2013~2014年杭州地区手足口病柯萨奇病毒A6型和A10型VP1基因特征分析

目的了解2013~2014年杭州地区手足口病病原谱的分布,并对其病原基因特征进行分析。方法采集2013年3月至2014年4月手足口病患儿标本1 340例,提取病毒核酸,通过逆转录和PCR扩增肠道病毒VP1序列并测序,经Blast比对确定病毒基因型。对柯萨奇病毒A6型(CA-A6)和A10型(CA-A10)VP1全长序列进行同源性比对分析,并构建系统进化树。结果1 340例手足口病患儿标本中,肠道病毒检出阳性率为81.43%(1 090/1 340)。其中,CV-A6阳性率为41.04%,取代EV-71(14.48%)成为杭州地区检出阳性率最高的肠道病毒;CV-A10检出率(8.51%)也高于CV-A16(3.81%),列于第三位。同源性比对及系统进化分析显示,2013~2014年的25株CV-A6病毒核苷酸同源性为89.0%~99.7%,主要分布于G、H基因亚型;15株CV-A10病毒核苷酸同源性为95.3%~99.9%,分布于F、G基因亚型。结论 2013~2014年杭州地区儿童手足口病的主要病原体发生重大变化,CV-A6病毒成为最主要病原,CV-A10病毒也存在潜在威胁,需加强对其他肠道病毒的持续监测和分子特征分析。     

湖北省手足口病肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1基因特征

目的 了解湖北省手足口病肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）的VP1基因特点,研究该省EV71和Cox A16的基因型别及分子进化特征。方法 对2014-2015年湖北省26株EV71和27株Cox A16流行株的VP1基因测序,分析其同源性和遗传进化特征。结果 2014-2015年湖北省EV71和Cox A16流行株VP1核苷酸和蛋白氨基酸序列同源性均较高,EV71流行株的蛋白氨基酸和核苷酸序列同源性分别为97.6%~100.0%和92.3%~100.0%。Cox A16流行株的蛋白氨基酸和核苷酸序列同源性分别为96.6%~100.0%和92.3%~100.0%。EV71的VP1基因系统进化分析表明,湖北省流行的EV71与我国其他地区流行的EV71均位于一个大的分支上,均为C4基因型的C4a亚型。Cox A16流行株与B1b亚型代表株位于同一分支上,主要为B1b亚型。结论 2014-2015年湖北省EV71和Cox A16流行株分别为C4a亚型和B1b亚型,其核苷酸和氨基酸与国内外其他地区的手足口病病毒株均有较高同源性。     

2018-2019年吉安市柯萨奇病毒A组6型和10型的病原学检测和流行特征分析

目的 通过吉安市近年手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)标本中通用型肠道病毒核酸(EV-RNA)阳性中的非柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CA16)和非肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)肠道病毒标本做柯萨奇病毒A组6型(Coxsa...     

2019年冬季青岛市手足口病患者感染柯萨奇病毒A组16型基因特征分析

  目的  调查2019年冬季青岛市妇幼医院和中心医院手足口病（HFMD）住院患儿病原感染情况,分析柯萨奇病毒A组16型（Cox A16）基因进化特征。  方法  收集2019年冬季青岛地区HFMD住院患儿104份咽拭子,采用实时荧光定量PCR进行肠道病毒核酸检测。 使用肠道病毒通用分型引物扩增阳性样本,扩增序列测序后进行Blast比对。 设计Cox A16 VP1全长引物,通过半巢式PCR扩增测序,使用DNAStar进行核苷酸和氨基酸的基因分析,使用MEGA软件构建进化树。  结果   HFMD住院患儿的咽拭子样本肠道病毒总体阳性率为57.7%（60/104）。 其中Cox A16阳性率为30.8%（32/104）,Cox A6阳性率为26.9%（28/104）。 对32份Cox A16阳性的样本进行VP1区全长扩增、测序并进行比对和同源性分析,其核苷酸同源性为87.0%～100%,氨基酸同源性为98.3%～100%。 系统进化分析表明,32株Cox A16中有17株为Cox A16 B1a基因型,另外15株为Cox A16 B1b基因型。  结论  引起2019年冬季青岛地区住院HFMD的病原体之一是Cox A16,且同时流行Cox A16的B1a和B1b型。     

