淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究淫羊藿苷对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的影响。方法体外培养血管内皮细胞,淫羊藿苷预处理24h后,采用过氧化氢诱导氧化损伤模型,MTT法测定细胞活性,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放、细胞中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果淫羊藿苷能明显提高细胞存活率,增加细胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放和细胞内MDA含量。结论淫羊藿苷对过氧化氢诱导的血管内皮细胞损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化有关。     

山楂叶总黄酮对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究溶血磷脂酰胆碱(LPC)和氧自由基(OFR)对血管内皮细胞(VEC)的损伤,及山楂叶总黄酮对损伤后VEC的保护作用。方法:以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为材料,测定LPC或黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶(X +XO)与VEC的作用,以及加入不同浓度的山楂叶总黄酮后,对细胞乳酸脱氢酶(LDH)的泄漏量,细胞丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量及对细胞增殖的影响。结果:当VEC与LPC(5ug/ml)或黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶(X +XO) (10umol/L +2 0 0umol/L)共孵育2 4h时,表现为细胞LDH泄漏量增多,细胞内MDA含量升高,NO含量减少,细胞生长减缓,存活率下降;当加入不同浓度的山楂叶总黄酮后则可明显抑制细胞LDH的泄漏量,降低MDA含量,提高NO的含量,细胞生长正常,存活率提高。结论:山楂叶总黄酮能通过抗氧化途径对LPC与X +XO所致VEC的氧化损伤起保护作用     

环维黄杨星D对培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的研究环维黄杨星D对纯化培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,测定细胞凋亡率、caspase-3、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果与正常组比较,模型组LDH、MDA含量、caspase-3活性及细胞凋亡率明显增高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01);CVB-D(1×10-5mol.L-1)组降低LDH、MDA含量、caspase-3活性和细胞凋亡率,提高SOD活性,与缺氧/复氧组比较各实验指标均差异具有显著性(P<0.05)。结论CVB-D对缺氧/复氧造成的心肌细胞损伤具有保护作用,作用机制与清除氧自由基,抗脂质过氧化及降低细胞凋亡率有关。     

木犀草苷对阿霉素诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的观察木犀草苷(luteoloside)对阿霉素(adriamy-cin,ADR)诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法采用新生SD大鼠乳鼠,差数分离提取心肌细胞,建立ADR心肌细胞损伤模型,培养48 h后随机分为正常对照组、ADR模型组、木犀草苷与ADR同时给药(12.5、6.25和3.125 mg.L-1)各剂量组及木犀草苷预孵育4 h后,与ADR同时给药(12.5、6.25、3.125 mg.L-1)各剂量组。观察木犀草苷对ADR诱导心肌细胞损伤的量效、时效关系,采用MTT法检测细胞活力、试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与正常对照组相比,模型组细胞存活率降低、细胞内LDH含量降低,漏出量增加、SOD活性降低及细胞上清液中MDA含量增多。与模型组相比,木犀草苷各处理组心肌细胞存活率均明显增加(P<0.05);木犀草苷与ADR同时给药12.5、6.25 mg.L-1组(P<0.05)能明显降低LDH漏出量、增强SOD活力、降低细胞上清中MDA含量;预孵育4 h后,与ADR同时给药各剂量组均能明显降低LDH漏出量(P<0.05)、增强SOD活力、降低MDA含量(P<0.01)。结论木犀草苷对ADR所致的心肌损伤有明显保护作用;且预孵育4 h后对心肌细胞的保护作用优于未孵育组,其初步作用机制可能与抗自由基、减轻脂质过氧化作用有关。     

山楂叶总黄酮对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究溶血磷脂酰胆碱（LPC）和氧自由基（OFR）对血管内皮细胞（VEC）的损伤，及山楂叶总黄酮对损伤后VEC的保护作用。方法：以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为材料，测定LPC或黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶（X XO）与VEC的作用，以及加入不同浓度的山楂叶总黄酮后，对细胞乳酸脱氢酶（LDH）的泄漏量，细胞丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的含量及对细胞增殖的影响。结果：当VEC与LPC（5ug/ml)或黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶（X XO）（10umol/L 200umol/L)共孵育24h时，表现为细胞LDH泄漏量增多，细胞内MDA含量升高，NO含量减少，细胞生长减缓，存活率下降；当加入不同浓度的山楂叶总黄酮后则可明显抑制细胞LDH的泄漏量，降低MDA含量，提高NO的含量，细胞生长正常，存活率提高，结论：山楂叶总黄酮能通过抗氧化途径对LPC与X XO所致VEC的氧化损伤起保护作用。     

