三种不同方法分离脐血造血干细胞的效果比较

目的探讨一种较好的脐血造血干细胞(HSCs)的分离方法,以最大限度地分离出脐血中的HSCs,使其以高纯度、最佳生长状态用于治疗和研究。方法取本院足月妊娠健康产妇的脐血20份,每份均采用羟乙基淀粉沉淀(HES)法、淋巴细胞分离液(Ficoll)密度梯度离心法、免疫磁珠(MACS)法处理。比较3种方法分离后的单个核细胞(MNCs)回收率、锥虫蓝拒染率及CD34细胞阳性率;将以上3种方法所得细胞用完全培养基培养,不同时间点计数细胞,绘制生长曲线,并观察原代细胞的生长情况及其形态特征;并采用半固体琼脂培养法,计数其粒-巨噬细胞集落形成单位数。结果 HES法得到的MNCs回收率高于Ficoll密度梯度离心法和MACS法(Pa<0.05);锥虫蓝拒染率三者比较差异无统计学意义(P>0.05);MACS法所得细胞CD34阳性率明显高于另2种方法(Pa<0.05),并且其所得细胞生长状态好,集落数最多;HES法和Ficoll法所得细胞,部分呈贴壁生长,与贴壁细胞共培养的细胞生长状态好;Ficoll密度梯度离心法得到细胞生长状态最差,集落数最少。结论 HES法可作为一种首选常规分离脐血造血干细胞的方法;MACS法分离得到造血干细胞纯度高,适于实验及临床研究。     

明胶-Ficoll法分离脐带血单个核细胞的方法学研究

目的比较直接利用Ficoll一步法和明胶-Ficoll两步法分离脐带血MNCs的效果。方法同一份脐带血分为两份,一份采用Ficoll直接分离MNCs,另一份先采用明胶沉淀红细胞后,再用Ficoll分离MNCs,比较两者的分离效率、细胞活力、细胞联苯胺染色阳性率、CD36和CD235a表达规律,以及CFU-E、BFU-E集落数。结果一步法和二步法的分离效率及细胞活力无统计学差异;一步法收集的细胞联苯胺染色阳性率高于二步法;一步法和二步法分离所得的MNCs表达CD36+/CD235a-和CD36+/CD235a+的细胞数无显著差异,但前者表达CD36-/CD235a+的细胞数比后者多;培养7天时CFU-E集落数,二步法稍低于一步法,14天时BFU-E集落数,二步法显著多于一步法。结论采用明胶-Ficoll二步法分离脐带血既不会增加MNCs的损失,还可更好地保留脐带血中比较早期的红系祖细胞。     

脐血间充质干细胞成功培养的相关因素探讨

目的探讨影响人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成功培养的相关因素,以期提高其培养成功率。方法脐血依胎龄分为3组:40周胎龄组(n＝11);36周胎龄组(n =6);32周及其以下胎龄组(n=5)。采用相对适宜的条件培养,观察能成功培养出MSCs的比率,探讨脐血MSCs培养与胎龄、脐血单个核细胞数量(mononuclear cells,MNCs)、脐血容量之间的相关关系,以及各因素之间可能存在的相关关系。通过检测脐血MSCs的生长曲线、细胞群体倍增时间、成纤维细胞集落形成数目(fibroblast colony forming unit,CFU-F)、表面标志的表达来观察脐血MSCs细胞的生物学特性。结果脐血MSCs培养成功率达54．5％。MSCs培养成功与否与接种于培养瓶内脐血MNCs数量密切相关,脐血MNCs接种数量在1．25×108／L以上者培养成功率达83．3％。单位体积内脐血MNCs含量与胎龄呈负相关。小胎龄者脐血MSCs成集落能力(CFU-F数目)高于大胎龄。流式细胞术检测显示,在原代培养细胞增殖期末间充质干细胞的重要表面标志CD29有62．1％的表达,传1代细胞表达CD29、CD105分别为78．3％和85．0％;造血系统的表面标志CD34、CD45则始终在3．0％以下。结论脐血MNCs的接种数量在1．25×108／L以上可以提高培养的成功率。相同容量内脐血MNCs与胎龄呈负相关,且脐血MSCs样细胞集落形成能力(CFU-F计数)小胎龄者高于大胎龄,可能是小胎龄脐血MSCs相对容易培养成功的原因之一。     

