通络醒脑泡腾片对Aβ海马注射痴呆大鼠tau蛋白磷酸化关键调控蛋白CDK5和GSK-3表达的影响

目的 探讨通络醒脑泡腾片对AD大鼠学习记忆和海马CKD5和GSK-3表达的影响,为其防治阿尔茨海默病提供依据.方法 建立Aβ25-35海马注射痴呆大鼠模型,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学和图像分析技术定量分析大鼠海马CKD5和GSK-3表达.结果 通络醒脑泡腾片能显著缩短训练第3天和第5天大鼠定向航行测试的逃避潜伏期,显著延长空间探索测试第一象限时间和有效区停留时间,缩短第三象限时间;能够显著降低海马区CDK5和GSK-3的表达,平均光密度值显著降低.结论 通络醒脑泡腾片具有提高AD大鼠学习记忆能力,抑制海马CDK5和GSK-3表达的作用,提示其益智作用与抑制海马CDK5和GSK-3有关.     

通络醒脑泡腾片对VD模型大鼠视交叉上核生物钟基因表达的影响

目的 考察通络醒脑泡腾片对血管性痴呆（VD）模型大鼠视交叉上核生物钟基因表达的影响。方法 采用双侧结扎颈总动脉法制备血管性痴呆大鼠模型,采用Morris水迷宫评价其认知功能;逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测各组大鼠视交叉上核生物钟基因Clock、Bmal、Per2基因的表达。结果 通络醒脑泡腾片能够改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆功能,可上调模型大鼠视交叉上核Bmal、Clock和Per2基因表达（P>0.05）。结论 通络醒脑泡腾片调节血管性痴呆模型大鼠认知能力与其调节视交叉上核生物钟基因Bmal、Clock和Per1有关。     

通络醒脑泡腾片对阿尔茨海默病大鼠海马PDH和α-KGDHC表达的影响

目的 探讨通络醒脑泡腾片(TLXN ET)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马PDH和α-KGDHC表达的影响.方法 建立淀粉样蛋白片段(Aβ 25-35)海马注射和双侧颈总动脉永久结扎两种大鼠AD模型.用Morris水迷宫法检测大鼠的学习记忆能力;免疫组化法定量分析大鼠海马丙酮酸脱氢酶(PDH)和α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)蛋白的表达.结果 与模型组比较,TLXNET能显著延长两种AD模型大鼠训练第5天的逃避潜伏期,改善空间探索行为;能显著提高大鼠海马PDH和α-KGDHC的表达,提高平均光密度值(IA);但在Aβ25-35海马注射模型中,TLXNET低剂量组的与模型组的比较无显著差异.结论 TLXNET可改善AD模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能与促进PDH和α-KGDHC的表达,增加脑内糖代谢的水平,提高脑能量的供应有关.     

基于转基因细胞模型研究通络醒脑泡腾片对Aβ代谢的影响

目的采用转基因细胞模型,考察通络醒脑泡腾片对Aβ生成和降解关键靶点的影响,探索其抗阿尔茨海默病的作用机制。方法体外培养SH-SY5Y-APP和SH-SY5Y-C99细胞,不同浓度的含药血清的培养液(含通络醒脑泡腾片血清0%~40%)干预48 h,采用MTT法确定无毒浓度,LDH法检测细胞活性,ELISA法检测Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)分泌量;采用RT-PCR和Western blot检测APP基因和蛋白表达,Western blot法检测APP剪切片段sAPPα和sAPPβ蛋白表达;qRT-PCR、Western blot及荧光检测试剂盒分别测定BACE1基因、蛋白水平和酶活性;Western blot检测Aβ降解酶IDE和NEP蛋白表达;体外培养SH-SY5Y,通络醒脑泡腾片不同浓度的含药血清培养液孵育48 h,MTT法检测Aβ_(25-35)诱导后细胞存活率。结果通络醒脑泡腾片含药血清对SHSY5Y-APP和SH-SY5Y-C99细胞均无明显毒性作用(P>0.05);通络醒脑泡腾片含药血清可明显抑制SH-SY5Y-APP细胞Aβ的分泌(P<0.05),对SH-SY5Y-C99细胞Aβ分泌量无影响;对SH-SY5Y-APP细胞APP基因及蛋白水平、sAPPα及Aβ降解酶NEP和IDE蛋白表达均无明显影响(P>0.05),但对sAPPβ蛋白有明显抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖关系,对BACE1基因、蛋白水平、活性均有明显抑制作用(P<0.01)。此外,研究发现通络醒脑泡腾片含药血清对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用(P<0.01)。结论通络醒脑泡腾片对β-分泌酶具有明显的抑制作用,并能对抗Aβ神经细胞毒性作用,提示抑制β-分泌酶和拮抗Aβ神经细胞毒性是通络醒脑泡腾片发挥抗阿尔茨海默病的主要作用机制。     

