不明原因习惯性流产患者主动免疫治疗前后TH1/TH2型细胞因子水平的变化

通过检测原因不明习惯性流产 (ｕｎ ｅｘｐｌａｉｎｅｄｈａｂｉｔｕａｌａｂｏｒｔｉｏｎ ,ＵＨＡ)患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)经滋养细胞抗原刺激产生各细胞因子的水平 ,探讨ＴＨ1/ＴＨ2因子在ＵＨＡ发病及主动免疫治疗中的作用。ＵＨＡ患者 35例 ( 2 7.5± 3.3岁 ) ,均接受 2疗程小剂量主动免疫治疗 ,免疫原采用丈夫或健康无关第三个体淋巴细胞 ,免疫剂量为 2× 10 7～ 3× 10 7个淋巴细胞 ,间隔 3周 ,共免疫 4次 ,在治疗前及免疫结束后 3周分别抽取外周血。同时选取 15名育龄健康未孕妇女 (至少有1次足月活产史 )作为正常对照组。…     

原因不明习惯性流产患者主动免疫前后IL-4、IL-12变化的研究

目的:探讨原因不明习惯性流产（UHA）患者主动免疫治疗前后外周血IL-4和 IL-12mRNA水平的变化。方法:用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测30例正常非孕妇女和30例UHA妇女的外周血单个核细胞内IL-4和IL-12mRNA表达水平的相对含量（％）。结果:①UHA组妇女外周血单个核细胞上IL-4mRNA的相对含量,明显低于正常非孕组妇女（P<0.01）。而IL-12　mRNA的相对含量明显高于正常非孕组妇女（P<0.05）。②主动免疫治疗后,UHA组妇女外周血单个核细胞上IL-4 mRNA的相对含量较治疗前明显升高（P<0.05）,而IL-12mRNA的相对含量较治疗前明显降低（P<0.01）。③主动免疫治疗后,UHA组妇女上述细胞因子mRNA的相对含量与正常非孕组妇女相比无显著差异。④主动免疫治疗后,妊娠成功者其外周血单个核细胞上IL-4　mRNA的相对含量较治疗前明显升高（P<0.05）,IL-12　mRNA的相对含量较治疗前明显降低（P<0.05）;而妊娠失效者IL-4和IL-12　mRN的相对含量与治疗前无显著差异。结论:IL-4和IL-12的表达异常与UHA的发生密切相关,主动免疫治疗可上调IL-4的表达及下调IL-12的表达,可能进一步诱导TH2分化和抑制TH1分化,从而促使TH1/TH2型细胞因子平衡向TH2为主的模式转换,并使妊娠获得成功。     

原因不明习惯性流产者免疫治疗前后APCA的比较

目的寻求治疗原因不明习惯性流产新的有效途径,探讨抗父体淋巴细胞毒抗体主动免疫治疗前后的变化.方法采用丈夫淋巴细胞对32例原因不明习惯性流产患者在怀孕前后各给予两次免疫治疗,20例同期在本院就诊,年龄组相当,有过足月分娩史的妇女作为对照组.对20例对照组及32例流产组治疗前后,分别检测抗父体淋巴细胞毒抗体.结果治疗组妊娠成功率为84.4%,对照组妊娠成功率为25%.两组比差异显著(P＜0.01=).对照组APCA阳性率为80%,流产组在治疗前的APCA为9.4%,两组比差异显著(P＜0.01=);流产组治疗后的APCA为78%,治疗前与治疗后比差异显著(P＜0.01=).结论主动免疫治疗可以提高习惯性流产患者妊娠成功率,也可诱导母体产生保护性抗体.     

淋巴细胞培养后免疫治疗原发性习惯性流产的研究

目的　探讨淋巴细胞培养后免疫治疗原发性习惯性流产 (UHA)的可行性。方法　采用白细胞介素 2 (IL 2 )刺激淋巴细胞 ,体外培养后主动免疫治疗UHA患者并检测其机体免疫反应状态。结果　 (1)免疫治疗组比对照组妊娠成功率明显提高 (P <0 .0 5 )。 (2 )免疫治疗后CD4/CD8比值和血清肿瘤坏死因子α(TNFα)变化与常规淋巴细胞免疫治疗相似。结论　 (1)淋巴细胞培养后可增加免疫原活性 ,减少用量 ,提高妊娠成功率。 (2 )临床观测无胎儿宫内生长迟缓及畸形儿出生。     