干细胞因子联合粒细胞集落刺激因子对单侧输尿管梗阻大鼠骨髓干细胞及内皮祖细胞的动员作用

目的：探讨干细胞因子(SCF)联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠骨髓干细胞及内皮祖细胞的动员作用。方法：56只Wistar大鼠随机分为7组：正常对照组、SCF组、G-CSF组、SCF联合G-CSF组（SCF-G组）、假手术组、UUO组、SCF联合G-CSF用于UUO组（UUO+SCF-G组）。实验第5天采集血标本后：①流式细胞仪检测静脉血单个核细胞中CD34+、CD34+/CD133+细胞;②检测血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐水平。结果：①对照组大鼠静脉血单个核细胞中CD34+细胞为（0.13±0.01）%,假手术组CD34+细胞为（0.24±0.06）%与对照组比较差异无显著性（P>0.05）;其余各组与对照组比较CD34+细胞百分率均明显增高(P<0.05),以UUO+SCF-G组（3.04±0.42）%及SCF-G组（2.10±0.28）%增高最为明显;②对照组大鼠静脉血单个核细胞中CD34+/CD133+细胞为（0.02±0.01）%,假手术组CD34+/CD133+细胞（0.05±0.02）%与对照组比较差异无显著性（P>0.05）;其余各组与对照组比较CD34+/CD133+细胞百分率均明显增高(P<0.05),以UUO+SCF-G组（0.73±0.17）%增高最为明显;③7组血清尿素氮,肌酐、谷丙转氨酶水平无明显增高,UUO组谷草转氨酶水平较其他6组增高,差异有显著性。结论：SCF和G-CSF对干细胞和内皮祖细胞的动员效果并非完全呈平行关系,联合使用可提高内皮祖细胞和干细胞的动员率,短期内未见肝、肾毒副作用。［中国当代儿科杂志,2007,9（2）：144-148］     

早产儿脐血造血干/祖细胞特点

目的对12例早产儿和18例足月儿脐血采集量、有核细胞数量、CD34+细胞比例、体外形成造血细胞克隆的能力进行比较研究。方法采用密闭式脐血采集袋,经脐静脉穿刺收集脐带血,按体积比5:1与60 g.L-1羟乙基淀粉(HES)混合、浓缩有核细胞,流式细胞仪检测CD34+细胞比例,甲基纤维素半固体培养基检测其脐血形成造血细胞克隆能力。结果早产儿脐血采集量及分离前后有核细胞数量均低于足月儿脐血[脐血采集量分别为(76.52±22.48)mLvs(94.21±20.32)mL,P<0.05;分离前有核细胞数量分别为(4.78±2.30)×108vs(8.36±2.51)×108,P<0.01;分离后有核细胞数量分别为(3.72±1.71)×108vs(6.54±1.94)×108,P<0.01)]。早产儿CD34+细胞比例高于足月儿脐血[(0.49±0.16)%vs(0.32±0.13)%,P<0.01],早产儿脐血体外生成红系爆式集落形成单位和粒-单系集落形成单位的能力也高于足月儿脐血[分别为(29.58±10.54)/2×105MNCvs(19.27±7.26)/2×105MNC,P<0.01和(45.28±16.2...     

诱导脐血内皮祖细胞分化成内皮细胞的研究

目的探讨诱导脐血来源内皮祖细胞分化为内皮细胞,分析其用作组织工程心血管修复物种子细胞来源的可行性。方法采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合应用分离脐血单个核细胞,在含有血管内皮生长因子(VEGF)等多种生长因子的培养液中培养扩增,通过形态学(光镜、电镜)、免疫荧光和流式细胞仪等技术对脐血来源内皮祖细胞分化的内皮细胞进行鉴定。结果从新鲜脐血中得到的单个核细胞数(3.4±2.1)×107/mL。贴壁细胞培养分化过程中形态发生改变,从小圆形变成梭形,最后分化成典型成熟内皮细胞的鹅卵石样形态,细胞数量可扩增达107。7 d后免疫荧光检测发现细胞表达内皮细胞特异性标志vWF和VEGFR-2。流式细胞仪分析单个核细胞经诱导分化后细胞表面表达CD133下降,从3.11%±1.05%下降至0.09%±0.02%。透射电镜观察到培养14 d的细胞胞浆中已出现典型的Weibel-Palade小体。结论脐血单个核细胞存在内皮祖细胞,并在体外可诱导分化为内皮细胞,初步具有用作构建组织工程心血管修复物种子细胞的可行性。     