天胡荽积雪草苷对SAMP8小鼠学习记忆功能的改善作用

目的观察天胡荽积雪草苷(asiaticoside from Hydrocotyle sibthorpioides,AHS)对快速老化模型SAMP8小鼠学习记忆功能的影响及其可能机制。方法选用6月龄SAMP8小鼠75只,随机分为SAMP8空白组、阳性药石杉碱甲对照组和AHS低、中、高剂量组,每组15只;另选用6月龄SAMR1小鼠15只作正常对照。各组分别灌胃相应药物3个月后,采用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力,采用Western blot测定Aβ1-42蛋白和可塑性相关蛋白在海马组织的表达水平,采用实时荧光定量PCR测定Aβ相关基因的表达。结果 AHS能明显提高小鼠的学习记忆能力。其机制研究表明,AHS明显降低脑组织Aβ1-42蛋白的含量,抑制Aβ相关基因APP、BACE1和CatB的表达,但提高NEP和IDE的水平;另外,AHS能明显提高突触可塑性相关蛋白包括突触后密度蛋白-95、磷-N-甲基-D-天门冬氨酸受体1、磷酸-钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ、磷酸蛋白激酶A Cβ亚基、蛋白激酶Cγ亚单位、磷酸化CREB和脑源性神经营养因子的表达。结论 AHS能明显改善学习记忆功能,其机制可能与降低脑组织Aβ的形成与沉积、提高突触可塑性相关蛋白的表达有关。     

海昆肾喜胶囊通过激活自噬改善SAMP8小鼠认知功能障碍

目的以SAMP8小鼠为模型,初步探索海昆肾喜(HKSX)胶囊对AD的防治作用及其作用机制。方法将4月龄SAMP8小鼠随机分为AD模型组(P8)、HKSX低剂量组(L-HKSX)、HKSX高剂量组(H-HKSX),同月龄SAMR1小鼠作为对照组(R1)。采用新物体识别和Morris水迷宫实验检测小鼠学习、记忆能力;ELISA法检测各组小鼠海马Aβ_1-40和Aβ_1-42水平;Western blot实验对海马LC3-Ⅱ、P62、Beclin-1、PSD95、Synaptophysin(Syn)的表达进行检测。结果相较于P8组小鼠,HKSX低、高剂量治疗均可增加小鼠对新物体的识别指数,提高小鼠穿越平台次数和在目标象限停留的时间,并且缩短潜伏期,增强对Aβ_1-40和Aβ_1-42的清除力,上调Beclin-1、LC3-Ⅱ相对表达量,下调P62的表达;此外,还提高了突触相关蛋白PSD95、Syn的表达水平。结论HKSX胶囊可调节自噬相关蛋白表达,改善自噬功能障碍,减少Aβ在体内的沉积,降低其毒性,提高突触可塑性,最终改善AD小鼠学习认知、记忆能力。     

淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能影响的研究

目的:研究淫羊藿苷(Icaritin,ICA)对快速老化小鼠SAMP8学习记忆功能的影响。方法:按体重随机挑选10只8月龄抗快速老化小鼠SAMR1和50只同月龄快速老化小鼠SAMP8,并将SAMP8随机分为5组(模型组、多奈哌齐组和ICA50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg组),灌胃给药1个月,在给药前后分别用Morris水迷宫、SMG-2迷宫和跳台方法检测SAMR1和SAMP8的学习记忆功能能力。结果:与给药前相比,给药后的快速老化小鼠SAMP8定位航行和空间搜索能力以及被动反应能力得到提高。结论:ICA可以改善SAMP8的学习记忆能力。     

