STZ诱导C57BL小鼠T1DM模型优化的研究

目的探索制备T1DM小鼠模型优化条件，为研究T1DM病因及发病机理提供理想的动物模型。方法分另9应用不同剂量、不同性另0小鼠以小剂量、多次注射链脲佐菌素方法（multiple low dose of stxeptozotodn，MLDS）制备T1DM小鼠糖尿病模型，动态监测小鼠血糖水平、体重的变化，比较不同方法糖尿病模型成功率与糖尿病小鼠死亡率。结果MLDS诱导雌性C57BL小鼠T1DM模型STZ小剂量组模型成功率为0，死亡率为22．06％。STZ大剂量组模型成功率为57．14％。死亡率为28．56％；MLDS诱导C57BL雄性小鼠T1DM模型的结果，T1DM组小鼠模型成功率为75％，死亡率为20％；MLDS诱导雄性C57BL小鼠T1DM模型再研究结果，T1DM组小鼠模型成功率为84．6％，死亡率为0。结论C57BL雄性小鼠更适合用于制备MLDS诱导T1DM模型，65mg／kg．BW STZ造模剂量优于其它三种剂量。     

禁食时间对链脲佐菌素诱导1型糖尿病小鼠模型的影响

目的:研究不同禁食时间对多次小剂量注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型的影响,探讨其最佳禁食时间。方法:将40只C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照组(C组)、禁食4 h组(F4组)、禁食10 h组(F10组)和禁食16 h组(F16组),每组10只。禁食组小鼠按多次小剂量腹腔注射STZ的方法诱导1型糖尿病模型,C组注射等量的柠檬酸盐缓冲液。测定各组小鼠注射STZ前及注射后1、2、3、4周的血糖、体质量的变化,计算小鼠糖尿病模型的成功率。结果:注射STZ2周后,各禁食组小鼠体质量明显降低,与C组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。注射STZ2周时,各禁食组血糖水平均>11.1 mmol/L,与C组比较差异有统计学意义(P<0.01);随着禁食时间的延长,血糖水平逐渐升高,自第3周起,F10组与F4组的血糖水平差异有统计学意义(P<0.05),但与F16组比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,禁食10 h后注射STZ,模型成功率为90.0%,同时不引起明显的体质量下降。结论:采用多次小剂量注射STZ的方法诱导小鼠1型糖尿病模型时,每次注射STZ前最佳禁食时间为10 h。     

链脲佐菌素诱导建立C57BL/6小鼠1型糖尿病心肌病模型的可行性研究

目的:建立C57BL/6小鼠1型糖尿病心肌病模型,并评价该疾病模型的可行性.方法:70只小鼠随机分为模型组(n=43)和对照组(n=27).模型组小鼠按50mg/kg体重连续5 d腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液,对照组小鼠注射相应体积的柠檬酸缓冲液.每周观察小鼠食量、饮水量、体重、精神活动等基本状况.每2周剪鼠尾取血,检测血糖,评价建模情况.实验第13用处死小鼠,取心脏石蜡包埋,行HE染色、天狼猩红染色显示病理改变,Image-pro plus 6.0分析软件计算胶原面积占总面积比值.结果:模型组小鼠饮水量、食量分别自第2、3周开始高于对照组小鼠(均P<0.01);注射STZ后第2周体重逐渐减轻,低于对照组小鼠(P<0.01).空腹血糖在建模第1周开始,模型组明显高于对照组(P<0.001).HE染色及天狼猩红染色显示模型组小鼠心肌纤维排列紊乱,分布不均,肌细胞间质明显增加.结论:本实验成功建立了C57BL/6小鼠1型糖尿痛心肌病模型,该模型可行性强,稳定性好.     