检测柯萨奇病毒A组6、10、16型的多重荧光RT-PCR建立及应用

目的建立检测手足口病(HFMD)肠道病毒的多重荧光RT-PCR方法。方法用多重荧光RT-PCR技术对引起HFMD的3种常见人肠道病毒[柯萨奇病毒A组(CVA)6、10、16型]进行检测,用基因测序法进行验证,并以灭活的CVA6、CVA10、CVA16病毒标准株以及引起临床相似症状的病原体样本进行特异性和灵敏度分析。结果 322例临床疑似HFMD标本,经本多重荧光RT-PCR法检测出CVA16、CVA10和CVA6型阳性样本分别为81、16和9份(总阳性率32.9%),且与基因测序法结果完全符合。将多重PCR体系中c-MMLV逆转录酶的量增至5 U,Hot-Taq酶的量增至8.5 U,可使其扩增效率提升至单重PCR扩增水平。优化后的体系可扩增出CVA6、CVA10和CVA16型阳性病毒标准RNA的检测下限分别是10,5和1 TCID50/mL。结论建立了一种灵敏、特异、高效和高通量的检测HFMD肠道病毒的多重荧光RT-PCR法,为其快速诊断提供了新的实验方法。     

2011~2013年杭州市手足口病病原谱流行特征及柯萨奇病毒A16型VP1区基因变异研究

目的了解杭州市手足口病病原谱流行特征及柯萨奇病毒A16型(CA16)分离株的VP1基因变迁规律。方法采集杭州市2011~2013年手足口病患者的2 197份临床标本,用通用引物进行肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测,对阳性标本进行分型,对部分CA16感染阳性重症患者标本测定VP1基因序列并进行同源性比对和系统进化树分析。结果杭州地区肠道病毒通用型核酸检出率为56.0%(1 317/2 197),肠道病毒71(EV71)、CA16和其他肠道病毒的检出率分别为24.1%(530/2 197)、13.9%(306/2 197)和22.8%(501/2 197)。在咽拭子和粪便标本中EV71检出率均最高,分别为23.9%(301/1 258)和23.6%(148/627),而在疱疹液标本中其他型肠道病毒检出率最高,为32.6%(76/233),脑脊液标本中无CA16检出。咽拭子标本和粪便标本在发病初期的检出率较高,发病后第5天和第6天后检出率低于发病初期检出率,而脑脊液和疱疹液不同病程阶段的检出率无统计学意义。9株CA16分离株VP1基因的核苷酸同源性为90.8%~99.7%,分属于B1b亚型和B1a亚型。结论 2011~2013年杭州地区手足口病患者主要病原体以EV71和CA16为主,样本类型和采样时间是影响肠道病毒检出率的重要原因。杭州地区CA16毒株VP1区基因的变异程度较低,需进一步加强开展手足口病的监测。     

2008-2013年湖北省十堰地区手足口病病原谱动态分析

目的分析十堰地区手足口病病原谱构成及其动态变化,为该病的预防控制提供参考。方法 2008年5月至2013年12月,从十堰市各县(市、区)收集2076例手足口病临床诊断病例标本,用一步法反转录聚合酶链反应(one-step RT-PCR)和实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)法进行手足口病毒核酸检测并分型,结合病例基本信息,对判定为手足口病的确诊病例,采用描述流行病学方法进行病原谱动态分析。结果 2008-2013年,肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组(Cox A16、Cox A6、Cox A10)及其他型人肠道病毒(EV)在手足口病确诊病例中的病原构成比依次为46.35%(24.19%~62.23%)、38.12%(13.06%~70.97%)、5.99%(0~13.06%)、3.75%(0~8.28%)和5.79%(1.37%~15.12%)。Cox A6与Cox A10致病对象为≤5岁婴幼儿;4-6月出现夏季流行高峰,10-11月出现冬季流行小高峰;各县(市、区)流行的手足口病毒均在4种以上,Cox A6所占比例持续上升,2013年达到13.06%。结论 2008-2013年十堰地区手足口病流行较为严重,病原体包括EV71、Cox A16、Cox A6、Cox A10等多种型别肠道病毒,EV71与Cox A16逐年交替维持着优势地位,Cox A6近2年有持续上升的趋势值得关注。国家在今后的疫情防控、疫苗策略和临床管理中,应高度重视手足口病持续流行过程中病原谱的变化。     

2018年浙江省宁海县柯萨奇病毒A组6型手足口病临床特征及分子流行病学

目的了解浙江省宁海县柯萨奇病毒A组6型（Cox A6）手足口病的临床特征，探讨其防控策略和措施。方法从国家疾病监测信息系统获取2018年宁海县手足口病资料，采集宁海县第一医院手足口病门诊、住院患者粪便和（或）咽拭子标本，用实时荧光定量反转录–聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测肠道病毒通用型及核酸分型，对Cox A6阳性标本进一步用RT-PCR方法进行VP1全长基因扩增、测序和系统进化分析。结果肠道病毒核酸阳性635例，阳性率为75.42%，其中Cox A6、非Cox A6阳性分别为412例（64.88%）和223（35.12%）；对Cox A6与非Cox A6病例组的临床表现进行比较，年龄、发热及热程、皮疹分布范围、出现疱疹及大疱疹比例、皮肤疼痛和痒感、脱皮及色素沉着、随访16周脱甲率等因素差异有统计学意义。 序列分析显示，2018年宁海县流行的Cox A6均为D3基因亚群，D3.2分枝。结论2018年宁海县Cox A6 D3基因亚群病毒广泛流行，临床上表现为皮肤黏膜剧烈反应，皮疹分布较非Cox A6广泛，脱甲为Cox A6病毒对指（趾）甲的直接侵害。     

