Bcl-2、c-myc基因在急性白血病中的表达及其意义

为探讨凋亡调控基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ对白血病的发生、疗效及预后判定的意义,采用免疫组化法检测ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ在７２例急性随系白血病患者骨髓细胞中的表达。结果发现初治和复发者ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ的表达比完全缓解组和对照组明显增高（Ｐ〈０．０１％）;初治组和复发组之间差异无显著性（Ｐ〉０．０５）;ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的表达呈正相关（Ｐ〈０．０１）;ｂｃｌ－２和／或ｃ－ｍｙｃ高度表达的患者     

环境雌激素辛基酚对人MCF-7细胞凋亡调控基因bcl-2mRNA表达的影响

目的 研究具有雌激素活性的环境污染辛基酚对雌激素受体阳性的乳腺癌细胞MCF-7凋亡调控基因bcl-2mRNA表达的影响及与对雌二醇作用的异同。方法 分别以不同浓度的17β-雌二醇和辛基酚刺激体外培养的MCF-7细胞12～120h，用RT-PCR方法测定细胞bcl-2mRNA的表达量。结果 17β-雌二醇和辛基酚作用MCF-7细胞24h后bcl-2mRNA表达量显著升高，持续至120h,较宽浓度范围的辛基酚均可引起bcl-2表达增高向，以10^-6mol/L作用最强。结论 辛基酚具有类似雌二醇的刺激PCF-7细胞bcl-2表达的作用，但作用强度不如雌二醇。     

小细胞肺癌中PTEN的表达及其与凋亡的关系

目的　探讨小细胞肺癌 (SCLC)组织中PTEN的表达及临床意义与细胞凋亡的关系。方法　 4 2例SCLC组织和 16例肺良性病变组织PTEN的表达采用免疫组织化学S -P法检测。 4 2例SCLC组织肿瘤细胞凋亡采用TUNEL法检测。结果　 4 2例SCLC组织PTEN缺失率 73.8%高于 16例肺良性病变 (P <0 .0 1) ,PTEN的缺失与SCLC的临床TNM分期相关 ,与细胞学亚型、性别、年龄无关。PTEN蛋白的缺失与小细胞肺癌癌细胞凋亡无关。结论　SCLC中存在PTEN缺失并对SCLC的发生、发展起着重要作用。     

细胞凋亡和相关基因Fas、bax和bcl-2蛋白在睾丸肿瘤中表达的研究

目的研究细胞凋亡和相关基因Fas、hax和bcl-2蛋白在睾丸肿瘤发生和发展中的作用。方法应用DNA未端标记、流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测56例睾丸肿瘤细胞凋亡状态及凋亡相关基因Fas、bax和bcl-2蛋白的表达。结果凋亡指数与肿瘤病理类型和淋巴结转移密切相关(P＜0．05)。Fas蛋白阳性表达37例(66．1％)，bax阳性48例(85.7％)，bcl-2阳性40例(71．4％)；Fas、bax和bcl-2蛋白表达与肿瘤的病理类型、临床分期和淋巴结转移无明显相关(P＞0.05)：凋亡指数在Fas、bax及bcl-2蛋白阳性表达和阴性表达者中差异有显著性(P＜0.05)。结论细胞凋亡在睾丸肿瘤发生中有重要作用。Fas、bax和bcl-2蛋白的异常表达尚不能成为睾丸肿瘤发生和发展的预后参数。     

非小细胞肺癌中bcl—2、p53蛋白表达和相互关系及临床意义

为探讨ｂｃｌ－２和ｐ５３蛋白在非小细胞肺癌中表达之间的关系及意义,应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对６２例非小细胞肺癌组织进行检测。结果发现：（１）ｂｃｌ－２蛋白阳性２０例,其中鳞癌１５例,腺癌５例;ｐ５３蛋白阳性４９例,其中鳞癌３４例,腺癌１５例。两者比较差异非常显著。（２）ｂｃｌ－２和ｐ５３的表达强度与肺癌的分化程度密切,但两者之间的表达相反;４８例随访患者发现ｐ５３表达阳性率与生存期有关,而与ｂｃｌ     

