曲尼斯特滴眼液在兔眼小梁切除术后应用的免疫组化研究

目的通过单克隆抗增殖细胞核抗原抗体（PCNA）和TGF—β1免疫组化的研究，评估曲尼斯特在兔眼实验性小梁切除术后抗纤维化方面的作用。方法27只兔子（54眼）随机分为对照组、MMC组、曲尼斯特组；双眼均行标准小梁切除术。MMC组术中应用丝裂霉素C（MMC）．曲尼斯特组术后应用曲尼斯特滴眼液。术后7天、14天、28天各组处死兔子3只，眼球组织固定，PCNA和TGF—β1免疫组化染色并进行PCNA计数和计算TGF—β1染色平均光密度。结果术后7天、14天对照组PCNA阳性细胞明显多于MMC组和曲尼斯特组（P〈0．05），而曲尼斯特组和MMC组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。曲尼斯特组TGF—β1的平均光密度值明显小于对照组，差异具有统计学意义俨〈0．05），而与MMC组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论曲尼斯特应用于青光眼滤过术后能抑制成纤维细胞增殖，其作用机制可能是通过直接抑制成纤维细胞增殖及减少TGF—β1分泌而间接抑制其增殖。     

可调节缝线抗青光眼小梁切除术疗效观察

目的：观察并探讨可调节缝线在青光眼小梁切除手术中的临床疗效。方法：收集2009年来人院的67例（76眼）青光眼患者,将其分为两组,其中对照组30例（34眼）行常规小梁切除手术,实验组37例（42眼）在常规手术基础上加用可调节缝线。观察两组患者术后患者眼压水平、滤过泡及前房发生情况。结果：实验组及对照组术后眼压较术前均有明显下降,术后2周后两组间跟压开始呈现显著性差异（P〈0.05;术后实验组浅前房发生率低于对照组,呈显著性差异（P〈0．05）;滤过泡发生率高于对照组,也呈显著性差异（P〈0．05）。结论：青光眼小梁切除术中使用可调节缝线可有效控制患者术后眼压水平,极大程度上促进了功能性过滤泡的形成及减少浅前房等并发症的发生率,能有效地提高青光眼手术的成功机率。     

青光安颗粒对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的抑制作用

目的:探讨青光安颗粒对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的抑制作用。方法:选取2016年4月至2018年9月湖南中医药大学第一附属医院收治的行滤过性手术治疗后滤过泡瘢痕化患者76例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组38例。2组均采用常规小梁切除滤过性手术,对照组术后给予血栓通胶囊,观察组术后给予青光安颗粒,2组均连续治疗2个月。比较2组治疗成功率、手术前后不同时间患眼最佳矫正视力(BCVA)及眼压,记录2组术后并发症发生情况。结果:2组患者术后7 d患眼术区均形成功能性滤过泡,观察组治疗成功率明显高于对照组(P 0. 05)。与术前比较,术后1、2个月2组患眼BCVA及滤过泡高度均明显提高/增加(P 0. 05),且观察组明显高于对照组(P 0. 05); 2组患眼眼压均明显降低(P 0. 05),且观察组明显低于对照组(P 0. 05)。2组总并发症发生率差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:青光眼滤过术后给予青光安颗粒可更明显地提高患眼BCVA,降低眼压,有效抑制滤过泡瘢痕化。     