主动免疫治疗原因不明习惯性流产致荨麻疹反应一例

主动免疫治疗原因不明习惯性流产方法简单,治疗成功率高,对孕妇的副作用少见报道。在实际工作中发现免疫治疗后致妻子荨麻疹反应一例,报道如下。临床资料患者陈某,31岁,汉族,发生早期流产4次。排除因遗传、内分泌、解剖异常、感染、自身免疫病等常见原因引起的流产,诊断为原因不明习惯性流产。丈夫身体健康无传染病。采用免疫疗法对妻子进行主动免疫治疗。具体方法见文献[1]。治疗6h后,在妻子的手背、膝盖、腋窝、腹股沟等处出现对称性红斑,瘙痒,无发热、寒战。经静脉注射葡萄糖酸钙,口服息斯敏,1h后症状逐渐消失,诊断为荨麻疹反应。在过后…     

习惯性流产免疫治疗中HLA封闭抗体的变化

本文调查了６８例不明原因的习惯性流产的妇女，发现病人普遍缺乏封闭抗体，抗丈夫白细胞抗体（ＡＰＬＡ）阳性率８．３３％，远远低于正常孕妇对照组的３４％；但是，６２例在接受ＨＬＡ免疫后ＡＰＬＡ阳性率提高到３７．１％，其中３５例成功分娩健康的婴儿。研究说明ＡＰＬＡ可以作为免疫治疗效果及疾病转归的观察指标。     

不明原因习惯性流产患者主动免疫治疗前后Th1/Th2型细胞因子水平的变化

为探讨主动免疫治疗对不明原因习惯性流产 (UHA )患者Th1/Th2型细胞因子水平的影响。采用酶联免疫吸附法检测15例正常非妊娠妇女、 35例UHA患者淋巴细胞主动免疫治疗前后经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果发现 :(1)在最佳诱导时间下 ,UHA组治疗前PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显低于正常对照组 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生IL 2、IFN γ的水平较治疗前明显降低 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平较治疗前明显升高 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生各细胞因子的水平与正常对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )UHA组 35例患者主动免疫治疗后半年内 2 8例妊娠 ,其中 9例又出现自然流产。 9例自然流产者治疗后IL 2、IFN γ水平未明显下降 ,IL 10水平未明显上升。 19例妊娠成功者治疗后IL 2、IFN γ水平较治疗前明显下降 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显上升 (P <0 0 5 )。以上结果表明UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,主动免疫治疗有助于上调Th2型细胞因子及下调Th1型细胞因子 ,利于UHA患者妊娠成功。     

36例封闭抗体不足习惯性流产患者免疫治疗的临床分析

为了探讨36例封闭抗体不足习惯性流产患者接受淋巴细胞免疫治疗的效果。病例选自2007年1月至2009年12月在三家医院就诊36例封闭抗体阴性习惯性流产患者,进行淋巴细胞免疫治疗。结果显示:36例患者在接受3个疗程的免疫治疗后,封闭抗体转为阳性30例(83.3%),与治疗前比较有统计学意义(P<0.01)。32例再次妊娠,3例再次发生早中期流产,妊娠时间维持到28~32周者共2例,32周~36+6周21例,足月分娩活婴6例,妊娠总成功率为80.6%。结果表明,淋巴细胞免疫是一种治疗封闭抗体不足习惯性流产有效、安全的方法。     

习惯性流产患者的淋巴细胞免疫治疗

反复习惯性流产（reeurent or repetitive spontaneous abortion,RSA）是指连续发生了3次或3次以上的自然流产。发生率为0．4％～1．0％,原因复杂,有解剖、内分泌、遗传、感染等原因,其中有40％～80％的患者原因不明,考虑与免疫有关,而封闭抗体（blocking antibody,BA）的缺乏是RSA的重要原因之一。我院自2003年9月始,利用丈夫淋巴细胞皮内注射,治疗原因不明的自然流产44例,治愈率达73．8％。收到良好的效果,现报道如下。     

原因不明习惯性流产与HLA相关性的初步研究

探讨ＨＬＡ与原因不明习惯性流产的关系。方法用血清学方法对６４例３次以上ＲＳＡ患者及其配偶进行ＨＬＡ抗原检测,并与１００例正常群体比较。结果ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－ＤＱ位点抗原频率在ＲＳＡ病人组与正常对照组中无明显差异,而且ＨＬＡ－ＤＲ７抗原频率在ＲＳＡ夫妇中则明显增高,为２１．８８％,Ｐ〈０．０１ＲＲ值为２．８。     