链脲佐菌素诱导实验性糖尿病大鼠模型建立的研究

目的:研究链脲佐菌素诱导实验性糖尿病大鼠模型的建立,并观察不同途径给药诱导的差异。方法:采用腹 腔注射或尾静脉注射链脲佐菌素,检测空腹血糖及胰岛素。结果:腹腔注射或尾静脉注射组均出现血糖升高、胰岛素下 降,和对照组相比有显著性差异(P<0.01),两组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:腹腔注射或尾静脉注射链脲佐菌 素均可诱导实验性糖尿病大鼠模型建立,两种途径无显著性差异。     

1型糖尿病大鼠模型建立及稳定性研究

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导SD大鼠1型糖尿病模型的方法并观察模型稳定性。方法按禁食与否、不同体重、不同给药剂量及不同给药途径对SD大鼠进行分组实验,观察其成模率,并在以最佳方式制备糖尿病模型后,分别于3,7,14,21 d和28 d对成模动物的血糖、每日采食量、饮水量和排尿量进行测定,并与对照组作比较分析。结果选择体重范围为201~240 g SD大鼠,禁食后以50mg/kg STZ一次性腹腔注射为最佳诱发糖尿病模型方式,其成模率可达到83.3%,成模大鼠于注射后72 h,血糖均稳定维持在18.7~21.1 mmol/L左右,同时成模后即出现多饮、多尿和多食表现,其症状体征与临床病人比较相似。结论成功制备1型SD大鼠糖尿病模型,且具有较好的稳定性。     

链脲佐菌素致小鼠糖尿病模型的建立与评价

目的探讨链脲佐菌素诱导小鼠实验性糖尿病模型的建立。方法一次性腹腔注射链脲佐菌素（150mg/kg）建立糖尿病小鼠模型,正常小鼠作对照。每周监测其体重和血糖变化,连续观察8周;摘取胰腺和肾脏,常规HE染色,光镜下进行组织形态学观察。结果与对照组相比,模型组小鼠体重明显减轻（P〈0.01）,血糖持续升高（P〈0.01）;模型组小鼠胰岛形态不规则,体积萎缩变小,胰岛内分泌细胞数量明显减少;肾小球明显肥大,且毛细血管数目显著增多。结论单剂量腹腔注射链脲佐菌素（150mg/kg）诱导糖尿病小鼠模型,是糖尿病相关研究较理想动物模型之一。     

1型糖尿病小鼠模型的构建

目的构建1型糖尿病小鼠模型,为进一步研究1型糖尿病发病机制及治疗方法提供依据。方法模型的诱导采用多次小剂量链脲佐菌素(STZ)给药法(MLDSTZ),雄性BALB/c小鼠64只,随机分为3组:模型组、阴性对照组、正常对照组。模型组小鼠连续5 d腹腔注射STZ溶液,阴性对照组腹腔注射柠檬酸缓冲液,正常对照组不注射。给药后观察小鼠一般状况,检测血糖、尿糖,同时以石蜡切片观察小鼠的胰腺组织病理变化。结果 STZ诱导的糖尿病模型鼠与对照相比存在明显的多饮、多食、多尿和体质量减轻等典型的糖尿病表现。在末次注射STZ 3周后,模型组小鼠尿糖均为阳性,对照组均为阴性。在4周后,模型组小鼠空腹血糖水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。模型鼠均有不同程度的胰岛萎缩、胰岛β细胞空泡变性、数目减少及不同程度的胰岛炎改变。结论采用MLDSTZ构建的1型糖尿病小鼠模型稳定,方法可靠。     

实验性2型糖尿病兔模型的建立及其血清物质变化研究

目的 构建完整的、实用的、有效的2型糖尿病动物模型,动态监测2型糖尿病病理改变过程中血清指标的变化情况.方法 20只家兔随机分成2组:对照组5只,常规饲养,实验组15只,采用高脂高糖饲料喂养加5次耳缘静脉注射40 mg/kg链脲佐菌素(STZ)联合诱导的方法建立2型糖尿病兔动物模型,以空腹血糖≥11.0 mmol/ L作为造模成功的标准.观察糖尿病兔血清中血糖(FBG)、血脂(TG、TC)、C-反应蛋白(CRP)、胰岛素(INS)水平的变化.结果 实验组在饲养过程中,TG,INS,CRP水平升高,显著高于对照组(t为2.61,3.11,3.46,均P<0.05).首次注射STZ后2~7 d FBG,INS,CRP升高达到高峰,与对照组比较差异有统计学显著性意义(t=3.14,P<0.01;t=3.21,P<0.05;t=3.63,P<0.01),平均FBG≥16.0 mmol/L,无动物死亡,成模率80%.结论 高脂高糖饲料喂养加小剂量多次注射STZ可建立稳定的兔2型糖尿病模型,方法简便易行,死亡率低、成模率较高,可作为研究2型糖尿病的理想动物模型.     

