巴戟天中水晶兰苷的提取分离及其含量测定

目的提取分离巴戟天茎中的水晶兰苷并测定巴戟天不同部位中水晶兰苷含量。方法巴戟天茎用80％的乙醇提取，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取物上D101大孔树脂富集环烯醚萜类成分，反复常压正相及反相柱层析，分离得水晶兰苷。采用高效液相色谱法测定巴戟天茎、根、叶中水晶兰苷含量。结果从巴戟天茎中分离得到水晶兰苷。水晶兰苷在巴戟天茎、根、叶的含量分别为18．11、12．22及11．03mg·g^-1。结论巴戟天茎中可以分离得到水晶兰苷，含量比巴戟天根和叶高。     

基于水晶兰苷含量优选制巴戟天炮制工艺

摘 要 目的：以制巴戟天中水晶兰苷含量为指标,优选制巴戟天炮制工艺。 方法: 以甘草用量、拌炒时间和煮制锅温为考察因素进行正交试验设计,采用HPLC法测定各样品中水晶兰苷含量：色谱柱为Kromalsil C₁₈（200 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（90∶10）;柱温为30℃;流速为1 ml·min^-1;检测波长为233 nm;进样量为5 μl。结果: 制巴戟天经不同工艺炮制后,各试验号水晶兰苷平均含量分别为0.535 6,0.582 4,0.523 4,0.589 1,0.578 6,0.587 8,0.575 2,0.609 1,0.558 7 mg·g^-1,说明制巴戟天炮制工艺的改变对水晶兰苷的含量有影响。结论:基于水晶兰苷含量的制巴戟天最佳炮制工艺为：甘草用量为6%,拌炒时间为10 min,煮制锅温为100 ℃。     

UPLC法测定脏连丸中6个生物碱和4个黄酮成分的含量

摘要：目的:建立UPLC法同时测定脏连丸中小檗碱、药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀6个生物碱类成分和黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素4个黄酮类成分的含量。方法:采用Waters AcquityBEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7μm）色谱柱,柱温:35℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:0.2 ml·min-1,检测波长:278 nm、345 nm。结果:在一定浓度范围内,脏连丸中10个成分均呈良好线性关系（r> 0.999）,平均加样回收率为99.41%～102.90%（RSD <3.0%,n=9）。12批样品中小檗碱、药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量分数分别为4.022 0～4.955 0 mg·g-1,0.991 0～1.338 0 mg·g-1,1.002 0～1.614 0 mg·g-1,0.641 0～1.133 0 mg·g-1,1.255 0～1.966 0 mg·g-1,0.859 0～1.336 0 mg·g-1,5.036 0～7.011 0 mg·g-1,0.987 0～1.314 0 mg·g-1,0.415 0～0.901 0mg·g-1,0.201 0～0.345 0 mg·g-1。结论:经方法学验证,所建立的UPLC法可同时测定脏连丸中10个成分的含量。     

大蓟炮制前后指纹图谱及主要成分含量变化研究

摘要：目的:建立大蓟及其炮制品的HPLC指纹图谱,并对其含有8个有效成分进行定量分析。方法:采用HPLC法,色谱柱:Waters XBridgeTM?C18（2）（250 mm×4.6 mm, 5μm）;流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:330 nm;流速:1.0 ml·min-1。建立大蓟和大蓟炭HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）》进行相似度评价及共有峰指认,并采用上述HPLC方法测定大蓟和大蓟炭中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、蒙花苷、柳穿鱼叶苷、刺槐素、柳穿鱼黄素的含量。结果:建立了大蓟和大蓟炭指纹图谱,大蓟共标定了18个共有峰,大蓟炭共标定了22个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.90。大蓟中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、蒙花苷、柳穿鱼叶苷、刺槐素、柳穿鱼黄素的含量分别为0.531 0～0.952 0 mg·g-1、1.447 0～2.174 0 mg·g-1、0.417 0～0.802 0 mg·g-1、0.518 0～0.969 0 mg·g-1、4.158 0～7.412 0 mg·g-1、7.006 0～9.122 0 mg·g-1、0.346 0～0.715 0 mg·g-1、0.069 0～0.266 0mg·g-1,大蓟炭中上述8个成分的含量分别为0.318 0～0.703 0 mg·g-1、1.003 0～1.501 0 mg·g-1、0.125 0～0.362 0 mg·g-1、0.859 0～1.351 0 mg·g-1、1.008 0～1.625 0、0.458 0～0.729 0 mg·g-1、4.556 0～5.699 0 mg·g-1、7.588 0～9.654 0 mg·g-1。大蓟HPLC指纹图谱在炮制前后发生显著变化,炮制后新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、蒙花苷和柳穿鱼叶苷含量显著减少,咖啡酸、刺槐素和柳穿鱼黄素含量显著增加。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱及多成分分析方法可有效区分大蓟及其炮制品。     