Immunosuppressive role of transforming growth factor beta in breast cancer

Transforming growth factor beta (TGF-β) is a multifunctional cytokine, whose myriad of functions include its ability to potently suppress the immune system. Because of its ability to negatively modulate the inductive and effector phases of the immune response, TGF-β is thought to contribute to tumor progression and metastases formation. Immunosuppression by tumor-derived TGF-β is increasingly becoming recognized as an important factor in tumor progression and may, in part, explain the low response rates achieved in cancer patients undergoing immunotherapy for their disease. This review will focus on the immunosuppressive role of tumor-derived TGF-β in breast cancer. Due to the paucity of human studies, it will specifically address the actions of tumor-derived TGF-β on cells of the immune system in preclinical animal models, as well as discuss strategies to negate the deleterious effects of TGF-β in order to improve the anti-tumor immune response.     

转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响

 目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2（LTBP2）中的作用及信号传导通路。 方法：培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。 结果：LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加（0、2、5、10 ng/mL）而明显升高,在5 ng/mL时刺激最强（P < 0.05）;5 ng/mL的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势（P < 0.05或P<0.01）;免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。 结论：TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。     

肠道缺血再灌流对肾内源性碱性成纤维细胞生长因子和 …

目的和方法：研究肠道缺血再灌流过程对肾脏内源性碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β基因表达的影响，采用肠系膜上动脉夹闭４５ｍｉｎ与再灌流６ｈ和２４ｈ动物模型，用原位杂交与逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究两种生长因子基因在正常，缺血以及再灌流肾组织中的表达。     

P13K/Akt信号通路在白蛋白诱导肾小管上皮细胞转化生长因子β1表达中的作用

目的 研究白蛋白对人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)的影响,以及P13K/Akt信号通路在这一过程中的作用.方法 体外培养HK-2细胞,分为对照组、白蛋白(BSA)组和白蛋白加抑制剂(BSA+Ly294002)组.分别于培养12、24、48 h后,用MTT法检测HK-2细胞的增殖;RT-PCR检测HK-2细胞TGF-β1 mRNA的表达;Western印迹测定HK-2细胞TGF-β1和磷酸化的PI3K(p-PI3K)、Akt(p-Akt)蛋白分泌.结果 白蛋白可明显诱导HK-2细胞增殖(P<0.05),诱导后12 hBSA组与对照组比较,TGF-β1 mRNA表达明显上调(0.472±0.025比0.233±0.021,P<0.05);TGF-β1蛋白明显上调(296±20.1比100±13.2,P<0.05);p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著增加(P<0.05).加Ly294002 12 h时HK-2增殖受抑制;48 h时TGF-β1 mRNA、蛋白和p-PI3K、P-Akt蛋白的表达也受到抑制(均为P<0.05).结论 白蛋白通过活化PI3-K/Akt信号转导通路诱导肾小管上皮细胞产生TGF-β1.     

转化生长因子β1降低大鼠自发性癫痫发作并抑制胶质细胞活化

 目的：观察经鼻给予转化生长因子β₁（TGF-β₁）是否能减少匹罗卡品致痫大鼠慢性自发性癫痫的发作并探讨其可能机制。方法：经鼻给予大鼠重组人TGF-β₁或等量PBS溶液,以匹罗卡品建立癫痫持续状态模型,癫痫持续状态后7 d经动态视频记录其活动,通过胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合接头分子1（Iba1）免疫组化观察癫痫大鼠海马组织胶质细胞的活化,采用尼氏染色观察海马区神经元的死亡。结果：TGF-β₁有效降低自发性癫痫的平均频率、发作程度和持续时间。癫痫持续状态后14 d TGF-β₁治疗组海马区活化的胶质细胞明显少于匹罗卡品模型组（P<0.05）;TGF-β₁显著降低海马CA3区神经元的死亡(P<0.01)。结论：经鼻给予TGF-β₁可降低大鼠自发重复性癫痫发作,抑制胶质细胞活化,从而减少神经元的死亡。     

转化生长因子-β1的Smad4非依赖性途径对胰腺癌细胞生长的影响

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1过表达对Smad4纯合性缺失的胰腺癌细胞生长的影响。方法将含TGF-β1的真核表达载体转染到人胰腺癌细胞BxPC3中,通过流式细胞仪、生长曲线以及细胞迁移试验观察其对BxPC3生物学行为的影响。用Western印迹法检测TGF-β1对BxPC3细胞中p21WAF/CLIP1表达的影响。结果转染TGF-β1基因的BxPC3细胞的形态发生明显改变,其生长速度自第4天开始较转染空载体pcDNA3的阴性对照组减慢。发现BxPC3细胞组S期细胞(27.53±0.02)%与pcDNA3组(26.32±0.01)%的比例均高于TGF-β1组(17.01±0.03)%,P<0.01,表明TGF-β1阻止细胞进入S期。细胞迁移试验表明转染的细胞运动能力明显增加。Western印迹法检测表明p21WAF/CLIP1的表达也相应增高。结论TGF-β1的Smad4非依赖性途径通过增强p21WAF/CLIP1的表达使细胞阻滞于G-G期,从而抑制细胞生长,并且该通路能诱导上皮细胞向间叶细胞转变。     