D-聚甘酯对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 用 H_2O_2(200μmol·L~(-1))诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤,研究D-聚甘酯(DPS)对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,采用试剂盒测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。同时采用流式细胞仪检测损伤后细胞内Ca~(2+)含量,并观察DPS对H_2O_2导致的内皮细胞内钙离子浓度的影响和细胞凋亡的作用。结果DPS 0.1,1,10μg·L~(-1)对损伤后ECV304具有促进增殖作用。DPS 0.1,1μg·L~(-1)使细胞培养液中SOD水平升高并降低细胞内MDA含量,4个剂量的DPS均能使细胞培养液中LDH释放减少。流式细胞术检测结果显示DPS能降低H_2O_2导致的细胞内Ca~(2+)含量的升高,并抑制细胞凋亡。结论 DPS具有保护H_2O_2致血管内皮细胞损伤的作用,其机理可能与其抗脂质过氧化作用,降低损伤后细胞内Ca~(2+)含量并抑制细胞凋亡有关。     

高甘油三酯血清对人脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的:研究单纯高甘油三酯血清(HTGBS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的损伤作用。方法:体外培养HUVEC,观察不同浓度的HTGBS对血管内皮细胞活力(MTT法测吸光度A值)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性,丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的影响。运用WesternBlot和酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测各组细胞中血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白的表达和细胞培养上清液中碳氧血红蛋白(COHb)的含量。结果:5%浓度的HTGBS对血管内皮细胞有明显的损伤作用,显著降低细胞活力、NO含量和SOD、NOS活性(P<0.01),显著升高血管内皮细胞中LDH、iNOS活性和MDA含量(P<0.01),并且5%HTGBS显著诱导细胞HO-1蛋白的表达并增加细胞培养液中CO的生成量(P<0.01)。结论:HTGBS体外诱导HUVEC氧化损伤,使细胞活力和抗氧化能力显著降低,增加其通透性及脂质过氧化程度,影响内皮细胞分泌功能并能诱导HO-1蛋白表达代偿性升高。     

淫羊藿总黄酮对LPC诱导内皮细胞损伤的保护作用

目的观察淫羊藿总黄酮对溶血性磷脂酰胆碱（LPC）诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法将血管内皮细胞分为正常对照组,LPC损伤对照组,LPC损伤加淫羊藿总黄酮低、中、高浓度（50、100、200nag·L^-1）组,检测细胞上清液中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）的含量和细胞内活性氧（ROS）水平。结果淫羊藿总黄酮剂量依赖性地降低LPC诱导的内皮细胞上清液中MDA、LDH含量增加并抑制细胞内ROS活性,且剂量依赖性地增加细胞上清液中NO含量。结论淫羊藿总黄酮对LPC诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞内ROS活性有关。     

洛伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱引起的离体血管内皮损伤的保护作用

目的探讨洛伐他汀（Lov）对溶血性磷脂酰胆碱（LPC）所致血管内皮损伤的保护作用及机制。方法利用家兔离体胸主动脉环和培养的人内皮细胞模型,分别观察洛伐他汀对LPC致离体血管环内皮依赖性舒张反应的损伤及对内皮细胞合成NO的损伤的保护作用。血管环分别与LPC（4 mg.L-1）和洛伐他汀（0.025、0.05、0.1μmol.L-1）单独孵育和共孵各15 min,分别检测乙酰胆碱（ACh）诱导的内皮依赖性舒张（EDR）反应及硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张（EDR）反应及血管组织中的脂质过氧化物产物丙二醛（MDA）的含量。在培养的人内皮细胞和培养基中分别加入LPC和洛伐他汀,分别检测LPC和洛伐他汀对内皮细胞中一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（eNOS）的影响。结果LPC（4 mg.L-1）与血管环孵育15 min,引起了血管EDR的显著降低,最大舒张比值较对照组明显减小（P〈0.01）,洛伐他汀剂量依赖性地减轻了LPC对血管EDR的损伤作用,其最大舒张比值较LPC损伤组明显增加,（P〈0.01）。LPC和洛伐他汀对硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应无明显影响。LPC引起了血管组织中MDA浓度明显升高,与对照组相比有显著性差异（P〈0.01） 不同浓度的洛伐他汀与血管环预孵后再与LPC孵育,剂量依赖性地减少了LPC所增加的MDA浓度,与LPC损伤组比较有显著差异（P〈0.01）。LPC与培养的内皮细胞孵育,导致了内皮细胞NO含量和eNOS活性的降低,不同浓度的洛伐他汀与内皮细胞预孵后再与LPC孵育,剂量依赖性地提高eNOS活性和NO的含量。结论LPC能直接抑制血管的EDR反应,洛伐他汀能剂量依赖性地拮抗LPC对EDR反应的抑制作用。其机制可能与LPC触发脂质过氧化反应,从而抑制血管内皮细胞NO的合成和增加NO的消耗有关,洛伐他汀通过抗氧化而保护血管内皮细胞的功能。     