子宫颈腺癌组织基因hMSH2的表达与细胞凋亡

目的:探讨基因hMSH2与细胞增殖、凋亡在子宫颈腺癌中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测hMSH2、Ki67的表达,DNA原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡。结果:36例宫颈腺癌组织中10例hMSH2呈阴性(28%),26例为阳性表达(72%),且与肿瘤分化程度相关,分化程度越低阳性率越低(P<0.05),hMSH2的表达与肿瘤组织学类型和FIGO分期未见明显关系(P>0.05)。TUNEL阳性指数癌旁正常子宫颈腺上皮均<4%,而子宫颈腺癌均>5%,低分化腺癌明显低于高、中分化腺癌(P<0.05),高、中分化腺癌间差异未达统计学意义(P>0.05),不同组织学类型TUNEL阳性指数相似。Ki-67阳性指数在癌旁正常子宫颈腺上皮均<10%,子宫颈腺癌<10%者仅3例(均为高分化腺癌),>10%者33例;低分化、中分化腺癌的Ki-67阳性指数明显高于高分化腺癌(P<0.01),低分化与中分化腺癌间差异未达统计学意义(P>0.05);Ki-67的表达与子宫颈腺癌组织学类型未见明显关系。hMSH2阴性子宫颈腺癌TUNEL阳性指数显著低于hMSH2阳性者(P<0.05),而Ki-67阳性指数两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子宫颈腺癌存在基因hMSH2失表达,hMSH2失表达反映了肿瘤的恶性程度,Ki-67、TUNEL阳性指数与子宫颈腺癌分化程度相关,基因hMSH2可能参与细胞凋亡。     

大肠肿瘤中Bcl-2表达的免疫组化研究

目的　通过观察大肠腺癌、大肠腺瘤中 Bcl- 2蛋白的表达状态 ,探讨 Bcl- 2在大肠肿瘤发生、发展中的作用。方法　利用免疫组化 S- P法 ,观察 4 8例大肠腺癌 ,15例大肠腺瘤中 Bcl- 2蛋白阳性细胞比率和分布 ,以 10例正常大肠粘膜组织做对照。结果　腺癌和腺瘤中 Bcl- 2阳性细胞比率均显著高于正常粘膜组织(P<0 .0 5和 P<0 .0 0 1) ,腺癌与腺瘤表达无明显差异 (P>0 .1)。早期腺癌显著高于腺瘤 (P<0 .0 0 1) ,但中晚期腺癌显著低于早期腺癌 (P<0 .0 0 1)。结论　 Bcl- 2高表达可能是大肠肿瘤形成的早期事件 ,对大肠腺瘤的发生和恶变起着重要的促进作用 ,中晚期腺癌中 Bcl- 2表达明显减少 ,其原因有赖于进一步研究。     

镉诱导LLC-PK_1细胞凋亡与bcl-2、p53蛋白表达关系的研究

目的　探讨镉诱导LLC PK1 细胞凋亡及与bcl 2、p5 3(mtp5 3)蛋白表达的相互关系。方法　采用透射电镜观察凋亡小体、流式细胞仪分析凋亡率、琼脂糖凝胶DNA电泳方法确定镉对LLC PK1 细胞诱导的凋亡作用 ,以及流式细胞仪分别测定bcl 2和p5 3基因表达产物bcl 2蛋白、mtp5 3蛋白。结果　透射电镜观察发现 4 0 μmol LCdCl2 作用LLC PK1 细胞 12h后 ,出现典型的凋亡小体 ;流式细胞仪分析其凋亡率为 32 6 1% ,并高于对照组 (1 0 8% ) (P <0 0 1) ;琼脂糖凝胶DNA电泳呈明显梯形条带。 0、10、2 0、4 0 μmol LCdCl2 作用LLC PK1 细胞 4h、8h ,8h后 ,bcl 2基因表达逐渐下降 ,并呈良好的剂量 -反应关系 (r=- 0 910 ,P <0 0 5 ) ;作用 4h、8h后mtp5 3蛋白表达均明显下降 ,并有剂量 -反应关系 (r值分别为 - 0 716、- 0 972 ,P值均 <0 0 5 )。结论　镉诱导LLC PK1 细胞凋亡可能与镉抑制bcl 2、mtp5 3蛋白表达有关     

BCL—2蛋白在燃煤型砷中毒患者皮肤中的表达分析

目的研究BCL-2基因在燃煤型砷中毒致皮肤恶性病变过程中的作用.方法将患者分为癌变组(A组,18例)、癌前组(B组,11例)和一般病变组(C组,39例);BCL-2蛋白的检测用免疫组化两步法.结果A、B及C3组的阳性细胞密度分别为(45.97±14.29)、(33.20±15.16)和(22.74±15.38),3组阳性率分别为94.44%、90.91%和58.97%,二者3组间差异均有显著性(A与CP＜0.01),B与CP＜0.05);3组阳性细胞分级构成差异亦有显著性(P＜0.01),A组Ⅲ级占50%,而B、C两组仅分别为9.09%和2.56%.结论在燃煤型砷中毒致皮肤癌变过程中,BCL-2基因起积极作用,其检测对该病的良、恶性鉴别有实用价值.     