中药复方脑还丹对快速老化鼠SAM-P/8海马CA1区超微结构的影响

目的探讨中药复方脑还丹对快速老化鼠海马CAl区超微结构的影响。方法3月龄雄性SAM/P 8小鼠30只,随机分成对照组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组,分别给予生理盐水及不同剂量中药复方脑还丹灌胃治疗4月,取海马制作电镜标本,透射电镜观察海马CAl区神经元超微结构。结果对照组脂褐素增多,溶酶体数目增多且空化,粗面内质网偶有扩张或膜结构断裂,核糖体数目明显减少,线粒体数目减少,线粒体肿胀、核膜增厚,嵴断裂或萎缩成中空状,细胞核核膜模糊, 核周池不清,染色质呈凝聚样改变,核周空泡明显。脑还丹组上述变化明显减轻。结论脑还丹能够减轻神经元退行性变化。     

3-硝基丙酸对沙土鼠海马CA1区锥体细胞超微结构的影响

目的观察小剂量3-硝基丙酸(≤20mg/kg)对沙土鼠海马CA1区锥体细胞超微结构的影响.方法将沙土鼠腹腔注射不同剂量3-硝基丙酸或双蒸水后3d,取海马CA1 区用戊二醛和锇酸固定,电镜下观察CA1区锥体细胞层神经元细胞核和细胞器超微结构形态变化,用体视学方法计算每张照片线粒体和粗面内质网体面积变化.结果实验组与对照组比较细胞核无明显变化,线粒体和粗面内质网轻度肿胀,体密度高于对照组.结论小剂量3-硝基丙酸可引起神经元缺氧代偿性反应,无致死性损害.     

碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调蛋白表达的影响

目的观察碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马钙调蛋白(calmodulin)表达的影响。方法健康2月龄雌性Wistar大鼠,交配妊娠后,取孕鼠28只,按体重随机分成对照组、碘缺乏组、甲状腺功能减退1和2组。自怀孕第6天(gestational day6,GD6)起,碘缺乏组饲以缺碘地区粮食配制的饲料,饮用自来水;甲状腺功能减退1和2组分别给予5和15ppm丙基硫尿嘧啶(propylthiouracil,PTU)饮水,饲以普通饲料,至生后第28天(postnatal day28,PN28)。分别于PN7、PN14和PN21时,每组随机取5只仔鼠,灌流固定大脑,进行组织病理切片和免疫组化染色,观察分析海马钙调蛋白表达。结果PN14和PN21时,在CA1和CA3区,15ppm组和碘缺乏组仔鼠海马钙调蛋白表达显著低于对照组(P0.05)。在DG区,钙调蛋白与对照组相比,差异无统计学意义。PN7时,各区均几乎观察不到阳性反应产物,各组间蛋白表达差异无统计学意义。结论在本试验条件下,碘缺乏和甲状腺功能减退可下调海马CA1和CA3区钙调蛋白蛋白表达。     

G蛋白在快速老化痴呆小鼠SAMP8脑组织中的异常表达

摘要 目的：探索在不同月龄小鼠SAMP8皮层和海马中G蛋白的异常表达情况。方法：以正常老化小鼠SAMR1为对照,利用Western-blot方法检测Gαq/11、Gαi和GαS蛋白在8月龄和18月龄小鼠SAMP8的异常表达。结果：与同月龄SAMR1相比,GαS、Gαi和Gαq蛋白在8月龄小鼠SAMP8皮层和海马组织中的表达无明显异常（p﹥0.05）,而到18月龄时,SAMP8皮层部位Gαq表达量明显低于SAMR1（p﹤0.05）,海马部位Gαq和 Gαi的表达量也明显低于SAMR1（p﹤0.05）。结论：18月龄SAMP8脑组织中Gαq和 Gαi的异常表达参与了阿尔海默病（Alzheimer’s, AD）的病理进展,并有望作为AD治疗的一个靶点。     