脱氢表雄酮唾液酸苷对A β25-35致海马神经元损伤作用研究

目的:应用原代培养胎鼠海马神经元,观察脱氢表雄酮唾液酸苷对β-淀粉样蛋白(A β25-35)损伤海马神经元的保护作用.方法:海马神经元分别与A β25-35(0.1μM)、脱氢表雄酮硫酸酯及脱氢表雄酮唾液酸苷孵育24 h后,检测细胞内漏出的乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性、脂质过氧化物(MDA)含量及细胞存活率的变化.结果:海马神经元与A β25-35共同孵育24 h后,细胞存活率显著下降、GSH-Px活性降低、LDH和MDA含量升高;海马神经元与不同浓度脱氢表雄酮硫酸酯和脱氢表雄酮唾液酸苷共孵24 h后,能改变A β25-35引起的损伤,使细胞存活率显著升高、GSH-Px活性升高、LDH活力和MDA含量降低.唾液酸苷衍生物在对部分指标的影响上,效价高于相应的硫酸酯.结论:脱氢表雄酮唾液酸苷可对抗A β25-35所造成的神经元损伤,作用可能是通过清除氧自由基、抗脂质过氧化作用和提高神经元产生抗氧化能力实现的.     

Protective effect of ginkgo biloba extract on endothelial cell against damage induced by oxidative stress

The viability of bovine aortic endothelial cells (BAECs) treated with 0.1 m H O was decreased by 39.8%, and 100 mg/l EGb761 increased the viability by 20.6%. Exposure BAECs to H O for 6 min resulted in a significant elevation in the intracellular free Ca. Pretreatment of BAECs with 10 mg/l and 100 mg/l EGb761 for 10 min showed a decrease in the intracellular free Ca, 4.5% and 20.6%, respectively. The apoptotic rate of BAECs measured by propidium iodide (PI) staining was (38.1 +/- 2%) after 18 h of treatment with H O. Pretreatment of BAECs with 100 mg/l EGb761 for 1 h reduced the apoptotic rate to 27 +/- 1%. In addition, there were about 5-7% of cells stained positive measured by TUNEL assay. When BAECs were exposed to 0.1 m H O for 18 h, the number of TUNEL-positive cells increased to 37-44%. When 10 mg/l EGb761 and 100 mg/l EGb761 were used, the TUNEL-positive cells decreased to 26.5 +/- 3.1% and 17.5 +/- 1.7%, respectively. Furthermore, EGb761 also inhibited caspase-3 activity induced by H O. It is concluded that EGb761 has protective effect on bovine vascular endothelial cells against damage induced by H O. Further studies are needed to clarify the mechanisms of action of EGb761.     

红车轴草总黄酮对H_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量;荧光法检测Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响,检测各组细胞内ROS的表达水平。结果与空白对照组相比,H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH,漏出量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、线粒体膜电位降低;与模型组相比,红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)细胞存活率明显增加(P<0.01,P<0.05),红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50 mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)均能明显降低LDH漏出量(P<0.01,P<0.05)、明显增强SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高线粒体膜电位(P<0.01)。结论红车轴草总黄酮对H2O2诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用,其初步作用机制可能与抗自由基,减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关。     

二甘醇对大鼠肾脏的损伤作用

目的观察二甘醇(DEG)致肾脏损伤的作用特点,并探讨其毒性作用靶细胞。方法采用离体肾脏灌流技术,分别用含0.3%,1.0%和3.0%DEG的灌流液灌流大鼠离体肾脏90min,监测肾脏灌流压力和尿量,测定肾小球滤过率、尿蛋白含量、肾组织内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)的活性。体外传代培养人脐静脉内皮细胞株(EA.hy926)和人肾近曲小管上皮细胞株(HK-2),观察DEG0.1～1.0mmol.L-1暴露2～24h后,细胞形态、存活率及乳酸脱氢酶(LDH)漏出变化。结果DEG增加离体灌流大鼠肾脏的灌流压力、尿量和尿蛋白含量,但对肾小球滤过率影响不明显;使灌流肾组织中SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量增加。DEG使EA.hy926细胞和HK-2细胞的细胞活力明显下降,LDH漏出明显增加,细胞形态明显改变。损伤具有明显的浓度和时间依赖性。结论DEG能导致肾脏明显损伤,毒性作用靶细胞可能为肾脏的血管内皮细胞和近曲小管上皮细胞,损伤作用与脂质过氧化反应有关。     

