c-ski 对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的研究原癌基因c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞活力、肌成纤维细胞分化、型胶原分泌等生物学行为的影响。方法免疫组化检测皮肤成纤维细胞内c-Ski蛋白的表达,并在转染c-ski基因后,利用MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活力、免疫组化和RT-PCR检测型胶原分泌、α-SMA细胞免疫组化检测肌成纤维细胞分化的改变。结果大鼠皮肤成纤维细胞内有c-Ski蛋白的表达,且主要表达在细胞核内,c-ski可以以剂量依赖的方式增加皮肤成纤维细胞的增殖活力,并可降低型胶原蛋白和mRNA的水平,但不改变皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程。结论c-ski促进细胞增殖但降低胶原分泌的作用可能对促进创伤愈合、降低瘢痕形成有着重要的意义。     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,以阐明LPS在皮肤创伤愈合中的可能作用.方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,采用3H-脯氨酸掺入法观察不同浓度(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1.0 μg·ml-1)的LPS对成纤维细胞胶原合成的影响.结果:LPS刺激浓度在0.005 μg·ml-1时,皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成增加;随着刺激浓度增加,刺激作用增强;但当LPS浓度为0.5 μg·ml-1时,促胶原合成作用开始降低;当浓度达到1.0 μg·ml-1时则呈现抑制效应.结论:在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞胶原合成,表明LPS在皮肤创伤愈合中可能具有重要作用.     

皮肤成纤维细胞收缩功能的研究

利用细胞培养技术，观察人体皮肤成纤维细胞收缩功能与年龄的关系。结果显示，在儿童期随年龄增长，成纤维细胞收缩功能增强；成年人成纤维细胞收缩功能均较儿童强，但与年龄变化无关。     

丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响，揭示其对瘢痕的作用及机制，方法对瘢痕成纤维细胞进行体外培养，采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析，以研究丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响．结果体外培养瘢痕成纤维细胞倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法观察和测定结果显示：与相应对照组相比，加入丹参组细胞生长及增殖均受到明显抑制，丹参各浓度组间细胞受抑制程度存在显著性差异（P〈0．05）．结论丹参对瘢痕成纤维细胞的生长、增殖有抑制作用，不同浓度其作用效果有差别．     

理化因素对成纤维细胞生物学特性的影响及研究进展

成纤维细胞 (fibroblast,FB)是创面愈合的主要修复细胞之一 ,它在创面修复过程中活化、增殖、合成胶原及分化的异常直接导致增生性瘢痕 (hypertrophicscar,HS)和瘢痕疙瘩 (ke loid ,K)的形成。增生性瘢痕一直是影响患者正常愈合的一个主要问题 ,其病因尚未完全明了。病理学研究     

人皮肤胶原为支架的瘢痕成纤维细胞三维培养

0引言成纤维细胞三维培养方法在有关创伤愈合及派痕研究中已被广泛采用［‘－”．既往多采用鼠尾腔可溶性胶原等，作为成纤维细胞三维培养支架．尚未见采用人皮肤胶原作支架，进行摊痕成纤维细胞三维培养的报道．我们以人皮肤胶原为支架，建立7新的疤痕成纤维细胞三维培养模型．回材料和方法1．l细胞用组织块法进行增生性癫痕组织成纤维细胞原代培养．分别用含200rnL／L和100mL／L／J’牛血清DMEM作为原代和传代后的培养液．实验用第4－－10代细胞．1．2胶原1．2．l可溶性鼠尾增胶原制备取SD大鼠尾胜剪碎，置5ml。／l一醋酸中搅拌，300…     

SV40大T抗原对人皮肤成纤维细胞生物学行为的影响

目的：研究SV40大T抗原（LT）基因对人正常皮肤成纤维细胞体外转化作用，以及转化后细胞生物学特性的改变。方法：采用脂质体介导的方法。利用含有LTcDNA的质粒psv3-neo转染人正常皮肤成纤维细胞。G418筛选后，挑选阳性克隆扩大培养，观察基因及蛋白在细胞内的表达。以及对细胞增殖等生物学特性的改变情况。结果：分离获得转化细胞克隆，原位杂交显示LTmRNA在转染细胞质中表达。免疫组化结果显示，细胞质中有SV40大T抗原表达。细胞计数，BrdU，流式细胞仪检测表明，经过一段时间的旺盛生长，在转染后第16代，细胞即进入危机期，以一种比衰老细胞更快的速度死亡。结论：LT可以促进正常皮肤成纤维细胞增殖，但这种能力是有限的，在转染后期甚至会促进细胞死亡，所以要使人的正常皮肤成纤维细胞永生化，单纯利用LT的转染是不够的，还需要结合其它的转化方式。     

糖尿病病程对真皮成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响.方法通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测.结果短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)蓄积,真皮S期细胞比例升高和单位面积皮肤羟脯氨酸含量减少.高糖和AGE HSA导致真皮FB生长抑制和凋亡,呈剂量依赖性.结论糖尿病皮肤随着病程延长,病理生理异常会不断加重;糖尿病真皮FB的生物学改变与皮肤高糖和AGEs蓄积存在直接关系.     

