[Ca2 ]i在15~30min内显著升高,0.5~1h维持在较高水平,4~24h后降到阴性对照组水平。结论青蒿琥酯有诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡和周期阻滞的作用,上调[Ca2 ]可能在其抗肿瘤机制中起重要作用。     

辛伐他汀对前列腺癌PC-3细胞影响的实验研究

目的:观察辛伐他汀对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡的影响,探讨辛伐他汀对前列腺癌的作用。方法:MTT比色法检测PC-3细胞的增殖;Hoechst 33258染色后荧光显微镜法观察PC-3细胞凋亡的形态学改变,并计算凋亡核百分率;Annexin V-FITC/PI双染色,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:(1)辛伐他汀可显著抑制PC-3细胞的体外增殖,并呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。(2)Hoechst 33258染色显示PC-3细胞经辛伐他汀(20?mol/L)分别处理24h和48h后,细胞出现凋亡,形态学变化表现为凋亡细胞体积缩小,核固缩,镜下细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染。FACS检测结果显示,20?mol/L辛伐他汀处理12h、24h、48h后的凋亡细胞数分别为14.81±1.08%、23.42±2.33%、40.77±4.06%。PC-3细胞分别经10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L辛伐他汀处理48h后,凋亡细胞数逐渐增多,凋亡核百分率计数分别为(11.20±3.33)%,(31.20±3.08)%,(56.24±4.50)%。FACS检测结果显示,10μmol/L、20μmol/L、40?mol/L辛伐他汀处理PC-3细胞48h后的凋亡细胞数分别为17.26±1.44%、32.45±2.56%、60.47±3.98%。结论:(1)辛伐他汀能明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的体外增殖。(2)辛伐他汀可诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡。     

双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞体内生长及Caspase-3表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤生长的抑制作用及对半胱天冬酶_3（Caspase-3）表达的影响,并探讨其可能的作用机制．方法：采用人前列腺癌PC·3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机分为对照组,二甲基亚砜（DMSO）溶剂组,DHA0．1,0．2mmo/kg组．各组经13d干预后,计算抑瘤率;光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化,以Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达水平．结果：DHA0．1,0．2mmol／kg组瘤质量明显〈对照组及DMSO溶剂组（P〈0．05）,DHA0．1,0．2mmol／kg组抑瘤率分别为69．221％,63．186％．光镜及电镜可观察到典型的凋亡细胞和凋亡小体;Hoechst33258染色可见DHA0．1,0．2mmol／kg组凋亡细胞明显增多,其凋亡细胞密度显著增大（P〈0．05）;免疫组化结果显示,DHA0．1,0．2mmol/fkg组Caspase-3表达明显升高（P〈0．05）．结论：DHA能够抑制前列腺癌PC．3细胞裸鼠种植瘤的生长,其机制可能与上调凋亡相关基因Caspase-3表达有关．     

双氢青蒿素促胃癌细胞凋亡的作用

目的 研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)生长抑制和促凋亡的作用.方法 用WST-1方法检测DHA处理后的胃癌细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 不同浓度的DHA可以抑制胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)的增殖,且呈现浓度依赖性增长趋势.DHA作用48 h后,胃癌细胞的周期阻滞在S期,同时有诱导胃癌细胞凋亡的作用;DHA作用24 h和48 h后,对胃癌细胞的迁移能力有抑制作用.结论 DHA可有效地抑制胃癌细胞的增殖,并促进其凋亡.     

一种新型含硒化合物诱导PC-3前列腺癌细胞凋亡及其体内抑瘤作用的研究

目的　探讨新型含硒化合物BBSKE(1,2 [二 (1,2 苯并异硒唑 3(2H) 酮 ) ]乙烷 )对PC 3前列腺癌细胞的增殖及凋亡的影响 ,观察其对小鼠前列腺癌的体内抑瘤作用。方法　培养PC 3前列腺癌细胞 ,用MTT法检测了不同浓度的BBSKE对其增殖的影响 ,用荧光显微镜、DNA电泳和流式细胞仪观察BBSKE对细胞凋亡的诱导作用 ,并检测BBSKE对PC 3细胞bcl 2和bax蛋白表达水平及半胱氨蛋白水解酶 3活性的影响。用TRAMP C2小鼠前列腺癌细胞皮下注射C5 7BL/ 6小鼠 ,建立小鼠前列腺癌模型 ,观察BBSKE在小鼠体内的抗前列腺癌作用。结果　BBSKE可以显著抑制PC 3细胞的体外增殖 ,其 4 8h的IC50 值为 17 90 μmol/L ,而阳性对照组顺铂为 15 0 μmol/L。同时BBSKE可以诱导PC 3细胞凋亡 ,2 0 μmol/L的BBSKE作用PC 3细胞 4 8h凋亡发生率达 2 6 32 % ,显著高于未经处理的对照组的 1 75 % (P <0 0 1)。细胞中bcl 2表达减低 ,bax表达无明显变化 ,半胱氨蛋白水解酶 3活性显著增高。动物实验也表明其对小鼠体内前列腺癌的生长有抑制作用 ,抑瘤率达 4 0 % ,顺铂对照组为 4 8%。结论　新型含硒化合物BBSKE可以抑制PC 3细胞增殖并促进其凋亡 ,其作用可能是通过降低细胞内的bcl 2 ,增加半胱氨蛋白水解酶 3活性而实现的 ;在前列腺癌的动物模     