雷公藤甲素抗兔眼外滤过术切口瘢痕化的机制研究

目的探讨祛风湿类中药提取物雷公藤甲素（TP）对兔眼外滤过术后切口部位成纤维细胞及其相关细胞因子的影响。方法将48只实验兔随机分为4组,分别为生理盐水（NS）组,丝裂霉素（MMC）组,0．2mg／mlTP组,0．4mg／mlTP组。每组12只,均行单眼造模。术中按不同组别局部浸润不同药物2min,生理盐水组中未造模眼（12眼）作为正常对照。于术后1d、6d、14d进行眼压测量及眼前节观察,并分别于术后6d及14d各组随机处死6只实验兔。制备眼球标本并行HE染色、免疫组化染色切片观察。结果兔眼外滤过术造模后1、6、14d均能有效维持眼压低水平（P〈0．05）,其中术后6dTP两浓度组均优于MMC组及NS组（P〈0．05）,术后14d高浓度TP组优于其它3组（P〈0．05）,而低浓度TP组优于NS组（P〈0．05）;两TP组于兔眼外滤过术后1、6、14d均能有效维持滤过泡形态和功能;并能于术后6、14d有效抑制切口部位成纤维细胞增殖,且优于NS组（P〈0．01）及MMC组（P〈0．05）;而高浓度组优于低浓度组（P〈0．01）;两TP组及MMC组均能有效降低兔眼滤过道成纤维细胞胞浆中细胞因子TGF—β1的表达。术后6d,各用药组滤过道成纤维细胞胞浆TGF—β1染色阳性颗粒少于NS组,呈棕黄色颞粒,而NS组呈深棕色颗粒;术后14d,各用药组阳性颗粒与NS组大体相近,均呈棕黄色颗粒,数量较6d组减少。结论雷公藤甲素对兔眼外滤过术切口部位瘢痕形成具有明显抑制作用。     

青光眼术后应用眼三针对视神经保护作用的临床观察

目的观察青光眼滤过术后应用眼三针疗法对视神经的保护作用。方法将60例符合标准的青光眼滤过术后患者分为实验组（30例）和对照组（30例）,实验组以针刺眼三针（睛明、承泣、上明）治疗,对照组行空白对照,分别于治疗前、治疗后2,4,6个月检测视力、眼压、视野缺损积分法（VFDS）评分。结果两组患者在治疗前、治疗后眼压的平均值比较稳定,差异无统计学意义（P〉0．05）。在6周内,视野缺损评分,实验组评分平均减少（2．08±0．42）dB,而对照组评分平均减少（1．40±0．28）dB,实验组减少值明显高于对照组（P〈0．05）。6个月后,对照组的视力矫正进步率为13．3％（2／30）,而实验组为50％（15／30）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论眼三针疗法对青光眼术后视神经有一定的保护作用。     

MMC联合t-PA抑制青光眼滤过手术后增殖的临床分析

目的观察丝裂霉素C(MMC)联合应用组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)在青光眼滤过手术中的抗增殖作用。方法将行单纯小梁切除术的青光眼患者78例(93眼)分为2组。对照组仅予以浸有0.2 g/L MMC棉片置于巩膜下5 min;实验组在对照组基础上于术毕前房注射t-PA 0.1 mL(200 mg/L),术后1,3 d球结膜下再次注射t-PA 0.3 mL。分别在术前及术后3,7,14,28 d和6个月测定2组患者眼压;分别在术后3,7,14,28 d和6个月取局部病理组织行增殖细胞核抗原(PCNA)染色记录5个高倍视野下阳性细胞数,HE染色观察滤过道开放情况,Masson三色染色观察滤出道新生胶原生成情况,裂隙灯下观察滤过泡形态。结果 2组患者术后3,7,14,28 d和6个月眼压均显著低于术前(P均0.01);且实验组术后各时间节点眼压均显著低于对照组(P均0.01)。2组患者术后3,7,14,28 d及6个月滤过道PCNA阳性细胞数均显著低于术前(P均0.01);且实验组术后各时点滤过道PCNA阳性细胞数均显著低于对照组(P均0.01)。实验组术后14、28 d滤过道开放率显著高于对照组(P均0.05)。实验组术后7,14,28 d及6个月滤过道处的胶原较对照组少而疏松,功能性滤过泡比率显著高于对照组(P均0.05)。结论在青光眼滤过手术中联合应用MMC和t-PA具有较强的抗增殖能力,可用于抗青光眼术后瘢痕形成。     

