芦荟大黄素调控miR-30b促进子宫内膜癌细胞自噬的研究

目的探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞HEC-1-B中miR-30b表达促进细胞自噬的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测miR-30b在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2中的表达水平。取miR-30b表达水平最高的HEC-1-B癌细胞分为HEC-1-B癌细胞组、miR-30b inhibitor NC组(转染miR-30b inhibitor NC)、miR-30b inhibitor组(转染miR-30b inhibitor)以及AE组(30μmol/L AE,未转染)和AE+转染组:AE+miR-30b mimics NC组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics NC)、AE+miR-30b mimics组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics)。q RT-PCR法检测各组细胞miR-30b表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色法检测各组细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3-I、LC3-II和p62表达水平。结果与人正常子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A、HEC-1-B和RL95-2癌细胞中miR-30b表达水平显著升高(P0.05)。其中HEC-1-B癌细胞中miR-30b表达水平最高,所以后续将选择HEC-1-B癌细胞进行转染实验。与HEC-1-B癌细胞组和miR-30b inhibitor NC组相比,miR-30b inhibitor组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P0.05)。与HEC-1-B癌细胞组相比,AE组和AE+miR-30b mimics NC组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P0.05)。与AE+miR-30b mimics NC组相比,AE+miR-30b mimics组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著升高(P0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著降低(P0.05)。结论子宫内膜癌细胞中miR-30b表达较高,AE可能通过抑制miR-30b表达,促进癌细胞自噬和凋亡,抑制癌细胞增殖,而过表达miR-30b可逆转AE发挥的作用。     

Wip-1基因在子宫内膜癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系研究

目的 探讨野生型p53诱导磷酸酶1(Wip-1)基因在子宫内膜癌组织中的表达及与细胞凋亡的关系.方法 选取子宫内膜癌患者68例,子宫内膜不典型增生患者30例,并留取正常子宫内膜组织标本40份.培养子宫内膜癌细胞系ECC-1(ER阳性)和KLE(ER阴性),将细胞分为Wip-1 siRNA组、siRNA对照组和空白对照组.利用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测不同组织及不同转染组细胞中Wip-1基因表达,四甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测不同处理组细胞增殖能力,An-nexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色检测不同处理组细胞凋亡及细胞周期.结果 子宫内膜癌组织中Wip-1mRNA表达水平(2.37士0.16)高于子宫内膜不典型增生组织(1.59士0.14)和正常子宫内膜组织(1.14士0.12),且子宫内膜不典型增生组织高于正常子宫内膜组织,差异均有统计学意义(P＜0.01);子宫内膜癌组织中Wip-1 mRNA表达水平与病理分期、病理分级、淋巴结转移、p53有关(P＜0.01);Wip-1 siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞在转染后24、48、96 h细胞存活率均低于siR-NA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);Wip-1 siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞Go+G1期比例均高于siR-NA对照组和空白对照组,而S期和G2 +M期比例均低于siRNA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01);Wip-1siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞凋亡率均高于siRNA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P＜o.05).结论 Wip-1基因参与了子宫内膜癌细胞增殖和凋亡过程.     

miR-135b对子宫内膜癌HOXA10基因表达的调控作用

目的 探讨miR-135b对子宫内膜癌中HOXA10基因表达的调控作用.方法 RT-PCR方法检测28例子宫内膜癌组织及相应癌旁组织中miR-135b及HOXA10的表达;用miR-135b模拟物及抑制物转染RL-952子宫内膜癌细胞株,RT-PCR检测转染效果并检测FOXO1 mRNA的变化,划痕实验检测转染后对细胞迁移的影响,流式细胞技术检测转染对细胞增殖的影响,Western blot检测HOXA10蛋白的变化.结果 miR-135b在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达升高(P<0.05),HOXA10则降低(P<0.05),经miR-135b模拟物转染后,子宫内膜癌细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平下降(P<0.05);经miR-135b抑制物转染后,子宫内膜癌细胞中HOXA10 mRNA和蛋白的表达水平升高(P<0.05);miR-135b能促进子宫内膜癌细胞的增殖(P<0.05).结论 miR-135b 在子宫内膜癌发生发展中有一定作用,子宫内膜中HOXA10的异常表达受miR-135b的调控.     

