阳和汤对小鼠移植性肿瘤抑制作用的实验研究

阳和汤是清代著名医家王洪绪所创名方，主治阴疽病症，近年被广泛用于内、妇诸科病症，用其加味治疗骨转移癌疼痛等［１］亦有较好疗效。为探讨其抗肿瘤作用，我们观察了该方对小鼠移植性肿瘤的抑制作用，现将结果报告如下。１　　实验材料１．１　　药物阳和汤：由熟地黄、鹿角胶、白芥子、肉桂、炮姜、麻黄、甘草等组成，经水煎、醇沉而成，生药浓度为１．５ｇ／ｍｌ，由本院制剂室提供；５－Ｆｕ：江苏南通制药总厂生产，批号０１０１１２；ＣＴＸ：江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号０１０８２９２１。１．２　　瘤株肉瘤Ｓ１８０Ａ…     

蝎毒抗癌多肽对移植性肿瘤的抑制作用

观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对小鼠肝癌（Ｈｅｐａｔｏｍａ２２，Ｈ２２）和小鼠黑色素瘤（ｍｅｌａｎｏｍａＢ１６）两种动物移植性肿瘤的抑制作用。方法采用肿瘤质量和肿瘤生长抑制以及带瘤小鼠外周血白细胞计数和脾脏指数和观察指标。     

竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用

目的：探讨竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用及对免疫功能的影响。方法：观察不同剂量竹叶取液对接种H22－肝癌细胞的小鼠的肿瘤生长和单核巨噬细胞功能的影响，检测小鼠胸腺指数、脾指数的变化。结果：与对照组相比，大、中剂量实验组动物瘤重明显减轻，单核巨噬功能显增强，胸腺（脾）指数显提高（P＜0．05）。结论：竹叶提取液对小鼠移植性肿瘤有明显的抑制作用。     

富勒醇对小鼠移植性肝癌抑瘤作用的初步研究

目的 研究富勒醇对小鼠移植性肝癌生长的抑制作用;方法 将荷瘤小鼠分为4组：4．8g／L和2．4g／L的富勒醇组。氟尿嘧啶组及空白对照组。分别腹腔注射相应的药物及注射用水后．给予光照射．连续7d。之后处死小鼠。记录瘤质量。结果 4．8g／L和2．4g／L的富勒醇组平均瘤质量均低于空白对照组（F=58．89,q=4．28、4．40,P〈0．01）,两种浓度富勒醇组之间瘤质量差异无显著性（q=1．32,P〉0．05）。氟尿嘧啶组平均瘤质量明显低于4．8g/L和2．4g／L富勒醇组（q=3．97、4．51．P〈0．01）,但其毒性作用大于富勒醇组。结论 富勒醇对小鼠移植性肝癌的生长均有明显抑制作用．且毒性作用较氟尿嘧啶小。     

甘草次酸钠对小鼠移植性肿瘤作用的实验观察

本文观察了甘草次酸钠对小鼠移植性肿瘤的抑制作用,并在此基础上观察了其对瘤细胞分裂指数和超微结构的影响,以及对抗肿瘤药物作用的影响。甘草次酸钠腹腔给药对小鼠S180、HepS具有不同程度的抑制作用,在10mg/kg时,抑制率分别为53.13％和40.10％(P值<0.05)。该药对HepA细胞分裂指数有抑制作用,24小时时,分裂指数抑制率为43.15％。电镜观察发现;使HepA细胞线粒体空泡变性,甚至界膜破损,细胞质中糖元颗粒减少,粗面内质网腔缩小,核染色质变细疏,膜完整性示踪剂镧颗粒进入胞质和核内。该药与抗肿瘤药物合用因不同药物和给药时间相异其增效作用亦不同,以ip喜树碱5分钟后投与本药为佳。此外本药对喜树碱引起的白细胞减少亦有保护作用。     

番茄红素对小鼠肝纤维化的保护作用

［摘要］目的: 探讨番茄红素对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的小鼠肝纤维化的干预作用。方法: 24只小鼠随机均分为3组,对照组、模型组及预防组。模型组小鼠予以腹腔注射Con A(20 mg/kg),每周1次,对照组腹腔注射等量PBS溶液,预防组在注射Con A的同时予番茄红素灌胃(20 mg/kg),每天1次,8周后处死小鼠。收集血液检测肝纤维化指标,测定肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛水平,病理学及半定量计分系统(semi-quantitative scoring system, SSS) 观察肝纤维化程度,免疫印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、Smad3蛋白、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达。结果： 与对照组比较,模型组血清透明质酸(hyaluronic acid, HA)、层黏连蛋白(laminin, LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen type Ⅲ, PC Ⅲ)水平,SSS计分,丙二醛,α-SMA、TGF-β1、Smad3的表达明显增加,SOD表达明显降低;与模型组相比,预防组HA、LN、PCⅢ水平,SSS计分,丙二醛,α-SMA、TGF-β1、Smad3的表达明显降低,SOD表达明显升高(P<0.01)。结论： 番茄红素通过减轻过氧化损伤,保护肝细胞,减少胶原生成,抑制α-SMA、TGF-β1及Smad3等致纤维化因子的表达,从而抵抗Con A诱导的肝纤维化作用。     

