聚乙二醇载药缓释微球复合去细胞瓣制备组织工程心脏瓣膜支架

目的:制备聚乙二醇(PEG)载药缓释微球复合去细胞瓣组织工程心脏瓣膜(TEHV)支架。方法:制备PEG微球,电镜观察粒径。去细胞瓣与PEG微球偶联,吸附转化生长因子(TGF-β1)。行ELISA检测,分子生物学、形态学和生物力学检测。结果:PEG微球粒径(42.72+3.48)nm。酶联免疫吸附检测示缓释效果明显,7dTGF-β1释放率67.22%,PEG微球的TGF-β1包封率为82.01%。与单纯去细胞瓣膜比较,复合支架羟脯氨酸含量和DNA含量无显著变化,形态学检测显示复合支架细胞外基质联合紧密,胶原纤维结构紧凑,且瓣叶生物力学性能提高。结论:制备PEGTGF-β1缓释微球去细胞瓣复合支架可行。     

转化生长因子-β_1基因转染构建组织工程瓣膜

目的:转化生长因子(TGF)-β1基因转染细胞,研究对天然支架组织工程瓣膜(TEHV)构建作用.方法:脂质体介导pcDNA3.0/TGF-β1基因载体进入大鼠肌成纤维细胞(MFB),48 h和4周后G418筛选法培养,SABC法检测TGF-β1表达.A组将转基因细胞种植去细胞猪主动脉瓣叶,B组种植未转基因细胞,C组单纯支架,体外培养2周构建TEHV.苏木精-伊红染色、扫描电镜观察,测定羟脯氨酸、DNA含量和最大负荷力.结果:基因转染48 h和4周,MFB瞬时和稳定表达TGF-β1蛋白.A组较B组细胞生长旺盛,胶原分泌较多,力学性能增强.结论:TGF-β1基因转染MFB作为种子细胞,能较好发挥TGF-β1活性,促进TEHV构建.     

碱性成纤维细胞生长因子联合骨髓间充质干细胞构建组织工程瓣膜的研究

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)联合骨髓间充质干细胞(MSCs)构建组织工程瓣膜(TEHV),能否在保证生物学性能不变的前提下,缩短MSCs体外构建TEHV的时间.方法:分离培养大鼠MSCs,进行细胞鉴定后种植于去细胞猪主动脉瓣膜支架上,再进行分组于体外构建TEHV.在培养基中加入5 μg/L的bFGF分别培养7 d、14 d做为实验组A和实验组B,实验组C除培养液中不添加bFGF外,其余同实验组B.对照组为大鼠肌成纤维细胞构建的TEHV.各组TEHV进行形态学观察,DNA和羟脯氨酸含量检测.结果:MSCs表达CD29 (94.82%)和CD44 (93.59%), a-SMA和Vimentin染色阳性,各组TEHV具有相似的形态学结构,DNA和羟脯氨酸含量的差异无统计学意义.结论:采用bFGF联合MSCs能在更短的时间内构建具有相同生物学性能的TEHV,从而缩短TEHV体外构建时间.     

转化生长因子β_1对心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响

目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对原代培养的乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与胶原合成的影响。方法出生1d~3 d的SD大鼠,用胰蛋白酶消化、差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,用不同浓度的TGF-β_1作用于心肌成纤维细胞,采用四氮唑盐(MTT)法测定CFs增殖,羟脯氨酸试剂盒检测胶原分泌,蛋白印迹法(Western Blot)检测心肌成纤维细胞分泌的TGF-β_1蛋白表达。结果与正常对照组比较,10 ng/m L TGF-β_1组心肌成纤维细胞增殖明显(P0.05);心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量明显增加(P0.01),同时TGF-β_1蛋白表达明显增加(P0.05)。结论 TGF-β_1可引起心肌成纤维细胞的增殖,胶原分泌增加,同时可使蛋白TGF-β_1蛋白含量增加。     

