PCEA对老年前列腺摘除病人围手术期应激反应的影响

目的 研究硬膜外自控镇痛（ＰＣＥＡ）对前列腺摘除病人围术期应激反应的影响。方法 ２０例在硬膜外阻滞下行前列腺摘除老年病人，其中１０例术后给予ＰＣＥＡ（ＰＣＥＡ组）另１０全铡为对照组。结果 ＰＣＥＡ组术后镇痛效果满意，ＣＯＲ、ＰＲＬ、ＧＬＵ与麻醉前比较无显著升高（均Ｐ〉０．０５），对照组术后２４ｈＣＯＲ、ＰＲＬ、ＧＬＵ显著升高（Ｐ〈０．０５或０．０１），术后４８ｈ ＣＯＲ、ＧＬＵ仍显著升高Ｐ〈０．０     

RT-PCR法测定脂肪组织解偶联蛋白mRNA表达水平的探讨

目的：建立解偶联蛋白（ＵＣＰ）ｍＲＮＡ表达水平的竞争ＲＴ－ＰＣＲ测定法;并应用该方法测定ＵＣＰ ｍＲＮＡ在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织的表达水平。方法：应用剪接重叠延伸ＰＣＲ（ＳＯＥ－ＰＣＲ）合成中央缺失型ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ。ＵＣＰ ｍＲＮＡ与作为内设标准的ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ用相同的引物在同一反应体系中进行逆转录反应和ＰＣＲ扩增。通过比较ＵＣＰ ｍＲＮＡ产物和ＵＣＰ竞争者ＲＮＡ产物的放射性信号强度求     

B超下行直肠前列腺穿刺诊断前列腺癌25例报告

直肠指检 (ＤＲＥ)、前列腺特异性抗原 (ＰＳＡ)及直肠Ｂ超(ＴＲＵＳ)是目前公认的诊断前列腺癌 (ＰＣａ)的主要方法 ,然而 ,确诊则需要病理检查。自 1998年以来 ,我们应用Ｂ超引导下的经直肠前列腺穿刺活检技术 ,并结合ＤＲＥ、ＰＳＡ和ＴＲＵＳ ,对 2 5例怀疑前列腺癌的患者进行诊断 ,现报告如下。1 资料与方法临床资料　 2 5例经ＤＲＥ发现前列腺结节或ＰＳＡ高于正常而怀疑前列腺癌的患者 ,进行了ＴＲＵＳ下行直肠前列腺穿刺组织活检术。年龄 5 1～ 86岁 ,平均 67.8岁。方法　应用ＡＣＵＳＯＮ - 12 8ＸＰ型Ｂ超检查仪 7ＭＨｚ直肠探头 …     

鼻咽癌化疗的研究进展

鼻咽癌 (ＮＰＣ )是特殊类型的头颈部癌 ,绝大部分为低分化或未分化型鳞癌 ,恶性程度高 ,生长快 ,易出现远处转移。因此 ,除公认的局部放射治疗外 ,近年 ,ＮＰＣ化疗亦有长足的进展 ,在其综合治疗中起到重要作用。1　复发 /转移鼻咽癌的联合化疗效果与其他头颈部鳞癌相似 ,ＮＰＣ标准化疗方案为ＤＤＰ + 5 -ＦＵ ,或ＤＤＰ + 5 -ＦＵ/ＣＦ[1] 。大量Ⅱ期临床研究表明 ,目前含ＤＤＰ方案疗效较非ＤＤＰ方案好。详见表 1。表 1　ＮＰＣ联合化疗疗效　　化疗方案例数 ＣＲ +ＰＲ(% )ＣＲ(% ) 作者ＤＤＰ +5 -ＦＵ 1 81 0 0 38.9ＭａｒｔｉｎＷ…     