TGF-β1 作用后老龄大鼠心肌成纤维细胞p38 MAPK通路和JNK通路的变化

目的:探讨转化生长因子β₁(TGF-β₁)作用后老龄大鼠心肌成纤维细胞丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路和c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路的变化。方法:提取乳鼠及老龄大鼠心肌成纤维细胞,以TGF-β₁(5μg/L)刺激,分为乳鼠PBS对照组(N1组)、乳鼠TGF-β₁干预组(N2组)、老龄鼠PBS对照组(A1组)和老龄鼠TGF-β₁干预组(A2组)。采用MTT比色法测定细胞增殖;Western blotting检测各组成纤维细胞总p38、phospho-p38、JNK及phospho-JNK水平。结果:TGF-β₁刺激后老龄鼠心肌成纤维细胞增殖能力低于乳鼠心肌成纤维细胞。加入TGF-β₁后,N2组和A2组的phospho-p38和phospho-JNK分别较N1组和A1组明显升高;N2组与A2组总p38及JNK水平无显著差异;加入TGF-β₁后,与N2组相比,A2组phospho-p38及phospho-JNK表达水平显著减弱(P<0.05)。结论:老龄导致心肌成纤维细胞的TGF-β₁/p38及TGF-β₁/JNK信号通路相关蛋白磷酸化水平受损。     

肾上腺髓质素拮抗转化生长因子β1的促纤维化作用及其机制

目的:探讨肾上腺髓质素(AM)在人肾小管上皮细胞系(HK-2)对转化生长因子β₁(TGFβ₁)促纤维化作用的影响及机制。方法:细胞总胶原的合成和分泌以[³H]-脯氨酸掺入量及培养液内[³H]-羟脯氨酸放射活性来判断;ELISA法检测培养液中纤维连接蛋白(FN)含量;FN、IV型胶原和组织型金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA的表达采用RT-PCR法;信号蛋白Smad2及Smad6蛋白表达采用Westernblot法。结果:(1)AM在蛋白和mRNA水平均明显抑制TGFβ₁刺激的胶原和纤维连结蛋白的表达;(2)AM抑制TGFβ₁刺激的TIMP-1mRNA的上调;(3)AM(10^-8mol/L)本身对Smad2和Smad6的表达无明显影响,且对TGFβ₁刺激的Smad2的表达也无明显影响;但是可以明显上调被TGFβ₁抑制的Smad6的表达。结论:在HK-2细胞,AM通过上调抑制性Smad6的表达拮抗TGFβ₁的促纤维化作用。     

转化生长因子-β族信号转导与肿瘤

转化生长因子 β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ,ＴＧＦ- β)族细胞因子包括ＴＧＦ - β类、骨成形蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＢＭＰ)类、活素 (ａｃｔｉｖｉｎ)类、抑素(ｉｎｈｉｂｉｎ)类、苗勒氏抑制物 (ｍｕｌｌｅｒｉａｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｓｕｂ ｓｔａｎｃｅ)及结节物 (ｎｏｄａｌ) ,胶质细胞源性促神经因子(ｇｌｉａｌ-ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｉｃｆａｃｔｏｒ) ,Ｄｐｐ(果蝇Ｄｅｃａｐｅｎｔａ ｐｌｅｇｉｃ基因产物 ) ,Ｖｇｌ(蛙卵ｖｇｌＲＮＡ产物 )等 2 5多…     

TGF-β1及TGF βR Ⅱ mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transform ing growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体TGFβRⅡ(TGF-beta receptorⅡ)的表达,探求TGF-β1在子痫前期发病中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对10例正常妊娠组和26例子痫前期组(包括12例轻度和14例重度)胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅡmRNA的表达水平进行检测,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRⅡmRNA的表达量均升高,与轻度子痫前期组及正常妊娠组相比有明显意义(P<0.05)。结论TGF-β1、TGFβRⅡ在转录水平就已经上调,它们的异常表达它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。