β细胞脂性凋亡

循环甘油三酯 (TG) /游离脂肪酸 (FFA)水平升高以及TG在 β细胞内的堆积 ,早期可导致基础胰岛素分泌增加而葡萄糖刺激的胰岛素分泌钝化 ,随后 β细胞内胰岛素含量渐下降 ,并出现 β细胞凋亡增加 ,细胞数量减少。神经酰胺依赖及非依赖的途径均参与了脂性凋亡的过程。当能量过剩、脂肪组织储存TG饱和且 β细胞内 β氧化代偿不足时 ,则造成TG在 β细胞内的堆积。若高糖和高脂同时出现时 ,两者可发生协同作用 ,加速 β细胞的功能障碍和凋亡。     

β细胞凋亡、再生和胰岛素分泌实验研究进展

β细胞凋亡增加和胰岛管上皮细胞定向分化障碍是糖尿病(DM)发病的中心环节。凋亡基因干预或凋亡抑制基因转导可有效抑制β细胞凋亡；betacellulinm和活化素A等联合作用，可诱导AR42J细胞向胰岛素分泌细胞转化，对人胎胰岛β细胞增殖和分化有重要作用；优降糖和诺和龙等药物可与β细胞表面的特异受体结合促进胰岛素分泌。     

棕榈酸对胰岛β细胞激素敏感性脂肪酶的影响

长期的高脂会造成胰岛β细胞胰岛素分泌障碍和三酰甘油(TG)的堆积,而过度堆积的TG是脂毒性的重要表现.激素敏感性脂肪酶(HSL)是催化TG水解的限速酶,在胰岛B细胞内表达和活化,并可能与胰岛素分泌及B细胞TG堆积有关.但是高脂对HSL的影响并不十分清楚.因此,本实验以不同浓度棕榈酸培养胰岛B细胞,观察其HSL的变化.     

Visfatin及其基因多态性与糖脂代谢的关系

β细胞凋亡增加和胰岛管上皮细胞定向分化障碍是糖尿病 (DM)发病的中心环节。凋亡基因干预或凋亡抑制基因转导可有效抑制 β细胞凋亡 ;betacellulinm和活化素A等联合作用 ,可诱导AR42J细胞向胰岛素分泌细胞转化 ,对人胎胰岛β细胞增殖和分化有重要作用 ;优降糖和诺和龙等药物可与β细胞表面的特异受体结合促进胰岛素分泌。     

β细胞凋亡、再生和胰岛素分泌实验研究进展

β细胞凋亡增加和胰岛管上皮细胞定向分化障碍是糖尿病（DM）发病的中心环节。凋亡基因干预或凋亡抑制基因转导可有效抑制β细胞凋亡；betacellulinm和活化素A等联合作用，可诱导AR42J细胞向胰岛素分泌细胞转化，对人胎胰岛β细胞增殖和分化有重要作用；优降糖和诺和龙等药物可与β细胞表面的特异受体结构促进胰岛素分泌。     

长期高浓度葡萄糖对胰岛细胞凋亡和功能相关基因表达的影响

目的　探明长期高浓度葡萄糖对体外胰岛细胞功能和凋亡相关基因表达的影响。方法应用放免法检测不同浓度葡萄糖培养后大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞在葡萄糖刺激时培育上清液和细胞内的胰岛素水平 ;应用半定量多重RT PCR和Northern印迹法检测培养后IDX 1(Isletduodenalhomeobox 1) ,葡萄糖激酶 (GK ) ,葡萄糖转运子 2 (GLUT2 ) ,C/EBPβ和Bcl xmRNA的表达情况 ;应用TUNEL法检测培养后的细胞凋亡百分率。结果　 ( 1)长期高浓度葡萄糖培养导致大鼠胰岛细胞和小鼠βTc3细胞对葡萄糖刺激的胰岛素分泌反应降低和细胞内胰岛素含量的减少 ;( 2 )高糖培养 14天可以使大鼠胰岛细胞IDX 1和GLUT2mRNA表达明显减少 (P <0 .0 5 ) ,C/EBPβmRNA表达明显增加 ,GKmRNA表达无明显变化 ;( 3 )高糖培养可以明显增加大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞凋亡百分率 ;( 4 )大鼠胰岛细胞高糖培养 14天后Bcl xSmRNA水平明显增加 ,Bcl xLmRNA水平无明显变化 ,Bcl xL/Bcl xSmRNA比率明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　 ( 1)长期高糖培养可以诱导大鼠胰岛细胞和小鼠 βTc3细胞凋亡和功能缺陷 ;( 2 )IDX 1表达的变化在大鼠胰岛细胞功能缺陷中起重要作用 ;( 3 )大鼠胰岛细胞的Bcl xL/Bcl xS比率变化在高糖所致的胰岛细胞凋亡中起重要作用。     