儿童晚期神经母细胞瘤自身造血干细胞移植疗效评估

目目的评价自身造血干细胞移植（ASCT）和CD34+细胞分选的ASCT对晚期神经母细胞瘤（NB）的疗效。方法回顾性分析2001年6月至2007年4月 在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心诊断为Ⅲ、Ⅳ期NB并完成治疗随访8个月以上患儿的临床资料,比较传统化疗与ASCT和CD34＋细胞 未分选移植与分选移植的疗效。用荧光定量PCR方法检测CD34+细胞分选前后酪氨酸羟化酶（TH）mRNA表达,监测NB的微小残留（MRD）,并评估 分选效果。结果55例NB患儿入组,其中Ⅲ期14例,Ⅳ期41例。Ⅲ期中的9/14例和Ⅳ期中的18/41例接受传统化疗;Ⅲ期中的5/14例和Ⅳ期中的 23/41例接受ASCT。Ⅳ期13/23例接受ASCT治疗患儿移植物经CliniMACS行CD34＋细胞分选处理。所有移植患儿均以卡铂、依托泊苷和美法仑行预 处理,平均采得有核细胞（7.1±2.5）×108·kg-1 ,CD34+细胞（4.0±1.5）×106·kg-1,无一例因移植相关并发症死亡。随访患儿的生存 时间及复发率：①Ⅲ期NB：化疗组平均随访33.5个月,3/9例（33％）复发;移植组平均随访37.0个月,1/5例（20％）复发,两组的中位无病 生存时间差异无统计学意义,(37.0±15.7)个月 vs (18.0±29.9)个月,P=0.446。②Ⅳ期NB：化疗组平均随访20个月,13/18例（72％）复发 ;移植组平均随访29个月,14/23例（61％）复发,两组的中位无病生存时间差异有统计学意义,（24.0±5.4)个月 vs (36.0±2.8)个月, P=0.006。③CD34＋细胞分选移植：未分选组平均随访27.8个月, 7/10例（70％）复发;CD34＋细胞分选组平均随访30.0个月,7/13例（54％） 复发,两组的中位无病生存时间差异无统计学意义,（34.0±11.8）个月 vs （36.0±5.1）个月,P=0.722。4例移植患儿CD34+细胞分选前后 的标本同时进行TH MRD检测,结果显示移植前TH阳性的2例标本经分选后全部转阴。结论ASCT能显著延长Ⅳ期NB患儿的长期生存时间,但对Ⅲ期 NB患儿的疗效不显著。CD34＋细胞分选能达到纯化NB细胞的作用,但可能因病例数较少,尚不能显示出ASCT临床优势。     

免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞的实验研究

目的 探讨免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞的可行性.方法 采用免疫磁珠细胞分选法去除羊水细胞中CD44和SSEA4阳性细胞,使OCT-4阳性胎儿干细胞间接得到分离,体外培养扩增后,观察细胞生长特性,免疫荧光染色计算OCT-4阳性胎儿干细胞得率,Real-TimePCR比较分离前后OCT-4表达量的差异,免疫组化检测NANOG、AKP、MAP-2、NGFR和Myosin等细胞因子的表达.结果 经免疫磁珠分离的细胞接种12h内贴壁生长,形态呈梭形,部分呈多角形,融合后形成辐射状排列.免疫荧光染色OCT-4阳性细胞得率为(90.15±8.25)%,Real-TimePCR检测结果显示分离后细胞OCT-4的表达量较未分离细胞和MSC有显著性差异(P＜0.01).原代培养可获得(1～2)×107个细胞,3代可获得(2～4)×108个细胞,传至10代以后细胞的增殖能力下降.免疫组化结果显示OCT-4阳性胎儿干细胞表达NANOG、AKP、MAP-2和NGFR等细胞因子.结论 免疫磁珠细胞分选法可以从羊水中分离出OCT-4阳性的胎儿干细胞,分离后的细胞保持干细胞原有特性及生物学特征,可作为组织工程种子细胞.     

