同种异体骨共价枝接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽对成骨细胞黏附和增殖的影响

目的观察同种异体骨共价枝接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）多肽对大鼠成骨细胞黏附和增殖的影响。方法以RGD多肽在同种异体骨片表面进行共价枝接反应,用X线光电子能谱分析仪（XPS）进行表面分析,以大鼠成骨细胞在骨片表面进行组织培养,MTY法及细胞计数法评价成骨细胞的黏附效力及增殖活性,通过相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态及增殖情况。结果以碳二亚胺（EDC）为交联剂能够将RGD多肽有效固定于同种异体骨片表面,成骨细胞在同种异体骨片表面培养4h、加h后,实验组细胞黏附效力（0．322±0．014、0．447±0．030）均明显强于对照组（0．240±0．012、0．337±0．048）,培养4d、6d、8d后,实验组成骨细胞增殖情况（0．510±0．054、0．612±0．075、0．629±0．098）亦强于对照组（0．405±0．054、0．340±0．030、0．339±0．018）。结论RGD多肽共价修饰同种异体骨能够有效促进成骨细胞的黏附和增殖。     

RGD肽对猪去细胞心脏瓣膜表面修饰的研究

目的 检测促黏附分子RGD肽(精-甘-天冬氨酸)表面修饰去细胞瓣天然支架可行性.方法 应用酶和去污剂法制备猪去细胞主动脉瓣,固相法合成含RGD短肽GRGDSPC.实验组采用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP使GRGDSPC肽与之结合,去细胞瓣直接混合短肽和单纯去细胞瓣两组作对照.X射线光电子能谱法(XPS)支架材料表面分析.结果 XPS法显示,对照组未检出硫元素,实验组检出硫元素电子结合能中间峰位在163.1～165.7eV,提示二硫键形成,证明Sulfo-LC-SPDP使GRGDSPC肽成功固定于去细胞瓣表面.结论 通过化学交联法实现RGD肽对去细胞瓣表面修饰,有望促进组织工程心脏瓣膜构建.     

RGD多肽表面修饰生物陶瓷修复骨缺损BMP-2的表达

目的：了解精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）多肽表面修饰的羟基磷灰石-磷酸三钙（hydroxyapatite-tricalcium phosphate,HA-TCP）修复节段性骨缺损局部骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）的表达。方法：以骨髓基质干细胞（marrow stromal cells,MSCs）复合RGD多肽表面修饰的HA-TCP或单纯材料培养制备组织工程骨,选择60只新西兰白兔,制作15mm长的桡骨节段性骨缺损模型,实验根据植入不同的材料分为A、B、C和D组,A组：骨缺损区植入MSCs复合RGD多肽表面修饰的HA-TCP培养制备的组织工程骨;B组：骨缺损区植入MSCs复合HA-TCP培养制备的组织工程骨;C组：骨缺损区植入RGD多肽表面修饰的HA-TCP;D组：骨缺损区植入HA-TCP。术后4周取材,行修复区局部BMP-2免疫组化分析。结果：术后4周各组骨缺损区均有新骨生成,修复区局部BMP-2表达水平依次为：A〉B〉C〉D（P〈0.001,P〈0.05）。结论：RGD多肽表面修饰对以HA-TCP为支架材料组织工程骨的修复作用有明显优化作用。     

RGD多肽表面修饰对HA-TCP生物陶瓷修复骨缺损的影响

目的：了解精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp,RGD）多肽表面修饰对羟基磷灰石-磷酸三钙（hydroxyapatite-tricalciumphos phate,HA-TCP）修复节段性骨缺损的影响。方法：以骨髓基质干细胞（marrow stromal cells,MSCs）复合RGD多肽表面修饰的HA-TCP或单纯材料培养制备组织工程骨,选择60只新西兰白兔,制作15mm长的桡骨节段性骨缺损模型,实验根据植入不同的材料分为A、B、C和D组,A组：骨缺损区植入MSCs复合RGD多肽表面修饰的HA-TCP培养制备的组织工程骨;B组：骨缺损区植入MSCs复合HA-TCP培养制备的组织工程骨;C组：骨缺损区植入RGD多肽表面修饰的HA-TCP;D组：骨缺损区植入HA-TCP。术后4、8、16周取材,行X线检查、组织学观察、计算机图像分析和生物力学测定。结果：术后4、8、16周各组骨缺损区均有新骨生成,成骨量随时间的推移而增加。经X线、组织学和生物力学评估,成骨能力依次为：A〉B〉C〉D（P〈0.001,P〈0.05）,其中A组术后16周骨缺损完全修复,骨髓腔再通,生物力学性能接近正常骨。结论：RGD多肽表面修饰对以HA-TCP为支架材料组织工程骨的修复作用有明显优化作用。     