神经生长因子对培养大鼠皮质神经元缺氧损伤的拮抗作用

AIM: To observe the effects of nerve growth factor (NGF) on neuronal hypoxic injury induced by sodium dithionite in primary cultures from gestation of 17-d rat fetal cerebral cortex. METHODS: Neuronal death and lactate dehydrogenase (LDH) efflux in the bathing medium were measured. The homogenate of cortical cells was used to determine malonyldialdehyde (MDA) content and superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) activities. RESULTS: When cultures were incubated for 24 h with sodium dithionite, efflux of LDH and MDA content increased while the number of surviving neurons decreased. NGF 100 micrograms.L-1 increased the number of surviving neurons to 85% +/- 9% of normoxia level under hypoxia. NGF 1-100 micrograms.L-1 concentration-dependently attenuated hypoxia-induced increase of efflux of LDH and MDA content, with IC50 of 27 and 49 (95% confidence limits: 18-49 and 29-110) micrograms.L-1. NGF 30 micrograms.L-1 induced a 3-fold increase in SOD and GSH-Px activities. The levels of SOD and GSH-Px activities in hypoxia group were increased 2.7-fold by NGF 100 micrograms.L-1. CONCLUSION: NGF prevented hypoxic insults in cultured cerebral cortical neurons by suppressing the generation of lipid peroxides and increasing the activities of antioxidant enzymes.     

Protective effects of Ginkgo biloba extract against lysophosphatidylcholine-induced vascular endothelial cell damage

ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｅｘｔｒａｃｔａｇａｉｎｓｔｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｄａｍａｇｅＣＨＥＮＪｉａｎＸｉｏｎｇ，ＣＨＥＮＷｅｉ...     

依达拉奉对LPC所致兔胸主动脉内皮功能的影响及机制

目的探讨依达拉奉(edaravone,Eda)对溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)所致家兔血管内皮损伤的影响及机制。方法家兔胸主动脉环分别与LPC(5 mg.L-1)和Eda(25～100μmol.L-1)单独孵育或共孵育,分别检测乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应和硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应,血管组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)和丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。结果 5 mg.L-1LPC孵育血管环30 min,明显抑制了乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应,但没有影响硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应,降低了血管组织中NO含量和SOD活性而增加了MDA含量。25～100μmol.L-1Eda分别孵育血管环15min,再与5 mg.L-1LPC共同孵育30 min,明显改善LPC所致的血管舒张功能的损害,升高了血管组织中NO含量和SOD活性而降低了MDA含量。结论 Eda对LPC所致的血管内皮依赖性舒张功能的损伤具有明显的保护作用,该效应可能与其抗氧化作用有关。     

Effects of atrial and brain natriuretic peptides on lysophosphatidylcholine-mediated endothelial dysfunction

Lysophosphatidylcholine (LPC), a major atherogenic lysophospholipid contained in oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL), induces endothelial dysfunction. Recent studies showed that natriuretic peptides (NPs) have antiatherogenic properties by inhibiting vascular smooth-muscle cell proliferation, but their effects on endothelial cells are little known. We examined whether atrial and brain NPs (ANP and BNP) have a protecting action against LPC-induced endothelial dysfunction. LPC (10 microM) significantly inhibited thrombin (0.001-1 U/ml)-induced endothelium-dependent relaxation without affecting endothelium-independent relaxation to sodium nitroprusside in isolated porcine coronary arteries. The impaired endothelium-dependent relaxation induced by LPC was prevented by treatment with ANP or BNP (i microM). In cultured bovine aortic endothelial cells (BAECs), LPC (10 microM) significantly attenuated bradykinin (1 microM)-stimulated nitric oxide (NO) release; however, this was prevented by ANP and BNP. Because LPC-induced endothelial dysfunction has been shown to be mediated at least in part by activation of the protein kinase C (PKC)-dependent signaling pathway, we also examined the effects of ANP and BNP on LPC-induced modulation of PKC activities in BAECs. LPC (10 microM) significantly stimulated PKC activity in BAECs. However, ANP or BNP significantly inhibited LPC (10 microM)-induced PKC activation. In conclusion, ANP and BNP protected endothelial cells from LPC-induced dysfunction in both isolated coronary arteries and cultured ECs. The mechanism appears to be at least in part related to the inhibition of LPC-induced PKC activation by NPs. These new actions of ANP and BNP against lysolipid-induced endothelial cytotoxicity may partly account for antiatherogenic properties of NPs.