miR-10 a在子宫内膜癌中的表达及意义

目的：探讨子宫内膜癌组织中miR-10a的表达及意义。方法收集40例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生及30例正常子宫内膜组织,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[ poly( A)-RT-qPCR]检测miR-10a在不同子宫内膜组织中的表达,并将检测结果和临床及病理资料进行统计学分析。结果 miR-10a在子宫内膜癌组织中的表达高于不典型增生和正常子宫内膜组织,3组间差异有统计学意义( P<0．01);miR-10a在Ⅲ+Ⅳ期子宫内膜癌患者中的表达量高于Ⅰ+Ⅱ期;病理分级为3级的患者中的表达量高于1+2级;肌层浸润深度≥1/2的患者中的表达量高于肌层浸润深度<1/2者;有淋巴结转移的患者中的表达量高于无转移者,差异均有统计学意义(P<0．05);不同年龄、病理类型及雌激素受体、孕激素受体是否阳性的子宫内膜癌患者中其表达量差异无统计学意义(P>0．05)。结论 miR-10a在子宫内膜癌组织中高表达,可能作为癌基因调控了子宫内膜癌的发生及发展。     

miR-193a-3p在子宫内膜癌中的表达及临床病理的关系

目的 探究miR-193a-3p在子宫内膜癌组织中相对表达及其对子宫内膜癌细胞株的生物学行为的影响。方法子宫内膜癌、正常子宫内膜组织样本均取自徐州医科大学附属医院2020年7月～2021年4月行手术切除的患者。实时荧光定量PCR(qPCR)检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织样本中miR-193a-3p的表达,分析miR-193a-3p的相对表达量与临床病理之间的关系。此研究选用Ishikawa细胞株作为研究,分为正常组(未作任何处理组)、对照组(转染miR-193a-3p-NC组)和过表达组(转染miR-193a-3p-mimics组),qPCR检测各组细胞miR-193a-3p的表达水平,CCK-8、Transwell小室检测各组处理前后Ishikawa细胞增值、迁移和侵袭差异性。结果 正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织中miR-193a-3p相对表达量分别为1.00,0.50±0.11,子宫内膜癌组织中miR-193a-3p相对表达水平较正常子宫内膜组织明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌组织miR-193a-3p的表达水平与患者临床分期以及是否发生淋巴结转...     

长链非编码RNA-C00473在子宫内膜癌中的表达及其通过miR-15b/cyclin D1对Ishikawa细胞增殖的影响

目的 观察长链非编码RNA（lncRNA）C00473在子宫内膜癌组织中的表达,及其通过调控微小RNA-15b（miR-15b）对子宫内膜癌细胞（Ishikawa）增殖能力的影响。方法 qRT-PCR检测20例子宫内膜癌组织（研究组）与20例正常子宫内膜组织（正常组）中lncRNA C00473的表达情况。在Ishikawa细胞中转染过表达质粒（pcDNA3.1-C00473）、siRNA C00473以及空质粒（pcDNA3.1）,分别为过表达组、抑制组及对照组（NC组）。CCK8 法检测各组Ishikawa细胞增殖情况。qRT-PCR、western blot检测各组中lncRNA-C00473、miR-15b及其靶基因细胞周期蛋白 D1（cyclin D1）的表达情况。结果 与正常组相比,研究组lncRNA-C00473的表达增高（P＜0.05）。qRT-PCR显示Ishikawa细胞中lncRNA C00473过表达与抑制效果显著（P＜0.05）;与NC组相比,过表达组细胞增殖能力升高,抑制组细胞增殖力降低,差异有统计学意义（均P＜0.05）;过表达组miR-15b水平低于抑制组,cyclin D1在mRNA和蛋白水平均高于抑制组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 lncRNA-C00473与子宫内膜癌相关,其可能通过miR-15b/cyclin D1途径影响子宫内膜癌细胞增殖能力。     