大段同种异体骨的制备研究

在不能满意获得自体骨的情况下 ,应用同种异体骨修复骨缺损是一种有效的方法。大段同种异体骨来源并不困难 ,而且可供不同形态、大小的需求。同种异体骨较人工假体最显著的特点在于骨端可获得牢固的生物愈合以及更容易使重要的肌腱韧带附丽 ,远期功能较好〔1〕。所以大段同种异体骨移植的研究越来越引起重视。国内外学者的研究就以下几个方面展开 :1　防止感染1 1　防止交叉感染同种异体骨移植既可因感染而导致植骨失败 ,也有引起人类疾病传播 ,交叉感染的危险。美国疾病控制中心于 1988年报道了世界第 1例因骨移植而传播艾滋病 ,术后 4年病…     

乳腺癌注射放射性示踪剂定位前哨淋巴结技术的最新研究

前哨淋巴结活检 (ｓｅｎｔｉｎｅｌｌｙｍｐｈｎｏｄｅｂｉｏｐｓｙ ,ＳＬＮＢ)是肿瘤外科 90年代兴起的一项新技术。 1998年Ｂｅｅｃｈｅｙ Ｎｅｗ ｍａｎ[1] 指出 ,ＳＬＮＢ是乳腺癌外科治疗的一次革命 ,现正成为国内、外肿瘤临床研究的热点 ,其目的是探讨前哨淋巴结(ｓｅｎｔｉｎｅｌｌｙｍｐｈｎｏｄｅ ,ＳＬＮ)能否反映腋窝淋巴结的状况 ,在早期乳腺癌中ＳＬＮＢ能否取代常规的腋窝淋巴结解剖 (ａｘｉｌｌａｒｙｌｙｍｐｈｎｏｄｅｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ ,ＡＬＮＤ) ,以减少患侧上肢淋巴水肿 ,提高患者的生活质量。该项研究的动物实验和…     

同种异体骨复合生长因子移植的研究

骨移植是骨科临床常用的方法,其中并体骨移植越来越受重视。本文对异体骨与不同生长因子复合移植的研究进行了综述,并且提出了多种生长因子与助诱导、抗感染、抑制免疫等载体复合移植是今后异体骨移植的发展方向.     

125I放射性粒子近矩放射治疗前列腺癌的体会

目的探讨经会阴植入125I放射性粒子近矩放射治疗在前列腺癌治疗中的价值.方法选取90名临床上无转移病灶的前列腺癌患者,其中行125I放射性粒子近矩放射治疗患者35名,行前列腺癌根治术患者55名.术后随访前列腺特异性抗原(PSA)水平,了解相关并发症.结果接受125I放射性粒子近矩放射治疗组,治疗后3个月血清PSA较基线水平明显降低,(19.35±16.58)ng/ml vs(0.315±0.276)ng/ml,差异有统计学意义.前列腺癌根治术治疗组术后3个月血清PSA较基线水平明显降低,(13.71±5.53)ng/ml vs(0.340±0.286)ng/ml,差异有统计学意义.两组间术后3个月PSA水平差异无统计学意义.接受125I粒子近矩放射治疗组术后并发症主要为尿路刺激症和轻微血尿,前列腺癌根治术组主要为肺部感染和尿失禁.结论125I放射性粒子近矩放射治疗前列腺癌创伤小,安全性高,术后疗效满意,是一种值得推广的前列腺癌局部治疗方法.     