钙离子-钙调磷酸酶对肺成纤维细胞表型转化的影响

目的探讨钙离子-钙调磷酸酶在大鼠肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞表型转化中的作用。方法体外分离培养大鼠肺成纤维细胞,免疫组织化学法检测波形蛋白鉴定细胞;以Fluo3-AM为钙离子荧光示踪剂,激光共聚焦显微镜检测细胞内基础Ca2＋水平以及给予转化生长因子β1（TGF-β1）刺激后细胞内钙离子水平变化;Westernblot检测各组细胞内α—sMA、P—Smad2的表达。结果①大鼠肺成纤维细胞波形蛋白胞浆表达呈阳性;②TGF-β1刺激后大鼠肺成纤维细胞胞内钙离子水平升高;③TGF—β1刺激组,α—SMA表达明显增加,加用环孢素A后不能抑制a-SMA的表达;TGF-β1与环孢素A共刺激1h、4h、24h各组与TGF-β1刺激组相比,p-Smad2水平均明显增加,且以环孢素A作用1h增加最为明显,而4h组和24h组比较差异无统计学意义。结论TGF-β1刺激后大鼠肺成纤维细胞胞内钙离子水平升高。钙调磷酸酶可能参与肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞表型转化。     

转化生长因子β1诱导BALB/c 3T3成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1表达的影响

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)促进BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞转化及对早期生长反应基因1(Egr-1)表达的影响.方法 实验组用TGF-β110 ng/ml处理BALB/c3T3成纤维细胞,对照组不给予TGF-β1.采用流式细胞仪检测孵育24、48、72 h的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分比,用免疫细胞化学方法及Western免疫印迹法检测TGF-β1处理15、30、60、90、120、180、240 min的Egr-1表达情况.结果 用TGF-β110 ng/ml培养24 h,实验组和对照组的α-SMA阳性细胞百分率分别为(6.65±0.48)%和(5.53±0.62)%;继续培养至48和72 h,实验组的α-SMA阳性细胞百分率[(28.38±3.60)%和(36.04±0.73)%]显著高于对照组[(9.49±0.21)%和(15.23±0.33)%].免疫细胞化学染色检测Egr-1的结果显示,培养90 min时实验组细胞中出现棕黄色阳性染色颗粒,而对照组阳性染色细胞较少.Western免疫印迹法检测Egr-1的结果显示,实验组培养15 min时的灰度水平(55±26)和对照组(38±18)无明显差别;随着给予TGF-β1时间延长,实验组灰度水平逐渐增加,60和90 min时(115±14和129±22)显著高于对照组,之后实验组灰度水平逐渐降低,在240 min时达最低点(39±7).结论 TGF-β1能诱导BALB/c 3T3成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,并且在此过程的早期Egr-1表达增加.     

Notch3表达下调在诱导心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞转化中的作用

目的:探讨Notch3在心肌成纤维细胞(CFs)向肌成纤维细胞(MFs)转化中的作用。方法:用胶原酶消化法分离培养SD仔鼠的CFs,将其于不同浓度的转化生长因子-β1(TGF-β1)孵育24 h。用Western blot检测CFs中平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)及Notch3的表达量,用ELISA法检测细胞上清羟脯氨酸含量,用Real-Time PCR检测Notch3 mRNA表达量;利用RNAi法干扰CFs中Notch3的表达,用实时PCR及Western blot检测干扰效果;Western blot检测α-SMA蛋白表达量,ELISA检测各组细胞上清羟脯氨酸含量。结果:TGF-β1可浓度依赖性地诱导CFs细胞上清羟脯氨酸含量增加和α-SMA表达增加,同时使Notch3表达下降,其中2 ng/ml,5 ng/ml,10 ng/ml 3个浓度组与对照组相比有统计学差异(P0.05)。RNAi法干扰Notch3后,干扰组与对照组相比,Notch3 mRNA及蛋白表达均下降(P0.05),同时,干扰组细胞上清羟脯氨酸含量及α-SMA表达均增加(P0.05)。结论:Notch3表达下调能诱导CFs向MFs转化。     

RhoA/ROKα反义寡核苷酸抑制TGF-β1诱导的血管外膜成纤维细胞α-SM-actin表达

目的 α-平滑肌-肌动蛋白(α-SM-actin)的表达是血管外膜成纤维细胞/肌成纤维细胞表型转化的分子标记.本研究观察阻断RhoA-ROKα信号转导通路对于转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞α-SM-肌动蛋白(actin)表达的影响,以揭示RhoA-ROKα信号通路在血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞过程中的作用.方法使用贴壁法体外培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞;用Western blot技术测定RhoA和ROKα在血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞过程中的表达.结果 RhoA-ROKα在血管外膜成纤维细胞表达,TGF-β1可以诱导RhoA表达上调.用反义寡核苷酸技术抑制RhoA或ROKα的表达后能够抑制α-SM-actin的表达.结论 RhoA-ROKα信号转导通路参与了TGF-β1诱导的血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞的过程.     

