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RT-PCR法测定脂肪组织解偶联蛋白mRNA表达水平的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立解偶联蛋白(UCP)mRNA表达水平的竞争RT-PCR测定法;并应用该方法测定UCP mRNA在成人腹膜内与腹膜外脂肪组织的表达水平。方法:应用剪接重叠延伸PCR(SOE-PCR)合成中央缺失型UCP竞争者RNA。UCP mRNA与作为内设标准的UCP竞争者RNA用相同的引物在同一反应体系中进行逆转录反应和PCR扩增。通过比较UCP mRNA产物和UCP竞争者RNA产物的放射性信号强度求 相似文献
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应泽伟 《中国交通医学杂志》2000,(3)
直肠指检 (DRE)、前列腺特异性抗原 (PSA)及直肠B超(TRUS)是目前公认的诊断前列腺癌 (PCa)的主要方法 ,然而 ,确诊则需要病理检查。自 1998年以来 ,我们应用B超引导下的经直肠前列腺穿刺活检技术 ,并结合DRE、PSA和TRUS ,对 2 5例怀疑前列腺癌的患者进行诊断 ,现报告如下。1 资料与方法临床资料 2 5例经DRE发现前列腺结节或PSA高于正常而怀疑前列腺癌的患者 ,进行了TRUS下行直肠前列腺穿刺组织活检术。年龄 5 1~ 86岁 ,平均 67.8岁。方法 应用ACUSON - 12 8XP型B超检查仪 7MHz直肠探头 … 相似文献
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鼻咽癌化疗的研究进展 总被引:13,自引:2,他引:11
鼻咽癌 (NPC )是特殊类型的头颈部癌 ,绝大部分为低分化或未分化型鳞癌 ,恶性程度高 ,生长快 ,易出现远处转移。因此 ,除公认的局部放射治疗外 ,近年 ,NPC化疗亦有长足的进展 ,在其综合治疗中起到重要作用。1 复发 /转移鼻咽癌的联合化疗效果与其他头颈部鳞癌相似 ,NPC标准化疗方案为DDP + 5 -FU ,或DDP + 5 -FU/CF[1] 。大量Ⅱ期临床研究表明 ,目前含DDP方案疗效较非DDP方案好。详见表 1。表 1 NPC联合化疗疗效 化疗方案例数 CR +PR(% )CR(% ) 作者DDP +5 -FU 1 81 0 0 38.9MartinW… 相似文献
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新药痔康栓由槐花等 6味中药组成 ,临床效果好。为了控制痔康栓的内在质量 ,我们研究并制定了以高效液相色谱法测定痔康栓中芦丁含量的方法。1 实验方法与结果1 1 仪器与试剂 高效液相色谱仪为美国WATERS 6 0 0E系统 (包括WATERS 6 0 0CONTROLLER ,WATERS 6 0 0PUMP ,WA TERS 486检测器 ) ;电脑工作站为WATERSPC 80 0 ;KQ 2 5 0型超声波清洗器 ;湘仪 岛津电子分析天平。水为重蒸馏水 ,甲醇 (色谱纯 ,分析纯 ) ,醋酸 (分析纯 ) ,芦丁对照品 (中国药品生物制品检定所提供 ,批号 0 80 93… 相似文献
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建立一种非同位素的不对称聚合酶链反应-单链构象多态性技术(aPCR-SSCP):通过不对称PCR(aPCR)获得单链,普通PAGE电泳分离,经银染快速准确检出突变;应用这种方法,研究了4株鼻咽癌细胞株CNE1,CNE2,HK1和SUNE1中肿瘤抑制基因P53基因突变,证实CNE1,CNE2在第8外显子,HK1在第5外显子有突变,并发现新建立的细胞株SUNE1存在第8外显子的突变。 相似文献
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肺炎支原体 (MycoplasmaPneumoniae ,MP)是引起小儿呼吸道感染 ,特别是肺炎的重要病原体之一。本文比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应 (PCR)和间接血凝试验 (IHA)检测肺炎患儿MP感染的结果。1 材料和方法标本来源 :5 96例肺炎患儿均为住院或门诊患者。男 36 3例 ,女 2 33例 ,年龄 1月~ 1 3岁。所有患者均采用消毒棉签咽部取样 ,用于PCR检测 ;其中 491例抽取外周血加作ELISA法检测 ,1 0 5例抽取外周血加作IHA法检测。PCR法 :采用美国MJ -1 5 0型基因扩增仪 ,MP诊断试剂盒由… 相似文献