放射性碘标记前列腺癌特异性溶瘤重组腺病毒的研究及其稳定性分析

目的 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒,构建125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物,并考察不同反应条件下病毒标记物标记率的影响.方法 125I标记采用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)作为氧化剂进行标记,分别设定不同浓度的溶瘤病毒和NBS进行作用,确定最佳的标记条件.分别考察125I的用量、反应时间、PH值、反应体积对125I-RSOAds-hTERT/PSA核素-溶瘤病毒标记物标记率的影响.采用凝胶柱层析法分离纯化核素-溶瘤腺病毒标记物;纸层析法测定125I-RSOAds-hTERT/PSA标记物不同时间的放射性纯度.结果 125I-RSOAds-hTERT/PSA放化纯度达95％以上,4℃冰箱放置7d其放化纯度基本稳定,保持在93％ ～94％.125I用量为0.5 μL(约0.2 mCi,7.4 MBq),NBS用量为25μg,8×109 VP/mL,125I-RSOAds-hTERT/PSA病毒液用量为100 μL,反应时间为3 min,PH值为7.5,加入PBS体积120 μL为最优条件.结论 核素125I标记hTERT/PSA双调控增殖型溶瘤腺病毒确切可行,标记物在一定条件下放化纯度稳定.     

同种异体骨移植的研究进展

同种异体骨移植是目前临床广泛使用于治疗各种骨缺损和促进脊柱融合的方法。根据处理方式的不同,同种异体骨可以分为：新鲜异体骨、深冻骨、冷冻干燥骨（fresh frozen allograft, FFA）和脱钙骨基质（demineralized bone matrix, DBM）。同种异体骨与新鲜的自体骨的愈合机制有着本质不同,其主要依靠“爬行替代”实现与宿主骨的融合,因此愈合速度慢、愈合质量差,容易发生骨不连和移植骨骨折,故存在较高的失败率。而复合生长因子、复合间充质干细胞以及红骨髓等方法可以提高异体骨愈合的速度。利用组织工程的原理与方法,采用复合移植的方法使异体骨得到活化,是今后异体骨移植研究与应用的发展方向。     

甲亢131I治疗前后骨密度测定的临床分析

目的 探讨甲亢患者131I治疗前及治疗后临床缓解持续时间的长短及其骨密度的变化情况。方法 70例甲亢患者于131I治疗前和其中37例于131I治疗后临床缓解小于6个月、9-12个月和大于18个月,分别用双能X线骨密度仪(DEXA)进行骨密度(BMD)测定,并分别与年龄匹配正常健康者95例进行对照分析。结果 (1)甲亢131I治疗前和治疗后临床缓解小于6个月、9-12个月的L2-4BMD均明确低于正常对照组,差异有非常显著性,股骨上段各区(股骨颈、Ward's区、大转子区)虽低于正常对照组,但差异无明显性;(2)131I治疗后临床缓解大于18个月的L2-4及股骨上段各区的BMD改善至接近正常人的水平,差异无显著性;(3)131I治疗后临床甲低组L2-4及股骨上段各区(尤其Ward's区)的BMD均明显低于正常对照组,差异有非常显著性。结论 甲亢经131I治疗后临床缓解6-12个月骨矿含量改善不明显,至18个月逐渐增加接近正常对照组水平;131I治疗后临床甲低持续时间大于6个月者,同样会导致骨矿含量的降低。     

125I偶联反义核酸对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用

目的观察125I偶联Ki67基因反义核酸(ASODNs)对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用.方法合成ki67基因ASODNs,氯胺-T法125I偶联ASODNs(125I-ASODNs).BALB/c种系裸鼠接种人肾癌786-0细胞.125I-ASODNs治疗组12只瘤体注射125I-ASODNs 0.1 ml(7.4 MBq/L、10 nmol),ASODNs治疗组12只瘤体注射ASODNs 0.1 ml(10 nmol),连续4 d.治疗后第3、6、12 d每组分别处死小鼠4只,取瘤组织检测肿瘤体积,免疫组化、Western blot技术检测Ki67表达,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡率.结果125I-ASODNs组治疗后3、6、12 d小鼠肿瘤体积分别为(51.8±13.7)、(76.1±22.9)、(636.9±73.8)mm3,与ASODNs处理组(70.3±18.9)、(185.7±37.7)、(868.9±128.2)mm3比较,差异有统计学意义(P<0.01);Ki67抗原表达率分别为(16.5±2.1)、(20.8±1.0)、(28.6±2.4)%,ASODNs组为(26.8±2.3)、(29.2±1)、(33.6±2.6)%,Ki67蛋白量比分别为(54.8±2.6)、(58.6±2.9)、(63.9±3.5)%,与ASODNs组(72.6±5.1)、(79.7±3.4)、(85.7±4.4)%比较差异有统计学意义(P<0.01);肿瘤细胞凋亡率分别为(22.6±2.0)、(24.9±2.0)、(27.7±2.2)%,与ASODNs组(15.1±1.6)、(17.8±1.9)、(18.3±2.3)%比较差异有统计学意义(P<0.01).结论125I-ASODNs比ASODNs具有更强的抑制裸鼠肾癌移植瘤生长及促进凋亡作用.     