平阳霉素微球长效制剂的制备及其体内外释放

目的 制备可稳定释药平阳霉素的长效微球制剂,考察该微球制剂在体内外的释放.方法 运用复乳溶剂挥发法,以聚乳酸羟基乙酸(PLGA)共聚物为囊材,将平阳霉素包封在PLGA微球中,制备可缓释的具有较高包封率的平阳霉素PLGA微球长效制剂.将该微球制剂在体外环境和比格犬体内做药物释放试验.结果 体外释放实验证明该微球制剂可持续释放平阳霉素近28 d,将其肌肉注射到比格犬体内,可稳定缓释平阳霉素近24 d.结论 平阳霉素PLGA微球制剂制备工艺合理,肌肉注射该微球制剂在体内有缓释平阳霉素的作用.     

紫杉醇缓释剂型对人胚肺成纤维细胞增殖的抑制作用

目的建立紫杉醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释系统,观察其抑制人胚肺成纤维细胞的效果,探讨用于治疗瘢痕性气道狭窄的可行性。方法采用改良溶剂蒸发法制备紫杉醇PLGA缓释微球,高效液相色谱法(HPLC法)测定其载药量、包封率,并行体外释放试验对其缓释性进行评估;采用噻唑蓝法测定空白微球及不同剂量的紫杉醇缓释微球对人胚肺成纤维细胞增殖的抑制率,对其有效性进行评价。结果紫杉醇PLGA微球形态圆整,平均粒径40μm,载药量和包封率分别为1.67%和66.8%。体外释药表明微球具有缓释性,可持续释放20天以上;20 mg微球每天释放的紫杉醇浓度在10-5mol/L左右,均在有效浓度范围内。MTT测定,不同剂量微球均可抑制HPF增殖,并且呈剂量依赖性,60 mg微球缓释液作用24 h,对HPF的抑制率可达50%以上。结论成功制备了紫杉醇缓释剂型,能够实现药物缓慢释放并可有效抑制HPF的增殖。证实局部应用该剂型在治疗瘢痕性气道狭窄方面具有潜在价值。     

老年大鼠肺成纤维细胞表型改变和转化生长因子-β1水平变化

目的 对比观察老年大鼠和成年大鼠肺脏成纤维细胞表型的改变和转化生长因子(TGF)-β1水平的变化,寻找肺间质纤维化发病率随年龄增长而增高的可能机制.方法 免疫组化法测定大鼠肺组织内α-平滑肌肌动弹白(α-SMA)含量,观察成纤维细胞表型的改变.ELISA法测定TGF-β1蛋白水平.荧光定量PCR(realtime PCR)技术测定TGF-β1 mRNA表达量的变化.结果 老年大鼠肺脏较成年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加(P＜0.01),TGF-β1蛋白水平升高[分别为(999.54±246.11)pg/g和(755.7±160.38)pg/g](P＜0.05),TGF-β1 mRNA(P＜0.01)表达水平降低.结论 老年大鼠肺脏肌成纤维细胞比例增加和TGF-β1蛋白水平升高可以构成肺间质纤维化随年龄增长发病率增高的基础,老化肺脏内TGF-β1水平升高是受到mRNA转录后调控机制的影响.     