人胎盘免疫活性肽对小鼠移植性肿瘤的抑制研究

目的：观察胎盘免疫调节肽的抑癌效果，阐明其抑癌的机理。方法：采用生化分离技术，将胎盘免疫调节肽进行分离纯化，用荷瘤小鼠抑癌实验进行活性检测。结果：胎盘提取物对荷瘤实验抑瘤率约为31％～42％。结论：胎盘免疫调节肽对肿瘤生长具有抑制作用。     

鲨鱼软骨提取物对小鼠实体瘤抑制作用的实验研究

目的：观察鲨鱼软骨粉（商品名Shark Cartilade,SC)及其提取物（Shark cartilage extracts,SCE)对荷肝癌（Hep)小鼠和肉瘤S180小鼠的抑瘤作用。方法：将荷肝癌（Hep)小鼠40只随机分为4组：鲨鱼软骨提取物组（SCE）、鲨鱼软骨粉高剂量组（SCH）、鲨鱼软骨粉低剂量组（SCL）和生理盐水对照组（NS）。灌胃给药,每天1次,连用14d,经动物脉瘤重计算抑瘤率。同样方法处理50只荷S180小鼠。结果：SEC、SCH和SCL组对Hep的抑瘤率分别为38．72％、19．78％、16．84％;对S180的抑瘤率分别为45．19％、4．10％和3．79％。结论：鲨鱼软骨制剂对小鼠Hep和小鼠S180实体瘤均有一定的抑制作用,但其提取物SCT的抑瘤率明显高于鲨鱼软骨粉SC（P＜0．01或P＜0．05）。     

桃仁乙醇提取物对小鼠移植性S180肿瘤的抑制作用

[目的]探讨桃仁乙醇提取物对小鼠移植性S180肿瘤的抑制作用.[方法]于昆明种小鼠右前肢腋下接种S180细胞建立荷瘤小鼠模型,接种当日随机分为模型组、环磷酰胺组及桃仁乙醇提取物大、中、小剂量组.口服给予模型组生理盐水,腹腔注射给予环磷酰胺组环磷酰胺25mg/kg,分别口服给予桃仁乙醇提取物大、中、小剂量组2.8,1.4,0.7g/kg桃仁乙醇提取物,连续给药10d,第11d停药.第12d处死小鼠观察桃仁乙醇提取物对移植性肿瘤S180的抑制作用,计算肿瘤抑制率、胸腺指数、脾脏指数、体质量变化等,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.[结果]桃仁乙醇提取物可减轻S180荷瘤小鼠的肿瘤质量,增加胸腺指数,提高SOD活性,降低MDA含量;大剂量(2.8g/kg)桃仁乙醇提取物可提高脾脏指数和体质量.[结论]桃仁乙醇提取物可抑制小鼠S180移植性肿瘤的生长.     

番茄红素对小鼠胃肠推进运动的影响

目的 探讨不同剂量番茄红素对小鼠胃肠推进运动的影响及M受体是否参与了这种作用.方法 昆明种小鼠70只,按分层随机区组设计分为:生理盐水组,香油对照组,番茄红素20 mg、40 mg、60 mg组,阿托品+香油组,阿托品+番茄红素60 mg组,每组10只.采用炭末胶液(含12%活性炭和4%明胶)灌胃,计算灌胃30 min后炭末胶液在小肠内推进距离占小肠全长的百分比(胃肠推进率).结果 ①与生理盐水组相比,香油对照组小鼠胃肠推进率增强不明显(P>0.05).②番茄红素20 mg、40mg组与香油对照组相比,小鼠胃肠道推进率差异无统计学意义(P>0.05),而番茄红素60 mg组小鼠胃肠道推进率明显增强(P<0.05).③阿托品+番茄红素60mg组与香油对照组比较小鼠胃肠道推进率明显减小(P<0.05).结论 番茄红素60 mg对小鼠胃肠道推进运动有显著作用,阿托品可以阻断60 mg番茄红素增强小鼠胃肠道推进运动的作用,其作用机制与M胆碱受体有关.     