阴道超声辐照后人胚绒毛滋养细胞凋亡及Bcl-2蛋白和Caspase-3蛋白表达的研究

目的:探讨阴道超声辐照对人胚绒毛滋养细胞凋亡的影响及其可逆性,同时探索Bcl-2蛋白及活化Caspase-3蛋白在滋养细胞凋亡中的作用。方法:选取符合条件的患者50例,随机分为5组,每组10例。4组实验组患者经阴道超声持续辐照10 min后分别于第1、3、5、7天行人工流产收集绒毛标本,第5组为对照组。采用TUNEL法检测各组绒毛滋养细胞的凋亡指数;同时采用免疫组化SABC法检测相应绒毛滋养细胞中Bcl-2蛋白及活化Caspase-3蛋白的表达水平。结果:阴道超声辐照对滋养细胞凋亡有影响。经阴道超声辐照10 min后,1天人胚绒毛滋养细胞的凋亡指数最高、Bcl-2蛋白的表达量最少、Caspase-3蛋白的表达量最多;随着取胚时间延长,凋亡指数逐渐下降、Bcl-2蛋白表达量逐渐增加、Caspase-3蛋白表达量逐渐减少;凋亡指数、Bcl-2蛋白及Caspase-3蛋白表达量分别于辐照后第5天、第3天、第5天开始与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阴道超声辐照10 min可致人胚绒毛滋养细胞凋亡增加,但该改变呈近期可逆性。Bcl-2蛋白和活化Caspase-3蛋白在滋养细胞凋亡中起着重要作用。     

皮肤鳞癌中三标志物的表达及其临床意义

目的研究survivin（SVV）、bcl-2基因蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在皮肤鳞癌（SCC）中的表达。方法用免疫组化SP法检测82例SCC组织和18例正常皮肤组织中的SVV、bcl-2基因蛋白和PCNA的表达水平。结果正常皮肤无SVV表达，SCC中阳性率为79.3％（P＜0.01）；且阳性率与组织分化、分期、转移和预后有关。癌组织bcl-2阳性率为58．5％，高于正常皮肤的16．7％（P＜0．01）；bcl-2阳性率与组织分化有关，与分期、转移和预后无关。SVV与PCNA呈正相关，与bcl-2无关。bcl-2与PCNA呈负相关。结论SVV和bcl-2在SCC的发生、发展中通过不同途径起作用，检测SVV对SCC的早期诊断、恶性程度判断、预测预后有作用。     

食管癌Fas、bcl-2蛋白和 DNA含量的流式细胞定量研究

目的探讨Fas和bcl-2蛋白表达和DNA倍体异常在食管癌发生和发展中的作用.方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术对70例食管鳞癌组织Fas、bcl-2蛋白和DNA含量进行定量检测.结果异倍体36例(51.4%),二倍体34例(48.6%);异倍体肿瘤其DNA指数、增殖指数和S期细胞比率均高于二倍体肿瘤,但差异无显著性(P＞0.05);Fas蛋白阳性表达42例(60.0%) , bcl-2蛋白阳性表达65例(92.9%),Fas蛋白表达与肿瘤病理分级密切相关(γ＝0.584,P＜0.05);异倍体肿瘤和二倍体肿瘤Fas和bcl-2阳性表达率和表达量均差异无显著性(P＞0.05).结论 DNA倍体异常、Fas和bcl-2蛋白的异常表达在食管癌发生和发展中起重要作用.     

硫代反义bcl—2脱氧寡核苷酸对U937细胞凋亡的影响

为研究硫代反义ｂｃｌ－２脱氧寡核苷酸（ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ）对单核细胞病细胞系Ｕ９３７细胞株凋亡的影响,采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、ＤＮＡ电泳、电镜和流式细胞计数技术检测了单核细胞白血病细胞系Ｕ９３７细胞株ｂｃｌ－２基因的表达和ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ时Ｕ９３７细胞凋亡的影响。结果发现Ｕ９３７细胞有大量ｂｃｌ－２基因表达：适当浓度（３０μｍｏｌ／Ｌ）ＡＮ－Ｓ－ＯＤＮｓ使Ｕ９３７细胞出现凋亡ＤＮＡ电泳梯     