Prx-1基因沉默对 TGF-β1诱导肺成纤维细胞增殖、ROS 水平、p-AKT 蛋白表达的影响

目的观察硫氧还原蛋白过氧化物酶1(Prx-1)基因沉默对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞增殖、活性氧簇(ROS)水平及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的影响。方法体外培养肺成纤维细胞MRC-5,并分为对照组、TGF-β1组、阴性转染组和实验组。阴性转染组和实验组分别通过脂质体Lipofectamine2000转染阴性对照siRNA及设计好的3个Prx-1 siRNA(Prx-1 siRNA-209、Prx-1 siRNA-289、Prx-1 siRNA-453),培养48 h,real-time PCR法检测Prx-1 mRNA,选取转染Prx-1 siRNA-453的细胞用于后续实验。除对照组外,其余三组给予TGF-β1(5μg/L)刺激。TGF-β1刺激24 h后,MTT实验观察细胞增殖情况,2,7-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)实验检测ROS水平;TGF-β1刺激45min后,Western blotting法检测p-AKT蛋白。结果对照组、TGF-β1组、阴性转染组、实验组OD值分别为0.56±0.07、0.81±0.10、0.88±0.18、1.16±0.18,ROS水平分别为2 922±291、4 348±484、4 660±375、5 415±436;实验组细胞增殖情况及ROS水平与其余三组相比,P均<0.01;TGF-β1组、阴性转染组与对照组相比,P均<0.01。对照组、TGF-β1组、阴性转染组、实验组细胞中p-AKT蛋白相对表达量分别为0.45±0.05、0.60±0.07、0.57±0.07、0.77±0.09;实验组与其余三组相比,P均<0.01;TGF-β1组与对照组相比,P<0.01。结论Prx-1基因沉默可增强TGF-β1对肺成纤维细胞的增殖诱导作用,上调细胞内ROS水平和p-AKT蛋白表达。     

紫杉醇长效PLGA微球的制备、性质及其在体内抗H22型肝癌的疗效

目的 制备长效紫杉醇聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球,对微球的常规理化特性、体外释放特性进行考察并对该微球的抗肝癌疗效进行鼠体内评估.方法 采用单乳溶剂挥发法制备紫杉醇PLGA微球成功后利用激光粒度分析仪测定其平均粒径,利用扫描电镜观测微球表面形貌,对3批微球样品进行载药量及体外释放检测,构建小鼠H22肝癌模型,以瘤内方式给药,给药15 d后观测肿瘤病理切片,评估疗效.结果 微球表观平整,形态圆滑,平均粒径为36.4 μm,3批样品平均载药量为7.42%,可维持30 d左右的体外释放,体内实验显示微球具备良好抗H22型肝癌疗效.结论 所制备的紫杉醇PLGA缓释微球具备良好的理化特性、体外释放特点并具备良好的抗肿瘤疗效.     

茶碱壳聚糖缓释微球吸入对小鼠支气管哮喘模型气道炎症及气道痉挛的影响

目的 探讨茶碱缓释微球吸入对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠肺泡灌洗液、细胞因子及肺组织病理改变的影响.方法 40只6～8周龄健康雄性BALB/C小鼠随机分为阴性对照组、模型组、布地奈德组、茶碱壳聚糖缓释微球吸入组,每组10只,同步饲养2周.小鼠于第1天、第8天及第15天OVA致敏,最后一次致敏后连续7d吸入1％的OVA激发,以建立哮喘模型.激发前各组给予所对应药物治疗,取肺泡灌洗液后,分别测定其中总蛋白、白细胞总数及分类,酶联免疫吸附试验测定BALE中IL-4、TNF-α.同时对肺组织切片进行HE染色,形态学检查和炎症状况的病理评分,采用计算机图像软件测定支气管壁面积(WAt)、管腔内径(T)并应用内周长(Pi)标准化.结果 模型组中的白细胞总数、嗜酸粒细胞、总蛋白、IL-4、TNF-α均明显高于阴性对照组.吸入布地奈德、茶碱壳聚糖微球组的上述指标较哮喘模型组明显降低(P＜0.05),两组之间差异无统计学意义;茶碱壳聚糖组中的巨噬细胞明显高于其余各组(P＜0.01).吸入布地奈德组和茶碱壳聚糖组小鼠肺组织切片病理形态显示,气道周围炎症较单纯哮喘模型组明显改善,两组患者炎症病理评分较单纯哮喘模型组亦明显改善,且两组之间差异无统汁学意义.各实验组支气管壁面积无差别;茶碱壳聚糖微球组能够显著改善支气管直径,与单纯哮喘模型组比较差异具有统计学意义(P＜0.05),而布地奈德组对支气管内直经无显著改善,与单纯模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 茶碱气道缓释微球吸入可以抑制气道炎症反应,扩张支气管平滑肌.因此,有望成为吸入激素加长效β2受体激动剂的补充或替代药物.     