链脲佐菌素诱导1型糖尿病的发生机制

目的 探讨链脲佐菌素(SIZ)注射诱导的1型糖尿病(T1DM)模型鼠胰岛细胞的损伤机制.方法 STZ对清洁级雄性7周龄Balb/C小鼠胰岛细胞的直接细胞毒试验;应用小剂量STZ、多次腹腔注射方法,诱导1型糖尿病小鼠模型.然后,脱颈处死1型糖尿病模型鼠,无菌制备模型鼠脾淋巴细胞与无菌制备的预先小剂量STZ致敏的同系鼠正常胰岛细胞体外混合培养,以同系正常鼠脾淋巴细胞为对照,观察模型鼠脾淋巴细胞及STZ对胰岛细胞的影响,MTT法检测OD值,化学发光法检测各组胰岛细胞所分泌的胰岛素量.结果 细胞毒试验显示以0.2 mg/ml STZ与正常Balb/C小鼠的胰岛细胞混合培养后,胰岛细胞损伤与对照组比较无明显变化(P>0.05),可用于体外胰岛细胞致敏;在脾淋巴细胞浓度为5×106 个/ml时,混合培养72h和144 h的结果:无SYZ致敏组、24hSTZ致敏组和48hSTZ致敏组与其各自对照组比较胰岛细胞的损伤及胰岛素的分泌量均无明显变化.而混合培养216h的结果:无STZ致敏组和24hSTZ致敏组与其各自对照组比较具有明显差异(P<0.05),48hSTZ致敏组与其对照组比较具有显著差异(P<0.01).在脾淋巴细胞浓度分别为5×107/ml时,混合培养72 h的结果:无STZ致敏组和24 hSTZ致敏组与其各自对照组比较具有明显差异(P<0.05);48h STZ致敏组与其对照组比较具有显著差异(P<0.01),而混合培养144 h和216 h的结果:无STZ致敏组、24 h STZ致敏组和48 hSTZ致敏组与其各自对照组比较具有显著差异(P<0.01).结论 T1DM模型鼠脾淋巴细胞对同系正常鼠的胰岛细胞具有一定的免疫损伤作用;糖尿病模型鼠脾淋巴细胞明显加强对低剂量STZ致敏的同系正常鼠胰岛细胞的免疫损伤作用.胰岛细胞的免疫损伤的程度与1型糖尿病模型鼠激活的脾淋巴细胞数量、低剂量STZ致敏同系鼠胰岛细胞的时间以及上述两者混合培养的时间密切相关.     

链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型

目的:研究如何运用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型.方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为高脂组、糖尿病对照组、正常组.高脂组用STZ 60 mg/kg一次性左下腹腔注射,并结合4周的高糖高脂饮食.糖尿病对照组用相同剂量STZ一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周.正常组用相同剂量的柠檬酸缓冲液一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周.于注射药物后72 h及1、4、8、12周等不同时间点测量空腹体重、血糖、尿糖等指标,进行统计分析.结果:高脂组与糖尿病对照组、正常组相比空腹血糖、体重明显增加,差异有显著性(P<0.05).高脂组与糖尿病对照组相比血糖增高并能保持长时间的稳定、尿糖强阳性.结论:STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食4周可成功诱导2型糖尿病大鼠模型.     

链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型的方法学探讨

目的：对比观察不同方法对链脲佐菌素(STZ)诱导速发型糖尿病肾病(DN)模型的影响。方法wistar和sD大鼠，空腹或非空腹状态下，STZ一次腹腔注射，72h后监测血糖、尿蛋白以及一般项目，同时行肾胰病理检查。结果：空腹wistar鼠成模率62．5％，SD鼠为87．5％，非空腹组成模率是10％，未成模鼠小剂量空腹追加STZ无一例成模。成模鼠肾胰显示特征性改变。不同时点血糖值差异大，第二周平均尿蛋白排泄即达33．48mg／24h。结论：非空腹鼠成模率极低，SD鼠成模可能优于wistar鼠，成模前血糖至少连续三天同时点监测，对早期DN的观察最好始于成模后第一周。     