c-myb、Bax蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨c-myb、Bax蛋白在子宫内膜癌中的表达和意义。方法 应用免疫组化SP法和TUNEL技术对68例子宫内膜样腺癌组织和42例正常子宫内膜组织中c-myb、Bax蛋白表达和细胞凋亡指数进行检测,结合临床病理指标进行分析。结果 c-myb、Bax在子宫内膜癌组织中的阳性表达率高于正常子宫内膜组织（P<0.05 ）。c-myb、Bax在分化程度越低的子宫内膜癌组织中的表达越高,在Ⅲ、Ⅳ期子宫内膜癌中的表达高于Ⅰ、Ⅱ期,差异有统计学意义（P<0.05）。子宫内膜癌组织的细胞凋亡指数高于正常子宫内膜组织,且子宫内膜癌细胞分化程度越低,细胞凋亡指数越高。Bax表达与子宫内膜癌细胞凋亡指数呈正相关（r=0.529, P<0.05）,而c-myb表达与子宫内膜癌凋亡指数无相关性（P>0.05）。结论 子宫内膜癌中存在c-myb、Bax蛋白的高表达,c-myb参与肿瘤细胞的增殖分化调节,Bax调节肿瘤细胞凋亡,两者可作为判断子宫内膜癌恶性行为和预后的指标。     

FAP-1与子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡的关系

目的 探讨Fas相关磷酸酯酶-1(FAP-1)在子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡中的作用.方法 应用S-P免疫组织化学方法检测63例子宫内膜癌中FAP-1、Fas及Fas-L的表达,同时检测13例子宫内膜非典型增生及20例正常子宫内膜组织作为对照.结果 FAP-1在子宫内膜癌中表达率为71.4%,明显高于正常子宫内膜中的表达率25.0%(P<0.05).Fas在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分剐为52.4%和85.1%(P<0.05).Fas-L在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为76.2%和35.0%(P<0.05).Fas蛋白表达阳性、阴性者子宫内膜癌组织中,FAP-1表达阳性率分别为51.5%和93.3%,两者间呈明显的负相关(P<0.05);而Fas-L表达阳性、阴性者中,FAP-1表达率分别为81.3%和40.0%,两者之间呈明显的正相关(P<0.05).结论 子宫内膜癌抵抗Fas介导的细胞凋亡与肿瘤细胞表达FAP-1有关,FAP-1引起的凋亡抑制在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用.     

miR-135b通过靶向FOXO1促进子宫内膜癌细胞的增殖

目的探讨miR-135b在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖的作用的机制。方法运用RT-PCR的方法检测22 对子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的miR-135b 和FOXO1 的表达;运用RT-PCR 的方法检测JEC、Ishikawa、HEC-1-B、 RL-952这4种子宫内膜癌细胞株中miR-135b和FOXO1的表达。分别转染miR-135b的模拟物抑制物于子宫内膜癌细胞株,通 过RT-PCR检测转染的效果,通过MTT增殖试验检测对子宫内膜癌细胞增殖的影响。通过RT-PCR的方法检测FOXO1 mRNA 的变化,Western blotting 检测在FOXO1 蛋白的变化。结果miR-135b 在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达增高（P< 0.05）, FOXO1在子宫内膜癌组织中较对应的癌旁组织表达降低（P<0.05）。荧光定量PCR显示子宫内膜癌细胞中miR-135b与 FOXO1表达趋势成负相关。miR-135b能促进子宫内膜癌细胞增殖（P<0.05）。上调miR-135b能够降低FOXO1 mRNA和蛋白 的表达（P<0.05）,下调miR-135b能够提高FOXO1 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。结论miR-135b在子宫内膜癌的发生发展 中发挥重要的作用,其部分分子机制可能是通过调控靶基因FOXO1而发挥作用。     

PTEN,Bim蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨促凋亡基因PTEN Bi m蛋白在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法应用免疫组化SP方法和Western blot方法检测17例正常增殖期子宫内膜、11例非典型增生子宫内膜及52例子宫内膜癌中PTEN、Bi m蛋白的表达。结果Bi m在正常子宫内膜中阳性表达率为100%,而在非典型增生内膜中阳性表达率开始下降(71.4%),在子宫内膜癌组织中明显下降,(P<0.05),而在子宫内膜癌各组织分级、临床分期及肌层浸润程度之间Bi m蛋白表达阳性率均无明显差异(P>0.05)。正常增殖期子宫内膜组织中PTEN表达量最多,随着内膜细胞的增殖程度的增加,PTEN表达量逐渐下降。结论PTEN Bi m蛋白表达改变与子宫内膜癌的发生密切相关。     