雌激素对去卵巢大鼠胰岛β细胞数量和功能的影响

目的 观察大鼠在去卵巢和雌激素替代治疗状态下,经小剂量链脲佐菌素(STZ)干预后胰岛β细胞数量和功能的变化. 方法 30只雌性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、STZ组、去卵巢组、去卵巢+STZ组和雌激素组.正常对照组和STZ组行假手术,其余均行去卵巢手术.术后雌激素组给予雌激素治疗,3周后STZ组、去卵巢+STZ组、雌激素组给予STZ(40 mg/kg)干预,检测各组大鼠血糖、血胰岛素水平,平均β细胞面积和相对β细胞数量,β细胞凋亡数量,β细胞内的促凋亡基因Bax、抗凋亡基因Bcl-2及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平. 结果 在STZ作用下,去卵巢大鼠口服葡萄糖耐量(OGTT)各时点血糖均较未去卵巢大鼠明显升高(P<0.05),且各时点胰岛素分泌水平均减少(P<0.05);胰岛素生成指数(△I30/△G30)及修正的β细胞胰岛素分泌指数MBCI下降,β细胞内胰岛素蛋白表达水平、相对β细胞数量和平均β细胞面积均明显下降(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(0.41±0.03对0.76±0.05,P<0.05),β细胞的凋亡指数升高(t=2.957,P<0.05).去卵巢后给予雌激素替代治疗则对上述变化有明显的改善作用,OGTT各时点血糖水平显著下降(P<0.05),β细胞内胰岛素蛋白表达水平及血胰岛素水平的升高,Bcl-2/Bax比值上升(0.71±0.05对0.41±0.03),β细胞的凋亡指数下降(t=2.782,P<0.05). 结论 去卵巢大鼠对外来刺激明显易感,小剂量STZ即导致胰岛β细胞的凋亡增加,数量减少,胰岛素分泌水平的下降,血糖明显升高.补充雌激素能够对抗去卵巢带来的对胰岛β细胞的不利影响,改善β细胞的凋亡,具有保护作用.     

瘦素对游离脂肪酸致大鼠胰岛β细胞脂毒性的保护作用

目的 探讨瘦素对于游离脂肪酸(FFA)导致的大鼠胰岛β细胞脂毒性的保护作用。方法体外分离Wistar大鼠胰岛进行培养,根据培养液中加入不同物质而分为4组:(1)对照组,(2)瘦素组,(3)FFA组,(4)FFA+瘦素组。培养72h后测定胰岛内甘油三酯(TG)含量,基础状态及葡萄糖刺激下胰岛素分泌情况,并用RT-PCR方法检测胰岛β细胞内脂肪酸氧化酶-肉毒碱软脂酰转移酶Ⅰ(CPT-Ⅰ)、脂肪酸合成酶-乙酰辅酶A羧化酶(ACC)以及过氧化质体增殖物激活受体α(PPARα)和PPARγ的mRNA表达情况 结果 (1)FFA使胰岛内TG含量增加(P<0.01),瘦素使胰岛内TG含量减少(P<0.01)。(2)瘦素抑制基础状态及高糖负荷后胰岛素分泌(均P<0.01);FFA使基础胰岛素分泌增加而高糖负荷后胰岛素分泌的增高幅度明显低于对照组(均P<0.01)。(3)瘦素使CPT-Ⅰ和PPARα表达增加(分别P<0.01和P<0.05),ACC和PPARγ表达减少(均P<0.01);FFA使CPT-Ⅰ和ACC表达增加,PPARα和PPARγ表达减少(均P<0.01)。结论 FFA使胰岛内TC聚集增加,基础状态胰岛素分泌增加而高糖负荷后胰岛素分泌减少,形成高胰岛素血症。而瘦素可以通过PPARα和PPARγ途径使胰岛内脂肪酸氧化酶表达增加,脂肪酸合成酶表达减少,胰岛内TG聚集减少,同时抑制胰岛素分泌,减轻高胰岛素血症,从而起到对于FFA导致的大鼠胰     

胰腺衍生因子的研究进展

胰腺衍生因子(pancreatic derived factor,PANDER)是2002年新发现的细胞因子,主要表达于胰腺β细胞和α细胞.在β细胞内,PANDER与胰岛素共同定位于胰岛素分泌颗粒中.葡萄糖、转录因子及细胞因子可调节PANDER mRNA的表达,葡萄糖及胰岛素促分泌剂可促进PANDER的分泌.PANDE...     