原花青素对 Aβ25-35诱导的小鼠学习记忆损伤的影响

目的：观察原花青素对淀粉样β蛋白25‐35（Aβ25‐35）诱导的小鼠学习记忆损伤的影响。方法将30只雄性2月龄C57bl／6小鼠随机均分为五组：E组为空白对照;其余四组采用双侧侧脑室注射Aβ25‐35制备的小鼠学习记忆损伤模型后,D组为模型对照,A、B和C组分别用原花青素50、100和150 mg／kg灌胃,连续30 d。D组和E组采用灭菌双蒸水灌胃。采用Y迷宫测试小鼠短期学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马CA1区神经元损伤情况;化学比色法测定小鼠血清中丙二醛（MDA）、羟自由基（OH －）、谷胱甘肽（GSH）、总抗氧化能力（T‐AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）表达水平;Western blot测定硝基络氨酸（NTS）、过氧化物还原酶1（Prdx‐1）在小鼠海马组织中的表达。结果与D组比较,A、B和C组小鼠短期学习记忆能力较好,CA1区深染神经细胞比例呈剂量依赖性下降,血清GSH、T‐AOC和SOD含量增高,且海马组织中NTS表达水平降低,Prdx‐1表达水平升高（ P＜0．01或P＜0．05）。结论原花青素能改善Aβ25‐35诱导的小鼠氧化应激水平,从而减轻小鼠海马神经退行性病变和小鼠学习记忆损伤。     

活血通络汤对脑卒中患者凝血功能、内皮功能及氧化应激水平的影响

讨论活血通络汤对脑卒中患者凝血功能、内皮功能及氧化应激水平的影响.选择2017年1月～2019年6月该院收治缺血性脑卒中患者120例,按照治疗方式分成两组,每组60例;对照组采用常规西药治疗,观察组在常规西药治疗的基础上联用活血通络汤治疗;比较两组患者治疗后认知功能、凝血功能、内皮功能以及氧化应激指标变化.治疗后,两组...     

复方黄连降糖散对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C信号通道的影响

目的：观察复方黄连降糖散对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用,对肾脏蛋白激酶C（PKC）活性以及钠离子通道的影响。方法：利用链脲佐菌素（STZ）建立大鼠的DN模型,建模成功后随机分为4组,即对照组、模型组、复方黄连降糖散组、贝那普利（洛汀新）组,在药物干预12周之后,检测大鼠背神经节中钠离子通道蛋白及mRNA水平,同时测定相对肾质量、血糖、尿蛋白排泄率（UPER）、血肌酐（SCr）、尿肌酐（UCr）、内生肌酐清除率（CCr）、肾脏PKC活性等。结果：糖尿病周围神经病变过程中,钠离子通道蛋白v1.7表达异常,与对照组相比,模型组与复方黄连降糖散组、贝那普利组钠离子通道蛋白显著上调。DN大鼠肾脏沉积明显,相对肾质量、血糖、UPER、CCr、肾脏PKC活性显著升高,贝那普利、复方黄连降糖散能够显著降低肾脏PKC活性,改善DN大鼠的蛋白尿、肾功能。结论：贝那普利、复方黄连降糖散能够保护DN大鼠肾脏,同时可以显著下调DN大鼠背根神经节中钠离子通道蛋白及mRNA的表达水平。     

雷公藤红素对肝叶部分切除老年小鼠术后认知功能及海马Tau蛋白磷酸化的影响

目的：观察肝叶部分切除术后老年小鼠认知功能的变化及海马内Tau蛋白磷酸化位点Ser396、Ser199/202的变化和雷公藤红素对老年小鼠术后认知功能障碍时的神经保护作用。方法：C57BL/6老年小鼠随机分为3组（n=48）：假手术组（S组）、肝叶部分切除术组（O组）和肝叶部分切除术加雷公藤红素组（C组）。每组再根据不同时间点分为12h、1d、3d和7d4个亚组,每个时间点12只动物。三组小鼠采用Mor-ris水迷宫检测小鼠认知功能,免疫组织化学法和Western blotting方法检测各组小鼠海马Tau蛋白磷酸化的变化。结果：与S组同时点比较,O组术后3d和7d时水迷宫成绩下降（P〈0.05）;C组术后3d和7d水迷宫成绩好于O组（P〈0.05）,而与S组接近（P〉0.05）。免疫组织化学染色阳性数和Western blotting显示O组Tau蛋白磷酸化位点Ser396、Ser199/202表达多于S组（P〈0.01）,而C组表达少于O组（P〈0.01）,与S组接近（P〉0.05）。结论：雷公藤红素对老年小鼠肝叶部分切除术造成的认知功能障碍具有明显的保护作用,其机制可能与抑制Tau蛋白异常磷酸化有关。     