具生物活性组织工程血管支架的制备及支架与血管平滑肌细胞的相容性研究

目的 探索缓释血管内皮生长因子(VEGF)的可降解聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)支架的制备及其与血管平滑肌细胞(SMC)的相容性.方法 使用明胶微球做为缓释载体,加载 VEGF 和PLGA 构建组织工程血管支架(VEGF-PLGA)并观察体外 VEGE 释放效果.体外培养大鼠肺主动脉SMC 细胞,随机将培养至第 5 代或第 6 代细胞分为三组:VEGF-PLGA 组、PLGA 组与对照组.并将SMC 种植在 VEGF-PLGA 膜、PLGA 膜片上,对照组不放置膜片.用相差显微镜观察细胞生长情况,采用 MTT 绘制细胞生长曲线,检测细胞增殖和细胞黏附率.结果 (1)VEGF 在体外释放达 14d 以上;(2)SMC 在 VEGF-PLGA 膜片上生长良好;(3)MTT 法检测细胞增殖情况显示,VEGF-PLGA 明显好于其它组(P<0.05),细胞增殖符合细胞生长曲线;(4)细胞黏附率检测显示,三组无明显差异(P>0.05),VEGF-PLGA 对血管平滑肌细胞有良好的相容性.结论 明胶微球载体制备工艺简便,性能优良,VEGF-PLGA 制备方法简便,可在较长时间内持续释放活性 VEGF,对血管 SMC 具有良好的相容性,可用于组织工程血管的进一步构建.     

依那普利拉通过调控TGF-β1表达对抗AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂依那普利拉(enalaprilat,Ena)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生鼠心室成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)增殖及对羟脯氨酸水平和TGF-β1蛋白表达的影响及机制.方法以培养的新生Wistar大鼠CFb为研究对象,分为对照组,模型组,用药组三个剂量组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;羟脯氨酸法测定胶原含量;逆转录-多聚酶链反应( RT-PCR)和流式细胞仪(FCM)检测Ena对TGF-β1转录及表达的影响.结果 Ena能够显著抑制AngⅡ诱导的CFb增殖(P＜0.05或P＜0.01),降低羟脯氨酸含量(P＜0.05或P＜0.01);抑制TGF-β1转录及其蛋白表达水平(P＜0.05或P＜0.01).结论Ena抗CFb增殖的作用与抑制TGF-β1转录和表达、拮抗AngⅡ的生物效应密切相关.     

ADAMTS-1 对小鼠成纤维细胞转化生长因子及其下游信号通路 PI3K / AKT 的影响简

目的 探索含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）对体外小鼠成纤维细胞（NIH3T3）转化生子因子（TGF-β1）及其下游信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）的影响.方法 体外培养小鼠成纤维细胞,以ADAMTS-1为处理因素,按照不同浓度,将NIH3T3分为空白组、低浓度组（1 nM）、中浓度组（10 nM）、高浓度组（20 nM）,通过RT-PCR检测细胞TGF-β1mRNA的表达情况,利用Western-blot观察细胞TGF-β1及磷酸化蛋白激酶B（pAKT）的蛋白表达情况.结果 根据RT-PCR图像显示,与空白组相比,其他各组TGF-β1mRNA的表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势（P〈0.05）.根据Western-blot图像显示,与对照组相比,其他各组TGF-β1、pAKT的蛋白表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势（P〈0.05）.结论 ADAMTS-1可能下调TGF-β1及其下游PI3K/AKT信号通路.     