小梁切除联合5-FU治疗新生血管性青光眼的临床效果分析

目的：探讨小梁切除联合5-FU治疗新生血管性青光眼的临床效果。方法：新生血管性青光眼60例60只眼平分为两组一治疗组与对照组各30例，两组患者都采用小梁切除手术，治疗组在术后注射5-Fu针剂配合治疗。结果：相对于对照组来说，治疗组经积极的手术治疗后，大多数保留了较好的视力（P〈0．05）。两组病例术前眼压水平差异无显著性（P〈0．05），经过治疗后，两组术后眼压水平差异有显著性（P〉o．05），治疗纽踢显低于对照组。结论：小梁切除联舍5-Fu治疗新生血管性青光眼能有效改善视力状况，降低眼压，值得推广应用。     

小梁切除联合羊膜移植治疗原发性青光眼临床研究

目的：观察小梁切除联合羊膜移植治疗原发性静光眼的临床效果,方法：对34例（48只眼）原发性闭角型青光眼和18例（26只眼）原发性开角型青光眼施行小梁切除联合结膜瓣下及巩膜瓣下新鲜羊膜移植术,对术后眼压,滤过泡,前房,视力和视野随进行了为期8个月至21个月（平均15．7个月）随访观察,结果：2只原发性闭角型青光眼（2例）和1只原发性开角型青光眼术后滤过泡瘢痕化,术后眼压达4．66kPa,其余71只眼（95．95％）术后眼压均控制在1．06－2．66kPa范围,74只眼术后视力均有不同程序提高,观察斯视神经及视野损害均未见加重,结论：小梁切除术联合羊膜移植可用于防止滤过泡瘢痕形成,具有保持滤过通畅和维持有效滤过功能的作用。     

25例抗青光眼术后白内障超声乳化术分析

目的：观察抗青光眼滤过术后白内障患者行白内障超声乳化吸出及人工晶体植入术的手术疗效。方法：对25例（27眼1抗青光眼滤过术后的白内障患者,采用避开滤过泡的颞侧巩膜隧道切口行白内障超声乳化吸出,植入人T晶体,术后观察视力、并发症、眼压和滤过泡的改变。结果：术后25眼均有不同程度的视力提高,视力〉0．5者70．4％。术后随访6～12个月．眼压和滤过泡无改变。结论：对青光眼滤过术后白内障。采用避开滤过泡的颞侧巩膜隧道切口行白内障超声乳化吸出及人工晶体植入术。既可提高视力,又可保持原有的抗青光眼滤过功能。     

加味桑白皮汤对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕形成的影响研究

目的探究加味桑白皮汤抗青光眼滤过术后滤过泡瘢痕形成的效果。方法将174例(193眼)原发性青光眼患者随机分为2组,对照组87例(95眼)予以小梁切除滤过性手术,术中应用丝裂霉素C预防滤过泡瘢痕,观察组在此基础上于手术前后2周予以加味桑白皮汤治疗,对比2组术后术眼滤泡类型、术眼眼压波动、手术成功率、术后视力及并发症发生情况。结果观察组术后功能性滤过泡率为78.6%,明显高于对照组的60.0%(P0.05);2组术后各时间点的眼压均明显低于术前(P均0.05),2组术后各时点两两比较差异无统计学意义(P均0.05);术后随访6个月,观察组手术成功率为78.6%,明显高于对照组的56.8%(P0.05);观察组术后视力提高及不变率为90.8%,明显高于对照组的63.2%(P0.05);2组术后并发症发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论抗青光眼滤过手术前后辅以加味桑白皮汤有助于进一步预防术后滤过泡瘢痕的形成,且不影响术后对眼压的控制,并对改善视力、保障手术质量有重要价值,值得临床推广应用。     