膀胱移行细胞癌COX-2表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的　探讨膀胱移行细胞癌中环氧化酶 -2 (Cyclooxygenase -2 ,COX -2 )表达及其与肿瘤细胞增殖活性和凋亡程度的关系。方法　采用免疫组织化学法检测 5 4例膀胱癌、2 9例癌旁组织和 10例正常膀胱黏膜中COX -2和Ki67的表达 ,并采用TUNEL法检测原位细胞凋亡水平 ,结合临床病理资料分析。结果　膀胱癌组织中COX -2阳性表达、Ki67标记指数及细胞凋亡指数均显著高于癌旁组织及正常膀胱黏膜 (P <0 0 1) ;COX -2表达水平和Ki67标记指数均与膀胱癌分化、临床分期、淋巴转移呈正相关 ;细胞凋亡指数与肿瘤分期、分级呈负相关 ,即肿瘤“瘤级”和“瘤期”越高 ,则细胞凋亡越少 ,易复发肿瘤其细胞凋亡指数明显低于无复发肿瘤 ;COX -2表达水平的升高伴随着肿瘤细胞增殖活性的增加和凋亡程度的降低。结论　膀胱移行细胞癌中COX -2表达上调 ,其表达水平与肿瘤细胞的分化、生长及转移相关 ;COX -2的高表达可能通过促进细胞增殖和 /或诱导细胞发生凋亡耐受在膀胱癌的发生、发展中发挥重要作用     

bcl-2及相关基因在番茄红素诱导人胃癌细胞凋亡过程中的作用

目的通过体外试验研究bcl-2及相关基因在番茄红素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡过程中的作用。方法将番茄红素作用于人胃癌SGC-7901细胞,DAPI染色观察细胞凋亡情况,RT-PCR法检测bcl-2、bax、p53mRNA的表达。结果番茄红素作用于人胃癌SGC-7901细胞后,细胞发生凋亡,凋亡率为78.5%;随番茄红素浓度的增加,bcl-2mRNA的表达明显降低,baxmRNA和p53mRNA的表达均显著增加,并均呈剂量-效应关系。结论番茄红素在体外能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,且以促进p53mRNA过表达,从而上调baxmRNA的表达,下调bcl-2mRNA表达,即通过改变bax与bcl-2的比例来促进人胃癌SGC-7901细胞凋亡。     

原发性肝细胞肝癌细胞凋亡与bcl-2基因的关系

目的 研究细胞凋亡相关基因bcl-2与原发性肝细胞肝癌(HCC)细胞凋亡的关系.方法 采用TdT酶介导的生物素化dutp缺口末端标记技术(Tunel)和免疫组化SP法,检测肝癌组织的细胞凋亡指数和bcl-2基因的表达并以慢性肝炎肝组织作为对照.结果 慢性肝炎肝组织细胞凋亡指数显著高于癌组织细胞(P<0.01),bcl-2在癌组织中的表达为51.3%,在对照组中的表达为25%.肝癌组织中bcl-2表达与癌组织凋亡指数呈负相关.结论 在HCC中,癌细胞凋亡明显受到抑制,其发生可能与bcl-2基因调节障碍有关.     

醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡及bcl-2基因表达的影响

目的　探讨醋酸铅 (PbAc)对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对bcl 2基因表达的影响。方法　SD大鼠腹腔分别注射PbAc 2 5、5 0、10 0mg/kg 5d ,第 6天用流式细胞仪分别测定其大脑皮层、海马和小脑组织的细胞凋亡率和bcl 2基因的表达产物Bcl 2蛋白含量。结果　染铅大鼠大脑皮层、海马、小脑细胞凋亡率 (% ) :2 5mg/kgPbAc组为 5 .80± 0 .87、4.82± 0 .37、4.82± 1.2 3 ,5 0 mg/kg组值高于 2 5mg/kg组 ,10 0mg/kg组值高于 5 0mg/kg组 ,均比对照组 (1.40± 0 .70、2 .0 0± 0 .6 3、1.6 6±0 .49)高 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;并有剂量 -反应关系 (r值分别为 0 .998、0 .989、0 .997)。染铅大鼠大脑皮层、海马、小脑bcl 2基因表达 (FI指数 ) :2 5mg/kgPbAc组为 0 .6 8± 0 .0 3、0 .6 1± 0 .0 6、0 .6 9± 0 .0 5 ;5 0mg/kg、10 0mg/kg组值均与 2 5mg/kg组接近 ,但均比对照组 (1.0 0± 0 .13、1.0 0±0 .17、1.0 0± 0 .13)降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;并有剂量 -反应关系 (r值分别为 0 .886、0 .787、0 .832 )。大鼠大脑皮层、海马和小脑细胞凋亡率与Bcl 2含量呈负相关 (r值分别为 - 0 .75 0、- 0 .5 0 9、- 0 .6 6 7)。结论　铅可以诱发大鼠脑细胞凋亡 ,其机制可能与脑组织内bcl 2基因表达下调有关