高效液相色谱法测定痔康栓中芦丁的含量

新药痔康栓由槐花等 6味中药组成 ,临床效果好。为了控制痔康栓的内在质量 ,我们研究并制定了以高效液相色谱法测定痔康栓中芦丁含量的方法。1　实验方法与结果1 1　仪器与试剂　高效液相色谱仪为美国ＷＡＴＥＲＳ 6 0 0Ｅ系统 (包括ＷＡＴＥＲＳ 6 0 0ＣＯＮＴＲＯＬＬＥＲ ,ＷＡＴＥＲＳ 6 0 0ＰＵＭＰ ,ＷＡ ＴＥＲＳ 486检测器 ) ;电脑工作站为ＷＡＴＥＲＳＰＣ 80 0 ;ＫＱ 2 5 0型超声波清洗器 ;湘仪 岛津电子分析天平。水为重蒸馏水 ,甲醇 (色谱纯 ,分析纯 ) ,醋酸 (分析纯 ) ,芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所提供 ,批号 0 80 93…     

应用非同位素aPCR-SSCP法检测P53基因突变

建立一种非同位素的不对称聚合酶链反应－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ）：通过不对称ＰＣＲ（ａＰＣＲ）获得单链，普通ＰＡＧＥ电泳分离，经银染快速准确检出突变；应用这种方法，研究了４株鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１，ＣＮＥ２，ＨＫ１和ＳＵＮＥ１中肿瘤抑制基因Ｐ５３基因突变，证实ＣＮＥ１，ＣＮＥ２在第８外显子，ＨＫ１在第５外显子有突变，并发现新建立的细胞株ＳＵＮＥ１存在第８外显子的突变。     

肺炎患儿肺炎支原体感染检测结果的比较

肺炎支原体 (ＭｙｃｏｐｌａｓｍａＰｎｅｕｍｏｎｉａｅ ,ＭＰ)是引起小儿呼吸道感染 ,特别是肺炎的重要病原体之一。本文比较酶联免疫吸附试验(ＥＬＩＳＡ)、聚合酶链反应 (ＰＣＲ)和间接血凝试验 (ＩＨＡ)检测肺炎患儿ＭＰ感染的结果。1　材料和方法标本来源 :5 96例肺炎患儿均为住院或门诊患者。男 36 3例 ,女 2 33例 ,年龄 1月～ 1 3岁。所有患者均采用消毒棉签咽部取样 ,用于ＰＣＲ检测 ;其中 491例抽取外周血加作ＥＬＩＳＡ法检测 ,1 0 5例抽取外周血加作ＩＨＡ法检测。ＰＣＲ法 :采用美国ＭＪ -1 5 0型基因扩增仪 ,ＭＰ诊断试剂盒由…     

T—载体在聚合酶链反应扩增产物克隆中的应用

目的 探讨克隆聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增产物的简便方法。方法 用ＰＣＲ方法分别特异性扩增Ｗｉｌｍｓ瘤基因ｗｔ１和尿激酶受体（ＵＰＡＲ）基因,并利用Ｔａｐ聚合酶具有的延伸酶活性将扩增产物直接克隆入Ｔ－载体,ＥｃｏＲＩ酶切鉴定阳性重组子。结果设计的引物可分别扩增ｗｔ１基因锌指区（３４３ｂｐ）和ＵＰＡＲ基因编码区全长（１０８３ｂｐ）;未经修饰的常规ＰＣＲ和高保真ＰＣＲ扩增产物可被直接克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ     

PCR-ASO技术对苯丙氨酸羟化酶基因外显子突变的分析

目的：检测苯丙酮尿症（ＰＫＵ）可疑患者的苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子７、１１、１２（Ｅ７、１１、１２）区域的点突变。方法：应用ＰＣＲ方法对６例可疑ＰＫＵ患者的ＰＡＨ基因Ｅ７、１１、１２区域进行扩增，再用γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记的寡核苷酸探针（ＡＳＯ）杂交技术对其进行分析。结果：其中３例仅与含有Ｒ２４３Ｑ突变的异常探针杂交，不与正常探针杂交，说明其为Ｒ２４３Ｑ突变纯合子。结论：ＰＣＲ－ＡＳＯ探针可以特异地与ＰＡＨ突变位点杂交，是诊断ＰＫＵ的一种准确、可行的方法。     

荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体及解脲支原体

聚介酶链技术 (ＰＣＲ)自 1989年开始应用于临床检验以来 ,以其简便、快捷、灵敏的优势成为临床实验诊断学的热点 ,1995年我们曾对 5 0 0例可疑ＳＴＤ患者应用ＰＣＲ检测淋球菌 (ＮＧ)、沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲支原体 (ＵＵ ) ,阳性率分别为 10 .2 %、12 .9%、11.2 % [1] 。荧光定量ＰＣＲ(ＦＱ -ＰＣＲ)作为常规ＰＣＲ更新换代的技术。 1999年在我院开始应用 ,9月～ 12月检测了 80 1例可疑ＳＴＤ患者的ＮＧ、ＣＴ、ＵＵ ,现报告如下 :1　材料与方法1 1　临床资料　 80 1例患者来源于皮肤性病科、妇科和泌尿科门诊 ,疑有泌尿生殖道感染或阴…     

两种不同来源的EBV LMP1基因在Balb／c3T3细胞中的表达

目的：研究来源于鼻咽癌细胞株ＳＵＮＥ１及ＥＢＶ标准株Ｂ９５－８细胞中两种ＥＢＶ ＬＭＰ１基因在真核细胞Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３中的表达,为进一步研究ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的核酸疫苗打基础。方法：将两种不同来源ＥＢＶ ＬＭＰ１基因的真核表达质粒,经脂质体法转染Ｂａｌｂ／ｃ３Ｔ３细胞后,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、免疫组化及ＰＣＲ的方法检测不同转染细胞中ＥＢＶ ＬＭＰ１蛋白的表达及核酸片段。结果：ＰＣＲ结构表     

云南经典型苯丙酮尿症基因Exon—11突变的检测

为了探讨云南省经典型ＰＫＵ基因突变特征,为基因诊断提供依据,应用ＰＣＲ－ＡＳＯ探针斑点杂交和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析技术,对１４个ＰＫＵ家系１４名患儿的ＰＡＨ基因Ｅｘｏｎ－１１进行检测。结果：检出两种突变Ｙ３５６Ｘ（ＴＡＣ→ＴＡＡ）和Ｖ３９９Ｖ（ＧＡＴ→ＧＴＴ）,突变频率均为７．１４％,前者略高于北方人群,后者低于北方人群。提示：云南ＰＫＵ患者ＰＡＨ基因Ｅｘｏｎ－１１突变不同于北方人群,这对提高云南省     

PCR技术在研究人微小病毒B19中的应用

ＰＣＲ技术在研究人微小病毒Ｂ１９中的应用ＳＴＵＤＹＯＮＨＵＭＡＮＰＡＲＶＯＶＩＲＵＳＢ１９ＵＳＩＮＧＰＯＬＹＭＥＲＡＳＥＣＨＡＩＮＲＥＡＣＴＩＯＮ赵国强综述（河南医科大学微生物学与免疫学教研室郑州４５００５２）人微小病毒Ｂ１９的概况人微小病毒Ｂ１９（...     

尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响

目的 采用ＰＣＲ微板核酸杂交ＥＬＩＳＡ分析脲嘧啶ＤＮ糖苷酶（ＵＮＧ／ＵＤＧ）防止ＰＣＲ产物污染及其对ＰＣＲ扩增效率的影响。探讨在不同Ａ／Ｔ含量的微生物中含尿嘧啶的ＰＣＲ产物对核酸杂交的影响。方法 以３组ｄＵＴＰ含量不同的ＰＣＲ产物作模板，抗污染组用ＵＮＧ处理，直接进行再次扩增。用微板核酸杂交ＥＬＩＳＡ检测第二次ＰＣＲ扩增的结果。结果 抗污染组中含ｄＵＴＰ的ＰＣＲ产物作模板，结果为阴性，而以不含ｄＵ     

急性白血病细胞促红细胞生成素受体的表达

促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ＥＰＯ）的主要靶细胞是ＣＦＵ－Ｅ,因而ＣＦＵ－Ｅ具有促红细胞生成素受体（ＥＰＯ－Ｒ）量最多。但于其他一些细胞也有ＥＰＯ－Ｒ的存在。我们已于人白血病细胞株中检测到了功能性的ＥＰＯ－Ｒ。本实验应用免疫组化技术...     