肾素-血管紧张素系统对胰岛β细胞功能的影响及AT1R在其中的作用机制

目的 研究血管紧张素Ⅱ对胰岛β细胞的分泌、增殖、凋亡、氧化应激和纤维化的作用.方法 应用βTC3细胞株、Western印迹检测、实时定量PCR检测、共聚焦显微镜监测Furo3标记的细胞内游离钙离子荧光强度的变化和流式细胞仪检测细胞凋亡及活性氧簇(ROS)产生等方法,研究血管紧张素Ⅱ对β细胞功能的影响,并进一步通过RNA干扰技术减少β细胞中AT1R的表达,研究AT1R在其中的作用机制.结果 βTC3细胞在高浓度葡萄糖刺激下胰岛素分泌增加4倍.高糖作用可引起细胞内Ca2+荧光强度急剧增加.血管紧张素Ⅱ急性刺激并不直接引起胰岛素分泌的改变,其对β细胞促分泌作用可能与其促增殖功能相关.血管紧张素Ⅱ部分是通过AT1R和蛋白激酶C介导的NAD(P)H途径在β细胞中引起氧化应激.RNAi减少AT1R的表达可以改善血管紧张素Ⅱ引起的细胞凋亡和纤维化.结论 血管紧张素Ⅱ通过其1型受体在β细胞的激素分泌、增殖、氧化应激、凋亡和纤维化等过程中发挥着重要作用.     

钙离子通道阻滞剂影响胰岛功能吗?

葡萄糖是体内调节胰岛素分泌的最主要因子，其机制主要是通过调节胰岛β细胞的代谢活动，使胞浆的ATP／ADP比率增加．导致细胞ATP敏感的钾通道（KATP）关闭，细胞膜去极化，电压依赖性钙通道（主要是L型钙通道）开放，钙离子内流，细胞内游离钙离子浓度升高，刺激囊泡内胰岛素放。因此，β细胞属于电兴奋性细胞，β细胞膜ATP依赖的钾通道与L型钙通道是影响胰岛素分泌的重要离子通道。     

胰岛素抵抗大鼠胰岛内胰淀素表达对β细胞凋亡的影响及干预研究

背景：本组过去的研究发现高脂饲养大鼠在引起全身性胰岛素抵抗的同时，尚伴有胰岛α细胞和β细胞的胰岛素抵抗，且严重脂毒性可导致β细胞凋亡；二甲双胍可改善糖脂毒性所致β细胞株的胰岛素抵抗哺。2型糖尿病时胰岛内胰淀素沉积增多，并可能与β细胞功能障碍有关。但全身性胰岛素抵抗时胰岛β细胞胰淀素表达及其对β细胞凋亡的影响以及二甲双胍和罗格列酮的作用则不清楚。     

IL-1β、IFN-γ对胰岛β细胞凋亡及胰岛素释放的影响

体外分离培养SD大鼠胰岛细胞,分别或共同加入IL-1β(终浓度20u/mL)和IFN-γ(终浓度150u/mL)处理.加入11.1mM的葡萄糖刺激胰岛素释放.应用放射免疫分析法测定培养液上清中胰岛素浓度,流式细胞术检测胰岛细胞凋亡.结果IL-1β单独作用于胰岛细胞,能抑制高糖刺激下胰岛素分泌及促进胰岛细胞凋亡.但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);IFN-γ单独或联合IL-1β能显著抑制胰岛素分泌(P＜0.05),促进胰岛细胞凋亡(P＜0.05).结论IFN-γ和IL-β能诱导胰岛β细胞凋亡,并且有协同作用.与自身免疫性糖尿病的发生、发展有一定关系.     

睾酮对白介素—1β损伤的胰岛细胞的保护机制

在离体培养的新生大鼠胰岛细胞上,观察到白介素-lβ(IL-lβ)对胰岛素的分泌有明显的抑制作用.给被IL-lβ抑制的胰岛以睾酮处理,可提高其胰岛素的分泌,表明睾酮对胰岛细胞有保护作用.睾酮可明显增加细胞内胰岛素含量,放线菌素D则可阻断睾酮的这一作用,提示睾酮促进细胞内DNA和胰岛素的合成,可能是其保护作用的机制之一     