HPLC测定巴戟天中的水晶兰苷

目的 以水晶兰苷为指标,评价商品巴戟天的质量.方法 采用HPLC法,色谱柱为Kromalsil C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(5:95→8.8:71.2,15 min),流速为1 ml·min-1;检测波长为231 nm;柱温为25℃.结果 商品巴戟天中水晶兰苷的含量差异较大,仅广东省德庆县高良镇巴戟天规范化种植基地的4.5年生样品中水晶兰苷的含量较为稳定.结论 商品巴戟天的质量参差不齐,应从源头上控制巴戟天的质量.     

RP-HPLC法同时测定巴戟天中4种蒽醌类化合物的含量

目的：建立以反相高效液相色谱法同时测定巴戟天中2-羟基-3-羟甲基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、甲基异茜草素4种蒽醌类化合物含量的方法。方法：色谱柱为Extend-C1（8250mm×4.6mm,5μm）,柱温为30℃,流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈（梯度洗脱）,流速为1.0mL.min-1,检测波长为277nm。结果：2-羟基-3-羟甲基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚、甲基异茜草素进样量均在0.2～250μg·mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r=0.9999或0.9998）;平均回收率分别为98.69%、99.67%、97.91%和99.74%,RSD分别为0.90%、1.97%、1.14%、0.41%（n=6）。结论：本法简便、准确、重复性好,可用于巴戟天中4种蒽醌类化合物的含量测定。     

HPLC法测定巴戟天药材中甲基异茜草素的含量

目的 建立高效液相色谱法测定巴戟天中甲基异茜草素含量的方法.方法 色谱柱为ODS-BP C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1 %磷酸（58：42）,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,检测波长为277 nm.结果 甲基异茜草在4.24 μg·ml-1～42.4μg·ml-1范围内呈现良好的线性关系（r=0.9997）;平均加样回收率为99.8%,RSD为0.5%（n=6）.结论 本法简便、准确,结果准确可靠、重现性好,可用于巴戟天中甲基异茜草素的含量测定.     

反相高效液相色谱法对不同来源西红花药材中西红花苷-1、苷-2的定量分析

目的 :测定西红花药材中西红花苷 1、苷 2的含量。方法 :采用反相高效液相色谱 ,以Nova PakC18( 4 μm ,150mm×3 .9mm)柱为色谱柱 ,甲醇 水 ( 55∶45)为流动相 ,测定波长为 ( 4 4 0± 1)nm。结果 :西红花苷 1的平均回收率为 99.53 % ,日内、日间RSD分别为 1.0 % ,1.6 % ;西红花苷 2的平均回收率为 99.43 % ,日内、日间RSD分别为 1.3 % ,1.8%。进口西红花商品药材中有 2种未测出或只有痕量 ,3种含量较低 (西红花苷 1为 80 .9～ 10 2 .0mg·g- 1生药 ,西红花苷 2为 44.5～ 62 .3mg·g- 1生药 ) ,而国产西红花商品药材中含量最高 (西红花苷 1为 176 .2mg·g- 1生药 ,西红花苷 2为 10 8.5mg·g- 1生药 )。结论 :建立的RP HPLC法测定不同来源西红花药材中西红花苷 1、苷 -2的含量 ,操作简便 ,结果准确。     