福建沿海地区1型和2型糖尿病人群血脂水平以及腰臀比值的相关调查研究

目的 探讨福建沿海地区1型（T1DM）和2型糖尿病（T2DM）人群的血脂各项指标和腰臀比值的差异.方法 研究对象包括对照组882名,T2DM组936例,T1DM组96例,血脂水平（包括甘油三酯、总胆固醇、高低密度脂蛋白和载脂蛋白）和腰臀比值（WHR）测定,稳态模型（HOMA）计算胰岛素抵抗（IR）指数,SPSS13.0软件统计.结果 （1）腰臀比值在T1DM组、T2DM组和对照组中不存在显著性差异,甘油三酯和低密度脂蛋白测定值T1DM组明显高于T2DM组和对照组（P〈0.05） 而甘油三酯与总胆固醇的比值在各组中差异无统计学意义（P〉0.05）.（2）载脂蛋白B在T1DM组与T2DM组内的分布差异无统计学意义（P〉0.05）,但高于对照组,高密度脂蛋白在各组间的分布差异有统计学意义（x2=3.549,x2=3.412,P≤0.05）即T1DM组〈T2DM组〈对照组.在DM组内,T2DM组的CHOL和LDL-C测定值均明显低于T1DM组（F1=6.406,P1=0.007 F2=9.183,P2=0.005）.结论 福建地区糖尿病人群血脂水平在T1DM组、T2DM组和对照组中存在显著差异,但腰臀比糖尿病组内无差别,T1DM比T2DM明显提高了DM合并血脂代谢紊乱的风险性.     

链脲佐菌素致糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的：对链脲佐菌素（STZ）致大鼠糖尿病（DM）性勃起功能障碍（ED）模型建立进行研究。方法：30只SD大鼠，随机分为5组：对照组、注射STZ40mg／kg组、注射STZ60mg／kg组、注射STZ80mg／kg组、注射缓冲液组，每组6只，分别记录4d、1周、2周、3周H的空腹血糖：阿朴吗啡（APO）诱导阴茎勃起次数及体质量。结果：空腹血糖及体质量在不同四个时间点和不同处理组间差异均有显著性（P均〈0．001），APO诱导阴茎勃起实验的勃起次数在注射STZ40mg／kg组与注射STZ60mg／kg组间差异存在显著性（P=0．043）。结论：STZ致大鼠DM模型的最佳注射剂量应为60mg／kg，APO诱导剂量以100μg／kg作为筛选ED模型的标准。     

Isogeneic or Allogeneic Transplantation of Duct-Ligated Pancreas in Streptozotocin Diabetic Mice

Abstract. Recovery from hyperglycaemia was observed in three different mouse hybrids that were made diabetic with streptozotocin, and then transplanted with pancreas from isogeneic donors whose pancreatic ducts were ligated over 8 weeks earlier. Recovery did not occur in recipients of allografts indicating that islets in ligated pancreas cannot be successfully transplanted across a major histocompatibility barrier. However, in lethally irradiated mice injected with allogeneic bone marrow (allogeneic radiation chimeras), subsequent transplantation of ligated pancreas from either isogeneic donors or allogeneic donor's of the same strain as the bone marrow donor decreased blood glucose of diabetic recipients. Thus, irradiation and allogeneic bone marrow therapy allow subsequent allogeneic transplantation of functional islet tissue in diabetic mice. Observations on diabetic mice transplanted isogeneically with ligated pancreas suggest that recovery from hyperglycaemia was more consistent when grafts were placed subcutaneously rather than intraperitoneally and when hosts received ligated pancreas from three donors rather than one. Thus, the site and amount of tissue transplanted are important considerations in the transplantation of ligated pancreas. Persistence of endocrine β-cells in ligated pancreas was required for recovery in grafted mice since diabetic hosts failed to recover when grafted with ligated pancreas obtained from alloxan or streptozotocin-treated, diabetic donors.     