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T—载体在聚合酶链反应扩增产物克隆中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨克隆聚合酶链反应(PCR)扩增产物的简便方法。方法 用PCR方法分别特异性扩增Wilms瘤基因wt1和尿激酶受体(UPAR)基因,并利用Tap聚合酶具有的延伸酶活性将扩增产物直接克隆入T-载体,EcoRI酶切鉴定阳性重组子。结果设计的引物可分别扩增wt1基因锌指区(343bp)和UPAR基因编码区全长(1083bp);未经修饰的常规PCR和高保真PCR扩增产物可被直接克隆入pGEM-T 相似文献
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目的:检测苯丙酮尿症(PKU)可疑患者的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7、11、12(E7、11、12)区域的点突变。方法:应用PCR方法对6例可疑PKU患者的PAH基因E7、11、12区域进行扩增,再用γ-32P-ATP标记的寡核苷酸探针(ASO)杂交技术对其进行分析。结果:其中3例仅与含有R243Q突变的异常探针杂交,不与正常探针杂交,说明其为R243Q突变纯合子。结论:PCR-ASO探针可以特异地与PAH突变位点杂交,是诊断PKU的一种准确、可行的方法。 相似文献
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荧光定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体及解脲支原体 总被引:2,自引:0,他引:2
聚介酶链技术 (PCR)自 1989年开始应用于临床检验以来 ,以其简便、快捷、灵敏的优势成为临床实验诊断学的热点 ,1995年我们曾对 5 0 0例可疑STD患者应用PCR检测淋球菌 (NG)、沙眼衣原体 (CT)和解脲支原体 (UU ) ,阳性率分别为 10 .2 %、12 .9%、11.2 % [1] 。荧光定量PCR(FQ -PCR)作为常规PCR更新换代的技术。 1999年在我院开始应用 ,9月~ 12月检测了 80 1例可疑STD患者的NG、CT、UU ,现报告如下 :1 材料与方法1 1 临床资料 80 1例患者来源于皮肤性病科、妇科和泌尿科门诊 ,疑有泌尿生殖道感染或阴… 相似文献
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两种不同来源的EBV LMP1基因在Balb/c3T3细胞中的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:研究来源于鼻咽癌细胞株SUNE1及EBV标准株B95-8细胞中两种EBV LMP1基因在真核细胞Balb/c3T3中的表达,为进一步研究EBV LMP1基因的核酸疫苗打基础。方法:将两种不同来源EBV LMP1基因的真核表达质粒,经脂质体法转染Balb/c3T3细胞后,用Western blot、免疫组化及PCR的方法检测不同转染细胞中EBV LMP1蛋白的表达及核酸片段。结果:PCR结构表 相似文献
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云南经典型苯丙酮尿症基因Exon—11突变的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
为了探讨云南省经典型PKU基因突变特征,为基因诊断提供依据,应用PCR-ASO探针斑点杂交和PCR-SSCP分析技术,对14个PKU家系14名患儿的PAH基因Exon-11进行检测。结果:检出两种突变Y356X(TAC→TAA)和V399V(GAT→GTT),突变频率均为7.14%,前者略高于北方人群,后者低于北方人群。提示:云南PKU患者PAH基因Exon-11突变不同于北方人群,这对提高云南省 相似文献
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PCR技术在研究人微小病毒B19中的应用STUDYONHUMANPARVOVIRUSB19USINGPOLYMERASECHAINREACTION赵国强综述(河南医科大学微生物学与免疫学教研室郑州450052)人微小病毒B19的概况人微小病毒B19(... 相似文献