利用质谱技术鉴定人肝癌细胞表面自然呈递的MAGE-A3表位

目的鉴定人肝癌细胞系HLE细胞表面自然呈递的1条HLA-A2限制性MAGE—A3抗原表位FLWGPRALV（MAGE-A3271-279）。方法用高效液相色谱仪（HPLC）及液-质联用仪对人工合成多肽FLWGPRALV进行鉴定,明确该多肽的HPLC出峰时间和质谱信号特征,并确定这两种仪器对该多肽的检测下限。以弱酸洗涤法从HLE细胞表面洗脱出由主要组织相容性抗原复合物（MHC）分子自然呈递的抗原多肽,用HPLC纯化分馏,根据人工合成多肽的出峰时间,收集该出峰时间前后2min的馏分,低温冻干后以液-质联用仪进行鉴定,明确其中是否存在MAGE-A3271-279抗原多肽。结果经纯化的多肽洗涤样品经液-质联用仪检测,可获得一个（m／z）2为529．9的双电荷质谱信号,对其碰撞诱导解离谱图进一步分析,证明其序列（自N端至C端）为FLWGPRALV,相对分子质量为1058．4Da,与MAGE-A3271-279抗原多肽相符,说明样品中存在低丰度的目的抗原多肽。结论可以从人肝癌细胞系表面直接分离、鉴定出可被HLA-A2分子自然呈递的MAGE-A3表位多肽,提示MAGE—A3271-279抗原多肽在肝癌免疫治疗中具有潜在应用价值。     

打压植骨结合金属网重建髋臼严重骨缺损

目的 评价打压植骨结合金属网重建严重骨缺损髋臼的中期临床效果,分析Paprosky骨缺损分型在评价骨缺损时的重要性.方法 1998年12月至2007年12月采用打压植骨技术结合使用金属网片和(或)金属网杯进行严重髋臼缺损重建63例(67髋),所有患者均为AAOS Ⅲ型混合型缺损.其中58例患者(61髋)获得了完整随访,平均63个月.Paprosky Ⅱ B 19例(20髋),Paprosky Ⅱ C 27例(28髋),Paprosky Ⅲ A 12例(13髋).术前Harris髋关节评分平均41.7分(21～52分).术后随访时进行临床疗效、影像学及并发症等评估.结果 58例(61髋)患者Harris髋关节评分术后平均89.2分(81～98分),术后优良率达93%,除3例发生聚乙烯髋臼从网杯中脱出外,其余55例患者髋臼无影像学松动.1例使用金属网杯患者髋臼旋转中心未能恢复正常.3例术后脱位患者,其中2例手法复位,1例切开复位,均获成功.术后发生感染1例(1.6%),经二期翻修打压植骨成功治愈.结论 异体骨打压植骨配合金属网是处理严重髋臼骨缺损的理想技术.建议在使用打压植骨技术对严重髋臼缺损重建时,采用AAOS分型结合Paprosky分型方法对缺损的严重程度进行评价.金属网杯不适用于严重髋臼骨缺损的打压植骨重建.     