高脂状态下Exendin-4对胰岛βTc6细胞内胰-十二指肠同源盒-1表达、细胞增殖功能及胰岛素分泌能力的干预作用

目的探讨Exendin-4在高脂状态下是否具有抗脂毒性及其相关机制是否涉及胰-十二指肠同源盒(PDX)-1。方法不同浓度的Exendin-4培育βTc6细胞不同时间,再应用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)干预24 h,检测细胞内PDX-1表达及增殖能力和胰岛素分泌功能。结果 1Exendin-4干预6 h,各组细胞PDX-1表达、细胞增殖能力和胰岛素分泌功能均未见明显改善;2当Exendin-4干预延长至12~24 h,随着干预浓度增高,细胞内PDX-1逐渐升高,细胞增殖能力和胰岛素分泌功能明显好转。结论高脂状态下适宜浓度的Exendin-4干预一定时限可上调β细胞内PDX-1的表达,并改善细胞增殖功能及胰岛素分泌能力。     

KATP通道开放剂与β细胞休息学说

2型糖尿病发病的中心环节为胰岛素抵抗和β细胞功能受损。胰岛素抵抗、高胰岛素血症及持续的糖毒性可加剧胰岛β细胞功能衰竭。大量研究表明,KATP通道开放剂(二氮嗪)开放KATP 通道,可强制过度疲劳的β细胞休息,抑制胰岛素的分泌,增加胰岛内胰岛素含量,恢复了胰岛素的脉冲式分泌,从形态和功能上保护了β细胞。适度的胰岛休息可以减轻β细胞的代谢压力,提高β细胞功能,是值得今后重点研究的方向。     

烟酰胺对抗环孢素A所致的人胰岛毒性

成人胰岛与烟酰胺和(或)环孢素A(CsA)共培养并进行胰岛素释放试验、细胞内胰岛素定量和原位细胞凋亡染色,结果表明烟酰胺促进离体胰岛细胞的胰岛素合成和分泌,并能减少胰岛细胞的凋亡,对CsA所致的胰岛细胞毒性有保护作用。     

胰高血糖素样肽1改善胰岛β细胞凋亡的研究

不论1糖尿病还是2型糖尿病，皆存有β细胞的破坏，凋亡是早期β细胞死亡的主要形式，因此减少凋亡对保持β细胞数量和功能至关重要。近年发现，胰高血糖素样肽1（GLP-1）具有促进β细胞增殖和减少细胞凋亡的作用。本研究以MIN6β细胞为对象，首先研究GLP-1对软脂酸诱导的细胞凋亡的影响，0．5mmol／L软脂酸作用于细胞36h，诱导39．4％细胞凋亡，10nmol／L GLP-1可使软脂酸诱导的细胞凋亡减少至32．8％，细胞活力增加13．9％，同时，GLP-1还可使细胞在低糖浓度下基础胰岛素的分泌增加，对高糖刺激的敏感性增加。     

从胰岛β细胞看Ghrelin在糖尿病中扮演的角色

Ghrelin可由胰岛α、β、ε细胞及胃黏膜细胞等分泌,可能通过旁分泌、自分泌或内分泌作用影响β细胞的分泌功能;同时抑制胰岛β细胞凋亡。Ghrelin呈剂量依赖性抑制葡萄糖刺激的胰岛素分泌,并呈瞬时调节,与胰岛素共同参与生理条件下的摄食和体重调节。1型糖尿病患者的Ghrelin基础水平偏高,经胰岛素治疗后下降,因此被认为是1型糖尿病初发及胰岛素治疗有效的标志物。Ghrelin水平与2型糖尿病的发病呈负相关;机体胰岛素抵抗时Ghrelin水平下降,胰岛素分泌增加,葡萄糖耐受性提高,是早期2型糖尿病的一种保护机制。     

白藜芦醇对原代大鼠胰岛葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响

分离SD大鼠胰岛接种于24孔板中,用不同浓度的葡萄糖和白藜芦醇分别培养1 h或24 h,结果表明白藜芦醇孵育大鼠胰岛1 h可呈剂苗依赖地抑制大鼠高糖刺激的胰岛素分泌,1、10和100 μmol/L白藜芦醇可以分别使胰岛素的分泌降低10%、35%(P<0.05)和80%(P<0.01).显微离子成像技术爪10μmol/L的白藜芦醇可以使高糖引起的β细胞内Ca2+浓度的升高减少60%(P<0.05).白藜芦醇可使软脂酸孵育24 h大鼠胰岛的胰岛素分泌恢复到对照组的75%(P<0.01),提示白藜芦醇短期可通过调控细胞内的Ca+浓度,而抑制原代胰岛高精刺激的胰岛素分泌,长期可改善软脂酸引起的β细胞损伤.