毛细支气管炎CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3 mRNA表达及与IgE关系

目的：通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿CD4+CD25+调节性T细胞（CD4+CD25+Treg）、Foxp3 mRNA的表达、IgE合成的检测,以探讨其在RSV毛细支气管炎发病机制中的作用。方法：在RSV检测阳性的57例毛细支气管炎患儿中,运用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg的比例,RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达量、ELISA法检测血清总IgE含量。25例健康儿童作为对照组。结果：毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞数量减少,特应性体质（7.7±1.6%）和非特应性体质组（8.8±2.1%）均低于对照组（10.5±1.6%）（P均<0.01）。毛细支气管炎特应性体质和非特应性体质组外周血Foxp3 mRNA表达亦均低于对照组（P<0.01）。而血清总IgE含量毛细支气管炎特应性体质（241.2±102.5 IU/mL）和非特应性体质组(125.5±63.2 IU/mL)均高于对照组(27.2±10.5 IU/mL)（P<0.01）。外周血CD4+CD25+Treg细胞数量、Foxp3 mRNA表达及血清总IgE含量在毛细支气管炎特应性体质和非特应性体质组之间差异有显著性意义。CD4+CD25+Treg、Foxp3 mRNA与血清IgE水平之间相关密切,r=-0.70,-0.79(均P<0.01)。结论：毛细支气管炎外周血淋巴细胞CD4+CD25+Treg和Foxp3 mRNA表达降低,二者低水平表达使IgE合成增多,共同参与了RSV毛细支气管炎的发病。［中国当代儿科杂志,2009,11（5）：349-353］     

TPO和FL有效扩增脐血CD34+细胞为巨核前体细胞

目的探讨人脐血CD34+细胞在TPO和FL细胞因子组合作用下体外扩增为巨核前体细胞的效果,为开展血小板减少症的细胞治疗建立实验条件。方法本研究采用人脐血经免疫磁珠法纯化分离的CD34+细胞,研究TPO+FL细胞因子组合对体外巨核前体细胞的扩增效果。结果显示在TPO与FL组合的作用下,脐血CD34+细胞(n=6)显著地扩增为巨核前体细胞(CD61+CD41+细胞),作用14天为较理想时间。无论是全细胞数和CD34+细胞,或是CD61+CD41+细胞和CFUMK,经过体外扩增,均显著增加。结论研究表明脐血CD34+细胞在TPO和FL细胞因子组合作用下可有效地扩增为巨核前体细胞,第14天是培养较理想时间。     

CD11b对儿童急性白血病脐血移植粒细胞和血小板恢复时间的影响

为了研究CD34+ CD1 1b+ 细胞输入量在脐血移植中对中性粒细胞和血小板恢复时间的影响 ,观察并分析 1 7例儿童急性白血病患者进行无关脐血移植的临床数据。结果显示 ,移植后 1 7例患者中性粒细胞≥ 0 5× 1 0 9 L的时间为 1 1～ 32天 (中位数为 1 7天 ) ;血小板≥ 2 0× 1 0 9 L的时间为 1 2～ 1 1 8天 (中位数为 4 0天 )。CD34+CD1 1b+ 细胞输入量为 1 0 7～ 79 0 0× 1 0 4 Kg(中位数为 9 1 8× 1 0 4 Kg)。CD34+CD1 1b+ 细胞输入量与中性粒细胞恢复时间呈反比 (γ =- 0 4 89,P <0 0 5) ;CD34+CD1 1b+ 细胞输入量与血小板恢复时间无关 (r =- 0 2 38,P >0 0 5)。CD34+ CD1 1b+细胞输入量与造血干细胞移植时的造血重建有关。     

脐血造血细胞含量与白血病脐血移植疗效分析

目的分析4711份库存脐血造血细胞含量及探讨脐血造血细胞含量与白血病脐血移植疗效的关系。方法分析4711例库存脐血总有核细胞数(TNC)和CD34+细胞数分布情况,探讨不同的造血细胞输入量、供受者HLA不相合数、受者性别、年龄、体重和疾病类型间植入率和生存率的差异。结果 4711例库存脐血TNC和CD34+细胞中位数分别为1.14×109/kg和4.06×106/kg,按3.7×107/kg有效TNC输入量计算,93.2%脐血可供体重50 kg以下受者移植。89例白血病患者移植后植入75例,植入率为84.3%。中性粒细胞绝对值≥0.5×109/L、血小板≥20×109/L和≥50×109/L的时间分别为移植后17、34和46 d。75例植入病例中,长期无病存活47例,死亡26例,2例复发;急性移植物抗宿主病(GVHD)Ⅰ～Ⅱ度、Ⅲ～Ⅳ度和慢性GVHD发生率分别为54.7%、20.0%、9.3%。影响移植植入率的因素包括受者年龄、TNC和CD34+细胞输入量;影响生存率的因素包括受者年龄、体重和输入CD34+细胞数。结论在无法找到HLA全相合骨髓供者时,可选择脐血作为替代骨髓的造血干细胞来源治疗儿童与成人白血病,TNC和CD34+细胞数仍是选择脐血移植物的参考指标。     

Does Mesenchymal Stem Cell Population in Umbilical Cord Blood Vary at Different Gestational Periods?