曲尼司特滴眼液治疗过敏性结膜炎的多中心临床研究

 目的 观察与评价曲尼司特滴眼液治疗过敏性结膜炎的有效性与安全性。方法 多中心随机单盲阳性药平行对照非劣效性检验临床试验。试验组曲尼司特滴眼液113例,113眼,对照组色甘酸钠滴眼液114例,114眼。结果 ①治疗28 d后临床综合疗效等级比较：痊愈率曲尼司特滴眼液30.97%,色甘酸钠滴眼液26.32%,P＝0.393 6。有效率曲尼司特滴眼液91.15%,色甘酸钠滴眼液83.33%,P＝0.063 6;两率之差的95%可信下限＝0.59%,统计量u＝4.021,P＝0.000 0,曲尼司特滴眼液非劣效于色甘酸钠滴眼液。②安全性评价：随访期不良事件发生率：曲尼司特滴眼液组7.50%,色甘酸钠滴眼液组4.17%;不良反应发生率：曲尼司特滴眼液组3.33%,色甘酸钠滴眼液组0.83%,P均＞0.05。不良反应症状为头昏、双眼痛、鼻塞咳嗽、胃部不适、胃口差、WBC异常。结论 曲尼司特滴眼液治疗过敏性结膜炎安全、有效。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞E-cadherin表达的影响

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的NRK-52E细胞转分化过程中转分化标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况及曲尼司特对其转分化过程的影响。方法应用TGF-β1(8 mg/L)刺激NRK-52E细胞,分别分为阴性对照组、TGF-β1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞术和蛋白质印迹检测各组E-cadherin的表达情况。结果流式细胞术和蛋白质印迹检测结果表明,TGF-β1刺激后,NRK-52E细胞E-cadherin的表达均显著减低。结论曲尼司特能够抑制TGF-β1诱导的NRK-52E转分化,其机制可能与上调E-cadherin的表达有关。     

改良溶剂挥发/萃取法制备曲尼司特聚乳酸微球及体外表征

 目的改良溶剂挥发/萃取法制备曲尼司特聚乳酸微球,并对其体外特性进行表征。方法O/W型溶剂挥发/萃取法制备曲尼司特聚乳酸微球,4%聚乙烯醇溶液为乳化剂,通过改变内相或外相溶剂,加快萃取速度,促进微球快速形成。对微球的粒径、表面形态、载药量、包封率、释放特性进行考察。结果内相中加入一定比例的极性溶剂可提高曲尼司特的包封率,微球粒径相应减小。外相中加入一定量有机溶剂进行萃取,并不能明显提高包封率,但微球粒径减小。优选条件制备的微球表面光滑圆整,药物具有一定的突释效应,7 d时释放约68%。结论经改良的溶剂挥发/萃取法可较好地用来制备曲尼司特聚乳酸微球,并能提高药物的包封率。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞E—cadherin表达的影响

目的观察转化生长因子β1（TGF—β1）诱导的NRK-52E细胞转分化过程中转分化标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）的表达情况及曲尼司特对其转分化过程的影响。方法应用TGF—β1（8mg／L）刺激NRK-52E细胞,分别分为阴性对照组、TGF—β1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞术和蛋白质印迹检测各组E—cadherin的表达情况。结果流式细胞术和蛋白质印迹检测结果表明,TGF—β1刺激后,NRK-52E细胞E—cadherin的表达均显著减低。结论曲尼司特能够抑制TGF—β1诱导的NRK-52E转分化,其机制可能与上调E—cadherin的表达有关。     

曲尼司特在人体内的药动学及生物利用度研究

 目的：测定曲尼司特(Tra)在人体内的药动学及生物利用度。方法：健康志愿者12人，随机、交叉、单剂量poTra片剂或胶囊400 mg,采用反相高效液相色谱法测定不同时间血药浓度，在计算机上以3P87程序拟合处理，计算药动学参数。结果：Tra片剂和胶囊的T_1/2K,K,T_max,c_max和AUC分别为7.31和9.44 h,0.114和0.085 6 h^-1,5.11和4.84 h,74.92和77.40 μg/ml,1 339和1 544 (μg·h)/ml。结论：经统计学分析表明，片剂与胶囊剂之间的药动学参数无显著性差异(P＞0.05)，片剂相对于胶囊的生物利用度为99.66%。     