子宫内膜癌的MRI诊断

目的评价磁共振成像(MR I)对子宫内膜癌的定性诊断及分期诊断价值。方法将14例经手术和病理证实的子宫内膜癌患者的MR I和超声心动图(USG)检查结果采用双盲法进行分析,计算各自的敏感性、特异性和准确性,并进行比较。结果MR I和USG在子宫内膜癌定性诊断的敏感性、特异性和准确性分别为77.78%、92.31%、83.87%和66.67%、82.35%、74.29%,二者之间有显著性差异;对子宫内膜癌分期的诊断准确性分别为83.42%和72.35%,二者之间有显著性差异。结论MR I能多轴位、多序列清晰显示子宫内膜癌病灶及侵犯范围与途径,明显优于USG检查方法,MR I应成为子宫内膜癌术前常规的影像检查方法。     

子宫内膜癌的研究概况

子宫内膜癌是妇科最常见的恶性肿瘤 ,其发病率在女性生殖系统恶性肿瘤中仅次于子宫颈癌 ,一般多见于老年妇女。近年来 ,发病年龄有提前趋势。国内外专家近年来对子宫内膜癌的研究也有了进一步的发展。1　人癌细胞培养、肿瘤标志物及雌、孕激素受体的研究人癌细胞培养 ,已成为基础医学和临床医学研究普遍采取的手段 ,使深入地研究恶性肿瘤的发病机理成为可能。1 968年 ,日本首先报道了在体外培养子宫内膜癌细胞系成功[1 - 2 ] 。 1 997年 ,岱美茹[3] 等报道了国内第一个正式建立的子宫内膜癌细胞系。细胞定名为ＨＥＣ -Ｄ。ＨＥＣ -Ｄ子宫内…     

Management of recurrent endometrial carcinoma

Management of recurrent endometrial carcinoma has traditionally focused on providing targeted adjuvant therapy in select groups of patients based on their risk factors. Major progress has been made over the last two decades in identifying these clinical-pathological risk factors, which has led to the classification of patients into different risk groups. Patients with high-risk factors are generally treated with adjunctive radiation therapy immediately following surgery to minimize the incidence of recurrence. Those patients identified as low-risk generally receive no further treatment. Patients with intermediate-risk factors are individualized either to receive adjunctive therapy or not to receive further therapy based on institutional bias. Review of the literature suggests this traditional treatment strategy may reduce local recurrence, but fails to improve overall survival. Further studies to identify molecular based biomarkers may improve current classification of risk factors and the selection of patients for adjunctive therapy. Once the recurrence takes place, loco-regional disease can be treated with radiation therapy with reasonable success. Targeted radiotherapy and several cytotoxic chemotherapeutic agents are effective in the treatment of systemic recurrent disease. Hormonal therapy has also been demonstrated to be useful in selected group of patients for palliative purpose. The current areas of controversy and debate include the efficacy of adjunctive therapy, mode of therapy, timing of therapy, and issues related to surgical staging of patients as required by the current FIGO staging system.     

子宫内膜癌单纯放射治疗疗效分析

目的 探讨子宫内膜癌单纯放射治疗的效果，以及分析影响治疗效果的因素。方法 回顾性分析45例单纯放射治疗的子宫内膜癌。其中I期10例，Ⅱ期22例，Ⅲ期12例，Ⅳ期1例。体外照射应用60Co治疗机或10MVX射线直线加速器，后装治疗应用Buchler及HY—HDR18后装治疗机。结果 本组病例其5年生存率62．2％(28／45)，其中I期为80．0％(8/10)，Ⅱ期72．7％(16／22)，Ⅲ期25％(3/12)。Ⅳ期为0．0％。患者的期别、病理组织学类型和组织学分级影响其预后。结论 对于一些有手术禁忌症或拒绝手术的患者，单纯放射治疗不失为一种安全有效的根治子宫内膜癌的方法，尤其是I、Ⅱ期患者。而对晚期患者疗效不佳，需要进一步探讨，以提高疗效。     