Objective

To identify and quantitatively determine Mesenchymal stem cells (MSCs) in the umbilical cord blood (UCB) of neonates born at different gestational periods.

Methods

UCB was collected at birth in neonates of three different gestational groups. The mononuclear cells (MNCs) were phenotypically analyzed by flow cytometer.

Results

The yield of total MNCs did not differ much with gestation; the average values were 22.6?±?6.48?×?106 cells/ml. The MSCs were significantly higher in the lower gestation group. These were 0.0219?±?0.012 %, 0.0044?±?0.003 % and 0.0022?±?0.003 % in 28 to 31 wk, 32 to 35 wk and >36 wk, respectively (P?=?0.00). There was a significant inverse correlation between the gestational age and the presence of MSCs with a correlation co-efficient of ?0.54 (P?=?0.0001).

Conclusions

The MSCs population was significantly higher in infants born at lesser gestation than those born at term gestation.     

Expression of AC133 vs. CD34 in acute childhood leukemias

AC133, a newly discovered antigen on human progenitor cells, demonstrating 5-transmembranous domains is expressed by 30-60% out of all CD34+ cells. Our aim therefore was to investigate the extent of human stem-/progenitor cells expressing AC133 antigen in umbilical cord blood, peripheral blood without or following an application of granulocyte-colony stimulating factor (rhG-CSF). The main task was the investigation of bone marrow aspirates derived from children suffering from newly diagnosed acute leukemias, as well as from patients with a relapse or during a complete remission. The determination of antigen expression was done by application of flow cytometry (FACScan analysis) and the usage of newly developed monoclonal antibodies (AC133/1 and AC133/2; Miltenyi Biotec GmbH) in combination with monoclonal antibody directed against CD34-antigens (HPCA-2; BD). Our studies till now show average percentages in umbilical cord blood derived from 43 newborns about 0.294 +/- 0.165% AC133+ vs. 0.327 +/- 0.156% CD34+ hematopoietic stem-/progenitor cells (HSPC). In peripheral blood from 11 healthy donors we verified up to 0.15% CD34+ as well as AC133+ HSPC's. The concentration of progenitor cells was found to be obviously higher in peripheral blood from children with various diseases (neuroblastoma, rhabdomyosarcoma, ALL/AML) and undergoing application with rhG-CSF in order to be prepared for PBSC-transplantation. In those cases we found up to 3.51% AC133+ cells as well as slightly higher values (3.94%) for CD34 antigens. Additionally we quantified 128 bone marrow (BM) samples for AC133+ and CD34+ cells. In 10 BM samples, derived from patients without any neoplasia, the CD34+ cells were about 0.03% and 1.49%, whereas AC133 values were up to 0.64%. Bone marrow aspirates from 53 children with acute leukemias at time of diagnosis (ALL: n = 41/AML: n = 12) have been immunophenotyped and leukemic blast cells have been proved for AC133- and CD34 antigen expression. 32/41 (78%) of lymphoblastic leukemic cells showed to be positive for CD34 antigen and 24/41 (58%) demonstrated AC133 antigens. Interestingly there were 2 ALL-patients with pathological blast cells positive for AC133 but lacking of any CD34 antigens. 42% (5/12) of investigated AML patients showed CD34+ phenotype, on the other hand there were only 25% (3/12) with AC133+ phenotype. Similar values were found in relapsed patients (n = 18). In BM samples from patients during complete remission (n = 47) we could detect percentages up to 5.55% for CD34 and up to 1.25% for AC133 positive stem-/progenitor cells. Such quite high data may be explained by occasionally application of rhG-CSF therapy. Our results till now lead to the conclusion, that it seems to be useful, to recruit quantification of CD34+ HPSC by additionally detecting AC133 antigens. This new stem cell marker (AC133) may be of great value in case of autologous peripheral blood stem cell transplantation (PBSCT) because it could be an alternative to the usual CD34+ MACS selection system.     