番茄红素对大鼠体内抗氧化酶活力的影响

目的　观察番茄红素 (lycopene ,LP)对大鼠抗氧化酶系统的影响。方法　大鼠饲喂番茄红素 4周后处死 ,测定血清和肝匀浆的超氧化物歧化酶 (SOD)活性、过氧化氢酶 (CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活力、总抗氧化能力 (T -AOC)、丙二醛 (MDA)及还原型谷胱甘肽 (GSH)含量。结果　各番茄红素给药组的大鼠血清和肝组织的SOD活性、GSH -Px活力及T -AOC上升 ,MDA含量降低 ,与空白组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　番茄红素可以提高大鼠机体的抗氧化能力 ,抑制脂质过氧化。     

番茄红素对糖尿病大鼠血糖及脂质过氧化作用的影响

目的　研究番茄红素 (lycopene ,LP)对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠血糖的调节作用极其抗氧化能力的影响。方法　利用四氧嘧啶造成糖尿病大鼠模型 ,以葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖 ,黄嘌呤氧化酶法测定血清和胰腺匀浆的超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,硫代巴比妥显色法测定丙二醛 (MDA)含量。结果　番茄红素能够明显降低糖尿病大鼠空腹血糖 ,提高血清和胰腺组织的SOD活性 ,降低MDA含量 ,与模型组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 0 5 )。结论　番茄红素可以降低糖尿病大鼠空腹血糖并能够提高其抗氧化能力。     

番茄红素对糖尿病大鼠肾脏RAS系统的调节作用

目的 研究番茄红素对糖尿病大鼠肾脏肾素-血管紧张素系统(RAS)的调节作用及其机制。 方法 选用12周龄的雄性瘦型及肥胖型Zucker大鼠(2型糖尿病大鼠模型)各16只,随机分为瘦大鼠+溶剂组,肥胖大鼠+溶剂组,瘦大鼠+番茄红素组及肥胖大鼠+番茄红素组。分别给予溶剂(蒸馏水)或番茄红素[40mg/(kg·d)]口服喂养6周。代谢笼分析各组大鼠24h尿液;ELISA测定各组大鼠血清氧化应激(MDA,GSH)水平变化;放射免疫法检测各组大鼠肾脏组织肾素(Renin)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量;分别采用qRT-PCR及 Western blot法检测各组大鼠肾脏组织AT₁受体mRNA及蛋白的表达水平。 结果 与瘦大鼠相比,校正体重因素后,肥胖糖尿病大鼠24h基础尿钠排泄显著降低(P<0.05),同时其体内氧化应激水平明显增高,即MDA活性水平显著升高,而GSH活性水平显著降低(P<0.05)。肥胖糖尿病大鼠肾脏Renin及AngⅡ水平也较瘦大鼠明显升高(P<0.05)。此外,肾脏AT₁受体的mRNA及蛋白表达水平在肥胖糖尿病大鼠肾脏也显著高于瘦大鼠(P<0.05)。通过给予番茄红素处理6周后,可明显改善肥胖糖尿病大鼠上述指标的变化,降低肾脏Renin、AngⅡ水平及肾脏AT₁受体的表达(P<0.05),而番茄红素对瘦大鼠无相应作用。 结论 番茄红素通过降低氧化应激水平,下调肥胖糖尿病大鼠肾脏RAS系统活性,从而促进血压的降低。     

番茄红素对人骨肉瘤细胞顺铂增敏作用及机制研究

目的 研究番茄红素（lycopene,LP）对人骨肉瘤MG-63细胞顺铂化疗敏感度的影响并初步探讨其可能的作用机制。方法 体外培养并取对数生长期人骨肉瘤MG-63细胞,设空白对照组、LP组（10μg/ml）、顺铂组（40μg/ml）和联合组[LP（10μg/ml）+顺铂（20μg/ml）];药物干预48h后,采用噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测细胞周期和细胞凋亡状况,反转录PCR（RT-PCR）法检测Bax mRNA、bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2比值,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测caspase-3蛋白表达。结果 联合干预组与顺铂组比较发现,联合干预组人骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,细胞周期G₀/G₁期显著延长（P<0.05）、S期和G₂/M期显著缩短（P<0.05,P<0.01）,细胞凋亡率（apoptosis index,AI）显著升高（P<0.01）,Bax mRNA表达明显上调、bcl-2 mRNA表达显著下调（P<0.05）且Bax/bcl-2比值显著升高（P<0.01）,caspase-3蛋白表达上调（P<0.01）。LP组与空白对照组比较发现,LP组MG-63细胞周期明显改变（G₀/G₁期延长、G₂/M期缩短）,bcl-2 mRNA显表达著下调（P<0.05）、Bax/bcl-2比值显著升高（P<0.05）,caspase-3蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 LP具有提高人骨肉瘤MG-63细胞顺铂敏感度的药理学作用,其机制可能与LP能够阻滞细胞周期以及调节凋亡相关调控基因和蛋白表达有关。     