HPLC法测定不同产地川射干中6个活性成分的含量

摘要：目的:比较不同产地川射干中射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素6个活性成分的含量,为该药材资源的综合开发利用提供科学依据。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Extend C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇（A）-含0.3%甲基-β-环糊精的0.2%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长为265nm,柱温30℃。结果:在上述条件下,射干苷、鸢尾甲苷A、鸢尾甲苷B、野鸢尾苷、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素平均回收率分别为100.3%,98.8%,98.1%,101.0%,101.3%,100.8%,RSD分别为0.70%,1.53%,0.39%,1.57%,1.41%,0.98%（n=6）;进样量分别在0.040～1.213μg,0.010～0.306μg,0.017～0.498μg,0.006～0.171μg,0.006～0.169μg,0.003～0.090μg范围内线性关系良好（r≥0.999 4）; 25批样品中6个成分的含量分别为5.923 5～43.514 4 mg·g-1,1.385 6～9.253 1 mg·g-1,3.526 2～16.028 5 mg·g-1,0.985 6～7.654 1 mg·g-1,2.965 6～12.354 1 mg·g-1,0.856 2～5.146 5 mg·g-1。结论:本试验所建立的方法可为川射干的质量控制提供科学的依据。     

HPLC法测定赶黄草根、茎、叶中6种成分成分

摘要：目的:比较不同产地赶黄草根、茎、叶中6种成分的含量,为该药材资源的综合开发利用提供科学依据。方法:采用Shim-pack GIST C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长:340 nm,流速:1.0 ml·min-1,柱温:35℃,进样量:20μl。采用SPSS 22.0、SIMCA 14.0统计软件对赶黄草根、茎、叶中6种成分的含量进行主成分分析与聚类分析。结果:芦丁、没食子酸、槲皮素、原儿茶酸、芹菜素、山柰酚质量浓度分别在0.028 0～0.570 0 mg·ml-1（r=0.999 7）、0.012 0～0.246 0 mg·ml-1（r=0.998 3）、0.034 0～0.682 0 mg·ml-1（r=0.999 9）、0.084 0～1.683 0 mg·ml-1（r=0.999 5）、0.007 0～0.144 0 mg·ml-1（r=0.997 9）和0.010 0～0.203 0 mg·ml-1（r=0.998 6）范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率在98.4%～100.0%,RSD在0.04%～1.42%之间（n=6）。聚类分析将赶黄草按根、茎和叶分为2大类,其中赶黄草叶与其余2个部位的差异较明显,主成分分析出不同药用部位赶黄草药材最佳入药部位为叶。结论:赶黄草的根、茎和叶中化学成分差异较大,建议在调配以赶黄草入药的方剂过程中应综合考虑饮片中根、茎和叶的比例,更好地提高药物疗效。     

兔眼结膜中阿奇霉素的浓度测定及其药动学

目的建立兔眼结膜中阿奇霉素的LC-MS/MS检测方法,研究阿奇霉素滴眼液在兔眼结膜中的药动学特征。方法 184只新西兰白兔进行单次以及多次给阿奇霉素滴眼液后,于不同时间点取眼结膜样本匀浆处理后以沉淀法去除匀浆液中蛋白基质,采用LC-MS/MS法测定兔眼结膜中的阿奇霉素。以克拉霉素为内标,采用Ultimate XB-Phenyl(100 mm×3.0 mm,3μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.01 mol.L-1乙酸铵水溶液(含0.1%乙酸)(75∶25,V/V),电喷雾离子源,正离子SRM扫描分析,内标和阿奇霉素离子对分别为:m/z 748→m/z 590和m/z 749→m/z 591。结果阿奇霉素结膜浓度在10.128～8 102.4μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.998 7);最低定量限为10.128μg.L-1;批内和批间RSD均小于10%;方法准确度在85%～115%之间。单次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为2 h和2 h,ρmax分别为22.29μg.g-1和21.80μg.g-1,AUC1-192分别为528.0μg.h.g-1和536.5μg.h.g-1,t1/2分别为25.5 h和24.1 h。多次给药后参比制剂和受试制剂的药动学参数tmax分别为8 h和8 h,ρmax分别为53.10μg.g-1和51.62μg.g-1,AUC1-192分别为1 584.9μg.h.g-1和1 379.4μg.h.g-1,t1/2分别为28.8 h和23.7 h。受试制剂和参比制剂药动学行为基本一致。结论建立的检测方法简便、灵敏。多次给药后在兔眼结膜内存在蓄积现象。     