PCR—ASO技术对苯丙氨酸羟化酶基因外显子突变的分析

目的：检测苯丙酮尿症（ＰＫＵ）可疑患者的苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子７、１１、１２（Ｅ７、１１、１２）区域的点突变。方法：应用ＰＣＲ方法支６例可疑ＰＫＵ患者的ＰＡＨ患者Ｅ７，１１，１２区域进行扩增，再用γ－＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记的寡核苷酸探针（ＡＳＯ）杂交技术对其进行分析。结果：其中３例仅与含有Ｒ２４３Ｑ突变的异常探针杂交，不与正常探针杂交，说明其为Ｒ２４３Ｑ突变纯合子。结论：ＰＣＲ－ＡＳＯ探     

乳腺癌雌激素受体表达与增殖细胞核抗原表达和AgNOR计数关系的研究

目的研究乳腺癌雌激素受体（ＥＲ）表达与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达和ＡｇＮＯＲ计数关系。方法采用ＡｇＮＯＲ染色技术和免疫组化Ｓ－Ｐ法，用抗ＥＲ单克隆抗体及抗ＰＣＮＡ单克隆抗体（ＰＣ１０），研究５０例乳腺癌ＥＲ与ＰＣＮＡ表达及ＡｇＮＯＲ计数。结果３３例乳腺癌ＥＲ阳性者与１７例ＥＲ阴性者相比，ＰＣＮＡ表达低（Ｐ＜０．０５），ＡｇＮＯＲ平均颗粒少（分别为４．９１±１．６９，６．５２±２．１３，Ｐ＜０．０１）。结论乳腺癌ＥＲ表达与ＰＣＮＡ表达及ＡｇＮＯＲ计数有相关关系，ＰＣＮＡ表达率及ＡｇＮＯＲ计数对评估乳腺癌预后有一定意义     

用TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE测定鼻咽癌端粒酶活性的比较

目的：比较ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测鼻咽癌端 酶的活性。方法：分别采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测了３８例鼻咽癌（ＮＰＣ）、１５例癌旁组织、１９例慢性鼻咽炎和鼻咽癌ＨＮＥ１细胞株、其它２种癌细胞株及３种正常细胞的端粒酶表达,并探讨了在不同数量的ＨＮＥ１细胞中端粒酶表达的灵敏度及ＨＮＥ１细胞株、５例ＮＰＣ活检组织经热灭活后端粒酶检测的     

鼻咽癌体外传代细胞株SUNE中EBV-LMP_1全基因的扩增

用长片段高保真度ＰＣＲ扩增系统（ｅｘｐａｎｄＴＭｈｉｇｈｆｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲｓｙｓｔｅｍ）从鼻咽癌（ＮＰＣ）体外传代细胞株ＳＵＮＥ中扩增出ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏膜蛋白（ＬＭＰ１）全基因,经凝胶电泳分析和ＤＮＡ斑点杂交进行鉴定。扩增片段长度为３．４３ｋｂ,相当于Ｂ９５－８细胞ＥＢＶ基因序列位置为１７００３３～１６６６０８ｎｔ,包括ＬＭＰ１基因的上游启动子／增强子序列、ＬＭＰ１编码序列的３个外显子、两个内含子及下游ｐｏｌｙＡ信号序列。ＬＭＰ１全基因的扩增对于深入研究ＬＭＰ１基因的结构与功能以及ＬＭＰ１在ＮＰＣ发生发展中的作用机制具有十分重要的价值。     

随机扩增多态DNA技术在地高辛标记HCMV DNA探针中的应用研究

应用ＲＥＡＰＤ－ＰＣＲ技术结合地高辛非放射生标记制备了人巨细胞病毒ＤＮＡ探针，并与常规随机引物法进行对照。ＲＡＰＤ－ＰＣＲ制备的ＨＣＭＶ ＤＮＡ探针长度呈多态性，扩增过程中不需合成特异引物，探针特异性强，产量高，用５０ｍｇ ＨＣＭＶ ＤＮＡ模板即可制备８．０μｇ探针；标记体系中ＲＡＰＤ－ＰＣＲ方法Ｄｉｇ－ｄＵＴＰ浓度为５．２％。