透明质酸保护组织工程软骨拮抗硝普钠抑制作用的机制研究

目的 研究透明质酸对壳聚糖复合支架与再分化软骨细胞构建的组织工程软骨的保护作用.方法 藻酸钠微球包被体外单层扩增培养的去分化软骨细胞2周以恢复其表型,Ⅱ型胶原蛋白表达的免疫组织化学监测分化状态.扫描电镜观察再分化软骨细胞在壳聚糖复合支架上的生长,3周后用硝普钠或(和)透明质酸以及β1整合素特异性阻断抗体作用于该组织工程软骨,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot检测软骨特异性的Ⅱ型胶原或聚集蛋白聚糖(aggrecan)的表达.结果 藻酸钠微球包被去分化软骨细胞2周能显著提高Ⅱ型胶原的表达.壳聚糖支架支持再分化软骨细胞的贴附、增殖和迁徙.硝普钠呈剂量依赖性地抑制组织工程软骨上的软骨细胞Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA的表达,而透明质酸显著提高Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA的表达.当用特异性抗体阻断β1整合素后,透明质酸不能逆转硝普钠对组织工程软骨中Ⅱ型胶原蛋白表达的抑制作用.结论 藻酸钠微球包被去分化的软骨细胞2周能恢复细胞的表型.透明质酸通过β1整合素信号通路拮抗低浓度硝普钠对组织工程软骨的抑制作用,保护软骨组织.     

姜黄素壳聚糖微球治疗大鼠溃疡性结肠炎

目的观察姜黄素壳聚糖微球对大鼠溃疡性结肠炎治疗作用。方法雄性SPF级BALB/c大鼠120只随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、姜黄素组、壳聚糖微球组、姜黄素壳聚糖微球组各20只。用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)7 d诱导溃疡性结肠炎模型。模型组:5%DSS自由饮水,正常饮食;阳性对照组:5%DSS自由饮水+含5 g/L柳氮磺胺吡啶的饲料喂养;壳聚糖微球组:5%DSS自由饮水+含15 g/L壳聚糖微球的饲料喂养;姜黄素组:5%DSS自由饮水+含20 g/L姜黄素的饲料喂养;姜黄素壳聚糖微球组:5%DSS自由饮水+含20 g/L姜黄素壳聚糖微球的饲料喂养。酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-4的含量,免疫组化检测结肠黏膜核转录因子(NF)-κB的表达,观察染色病理切片,计算结肠黏膜组织学损伤分数。结果模型组较其他各组结肠黏膜组织学损伤评分显著增加,血清IL-1β、IL-6含量显著升高,IL-4含量显著降低,结肠黏膜NF-κВ表达显著升高(P0.01)。与姜黄素组比较,姜黄素壳聚糖微球组结肠黏膜组织学损伤评分、血清IL-1β和血清IL-6水平显著降低,IL-4含量显著升高,结肠黏膜NF-κВ表达显著降低(P0.01)。结论姜黄素壳聚糖微球可能通过抑制NF-κВ的表达,减轻炎症反应,通过抗炎作用而达到减轻溃疡性结肠炎中结肠组织损伤的作用。     

肝细胞生长因子抑制高糖诱导肾间质成纤维细胞胶原合成和转化生长因子-β1的表达

目的:探讨重组人肝细胞生长因子(rhHGF)对高糖诱导肾间质成纤维细胞损伤的影响.方法:体外培养肾间质成纤维细胞,在高糖环境下加入rhHGF,以酶联免疫吸附法检测培养上清中Ⅲ型胶原浓度,RT-PCR检测细胞HGF和TGF-β1基因表达,Western blot方法检测TGF-β1蛋白合成.结果:高糖预处理的细胞Ⅲ型胶原合成增加(同正常对照组相比,P＜0.01).高糖作用早期HGF表达升高,随着作用时间延长,其分泌量下降,而TGF-β1 出现持续高表达.此外,HGF可以抑制TGF-β1基因和蛋白表达,结果显示,加入HGF后,TGF-β1基因表达显著下降,表达量下降了50%,并且HGF以剂量依赖形式抑制TGF-β1表达,相关分析证实r=-0.8726,P＜0.01.同时HGF对Ⅲ型胶原合成产生抑制作用.结论:高糖环境促进Ⅲ型胶原合成和TGF-β1持续高表达.rhHGF可以部分抑制Ⅲ型胶原和TGF-β1表达.