湖北省十堰市59例柯萨奇病毒A组6型手足口病流行病学特征与临床特点分析

目的 探讨柯萨奇病毒A组6型（coxsackievirus A6,Cox A6）手足口病的流行病学特征与临床特点,为该病的诊治与防控提供参考。方法 2012年10月至2013年9月,收集十堰市570例手足口病临床诊断病例标本,以实时荧光定量聚合酶链反应（real time RT-PCR）法进行手足口病病毒核酸检测并分型,对判定为Cox A6的手足口病确诊病例,采用描述流行病学方法进行流行病学特征与临床特点分析。结果 Cox A6在手足口病确诊病例的病原构成中居第3位（占13.41%,59/440）;5岁以下儿童占100.00%,3岁以下占86.44%,散居、幼托儿童构成比为83.05%和16.95%,全市各县（市、区）全年均有发病,高峰期出现在10-11月,有1起聚集性疫情发生;所有病例在手、足、口或臀部出现皮疹,34.53%的病例出现发热,87.72%的病例出现口腔炎,26.32%的病例出现呼吸系统症状,3例白细胞计数偏高。结论 Cox A6肠道病毒可引起典型的手足口病及聚集性疫情,是手足口病的重要病原体之一,应加强监测与研究。     

2017－2019年广东省柯萨奇病毒A组6型感染手足口病流行特征分析

  目的  了解2017—2019年广东省柯萨奇病毒A组6型（Cox A6）感染手足口病流行特征。  方法  在广东省21个地市及佛山市顺德区（省直管区）共选取22家哨点医院开展手足口病普通病例Cox A6感染监测,结合手足口病个案及暴发数据,估算Cox A6感染手足口病发病情况并分析人群和时间分布特征。  结果  Cox A6感染阳性率分别为57.1%、23.0%、47.4%。 暴发构成比为18.5%（12/65）,仅次于Cox A16,主要发生在9月和6月。 估算发病率随年龄升高呈下降趋势（趋势χ2=2683320.620,P＜0.001）,高发年龄组依次为0～（1650.29/10万）、1～（4092.17/10万）、2～（2057.02/10万）和3～岁组（1530.23/10万）;随月龄增加呈上升趋势（趋势χ2=771.582,P＜0.001）,高发月龄依次是11～（4982.7/10万）、10～（4150.7/10万）、9～（3523.2/10万）、8～（2684.97/10万）和7～月龄组（1813.01/10万）。 高发月份依次是9（34.99/10万）、7（30.98/10万）、10（28.88/10万）、8（24.18/10万）和6月（22.04/10万）。 重症及死亡病例构成比为25.2%（86/341）,仅次于肠道病毒71型（EV71）（35.5%,121/341）。  结论  Cox A6已成为广东省手足口病病原的主要型别之一,各年份流行强度不同;暴发疫情强度仅次于Cox A16,Cox A6感染水平高时,暴发疫情增多,主要发生在托幼机构,9月和6月常见;6—10月是高发季节,0～3岁儿童是高危人群,6～11月龄为高发月龄;重症及死亡强度低于EV71,高于Cox A16,但其重症及死亡比例较以往研究增加。     

2010-2015年广州地区手足口病Cox A6,Cox A4和Cox A10的病原监测和流行分析

目的 了解引起广州地区手足口病（HFMD）的柯萨奇病毒A组6型（Cox A6）、A组4型（Cox A4）和A组10型（Cox A10）的分子流行病学特征。方法 对2010-2015年收集的HFMD病例标本进行荧光定量PCR检测,以Cox A6、Cox A4和Cox A10的VP1部分基因序列进行同源分析和构建系统发育树。运用统计学方法对不同肠道病毒引起的HFMD流行特征进行描述性分析。结果 从广州地区HFMD患儿的12 054份临床标本中检出8945份肠道病毒阳性,其中2174份为Cox A6（24.30%）,144份为Cox A4（1.61%）,155份为Cox A10阳性（1.73%）。Cox A6和Cox A10的主要感染人群为1~2岁幼儿,Cox A4为3~4岁幼儿,男性病例多于女性。HFMD发病时间集中于的4-10月。广州市肠道病毒Cox A6、Cox A4和Cox A10流行株与国内其他地区的流行株亲缘关系接近。结论 广州地区引起HFMD流行的优势病毒株包括EV71、Cox A16和Cox A6 3种肠道病毒,并呈交替或共同流行状态。Cox A4和Cox A10也是重要的病原体。应加强肠道病毒流行趋势的长期监测及深入研究,以掌握HFMD流行的变化趋势。     