子宫内膜癌的电子束CT诊断

目的 探讨电子束CT对子宫内膜癌的诊断作用.方法 经病理证实的子宫内膜癌患者27例,其中腺癌21例,腺鳞癌4例,浆液乳头状癌及透明细胞癌各1例.临床分期Ⅰ期13例,Ⅱ期7例,Ⅲ期4例,Ⅳ期3例.所有患者均行电子束CT平扫及增强.结果 CT表现子宫腔扩大、内膜增厚25例;子宫肌壁厚薄不均21例,其中7例可见腔内乳头状结节或团块;子宫体增大18例;子宫颈增大变形、密度不均7例;子宫轮廓不规则,宫旁间隙及盆腔侧壁斑片、结节或团块影5例;肝脏、腹腔远处转移3例.27例子宫内膜癌患者CT分期与临床分期一致25例,2例CT判断错误.结论电子束CT在子宫内膜癌的诊断及分期中具有重要作用.     

Survivin在子宫内膜样腺癌中的表达

目的研究Survivin在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生和子宫内膜样腺癌(EA)三种组织中表达的差异。方法选取华北石油管理局总医院2010年1月~2012年6月手术切除子宫并经病理证实的EA存档标本40例(EA组),经诊刮或宫腔镜检查病理结果示子宫内膜不典型增生20例(AHE组),同时选取同期因子宫脱垂或子宫肌瘤行子宫切除的正常子宫内膜20例作为对照(CON组)。通过免疫组织化学法检测三组中Survivin表达情况的差异。应用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。结果 EA组的Survivin表达阳性率为90%,显著高于CON组(75%),差异有统计学意义(P<0.05)。在EA组中,组织分级为G1、G2、G3级的患者Survivin阳性率分别为85.0%、90.9%、100.0%,差异有统计学意义(P<0.05);手术-病理分期为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的患者Survivin阳性率分别为62.1%、85.7%、100.0%,差异有统计学意义(P<0.05);肌层浸润深度<1/2及≥1/2的患者Survivin阳性率分别为88.5%、92.9%,差异无统计学意义(P>0.05);存在淋巴结转移及无淋巴结转移的患者Survivin阳性率为100.0%、80.6%,差异无统计学意义(P>0.05);存在脉管浸润及无脉管浸润的患者Survivin阳性率分别为100.0%、84.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论相较于正常子宫内膜,EA组织中Survivin表达显著增多。Survivin的阳性表达率与EA组织学分级和手术-病理分期相关,与肌层浸润、淋巴结转移及有无脉管浸润无关。     

Recent updates of management of endometrial carcinoma

Endometrial carcinoma is a low grade curable malignancy and most patients present with early disease with excellent survival. Of all female pelvic malignancies, it seems to have more advocates for different treatment plans than any other. Total extrafascial hysterectomy and bilateral salphingo-oophorectomy is the primary operative procedure. Pelvic lymhadenectomy is performed in most centres on therapeutic and prognostic grounds and to individualize adjuvant treatment. Postoperative irradiation are used to reduce pelvic and vaginal recurrences in high risk cases. Treatment planning are conservative in order to reduce patients morbidity and overtreatment while maintaining acceptable recurrence and survival rates.     

Fas/FasL系统在人子宫内膜增生过长和子宫内膜癌中的表达

目的：探讨Fas和Fas配体（FasL）在人子宫内膜增生过长和子宫内膜癌发病中的作用．方法：采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶染色法（SP法）检测加例子宫内膜增生过长的异位内膜与18例子宫内膜癌内膜中Fas和FasL蛋白的表达;采用原位杂交方法检测FasLmRNA水平．设正常子宫内膜25例为对照组．结果：Fas蛋白在正常子宫内膜的阳性表达率为68％,在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组的阳性表达率分别为58％和22％,差异具有统计学意义（P〈0．05）．FasL蛋白在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为68％和94％,明显高于对照组32％,差异具有统计学意义（P〈0．05）．FasLmRNA的表达强度在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组亦明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）．结论：Fas与FasL蛋白表达失调,可能是子宫内膜增生过长的发病机制之一,对子宫内膜癌组织逃避免疫系统监视具有重要作用．