Ti-Nb-Zr-Sn系合金对牙龈成纤维细胞生物学行为的影响

目的:检测Ti-Nb-Zr-Sn系超低模量合金的组织相容性.方法:用浸浴Ti-Nb-Zr-Sn系合金后的细胞培养液培养大鼠牙龈成纤维细胞(FB),MTT法观察细胞生长率;大鼠牙龈FB分别接种在Ti-Nb-Zr-Sn系合金和纯钛表面,荧光显微镜下观察细胞在金属表面附着情况,计数贴壁细胞数.结果:Ti-Nb-Zr-Sn系合金对大鼠牙龈FB无不良影响;Ti-Nb-Zr-Sn系合金与纯钛对FB初期黏附和增殖的影响没有差异.结论:Ti-Nb-Zr-Sn系合金具有优良的组织相容性.     

透明质酸对胚胎成纤维细胞胶原网架收缩的影响

目的 探讨羊水中抑制胚胎伤口收缩的成分是否为透明质酸ＨＡ以ＨＡ对胚胎伤口收缩是否有直接的抑制作用。方法 使用一种体外胚胎伤口收缩模型－－含成纤维细胞的胶原网架ＦＰＣＬ），观察ＨＡ深度为１μｇ／ｍ１￣１０ｍｇ／ｍ１对ＦＰＣＬ收缩的影响。结果低深度组（１、５、２０、５０、１００、１０００μｇ／ｍ１）的ＨＡ对ＦＰＣＬ的收缩指数，差异有显著意义（Ｐ〈０．０５）；高深度级（３、６、１０ｍｇ／ｍ１）ｒ ＨＡ     

糖尿病病程对真皮成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测。结果短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)蓄积,真皮S期细胞比例升高和单位面积皮肤羟脯氨酸含量减少。高糖和AGE-HSA导致真皮FB生长抑制和凋亡,呈剂量依赖性。结论糖尿病皮肤随着病程延长,病理生理异常会不断加重;糖尿病真皮FB的生物学改变与皮肤高糖和AGEs蓄积存在直接关系。     

低氧促进大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成

目的研究低氧(2%氧)对成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成、总蛋白合成及Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA表达的影响.方法分离培养成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞,采用液体闪烁计数方法检测心脏成纤维细胞胶原酶敏感的3H-脯氨酸掺入率来观察细胞胶原蛋白合成变化,并检测3H-亮氨酸掺入率观察细胞总蛋白合成的变化,采用RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA的表达.结果成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞在低氧第24、48小时胶原酶敏感的3H-脯氨酸掺入率较常氧组显著增加,分别增加132%(P＜0.05)和163%(P＜0.01);低氧12 h起Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA表达显著高于常氧培养的细胞.结论低氧能够直接促进体外培养的成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成和Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA的表达,提示低氧对心脏成纤维细胞胶原合成代谢的直接调节可能是低氧性心肌纤维化的重要机制.     

氧化低密度脂蛋白对大鼠心肌成纤维细胞胶原的影响

目的 探讨氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对大鼠心肌成纤维细胞胶原合成的影响.方法 体外培养乳鼠心肌成纤维细胞,加入ox-LDL(10、20、50、100μg/ml)干预24 h,3H-胸腺嘧啶核苷掺人法观察细胞DNA合成,3H-脯氨酸掺入法观察胶原的合成,酶谱法测定基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9活性,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,RT-PCR检测MMP-2、MMP-9的mRNA表达.结果 和对照组比较,ox-LDL作用于心肌成纤维细胞24 h后,呈浓度依赖性促进细胞DNA合成,同时抑制细胞胶原合成.ox-LDL显著增加MMP-2和MMP-9活性,但各组间作用无明显区别;同时MMP-2和MMP-9蛋白表达也显著性增加,以100μg/ml组作用最强.50μg/ml ox-LDL能显著增加MMP-2和MMP-9的mRNA表达,100μg/ml组作用更强.结论 ox-LDL作用于心肌成纤维细胞能减少胶原的合成并增加胶原的降解,提示其在心肌重构过程巾起一定的作用.     