微动对骨折端骨密度的影响

目的:研究骨折端微动时应力对骨密度的影响。方法:60只新西兰大白兔随机分为微动组与固定组,每组30只。固定组术后使骨折端固定。微动组使外固定架中间杆有0.5mm的轴向移动,术后动物自由行走,依靠体重使外固定架产生微动。利用双能X线骨密度测量仪测定两组动物骨痂的骨密度。结果:术后14d时固定组、微动组骨密度为正常的10%左右,两组无显著差异。21、28d两组骨密度有明显上升,微动组与固定组比较差异有显著性意义(P<0.01)。42d时微动组骨密度高于正常水平。56d时微动组骨密度稍下降,但仍高于正常,固定组骨密度高于正常水平,两组无显著差异(P>0.05)。结论:微动可增强骨愈合时骨痂的骨密度。     

长期维持血液透析患者腰椎QCT骨密度定量检测结果分析

目的：探讨长期维持性血液透析患者的骨质疏松症发病率,为临床诊断和治疗提供依据。方法整理在本院进行腰椎QCT骨密度测量中的透析患者45例,其中男25例、女20例,年龄25～77岁、平均56．1岁,透析时间20～134个月、平均56．3个月;随机选取健康人群45例,其中男17例、女28例,年龄30～78岁、平均49．2岁。按男女性别分为透析组与对照组。年龄、性别差异无统计学意义（ P＞0．05）。利用SPSS19．0对数据进行处理,计量资料采用方式表示,采用配对样本T检验、独立样本T检验,P＜0．05表示差异有显著性;计数资料采用卡方检验。结果长期维持血液透析患者的腰椎骨密度要低于健康人群的骨密度（ P＜0．05）;骨质疏松症发病率要高;骨密度改变与透析时间无统计学意义（ P＞0．05）。结论长期维持血液透析患者的腰椎骨密度低于健康人群,骨质疏松症的发病率高。     

羟基磷灰石材料结合牵拉成骨技术修复骨缺损的实验研究

 目的 探讨羟基磷灰石（hydroxyapatite/tri-calcium phosphase,HA/TCP）材料结合牵拉成骨技术是否能减少治疗骨缺损所需的时间并促进骨的矿化过程。方法 将36只健康雄性新西兰大白兔（20~24周,体重2.2~2.8 kg）随机分为3组,每组12只。于左胫腓关节下方做1 cm的胫骨缺损。A组：将骨缺损两端靠拢,外固定架加压固定。B组：将1 cm长的HA/TCP材料填入1 cm的骨缺损中,外固定架加压固定。C组：将骨缺损两端拉近至间距0.5 cm,将0.5 cm长的HA/TCP材料填入剩余的0.5 cm骨缺损中,外固定架加压固定。除B组外,A、C组均于术后7 d开始延长胫骨,A组延长10 d,C组延长5 d。在术后即刻、12、17、27、37 d用“C”型臂X线机观察各组新生骨的矿化过程。所有动物于术后37 d处死,取新生骨样本测量骨矿物质含量（BMC）和组织矿物质含量（TMC）,行胫骨扭转实验及组织病理学分析。结果 C组BMC为（454.44±89.98） mg和TMC为（454.40±89.97） mg显著高于A、B两组。C组新生骨的最大扭矩、新生骨的成熟度均明显高于A、B两组,骨的矿化和重塑也较快。C组在观察期总共37 d内骨愈合良好,但A、B两组在37 d内并未达到骨愈合。结论 在兔胫骨缺损延长模型中,与单一疗法相比,联合应用羟基磷灰石材料和牵拉成骨技术可减少治疗时间并促进骨的矿化。     

沈阳市2697名健康体检者超声跟骨骨密度调查分析

目的 了解沈阳地区健康男、女的骨密度情况。方法 回顾性分析2008~2010年中国医科大学附属盛京医院体检中心体检的1216名女性和1481名男性沈阳市健康体检者的骨密度，检测方法为定量超声跟骨骨密度测定。结果 女性平均T值-1.216±0. 960，男性平均T值-0.750±1. 028,二者差异显著；女性骨质疏松93例，占7.65%.，骨量减少663例，占52. 56%;男性骨质疏松37例，占 2.5%，骨量减少616例，占41.59%_。结论 女性各年龄段T值均低于男性，随着年龄增加，男女T值 均逐渐下降，进入围绝经期后女性T值下降更为迅速，定量超声跟骨骨密度测定可以作为骨量减少及骨质疏松的筛查手段。