针刺对慢性高眼压兔视网膜Bcl-xl、BDNF表达的影响

目的:探讨针刺对青光眼视神经的保护作用及作用机制。方法:以大耳白兔为实验动物,通过前房内注射复方卡波姆溶液造成实验性青光眼模型。28d后,通过滤过性手术使眼压恢复正常。20只(40只眼)大耳白兔分层随机分为模型组、针刺组、神经营养剂组,并设正常对照组,每组5只,眼数为10只。针刺组穴取双侧"球后""风池""行间",每日早、晚各针1次;神经营养剂组给予维生素B1100mg、维生素B12500μg肌肉注射,每日1次;其他组不做治疗处理。治疗4周后,观察各组兔视网膜组织凋亡抑制基因(Bcl-xl)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化。结果:实验结束时,与模型组相比,针刺组视网膜组织Bcl-xl、BDNF表达分别为(31.20±5.97)个/mm2、(6.3±1.89)个/mm2,显著高于模型组的(26.70±4.32)个/mm2、(4.0±1.89)个/mm2,两组相比,差异有统计学意义(均P0.05)。结论:针刺能上调青光眼模型兔视网膜Bcl-xl和BDNF的表达,从而保护高眼压损害的视神经。     

慢性高眼压兔模型经睫状体平坦部滤过术后UBM观察

目的观察慢性高眼压模型兔经睫状体平坦部滤过术后不同时间段的眼前节表现及切口、滤过泡、滤过通道和玻璃体的组织形态变化。方法 30只青紫蓝兔眼前房穿刺,注射0.3%的复方卡波姆溶液,制作慢性高眼压模型。造模成功后7 d行睫状体平坦部滤过术,分别于术后3 d、2周、1个月、2个月、3个月、6个月在全麻下对手术组兔眼行超声生物显微镜(ultrasound biomicroscopy,UBM)检查,动态观察前房、滤过泡、滤过道、前玻璃体。结果睫状体平坦部滤过术在术后半个月内普遍滤过泡形态较好,滤过道通畅。术后1个月至术后3个月滤泡增殖趋势出现,滤过泡趋于平坦,部分滤过道模糊,1只眼出现玻璃体牵拉。术后6个月,滤过泡形态较前局限、壁增厚,滤过道较前狭窄,部分未见明显的滤过道。结论睫状体平坦部滤过术中、术后并发症少,是一种安全的抗青光眼手术。术后远期滤过泡增殖是影响手术效果的一个因素。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞表达α-SMA的影响

目的观察转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的NRK-52E转分化过程中转分化标志物α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况及曲尼司特对其的影响。方法 NRK-52E经培养传代后随机分为阴性对照组,TGF-α1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞仪测定α-SMA（＋）细胞的百分数,Western-blot分析细胞表达α-SMA的程度。结果流式细胞术分析显示阴性对照组α-SMA阳性细胞百分比明显增多,说明细胞发生EMT;曲尼司特干预组细胞表达α-SMA阳性细胞百分比呈剂量依赖性递减,且与阳性对照组比较有显著性差异（P〈0.05）;Western-blot结果也表明,曲尼司特能剂量依赖性降低NRK-52E胞质α-SMA表达的程度。结论曲尼司特可以抑制肾小管上皮细胞α-SMA的表达,从而抑制EMT,减少ECM的积聚,保护肾脏。     

曲尼司特对TGF-β1诱导的NRK-52E细胞表达α-SMA的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的NRK-52E转分化过程中转分化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况及曲尼司特对其的影响。方法 NRK-52E经培养传代后随机分为阴性对照组,TGF-α1诱导组和不同剂量曲尼司特干预组,采用流式细胞仪测定α-SMA(+)细胞的百分数,Western-blot分析细胞表达α-SMA的程度。结果流式细胞术分析显示阴性对照组α-SMA阳性细胞百分比明显增多,说明细胞发生EMT;曲尼司特干预组细胞表达α-SMA阳性细胞百分比呈剂量依赖性递减,且与阳性对照组比较有显著性差异(P<0.05);Western-blot结果也表明,曲尼司特能剂量依赖性降低NRK-52E胞质α-SMA表达的程度。结论曲尼司特可以抑制肾小管上皮细胞α-SMA的表达,从而抑制EMT,减少ECM的积聚,保护肾脏。