冬凌草甲素诱导人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡及其机制

目的:探讨冬凌草甲素抑制人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3细胞的增殖、诱导其凋亡的作用.方法:用不同浓度的冬凌草甲素干预PC-3细胞,通过MTT实验和细胞的药物浓度-时间生长曲线分析观察其对PC-3细胞活力的影响;用流式细胞仪分析PC-3早期凋亡细胞的百分率;Western印迹检测Bax Bcl-2和caspase...     

EGCG诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡及对Survivin蛋白表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocat-echin-3-gallate,EGCG)对人前列腺癌细胞PC-3凋亡及对其Survivin蛋白表达的影响。方法使用不同浓度的EGCG(0、20、40、80μg/mL)处理前列腺癌细胞株PC-3,通过细胞增殖曲线实验检测EGCG对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度EGCG处理PC-3细胞48h后对细胞周期及凋亡的影响;用RT-PCR法检测各浓度EGCG作用48h后PC-3细胞中Survivin基因的表达差异,使用Western blot进行确认。结果 EGCG可以抑制PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用随EGCG浓度的增加而增强(P<0.05);Sur-vivin在PC-3细胞中高表达,EGCG促使PC-3细胞的Survivin表达下调,其表达水平随EGCG浓度的增加而减少(P<0.01)。结论 EGCG能下调PC-3细胞中Survivin蛋白的表达,这可能是EGCG抑制PC-3细胞增殖、诱导其凋亡的关键机制。     

前列腺癌细胞凋亡相关基因表达及其意义

前列腺癌的治疗方法最主要是激素治疗，但当其发展为雄激素非依赖型时，对激素治疗的疗效甚微。需要其他治疗方法的配合，而前列腺癌细胞上有多种细胞凋亡相关基因表达，各种细胞凋亡相关基因及其间的相互作用影响着前列腺癌细胞的生长和分化，本主要介绍前列腺癌的凋亡相关基因及其在化疗，放疗及基因治疗等不同方法中的意义。     

双氢青蒿素对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

研究双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对人胃癌细胞BGC-823细胞增殖、凋亡的影响及机制。 方法采用噻唑蓝（methylthiazoletetrazolium,MTT）法检测DHA对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用;用流式细胞技术、荧光显微镜、透射电子显微镜检测经DHA处理后BGC-823细胞的凋亡率及形态特征的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因Bax、Caspase-3、Caspase-8表达的变化。 结果MTT分析表明,DHA作用可明显抑制BGC-823细胞的增殖,抑制率随药物浓度的增加而增大,且随着时间的延长而增大,具有显著的剂量和时间依赖性（P＜0.01）,半数抑制浓度(IC50值)为3.4 μmol/L。流式细胞术检测结果显示,随着DHA药物浓度的增加,凋亡峰愈加明显,并呈现出剂量依赖性（P＜0.01）。形态学的观察结果：BGC-823细胞在DHA作用下出现典型的凋亡形态。Western印迹显示：Bax、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达随着DHA给药浓度的增加而增高。 结论DHA对BGC-823细胞增殖有抑制作用;DHA通过上调Bax、Caspase-3、Caspase-8表达促进BGC-823细胞凋亡。     

AG-490诱导人前列腺癌细胞凋亡的研究

目的 研究抑制Janus kinase-signal transducer and activator(JAK-STAT)途径的磷酸化，诱导前列腺癌细胞凋亡的效应。方法 不同浓度的JAK2磷酸化抑制剂AG-490处理人前列腺癌PC-3M细胞，MTT比色法和流式细胞术检测半数细胞生长抑制剂量(IC50)和细胞凋亡率，透射电镜和TUNEL法观察凋亡形态。结果 AG-490能够抑制PC-3M细胞增殖并表现为剂量依赖性，48h的IC50为56．8μmol／L；用AG-490处理PC-3M细胞后可观察到典型的细胞凋亡形态。结论 JAK-STAT途径磷酸化在支持PC-3M细胞增殖过程中起重要作用，AG-490能够有效抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖并促进其凋亡。