三丁酸甘油酯诱导白血病细胞分化及凋亡机制的研究

为了探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂三丁酸甘油酯（tributyrin,TB）诱导NB4、K562白血病细胞分化和（或）凋亡的作用机制,利用Western blot方法及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测TB作用前后NB4、K562细胞组蛋白H3乙酰化水平以及p21^WAF1表达量的改变.结果表明：NB4（或K562）细胞经TB0.1 mmol/L（或TB 0.5 mmol/L）作用16小时后可见组蛋白H3乙酰化水平明显上升,并有剂量依赖效应.NB4、K562细胞经TB 0.1 mmol/L作用后可见p21^WAF1 mRNA表达上调,且具有剂量依赖效应.p21^WAF1 mRNA的这种上调开始于TB作用2小时后,16小时达高峰,可维持48小时.结论：TB诱导NB4、K562细胞发生分化和（或）凋亡的机制与TB引起细胞组蛋白高乙酰化和继而上调p21^WAF1表达有关.     

rhGM-CSF和rhIL-4诱导的髓性白血病细胞刺激自体T细胞增殖与IFN-γ分泌作用

为了研究rhGM-CSF和rhIL-4诱导的髓性白血病细胞刺激自体T细胞的增殖作用和IFN-γ的分泌作用。运用rhGM-CSF和rhIL-4在体外进行CML和AML外周血MNC培养，培养的第7天运用流式细胞术测定CML和AML细胞的CD80，CD86和HLA-DR表达；以诱导的白血病细胞作为刺激细胞，自体T细胞作为反应细胞，在体外进行混合淋巴细胞培养（MLR），测定自体T细胞的增殖情况和IFN-γ的分泌情况。结果显示,rhGM-CSF和rhIl-4明显上调CML细胞HLA-DR，CD80和CD86的表达，并明显上调AML细胞的CD80与CD86表达；诱导后的白血病细胞刺激自体T细胞明显的增殖和促进IFN-γ的分泌（CML组）作用。结论：rhGM-CSF和rhIL-4诱导的CML和AML细胞可能具有向自体T淋巴细胞递抗原的能力。     

Overexpression of Natural Killer T Cells Protects Vα14-Jα281 Transgenic Nonobese Diabetic Mice against Diabetes

Progression to destructive insulitis in nonobese diabetic (NOD) mice is linked to the failure of regulatory cells, possibly involving T helper type 2 (Th2) cells. Natural killer (NK) T cells might be involved in diabetes, given their deficiency in NOD mice and the prevention of diabetes by adoptive transfer of α/β double-negative thymocytes. Here, we evaluated the role of NK T cells in diabetes by using transgenic NOD mice expressing the T cell antigen receptor (TCR) α chain Vα14-Jα281 characteristic of NK T cells. Precise identification of NK1.1⁺ T cells was based on out-cross with congenic NK1.1 NOD mice. All six transgenic lines showed, to various degrees, elevated numbers of NK1.1⁺ T cells, enhanced production of interleukin (IL)-4, and increased levels of serum immunoglobulin E. Only the transgenic lines with the largest numbers of NK T cells and the most vigorous burst of IL-4 production were protected from diabetes. Transfer and cotransfer experiments with transgenic splenocytes demonstrated that Vα14-Jα281 transgenic NOD mice, although protected from overt diabetes, developed a diabetogenic T cell repertoire, and that NK T cells actively inhibited the pathogenic action of T cells. These results indicate that the number of NK T cells strongly influences the development of diabetes.     

金边瑞香浸膏对小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18表达的影响

目的观察金边瑞香（daphne odora var.marginata,DOVM）浸膏对小鼠血清干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素18（IL-18）表达的影响。方法选用昆明系小鼠60只,随机分为生理盐水组（对照组）和1、2、4、8、16 g/（kg.d）DOVM浸膏组共6组,每组10只。DOVM浸膏不同浓度组分别灌胃给药0.02 mL/g,1次/d,连续14 d;生理盐水组给予生理盐水灌胃0.02 mL/g,1次/d,连续14 d。常规分离血清后,采用生物素双抗体ELISA夹心法（ABC-ELISA）测定各组小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18的水平。结果1 g/（kg.d）DOVM浸膏组血清IL-4水平明显高于生理盐水组（P〈0.05）。生理盐水组与DOVM浸膏不同浓度组血清IFN-γ、IL-18水平比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）,DOVM浸膏不同浓度组间血清IFN-γ、IL-18水平比较差异也均无统计学意义（P均〉0.05）。结论1 g/（kg.d）DOVM浸膏对小鼠IL-4的表达有一定促进作用。