Probiotics modulate the microbiota–gut–brain axis and improve memory deficits in aged SAMP8 mice

ProBiotic-4 is a probiotic preparation composed of Bifidobacterium lactis, Lactobacillus casei, Bifidobacterium bifidum, and Lactobacillus acidophilus. This study aims to investigate the effects of ProBiotic-4 on the microbiota–gut–brain axis and cognitive deficits, and to explore the underlying molecular mechanism using senescence-accelerated mouse prone 8 (SAMP8) mice. ProBiotic-4 was orally administered to 9-month-old SAMP8 mice for 12 weeks. We observed that ProBiotic-4 significantly improved the memory deficits, cerebral neuronal and synaptic injuries, glial activation, and microbiota composition in the feces and brains of aged SAMP8 mice. ProBiotic-4 substantially attenuated aging-related disruption of the intestinal barrier and blood–brain barrier, decreased interleukin-6 and tumor necrosis factor-α at both mRNA and protein levels, reduced plasma and cerebral lipopolysaccharide (LPS) concentration, toll-like receptor 4 (TLR4) expression, and nuclear factor-κB (NF-κB) nuclear translocation in the brain. In addition, not only did ProBiotic-4 significantly decreased the levels of γ-H2AX, 8-hydroxydesoxyguanosine, and retinoic-acid-inducible gene-I (RIG-I), it also abrogated RIG-I multimerization in the brain. These findings suggest that targeting gut microbiota with probiotics may have a therapeutic potential for the deficits of the microbiota–gut–brain axis and cognitive function in aging, and that its mechanism is associated with inhibition of both TLR4-and RIG-I-mediated NF-κB signaling pathway and inflammatory responses.     

茶碱对慢性阻塞性肺疾病稳定期诱导痰白细胞介素-8及肺功能的影响

目的探讨茶碱对慢性阻塞性肺疾病稳定期诱导痰白细胞介素-8及肺功能的影响。方法将40例稳定期COPD患者随机分为试验组和对照组,试验组给予茶碱口服,对照组给予安慰剂口服,共8周,观察治疗前后诱导痰白细胞介素8(IL-8)及肺功能的变化。结果试验组患者治疗8周后诱导痰IL-8浓度较治疗前显著降低(P<0.05),肺功能显著改善(P<0.05),而对照组诱导痰IL-8浓度及肺功能治疗前后差异无统计学意义。结论茶碱可减轻COPD患者气道炎症,改善COPD稳定期肺功能。     

血清8-OHdG、MnSOD水平与急性缺血性脑卒中患者rt-PA静脉溶栓后认知功能恢复的相关性分析

目的 探讨血清8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)水平与急性缺血性脑卒中患者(AIS)经重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓治疗后认知功能恢复情况的相关性.方法 选取2016年3月至2018年10月在本院进行rt-PA静脉溶栓治疗的112例AIS患者,根据患者溶栓治疗后7 d蒙特...     

高压氧辅助治疗对急性脑梗死伴认知功能障碍患者认知功能及神经功能恢复情况的影响分析

目的探讨对急性脑梗死伴认知功能障碍患者采用高压氧辅助治疗对认知功能及神经功能恢复情况的影响。方法42例急性脑梗死伴认知功能障碍患者,根据治疗方法不同分为实验组及对照组,每组21例。对照组仅给予常规急性脑梗死药物治疗,实验组在常规急性脑梗死药物治疗基础上给予高压氧治疗。比较两组患者入院当天、治疗第30天简易精神状态检查量表(MMSE)评分及入院当天、治疗第3天、第30天美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分。结果入院当天,两组患者MMSE评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗第30天,实验组患者MMSE评分为(24.2±3.5)分,高于对照组的(21.3±2.6)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。入院当天、治疗第3天,两组患者NIHSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗第30天,实验组患者NIHSS评分为(12.2±1.7)分,明显低于对照组的(14.3±2.4)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧辅助治疗对急性脑梗死患者认知功能及神经功能的恢复可能有促进作用。