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目的 采用PCR微板核酸杂交ELISA分析脲嘧啶DN糖苷酶(UNG/UDG)防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响。探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响。方法 以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板,抗污染组用UNG处理,直接进行再次扩增。用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果。结果 抗污染组中含dUTP的PCR产物作模板,结果为阴性,而以不含dU 相似文献
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促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的主要靶细胞是CFU-E,因而CFU-E具有促红细胞生成素受体(EPO-R)量最多。但于其他一些细胞也有EPO-R的存在。我们已于人白血病细胞株中检测到了功能性的EPO-R。本实验应用免疫组化技术... 相似文献
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PCR—ASO技术对苯丙氨酸羟化酶基因外显子突变的分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:检测苯丙酮尿症(PKU)可疑患者的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7、11、12(E7、11、12)区域的点突变。方法:应用PCR方法支6例可疑PKU患者的PAH患者E7,11,12区域进行扩增,再用γ-^32P-ATP标记的寡核苷酸探针(ASO)杂交技术对其进行分析。结果:其中3例仅与含有R243Q突变的异常探针杂交,不与正常探针杂交,说明其为R243Q突变纯合子。结论:PCR-ASO探 相似文献
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目的研究乳腺癌雌激素受体(ER)表达与增殖细胞核抗原(PCNA)表达和AgNOR计数关系。方法采用AgNOR染色技术和免疫组化S-P法,用抗ER单克隆抗体及抗PCNA单克隆抗体(PC10),研究50例乳腺癌ER与PCNA表达及AgNOR计数。结果33例乳腺癌ER阳性者与17例ER阴性者相比,PCNA表达低(P<0.05),AgNOR平均颗粒少(分别为4.91±1.69,6.52±2.13,P<0.01)。结论乳腺癌ER表达与PCNA表达及AgNOR计数有相关关系,PCNA表达率及AgNOR计数对评估乳腺癌预后有一定意义 相似文献
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用TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE测定鼻咽癌端粒酶活性的比较 总被引:6,自引:3,他引:3
目的:比较TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE检测鼻咽癌端 酶的活性。方法:分别采用TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE检测了38例鼻咽癌(NPC)、15例癌旁组织、19例慢性鼻咽炎和鼻咽癌HNE1细胞株、其它2种癌细胞株及3种正常细胞的端粒酶表达,并探讨了在不同数量的HNE1细胞中端粒酶表达的灵敏度及HNE1细胞株、5例NPC活检组织经热灭活后端粒酶检测的 相似文献
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用长片段高保真度PCR扩增系统(expandTMhighfidelityPCRsystem)从鼻咽癌(NPC)体外传代细胞株SUNE中扩增出EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白(LMP1)全基因,经凝胶电泳分析和DNA斑点杂交进行鉴定。扩增片段长度为3.43kb,相当于B95-8细胞EBV基因序列位置为170033~166608nt,包括LMP1基因的上游启动子/增强子序列、LMP1编码序列的3个外显子、两个内含子及下游polyA信号序列。LMP1全基因的扩增对于深入研究LMP1基因的结构与功能以及LMP1在NPC发生发展中的作用机制具有十分重要的价值。 相似文献
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应用REAPD-PCR技术结合地高辛非放射生标记制备了人巨细胞病毒DNA探针,并与常规随机引物法进行对照。RAPD-PCR制备的HCMV DNA探针长度呈多态性,扩增过程中不需合成特异引物,探针特异性强,产量高,用50mg HCMV DNA模板即可制备8.0μg探针;标记体系中RAPD-PCR方法Dig-dUTP浓度为5.2%。 相似文献