母婴因素对脐血CD34+造血干/祖细胞的影响

目的 比较不同母婴因素与脐血有核细胞总数及CD34⁺造血干/祖细胞数量的关系,为脐血库合理选择脐血提供参考。方法 前瞻性收集130例2019年6月至2020年1月期间于大连市妇女儿童医疗中心分娩的新生儿脐血标本,男女比例为1：1。收集围生期相关信息：孕母年龄及血型,有/无妊娠糖尿病、妊娠高血压,妊娠方式、分娩方式、单胎/双胎,新生儿体重、性别、生后Apgar评分,以及胎盘、羊水、脐带情况。结果 根据孕母血型、妊娠糖尿病、妊娠高血压、妊娠方式、分娩方式、单胎/双胎,新生儿性别、生后Apgar评分,胎盘形态、羊水胎粪污染、脐带绕颈等情况进行分组,组间比较脐血有核细胞总数及CD34⁺细胞计数差异均无统计学意义（P > 0.05）。孕母年龄、新生儿体重与脐血有核细胞总数无相关性（P > 0.05）,新生儿体重与CD34⁺细胞计数无相关性（P > 0.05）,孕母年龄与CD34⁺细胞计数呈正相关（P < 0.05）。结论 脐血中CD34⁺细胞数量随孕母年龄增大而增多,故脐血库在筛选脐血时,同等条件下可以选择年龄偏大的孕妇。     

酶消化法分离脐带干细胞

目的 研究酶消化法从脐带组织中分离干细胞的可能性,为心血管组织工程研究提供一个新的种子细胞来源.方法 采用胶原酶胰酶消化新鲜脐带组织,将获得的细胞传代培养,观察基本生物学特性,流式细胞仪鉴定细胞表面分子,以不同方法将其向骨、脂肪和心肌细胞方向诱导,分别采用Von Kossa、油红O染色和免疫组织化学染色对分化的细胞进行鉴定.结果 新鲜分离的脐带细胞在培养72h后,开始贴壁,传代培养后,细胞逐渐纯化,流式细胞仪分析这些细胞表达CD13、CD29、CIN4、CD90、CD105、CD166和MHC-Ⅰ,而不表达CD31、CD34、CD45、CD106和MHC-Ⅱ.在成骨细胞和成脂肪细胞诱导培养后,Von Kossa染色和油红O染色阳性.在5-氮胞苷诱导4周后,免疫组织化学染色心肌特异性抗体肌动蛋白a-actin和肌钙蛋白T阳性.结论 脐带组织中含有丰富的干细胞,酶消化法能够成功分离出脐带干细胞.     

群体反应性抗体干扰脐血CD34+细胞增殖、分化的实验研究

目的 探讨血清特异性群体反应件抗体(PRA)对脐血CD34+细胞增殖、分化能力的影响.方法 取含PRA(经实验证实)的β地中海贫血患儿血清,与脐血CD34+细胞、补体孵育,观察PRA对CD34+细胞增殖、分化的影响,分A组(不加血清组)、B组(PRA血清组)、C组(PRA血清加补体组)、D组(补体组)、E组(PRA阴性血清组)共5组.孵育后以3H-TaR掺入法测定细胞DNA合成及流式细胞仪检测Annexin V和CD95表达;并进行集落培养,于第10天计数集落.结果 A组为(20.71±2.81)U/L,低于B组(64.28±5.12)U/L、C组(84.29±4.99)U/L,B组低于C组;D、E组均为(22.86±2.91)U/L和(22.86±2.91)U/L,均低于B、C组;各组氚每分钟β射线释放量(cpm):A组为(22629±3288),高于B组(4598±2178)和C组(1626±1192),A组和D、E组之间的差异无统计学意义(P＞0.05);A组的总集落数、粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、混合系集落形成单位(CFU-GEMM)及爆式红系集落形成单位(BFU-E)数均高于B、C组,B组的总集落数、CFU-GM及CFU-GEMM数均高于C组;D组和E组的各种集落数与A组的差异无统计学意义(P＞0.05);各组CD34+细胞Annexin V及CD95表达百分率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 特异件PRA血清对脐血CD34+细胞的增殖和分化有抑制作用,补体可增强上述作用;特异性PRA血清对脐血CD34+细胞的凋亡无明显影响.