Antinociceptive anti-inflammatory effect of Monotropein isolated from the root of Morinda officinalis

The root of Morinda officinalis (Rubiaceae) is used to treat rheumatoid arthritis and impotence in the traditional Oriental medicine. To identify the antinociceptive anti-inflammatory components of this crude drug, we adopted an activity-directed fractionation approach. The active fraction of the BuOH extract of M. officinalis root was subjected to silica gel and ODS column chromatography to yield two diterpenes, compounds 1 and 2 and these were identified as monotropein and deacetylasperulosidic acid, respectively. The iridoid glycoside, monotropein, was tested for its anti-inflammatory antinociceptive effects using hot plate- and writhing antinociceptive assays and by using carrageenan-induced anti-inflammatory assays in mice and rats. Pretreatment with monotropein (at 20, 30 mg/kg/d, p.o.) significantly reduced stretching episodes and prolonged action time in mice. It also significantly reduced acute paw edema by carrageenan in rats. These results indicate that monotropein contributes to the antinociceptive and anti-inflammatory action of Morinda officinalis root.     

HPLC测定不同产地和不同部位贯叶金丝桃中的金丝桃素

目的 测定自四川、湖北、甘肃、陕西等4省48个样地的贯叶金丝桃中金丝桃素的含量,为评价药材质量提供依据.方法 采用HPLC方法,色谱柱为Agilent zorbax extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-6 mmol·L-1磷酸氢二钠(87.5∶12.5,用磷酸调pH6.5),检测波长为590 nm,柱温30℃,流速1 mL· min-,进样量10 μL.结果 金丝桃素4.04～252.5 ng与峰面积之间的线性良好(r2 =0.9996);回收率为99.69％,RSD=1.28％ (n =9).不同产地贯叶金丝桃中金丝桃素的含量为0.186 ～0.382 mg·g-1,不同部位中的含量为花＞叶＞茎;光照在提取过程中对金丝桃素检测结果的影响较大.结论 不同产地贯叶金丝桃的不同部位中金丝桃素的含量均不同.     

不同产地大蒜中硒含量的荧光测定

目的用荧光分光光度法测定大蒜样品中的硒含量。方法按照中华人民共和国国家标准(GB/T 5009.93-2003)中的食物中硒的测定。结果硒质量浓度在0.01～0.2mg·mL-1范围内与其荧光强度呈线性关系,相关系数为0.9993,精密度为2.7%。4个不同产地(新疆昭苏,新疆乌什,新疆阿合奇和山东苍山)大蒜中硒的含量分别为0.041,0.043,0.046和0.033μg.g-1。结论结果表明此方法可靠,重现性好。     