全长型脾酪氨酸激酶基因转染对人喉鳞癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的 探讨全长型脾酪氨酸激酶[full-length spleen tylosine kinase,SYK(L)]基因转染对人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法 建立人喉鳞癌Hep-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分为SYK(L)重组质粒转染组、阴性对照质粒转染组和生理盐水组,分别向瘤体内注射SYK(L)重组质粒pIRES2-EGFP-SYK(L)及脂质体混合物、阴性对照质粒pIRES2-EGFP及脂质体混合物和生理盐水,观察肿瘤生长情况。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time fluorescence polymerase chain reaction,Q-RT-PCR)、Western blot法检测各组瘤体内的SYK(L) mRNA及蛋白表达水平。结果 SYK(L)重组质粒转染组的肿瘤平均体积为367.61±81.23mm³,明显小于阴性对照质粒转染组900.20±131.41mm³及生理盐水组930.71±143.73mm³,差异有统计学意义(F=99.91,P<0.01);Q-RT-PCR结果显示SYK(L)重组质粒转染组瘤体内mRNA相对表达量为2.268±0.075,明显高于阴性对照质粒转染组(1.212±0.025)及生理盐水组(1.175±0.031)(F=102.01,P<0.01);Western blot法检测结果显示SYK(L)重组质粒转染组瘤体内相对蛋白含量(0.834±0.021)明显高于阴性对照质粒转染组(0.243±0.041)和生理盐水组(0.301±0.039),差异有统计学意义(F=104.13,P<0.01)。结论 全长型脾酪氨酸激酶基因转染对人喉鳞癌裸鼠移植瘤有明显的生长抑制作用,有望成为基因治疗喉癌的新靶点及途径。     

番茄红素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖的影响

目的 观察番茄红素对体外培养的雌激素受体阳性(ER )乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性(ER-)乳腺癌细胞MDA-MB-231的存活率、细胞周期及凋亡的影响.方法 采用MTT法和H3-TdR 掺入法观察番茄红素对两种细胞增殖的影响;流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化.结果 番茄红素抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖和DNA合成,具有剂量效应关系,随着时间延长,抑制作用增强,最大抑制率分别为52.6%、61.9%.流式细胞仪结果显示,番茄红素作用24 h后,MCF-7、MDA-MB-231细胞周期各相发生变化,G0/G1期细胞增多,而S期和G2/M期细胞减少,同时可诱发MDA-MB-231细胞凋亡.结论 番茄红素通过阻滞MCF-7细胞于G1期而抑制该细胞的增殖,而对MDA-MB-231细胞增殖的抑制除可通过阻滞细胞周期进程外,还与诱导凋亡有关.     

番茄红素酸价测定新方法的研究

运用国家标准方法GB5009.37～2003第一法测定番茄红素酸价时,由于存在溶液与指示终点颜色相近难以判断滴定终点的问题,本方法增加了以pH计的pH指示到8.6为判定终点,从而使测定结果准确无误且精密度高。     

切除小白鼠性腺对乌拉坦诱发肿瘤的影响

本文观察了切除小白鼠性腺对乌拉坦诱发肿瘤的影响。结果显示,切除性腺动物肺肿瘤诱发率普遍降低,尤以切除卵巢动物更明显(肺肿瘤诱发率18.5％,对照组81.2％,p<0.01)。说明卵巢激素可能对乌拉坦诱发肺肿瘤有促进作用;性腺切除及假手术组动物的胸腺肿瘤诱发率有增高之势,但尚无统计学差异,可能与实验时间较短(180天)肿瘤发生率低未显示出规律性有关。     

精原干细胞移植受体鼠模型的建立

目的通过对4周龄昆明白小鼠腹腔内单次注射白消安来制作精原干细胞移植受体鼠模型。方法将实验动物分为4组,A、B、C组注射白消安的剂量分别是30 mg/kg4、0 mg/kg5、0 mg/kg体重,D组为对照组。注射后每天记录小鼠的存活情况,注射白消安后的20 d3、0 d4、0 d称量睾丸重量、测定血常规、制作并观察睾丸组织学切片、统计曲细精管的中空率。结果A、B、C、D组的死亡率分别是25.00%3、1.58%、80.00%、0.00%,注射白消安后30 d各组小鼠曲细精管中空率分别是45.25%、75.25%、1.50%、0.00%,白细胞、红细胞、血小板数量等血常规指标均恢复正常。结论腹腔内单次注射30 mg/kg或40 mg/kg剂量的白消安,死亡率较低(25.00%、31.58%),30 d后曲细精管中空率较高(45.25%7、5.25%)、血常规指标恢复正常,适合做精原干细胞移植受体。