雷公藤内酯醇对成纤维细胞的影响

目的：研究雷公藤内酯醇(Tri)对成纤维细胞的细胞动力学及形态学影响，以探讨其抑制增生性瘢痕的机制。方法：用光镜、电镜观察用药前后成纤维细胞的形态学变化，用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果：用药组在光镜下细胞密度较低，细胞体细长，部分失去正常的细胞形态、细胞质红染，并可见典型的凋亡小体；电镜下粗面内质网疏松，内容物减少，并可见各期凋亡细胞。细胞动力学检测(FCM)示用药组凋亡比例(AI)明显增加，并呈一定的量效关系，对细胞周期则无影响。结论：Tri促进成纤维细胞的凋亡，可能对胶原的分泌也有一定的影响。     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞胶原合成的影响

０引言在瘢痕机理的研究中，有学者发现一种相对分子质量（Ｍｒ）为１５０ｘ１０３的糖蛋白能刺激体外培养的成纤维细胞（ＦＢ）产生高浓度透明质酸（ＨＡ），称为透明质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）．ＨＡＳＦ参与创伤愈合过程，是导致胚胎早期伤口无瘢痕修复的重要因素之一［１］，而瘢痕的主要基质成分为胶原蛋白，ＨＡＳＦ对于ＦＢ胶原合成的作用尚未见文献报道，我们利用体外培养的正常人皮肤及瘢痕ＦＢ，观察了ＨＡＳＦ对细胞胶原合成的影响．１方法１．１实验仪器与试剂ＬＳ－６５００液问计数仪（Ｂｅｃｋｍａｎ），ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２…     

PDGF-AB对成纤维细胞增殖及成纤维细胞-胶原网收缩的影响

引言血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）在创面愈合过程中起重要作用，特别是对一些慢性难愈性伤口如糖尿病溃疡、慢性静脉性溃疡、褥疮、放射性溃疡等均有明显促进愈合作用［１～３］．ＰＤＧＦ是由Ａ，Ｂ两种单体构成的二聚体结构，可以形成ＰＤＧＦ－ＡＡ，ＰＤＧＦ－ＡＢ...     

雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响

目的:探讨雌激素对人正常皮肤成纤维细胞的影响,为进一步探讨雌激素抗皮肤衰老的机制和开发抗衰老护肤品提供新思路。方法:采集正常成人皮肤标本,分离培养真皮成纤维细胞;以流式细胞术检测17β-E2作用前后成纤维细胞内活性氧(ROS)水平的改变,以及检测丙二醛(MDA)含量和三种抗氧化酶(SOD,GSH-px,Cat)的活性。结果:①雌激素浓度为1×10-6-1×10-10mol/L(生理浓度至药理浓度范围之内)时,可促进人皮肤成纤维细胞的增殖;②雌激素浓度为1×10-7-1×10-10mol/L时,可以减少人正常皮肤成纤维细胞内MDA的生成,加速三种抗氧化酶的产生;③1×10-6-1×10-10mol/L雌激素作用于人皮肤成纤维细胞后,可以降低细胞内活性氧(ROS)的产生。结论:雌激素在一定浓度时具有改善人正常皮肤成纤维细胞生物学特性的作用,且药物浓度与对人皮肤成纤维细胞的作用密切相关。     

中药马勃对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

［摘 要］ 目的：中药马勃作用于体外培养大鼠皮肤的成纤维细胞,观察大鼠成纤维细胞增殖及胶原合成的能力,探讨马勃有效组分在细胞水平上促皮肤患处愈合的作用机制。方法：运用体外细胞培养技术对新生大鼠乳鼠皮肤的成纤维细胞进行培养,实验分为对照组（不给药组）和马勃有效组分37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L组;实验组于传代培养24 h后加入不同浓度的药物,继续培养24、48、72 h后收集细胞。采用MTT比色法测定细胞增殖,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法测定细胞胶原含量。结果：与对照组比较,37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L实验组的成纤维细胞增长率和成纤维细胞胶原合成能力均显著性升高（P＜0.01）。在药物作用时间方面,与对照组比较,在24、48和72 h观察细胞增殖率和胶原合成能力均显著增强,72 h最强,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：在不同剂量马勃有效组分作用下,大鼠成纤维细胞活化增殖,胶原合成的能力增强。