益肾降浊汤对脑缺血再灌注大鼠海马NE、5-HT含量的影响

目的　观察益肾降浊汤对脑缺血再灌注大鼠海马NE、5 HT含量的影响。方法　阻断大鼠双侧颈总动脉进行缺血再灌注 ,于术后d 1、d 7、d 15用高压液相色谱电化学检测法测定海马NE、5 HT的含量。结果　模型大鼠在术后d 1、d 7、d 15海马NE含量分别是 :36 4 2 5± 6 6 4 7,349 76± 5 9 38,(344 5 9± 70 31) μg·g-1,5 HT含量分别是 :6 4 6 72± 83 33,6 2 9 11± 90 6 4 ,(5 96 6 8± 99 4 7) μg·g-1,均较正常组明显降低 (P <0 0 1) ,且随着时间的延长逐渐下降。而中药组大鼠在相同日期海马NE含量分别是 4 17 91± 6 8 2 2 ,4 16 37± 4 8 6 5 ,(42 0 2 9± 5 1 4 5 ) μg·g-1,5 HT含量分别是 :731 31± 5 7 2 6 ,74 6 4 5± 77 77,(770 2 4±5 8 4 1) μg·g-1,均明显高于模型组 (P <0 0 5 )。结论　NE和 5 HT参与了脑缺血再灌注后的神经元损伤 ,益肾降浊汤可升高脑缺血再灌注后的海马NE、5 HT含量 ,保护神经元。     

间硝苯啶对猫冠脉流量,心肌耗氧量的量效关系

不同剂量m-Nif 10,20,40μg·kg~(-1)iv显著增加猫冠脉血流量(CBF),并呈明显量效反应关系,按作用峰值计算,分别增加原水平30,68,94％,Nif-20μg·kg~(-1)增加原水平49％,同时显著降低心肌耗氧量(MOC),按作用峰值计算,分别降低原水平29,46,55％,Nif降低原水平45％,心肌氧摄取减少,m-Nif分别减少原水平31,44,54％,Nif43％,血压分别降低原水平39,42,50％,Nif45％,m—Nif明显减慢心率,Nif则不减慢心率.m—Nif在40μg·kg~(-1)iv增加冠脉流量远较其他剂量强而持久,Nif较同量m-Nif作用弱而短。     

缓激肽开放血瘤屏障过程中诱发快速耐受性的机制探讨

目的探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响。方法首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型。模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10μg.kg-1.min-1,动态观察肿瘤组织内热休克因子1(heatshockfactor1,HSF1)蛋白单体和三聚体的活性及热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)的表达(Westernblot法)。免疫组织化学技术检测血瘤屏障上紧密连接蛋白occludin的变化。利用伊文思蓝连续监测缓激肽处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血瘤屏障的通透性,同时电镜观察血瘤屏障的病理学改变。结果缓激肽作用于C6大鼠后,紧密连接增宽,血瘤屏障通透性增加,伊文思蓝渗出量分别较对照组增加了5.19μg.g-1(0min),5.06μg.g-1(5min),11.35μg.g-1(10min,P<0.05),21.54μg.g-1(15min,P<0.01),12.81μg.g-1(30min,P<0.05),7.28μg.g-1(60min)。肿瘤组织内HSF1蛋白三聚体活性和HSP70蛋白的表达逐渐增加,且分别于处理后的5min和30min时达高峰(P<0.01,与对照组相比),最大值为对照组的2～3倍。免疫组化检测结果发现,处理后的C6动物,其血瘤屏障的紧密连接蛋白occludin表达减少,15min后逐渐增加。结论缓激肽作用于血瘤屏障后,激活了HSF1并促进了hsp70蛋白的表达。增加的hsp70可能通过发挥分子伴侣作用来修复紧密连接蛋白,进而诱发快速耐受性。     

松果腺褪黑素对大鼠腹腔巨噬细胞化学发光和脾、下丘脑PGE_2含量的影响

采用松果腺切除术、酵母多糖调理的鲁米诺依赖的化学发光法及前列腺素E_2(PGE_2)放射免疫测定方法观察了松果腺和褪黑索(MT)对大鼠腹腔巨噬细胞化学发光及脾、下丘脑PGE_2含量的影响。结果表明:松果腺切除后大鼠腹腔巨噬细胞化学发光值降低,脾及下丘脑PGE_2含量升高,10～1000 μg·kg~(-1)MT分别恢复之。其中以10μg·kg~(-1)MT作用最强;10μg·kg~(-1)MT还抑制正常大鼠脾及下丘脑PGE_2含量。上述作用可能是松果腺MT对炎症免疫调节作用的部分机制。