Hand,foot, and mouth disease associated with coxsackievirus A10: more serious than it seems

Introduction: Hand, foot, and mouth disease (HFMD) is a common viral childhood illness, that has been a severe public health concern worldwide, particularly in the Asia-Pacific region. According to epidemiological data of HFMD during the past decade, the most prevalent causal viruses were enterovirus (EV)-A71, coxsackievirus (CV)-A16, CV-A6, and CV-A10. The public health burden of CV-A10-related diseases has been underestimated as their incidence was lower than that of EV-A71 and CV-A16 in most HFMD outbreaks. However, cases of CV-A10 infection are more severe, and its genome is more variable, which has alerted the research community worldwide.

Areas covered: In this paper, studies on the epidemiology, laboratory diagnosis, clinical manifestations, molecular epidemiology, seroepidemiology, animal models of CV-A10, and vaccines and antiviral strategies against this genotype are reviewed. In addition, the genetic evolution of circulating strains was analyzed.

Expert opinion: Multivalent vaccines against EV-A71, CV-A16, CV-A6, and CV-A10 should be a next-step HFMD vaccine strategy.     

2010—2012年浙江省余姚市手足口病的病原构成及Cox A16 VP1基因特征分析

目的了解浙江省余姚市引起手足口病的病原构成,研究Cox A16基因特征及变异情况。方法收集手足口病患者标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测并分型,每年选择几个样品进行Cox A16 VP1基因的扩增和核苷酸序列测定,测序结果利用DNAstar和Blast软件进行比对分析。结果 2010—2012年从1651份标本检出柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)25.86%,肠道病毒71型(EV71)39.85%,其他肠道病毒19.38%;Cox A16 VP1蛋白氨基酸序列相似性为99.3%~100%,7株Cox A16基因分型属于B1基因亚型。结论 2010—2012年余姚市手足口病流行的主要病原体为Cox A16和EV71,流行的Cox A16属于B1基因亚型,并具有高度相似性。     

2010-2015年河北省手足口病流行特征分析

目的 分析河北省2010-2015年手足口病流行特征,为手足口病的防控提供参考依据。方法 采用描述流行病学方法,对来自国家传染病监测信息报告管理系统中的手足口病病例资料和河北省各网络手足口病实验室的病原检测结果进行分析。结果 河北省2010-2015年共报告手足口病444 825例,其中重症病例3 643例,死亡病例157例,6年平均发病率为102.34/10万;每年5-6月达到发病高峰;病例主要集中在保定市、沧州市和石家庄市,三市病例数占全省病例总数的50.54%;病例主要发生在5岁以下尤其是1～3岁组儿童,男性病例多于女性,职业分布以散居儿童为主。病原学方面,共对34 069例手足口病病例的标本进行肠道病毒核酸检测,检出阳性病例21 645例,阳性检出率为63.53%,肠道病毒71型（EV71）的构成比为38.82%,重症病例和死亡病例中EV71的构成比分别为80.44%和92.31%。结论 手足口病在河北省分布广泛,有明显的季节性和人群差异;EV71是河北省手足口病的主要病原,也是引起大多数重症病例和死亡病例的病原体。     

重症手足口病的早期识别

手足口病（HFMD）是由肠道病毒引起的呈全球性分布的感染性疾病,肠道病毒71型（EV71）及柯萨奇 A 组16型（CVA16）肠道病毒是导致此疾病的主要病毒。该病具有发病率高、病程进展迅速、死亡率高等特点。因 EV71病毒感染所具有的嗜神经性,重症患儿一般易出现神经系统损害,严重者会出现脑干脑炎、心肺功能衰竭而导致死亡。目前临床上,对于如何早期识别手足口病患儿的重症倾向、提前采取干预措施、改善预后、降低死亡率还是一个比较棘手和具有挑战的课题。通过文献复习对具有早期识别意义的且与病程进展密切相关的临床和实验室指标进行探讨,为临床及早识别预后差的手足口病患儿,进一步早期对重症手足口病采取针对性治疗干预措施、改善患儿预后,临床分级分层治疗提供依据和参考。